一种从泽泻中提取24-乙酰泽泻醇a的方法
【专利摘要】本发明提供一种从泽泻中提取24-乙酰泽泻醇A的方法，主要解决了现有技术中操作复杂，回收率低，不适合工业化生产。该从泽泻中提取24-乙酰泽泻醇A的方法包括以下步骤：1]提取；2]除杂；3]沉淀溶解及萃取；4]调碱、脱色；5]重结晶。该从泽泻中提取24-乙酰泽泻醇A的方法操作简单，产品含量高，回收率高，适合于工业化生产。
【专利说明】一种从泽泻中提取24-乙酰泽泻醇A的方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于泽泻提取分离领域，涉及一种提取三萜类化合物的方法，具体涉及一 种从泽泻中提取24-乙酰泽泻醇A的方法。
【背景技术】
[0002] 泽泻来源于泽泻科植物泽泻的干燥块茎，具有清热、利尿的功效。用于小便不利、 水肿胀满、泄泻尿少、痰饮眩晕、热淋涩痛、高血脂症，是一种临床应用非常广泛的中药。泽 泻的化学成分以三萜类成分为主，其中萜醇类化合物具有降血脂和保肝的作用，24-乙酰泽 泻醇A作为主要的活性成分之一，经分子药理学的研宄表明，其具有很强的免疫调剂作用， 研宄其具有非常重要的意义。
[0003] 目前对于24-乙酰泽泻醇A的研宄报道比较少，邱丽莉提供了一种大孔树脂分 离纯化泽泻中4中三萜类化合物的工艺研宄，利用大孔树脂吸附，不同浓度的醇洗脱，得 到了 4种三萜类化合物，其中包括24-乙酰泽泻醇A，所得产品中4种成分之和的含量为 18. 68%〇
[0004] YEP等将泽泻95%乙醇提取，减压蒸干，得到的固体用石油醚和氯仿溶解，残渣用 硅胶柱层析，石油醚-乙酸乙酯洗脱，再次硅胶柱分离，氯仿-丙酮洗脱，甲醇重结晶得到样 品。
【发明内容】
[0005] 为了解决【背景技术】中所存在的技术问题，本发明提供一种从泽泻中提取24-乙酰 泽泻醇A的方法，该从泽泻中提取24-乙酰泽泻醇A的方法操作简单，产品含量高，回收率 高，适合于工业化生产。
[0006] 本发明的技术方案：
[0007] -种从泽泻中提取24-乙酰泽泻醇A的方法，包括以下步骤：
[0008] 1]提取
[0009] 将泽泻粉碎，用浓度为0. 1% -10%的碱水润湿4h，采用水或有机溶剂提取2-3次， 将提取液浓缩后加入麦芽糊精或倍他环糊精，然后喷雾干燥；
[0010] 所述碱水为氢氧化钾溶液、氢氧化钠溶液、石灰水或氨水；所述有机溶剂为乙酸乙 酯、氯仿、甲醇、乙醇中的一种或几种混合；所述麦芽糊精或倍他环糊精的用量为泽泻质量 的 3% -5% ;
[0011] 2]除杂
[0012] 在10°C -60°C条件下，向步骤1所得产物中加入0. 5-10倍量的溶剂或溶液进行溶 解，过滤，得沉淀物质；
[0013] 所述溶剂或溶液为水、甲醇溶液或乙醇溶液；
[0014] 3]沉淀溶解及萃取
[0015] 向步骤2所得的沉淀物质中加入2-20倍量的PH为1-4的盐酸溶液加热溶解，待 溶解完全后过滤，然后用有机溶剂萃取1-3次，之后浓缩至原料泽泻量的1/100-1/10 ;
[0016] 所述的有机溶剂为乙酸乙酯、氯仿、二氯甲烷、甲醇、乙醇中的一种或几种的混 合；
[0017] 4]调碱、脱色
[0018] 将步骤3所得的浓缩液调节PH至8,得沉淀，然后用3-10倍量浓度为50% -80% 乙醇溶解，再加入沉淀质量的1% -20%辅料脱色0. 5h-3h，过滤浓缩，放置结晶；
