蛋白激酶抑制剂的制作方法
【专利摘要】本发明涉及新型蛋白激酶抑制剂家族。具体而言，本发明涉及Tec和Src蛋白激酶家族成员的抑制剂。
【专利说明】蛋白激酶抑制剂 发明领域
[0001] 本发明涉及新型蛋白激酶抑制剂家族。具体而言，本发明涉及Tec和Src蛋白激 酶家族成员的抑制剂。
[0002] 发明背景
[0003] 蛋白激酶是真核细胞中的一大群胞内和跨膜信号传导蛋白质。这些酶负责将末端 (Y)磷酸自ATP转移至靶蛋白的特定氨基酸残基。靶蛋白中特定酪氨酸、丝氨酸或苏氨酸 氨基酸残基的磷酸化作用可调节其活性，导致细胞信号传导和代谢的显著变化。蛋白激酶 可发现于细胞膜、细胞溶质和诸如核的细胞器中，且负责调节多种细胞功能，包括代谢、细 胞生长和分化、细胞信号传导、调节免疫反应和细胞凋亡。受体酪氨酸激酶是具有响应胞外 信号并活化胞内信号传导级联的蛋白酪氨酸激酶活性的细胞表面受体大家族（Plowman等 人（1994)DN&P，7(6):334-339)。
[0004] 在以良性和恶性增殖、过度血管生成为特征的多种疾病和病症以及由免疫系统不 当活化导致的疾病的机制中牵涉到各种蛋白激酶的异常活化或过度表达。因此，期望选定 激酶或激酶家族的抑制剂可适用于治疗癌症、自体免疫疾病和炎症性病况，包括（但不限 于）：实体肿瘤、血液恶性肿瘤、关节炎、移植物抗宿主疾病、红斑狼疮、牛皮癣、结肠炎、回 肠炎、多发性硬化、葡萄膜炎、冠状动脉血管病变、全身性硬化症、动脉粥样硬化、哮喘、移植 物排斥、过敏症、皮肌炎、天疱疮等。
[0005] 可靶向调节疾病的激酶的实例包括受体酪氨酸激酶，诸如血小板衍生生长因子受 体（PDGFR)成员、血管内皮生长因子受体（VEGFR)家族和胞内蛋白，诸如SyKSRC和Tec激 酶家族的成员。
[0006] Tec激酶主要是非受体酪氨酸激酶，但并非专门在造血源细胞中表达（Bradshaw JM. Cell Signal. 2010, 22:1175-84)。Tec 家族包括 Tec、布鲁顿氏酪氨酸激酶（Bruton，s tyrosine kinase,Btk)、诱导型T细胞激酶（Itk)、静息淋巴细胞激酶（Rlk/Txk)和骨髓表 达激酶（Bmx/Etk)。Btk是在B细胞受体信号传导中重要的Tec家族激酶。Btk被Src家族 激酶活化并使PLC γ磷酸化，导致对B细胞功能和存活的作用。另外，Btk在响应于巨噬细 胞、肥大细胞和中性粒细胞的免疫复合物识别的信号转导中是重要的。Btk抑制作用对于淋 巴瘤细胞的存活也是重要的（Herman, SEEBlood 2011，117:6287-6289)，表明Btk的抑制 可适用于治疗淋巴瘤。
[0007] cSRC是酪氨酸激酶SRC家族的原型成员，其包括Lyn、Fyn、LCk、Hck、Fgr、Blk、Syk、 Yrk和Yes。cSRC关键在癌症所涉及的信号传导路径中涉及到，而且在人恶性肿瘤中常过度 表达（Kim IX，Song L, Haura EB. Nat Rev Clin Oncol. 20096 (10) :587-9)。cSRC 在细胞粘 附、迁移和骨重建中的作用强烈暗示在骨转移的发展和进程中的此激酶。cSRC在生长因子 受体酪氨酸激酶的信号传导下游也涉及到，而且调节细胞周期进程，表明cSRC抑制作用将 影响癌细胞增殖。另外，抑制SRC家族成员可适用于设计成用以调节免疫功能的治疗。SRC 家族成员（包括Lck)调节T细胞受体信号转导，此导致致使细胞因子释放、存活和增殖的 基因调节事件。因此，已强烈寻求Lck的抑制剂作为在移植排斥和T细胞介导的自体免疫疾 病中具有潜在应用的免疫抑制剂（Martin等人Expert Opin Ther Pat. 2010, 20:1573-93)。
[0008] 使用小分子抑制剂来抑制激酶已成功产生几种被认可用于治疗人病况的治疗剂。 本文中，我们公开新型的激酶抑制剂家族。此外，我们证实改变化合物取代可影响激酶选择 性且因此影响药剂的生物学功能。
[0009] PCT公布号W002/080926和W002/76986公开吡唑并嘧啶作为治疗剂。Btk包括在 生物无关激酶的长清单中。在W002/080926中未公开激酶抑制作用或细胞活性的证据且范 例集中在具有有限的未经取代的4-苯氧基苯基衍生物子集的酰胺和磺酰胺衍生物上。
[0010] 美国专利号7, 514,444公开了 Btk的抑制剂。已报道本专利的化合物 13 (PCI-32765)对包括 Btk、Lck、Lyn、cSRC、Jak、EGFR、KDR 等的宽范围激酶显示 ATP 竞争 性结合（Honigberg, L. A等人，The Bruton tyrosine kinase inhibitor PCI_32765blocks B-cell activation and is efficacious in models of autoimmune disease and B-cell malignancy, PNAS第107卷第29期，13075-13080)。尤其对于Btk而言，报道化合物13的 丙烯酰胺官能团与Cys481的硫醇部分共价结合，此位于与Btk的ATP结合袋相邻处，因此 诱发对Btk的"持续"抑制作用。然而，化合物13也抑制也以与ATP结合袋相邻的Cys为 特征的各种激酶，诸如Bmx、Tec、Txk、Itk、EGFR、ErbB2、ErbB4、Jak3和Blk。与任何这些激 酶共价结合都可以减少此方法的选择性质。