[0019] 所述的辅料为活性炭、硅胶、氧化铝中的一种或几种的混合；
[0020] 5]重结晶
[0021] 向步骤4所得的结晶中加入0. 1-2倍量的四氢呋喃溶解，待溶解完全后，加入 0. 3-0. 8倍量的乙酸乙酯或丙酮，放置结晶，所得结晶干燥，既24-乙酰泽泻醇A。
[0022] 上述步骤1中，将泽泻粉碎，用浓度为0. 5%的石灰水润湿4h，采用乙酸乙酯提取 2-3次，将提取液浓缩后加入麦芽糊精或倍他环糊精，喷雾干燥。
[0023] 上述步骤2中，在温度为10°C条件下，向步骤1所得产物中加入8倍量的浓度为 45 %的乙醇水溶液进行溶解，过滤，得沉淀物质。
[0024] 上述步骤3中，向步骤2所得的沉淀物质中加入6倍量的PH为3. 5的盐酸溶液加 热溶解，待溶解完全后过滤，然后用体积比为9:1二氯甲烷和乙醇的混合溶剂萃取1-3次， 之后浓缩至原料泽泻量的1/100-1/10。
[0025] 上述步骤4中，将步骤3所得的浓缩液调节PH至8,得沉淀，然后用8倍量浓度为 65%乙醇溶解，再加入沉淀的0. 5倍量的质量比为3:5的活性炭和氧化铝的混合辅料脱色 Ih，过滤浓缩，放置结晶。
[0026] 上述步骤5中，向步骤4所得的结晶中加入1. 6倍量的四氢呋喃溶解，待溶解完全 后，加入0. 6倍量的乙酸乙酯，放置结晶，所得结晶干燥，既24-乙酰泽泻醇A。
[0027] 本发明的优点如下：
[0028] 1、采用碱水润湿提取，将大部分大极性杂质残留在提取渣中；
[0029] 2、取液喷雾干燥后，进一步用溶剂除杂，大大减少了杂质量，使最终产物的含量大 大提高，为后续结晶除杂作了铺垫；
[0030] 3、用酸碱除杂，活性炭和氧化铝脱色吸附杂质，达到替代硅胶柱或高速逆流分离， 大大降低生产成本；
[0031] 4、工艺简单，适合工业化生产。
【具体实施方式】
[0032] 实施例一
[0033] 1、提取：
[0034] IOOkg原料粉碎至40目，用200kg 0. 1 %的氢氧化钾溶液润湿4h，采用浓度为 80%乙醇提取3次，每次提取2h，提取液浓缩至比重为1. 08,加入3kg麦芽糊精，喷雾干燥， 喷雾时进风温度为180°C，出风温度为82°C，喷粉后的产品备用。
[0035] 2、除杂：
[0036] 将上述喷雾干燥的粉，用1倍干燥粉质量的水提1次，提取温度为KKTC，共煮lh， 沉淀备用，上液弃，经测定上液的含量为0. 02 %。
[0037] 3、沉淀溶解，萃取
[0038] 将上述沉淀采用2倍沉淀质量的pH = 1的盐酸溶液在60°C的条件下溶解，溶解完 全后，过滤，用等倍量的乙酸乙酯萃取2次，浓缩至无乙酸乙酯备用。
[0039] 4、调碱，脱色
[0040] 将上述浓缩液，调PH = 8. 0,所得沉淀，用3倍沉淀质量的80 %乙醇溶解，加入沉 淀质量1%的活性炭脱色lh，浓缩至原料质量的1/10,放置结晶。
[0041] 5、重结晶
[0042] 将上述结晶，采用0. 2倍结晶质量的四氢呋喃溶解，待溶解完全后，加入0. 4倍结 晶质量的丙酮，放置结晶，所得结晶干燥后，得到119g，产品含量为98. 9%。
[0043] 实施例二
[0044] 1、提取
[0045] IOOkg原料粉碎至20目，用300kg 1. 2%的氢氧化钠溶液润湿4h，采用乙酸乙酯提 取3次，每次提取2h，提取液浓缩至比重为1. 05,加入5kg倍他环糊精，喷雾干燥，喷雾时进 风温度为170 °C，出风温度为85 °C，喷粉后的产品备用。
[0046] 2、除杂
[0047] 将上述喷雾干燥的粉，用8倍干燥粉质量的45%乙醇在KTC的条件下，溶解2次， 每次I. 5h，沉淀备用，上液弃，经测定上液的含量为0. 001 %。
[0048] 3、沉淀溶解，萃取：
[0049] 将上述沉淀采用4倍沉淀质量的pH = 3的盐酸溶液在60°C的条件下溶解，溶解完 全后，过滤，用等倍量的氯仿萃取2次，浓缩至无氯仿备用。
[0050] 4、调碱，脱色
[0051] 将上述浓缩液，调PH = 8. 0,所得沉淀，用4倍沉淀质量的75 %乙醇溶解，加入沉 淀质量20%的硅胶脱色I. 5h，浓缩至原料质量的1/30,放置结晶。
[0052] 5、重结晶
[0053] 将上述结晶，采用2倍结晶质量的四氢呋喃溶解，待溶解完全后，加入0. 8倍结晶 质量的乙酸乙酯，放置结晶，所得结晶干燥后，得到120g，产品含量为98. 0%。
[0054] 实施例三
[0055] 1、提取
[0056] IOOkg原料粉碎至30目，用150kg 5%的石灰溶液润湿4h，采用浓度为80%甲醇 提取2次，每次提取I. 5h，提取液浓缩至比重为1. 07,加入5kg麦芽糊精，喷雾干燥，喷雾时 进风温度为190°C，出风温度为95°C，喷粉后的产品备用。
[0057] 2、除杂
[0058] 将上述喷雾干燥的粉，用4倍干燥粉质量的80%乙醇在50°C的条件下，溶解2次， 每次2h，沉淀备用，上液弃，经测定上液的含量为0. 01 %。
[0059] 3、沉淀溶解，萃取：
[0060] 将上述沉淀采用20倍沉淀质量的pH = 4的盐酸溶液在60°C的条件下溶解，溶解 完全后，过滤，用等倍量的二氯甲烷萃取2次，浓缩至无二氯甲烷备用。
[0061] 4、调碱，脱色
[0062] 将上述浓缩液，调PH = 8. 0,所得沉淀，用5倍沉淀质量的60 %乙醇溶解，加入沉 淀质量5%的活性炭和氧化铝质量比3:5,脱色lh，浓缩至原料质量的1/50,放置结晶。
[0063] 5、重结晶
[0064] 将上述结晶，采用0. 5倍结晶质量的四氢呋喃溶解，待溶解完全后，加入0. 3倍结 晶质量的丙酮，放置结晶，所得结晶干燥后，得到130g，产品含量为98. 1%。
[0065] 实施例四
[0066] 1、提取
[0067] IOOkg原料粉碎至60目，用180kg 0. 5%的石灰溶液润湿4h，采用浓度为乙酸乙醋 提取2次，每次提取I. 5h，提取液浓缩至比重为1. 07,加入4. 5kg倍他环糊精，喷雾干燥，喷 雾时进风温度为170°C，出风温度为80°C，喷粉后的产品备用。
[0068] 2、除杂
[0069] 将上述喷雾干燥的粉，用0. 5倍干燥粉质量的60%甲醇在30°C的条件下，溶解3 次，每次lh，沉淀备用，上液弃，经测定上液的含量为0. 008%。
[0070] 3、沉淀溶解，萃取：
[0071] 将上述沉淀采用10倍沉淀质量的pH = 2. 5的盐酸溶液在60°C的条件下溶解，溶 解完全后，过滤，用等倍量的二氯甲烷和乙醇比例为9:1混合溶剂，萃取2次，浓缩至无乙醇 备用。
[0072] 4、调碱，脱色