[0011] ⑶C-0834属于最近报道展示显著Btk选择性的结构无关的化合物家族（Liu L.等 人,Antiarthritis effect of a novel Bruton's tyrosine kinase (BTK) inhibitor in rat collagen-induced arthritis and mechani sm-based pharmacokinetic/ pharmacodynamic modeling: relationships between inhibition of BTK phosphorylation and efficacy. J Pharmac ol Exp Ther.2011年7月；338(1): 154-63)。 GDC-0834在自体免疫疾病的几种动物模型中都具有活性。然而，此化合物由于人特异性 代谢而在1期临床试验中失败（Liu L等人，Significant species difference in amide hydrolysis of GDC-0834, a novel potent and selective Bru ton's tyrosine kinase inhibitor, Drug Metab Dispos.2011年 10 月；39(10):1840-9)。
[0012] EGFR的抑制作用与多种临床化合物诱发严重皮疹相关（Tan A R等人，Markers in the epidermal growth factor receptor pathway an d skin toxicity during erlotinib treatment. Ann Oncol. 2008 年 I 月；19(1): 185-90)。类似地，KDR (VEGFR2) 的抑制作用在临床上与高血压相关（Howard R. Mellor等人·，Cardiotoxicity Associated with Tar geting Kinase Pathways in Cancer, Toxicological Sciences 120 (I)，14-32 (2011))。因此，开发展示较大激酶选择性的Btk抑制剂可潜在地用于需要急 性和/或慢性给药方案的各种B细胞相关适应症，诸如癌症、炎症性和自体免疫疾病。
[0013] 本发明涉及在炎症和自体免疫疾病的动物模型中展示细胞活性、口腔暴露和活性 的有效且选择性的非共价Btk抑制剂家族。激酶选择性和细胞效能与化合物上的特定取代 模式相关。公开以克数量级规模（multi-gram scale)提供化合物的合成方法。 发明概要
[0014] 本发明涉及新型激酶抑制剂家族。已发现此类化合物具有针对Tec和Scr蛋白激 酶家族成员的抑制活性。
[0015] 本发明的一个方面涉及式1的化合物：
【权利要求】
1. 一种式1的化合物：
其中R1选自： 1) 氢， 2) 烷基， 3) 杂烷基， 4) 碳环基， 5) 杂环基，和 6) -C (O) R4 ； 其中所述烧基、杂烧基、碳环基和杂环基可另外由以下基团取代： 1) 羟基， 2) 烧氧基， 3) 烷基， 4) -OC (O)R4, 5) -OC (0) NR5R6, 6) -C (O)R4, 7) -C (0) NR5R6, 8) -NR5R6, 9) -NR2C (O)R4, 10) -NR2S (0)nR4,和 ID-NR2C(O)NR5R6 ；
X1和X2独立地选自氢、卤素和氰基； η是0至2的整数； m是O至2的整数； m'是O至2的整数； W选自： 1) 烷基， 2) 芳烷基， 3) 杂芳烷基， 4) -OR3, 5) -OC (O)R4, 6) -OC (0) NR5R6, 7) -CH2O-R4, 8) -NR5R6, 9) -NR2C (O)R4, 10) -NR2S (0)nR4,和 ID-NR2C(O)NR5R6 ； 其中所述烷基、芳烷基和杂芳烷基可另外经取代； R2是氢!或烧基； R3选自：经取代或未经取代的烷基、经取代或未经取代的烯基、经取代或未经取代的炔 基、经取代或未经取代的杂烷基、经取代或未经取代的碳环基、杂环基、经取代或未经取代 的芳基、经取代或未经取代的杂芳基、经取代或未经取代的芳烷基和经取代或未经取代的 杂芳烷基； R4选自：经取代或未经取代的烷基、经取代或未经取代的烯基、经取代或未经取代的炔 基、经取代或未经取代的杂烷基、经取代或未经取代的碳环基、杂环基、经取代或未经取代 的芳基、经取代或未经取代的杂芳基、经取代或未经取代的芳烷基和经取代或未经取代的 杂芳烷基； R5和R6独立地选自：氢、烷基、烯基、炔基、杂烷基、碳环基、杂环基、芳基和杂芳基； 或者，R5和R6稠合形成3至8员杂环基环系统。
2. 如权利要求1所述的化合物，其中W是-0R3,且其中R3选自：经取代或未经取代的芳 烷基和经取代或未经取代的杂芳烷基。
3. 如权利要求1所述的化合物，其中W选自：
4.根据权利要求1所述的化合物，其中W选自：
5. 根据权利要求1至4中任一项所述的化合物，其中R1选自：H、CH3、
6. 根据权利要求5所述的化合物，其中Rl选自：
7. 根据权利要求1至6中任一项所述的化合物，其中Y选自：
8. 根据权利要求1至5中任一项所述的化合物，其中Z选自：
9. 根据权利要求8所述的化合物，其中Z是：
10. 根据权利要求1至9中任一项所述的化合物，其中Y-Z-W选自：
11. 一种化合物，其选自：
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【文档编号】C07D487/04GK104379586SQ201380028248
【公开日】2015年2月25日 申请日期:2013年5月28日 优先权日:2012年5月31日
【发明者】A·劳伦特, Y·罗斯, J·B·加奎斯 申请人:制药科学公司