[0073] 将上述浓缩液，调PH = 8. 0,所得沉淀，用10倍沉淀质量的50%乙醇溶解，加入沉 淀质量8%的活性炭和氧化铝质量比1:10,脱色3h，浓缩至原料质量的1/100,放置结晶。
[0074] 5、重结晶
[0075] 将上述结晶，采用1倍结晶质量的四氢呋喃溶解，待溶解完全后，加入0. 5倍结晶 质量的乙酸乙酯，放置结晶，所得结晶干燥后，得到123g，产品含量为98. 7%。
[0076] 实施例五
[0077] 1、提取
[0078] IOOkg原料粉碎至50目，用150kg 10%的氢氨水溶液润湿4h，采用氯仿提取3次， 每次提取3h，提取液浓缩至比重为1. 06,喷雾干燥，加入3kg倍他环糊精，喷雾时进风温度 为173 °C，出风温度为75 °C，喷粉后的产品备用。
[0079] 2、除杂
[0080] 将上述喷雾干燥的粉，用10倍干燥粉质量的30%乙醇在40°C的条件下，溶解1 次，每次2. 5h，沉淀备用，上液弃，经测定上液的含量为0. 003%。
[0081] 3、沉淀溶解，萃取：
[0082] 将上述沉淀采用6倍沉淀质量的pH = 3. 0的盐酸溶液在60°C的条件下溶解，溶解 完全后，过滤，用等倍量的二氯甲烷和乙醇比例为1: 1，萃取2次，浓缩至无乙醇备用。
[0083] 4、调碱，脱色
[0084] 将上述浓缩液，调PH = 8. 0,所得沉淀，用8倍沉淀质量的65 %乙醇溶解，加入沉 淀质量20 %的活性炭和氧化铝的混合料，其质量比3:7,脱色lh，浓缩至原料质量的1/60， 放置结晶。
[0085] 5、重结晶
[0086] 将上述结晶，采用1. 5倍结晶质量的四氢呋喃溶解，待溶解完全后，加入0. 8倍结 晶质量的乙酸乙酯，放置结晶，所得结晶干燥后，得到112g，产品含量为98. 3%。
[0087] 实施例六
[0088] 1、提取
[0089] IOOkg原料粉碎至50目，用180kg 0. 5%的石灰水溶液润湿4h，采用乙酸乙酯提取 3次，每次提取2h，提取液浓缩至比重为1. 08,喷雾干燥，加入3. 5kg倍他环糊精，喷雾时进 风温度为173 °C，出风温度为75 °C，喷粉后的产品备用。
[0090] 2、除杂
[0091] 将上述喷雾干燥的粉，用8倍干燥粉质量的45%乙醇在KTC的条件下，溶解1次， 每次2h，沉淀备用，上液弃，经测定上液的含量为0. 001 %。
[0092] 3、沉淀溶解，萃取：
[0093] 将上述沉淀采用6倍沉淀质量的pH = 3. 5的盐酸溶液在60°C的条件下溶解，溶解 完全后，过滤，用等倍量的二氯甲烷和乙醇比例为9: 1，萃取2次，浓缩至无乙醇备用。
[0094] 4、调碱，脱色
[0095] 将上述浓缩液，调PH = 8. 0,所得沉淀，用8倍沉淀质量的65 %乙醇溶解，加入沉 淀质量5%的活性炭和氧化铝的混合料，其质量比3:5,脱色lh，浓缩至原料质量的1/60,放 置结晶。
[0096] 5、重结晶
[0097] 将上述结晶，采用1. 6倍结晶质量的四氢呋喃和乙酸乙酯混合溶剂溶解，其质量 比为2:1，待溶解完全后，加入0.6倍结晶质量的乙酸乙酯，放置结晶，所得结晶干燥后，得 到138g，产品含量为99. 3%。
[0098] 经过大量实验结果可以得出，该从泽泻中提取分离24-乙酰泽泻醇A的方法所得 产品的收率大于等于〇. 11%，产品中24-乙酰泽泻醇A含量大于等于98.0%;因此，该方法 产品含量高，回收率高，适合于工业化生产。
[0099] 本发明与现有技术进行实验结果对比，并得出如下结果：
[0100]
【权利要求】
1. 一种从泽泻中提取24-乙酰泽泻醇A的方法，其特征在于，包括以下步骤： 1] 提取 将泽泻粉碎，用浓度为〇. 1 % -10 %的碱水润湿4h，采用水或有机溶剂提取2-3次，将提 取液浓缩后加入麦芽糊精或倍他环糊精，然后喷雾干燥； 所述碱水为氢氧化钾溶液、氢氧化钠溶液、石灰水或氨水；所述有机溶剂为乙酸乙酯、 氯仿、甲醇、乙醇中的一种或几种混合；所述麦芽糊精或倍他环糊精的用量为泽泻质量的 3% -5% ； 2] 除杂 在10°C -60°C条件下，向步骤1所得产物中加入0. 5-10倍量的溶剂或溶液进行溶解， 过滤，得沉淀物质； 所述溶剂或溶液为水、甲醇溶液或乙醇溶液； 3] 沉淀溶解及萃取 向步骤2所得的沉淀物质中加入2-20倍量的PH为1-4的盐酸溶液加热溶解，待溶解 完全后过滤，然后用有机溶剂萃取1-3次，之后浓缩至原料泽泻量的1/100-1/10 ; 所述的有机溶剂为乙酸乙酯、氯仿、二氯甲烷、甲醇、乙醇中的一种或几种的混合； 4] 调碱、脱色 将步骤3所得的浓缩液调节PH至8,得沉淀，然后用3-10倍量浓度为50% -80%乙醇 溶解，再加入沉淀质量的1% -20%辅料脱色0. 5h-3h，过滤浓缩，放置结晶； 所述的辅料为活性炭、硅胶、氧化铝中的一种或几种的混合； 5] 重结晶 向步骤4所得的结晶中加入0. 1-2倍量的四氢呋喃溶解，待溶解完全后，加入0. 3-0. 8 倍量的乙酸乙酯或丙酮，放置结晶，所得结晶干燥，既24-乙酰泽泻醇A。
2. 根据权利要求1所述的从泽泻中提取24-乙酰泽泻醇A的方法，其特征在于：所述 步骤1中，将泽泻粉碎，用浓度为0. 5 %的石灰水润湿4h，采用乙酸乙酯提取2-3次，将提取 液浓缩后加入麦芽糊精或倍他环糊精，喷雾干燥。
3. 根据权利要求2所述的从泽泻中提取24-乙酰泽泻醇A的方法，其特征在于：所述 步骤2中，在温度为10°C条件下，向步骤1所得产物中加入8倍量的浓度为45%的乙醇水 溶液进行溶解，过滤，得沉淀物质。
4. 根据权利要求3所述的从泽泻中提取24-乙酰泽泻醇A的方法，其特征在于：所述 步骤3中，向步骤2所得的沉淀物质中加入6倍量的PH为3. 5的盐酸溶液加热溶解，待溶 解完全后过滤，然后用体积比为9:1二氯甲烷和乙醇的混合溶剂萃取1-3次，之后浓缩至原 料泽泻量的1/100-1/10。
5. 根据权利要求4所述的从泽泻中提取24-乙酰泽泻醇A的方法，其特征在于：所述步 骤4中，将步骤3所得的浓缩液调节PH至8,得沉淀，然后用8倍量浓度为65 %乙醇溶解， 再加入沉淀的0. 5倍量的质量比为3:5的活性炭和氧化铝的混合辅料脱色lh，过滤浓缩，放 置结晶。
6. 根据权利要求5所述的从泽泻中提取24-乙酰泽泻醇A的方法，其特征在于：所述步 骤5中，向步骤4所得的结晶中加入1. 6倍量的四氢呋喃溶解，待溶解完全后，加入0. 6倍 量的乙酸乙酯，放置结晶，所得结晶干燥，既24-乙酰泽泻醇A。
【文档编号】C07J13/00GK104497091SQ201410816727
【公开日】2015年4月8日 申请日期:2014年12月24日 优先权日:2014年12月24日
【发明者】肖红, 张瑜, 王晓莹, 郭伟妮, 张利娜 申请人:陕西嘉禾植物化工有限责任公司