专利名称：雌甾烯类固醇作为改变人下丘脑功能的神经化学启动物以及相关的药用组合物和方法
技术领域：
本发明涉及用于改变人下丘脑功能从而改善由其调控的生理和行为的药用组合物和方法。具体而言，本发明涉及使用某些雌甾烯类固醇作为生理和行为的神经化学效应物。
本发明涉及在此详述的一些称作雌甾烯类固醇的，以及与其相关的化合物，用这些化合物作为人的化学信息素去改变下丘脑的功能并进而影响某些受下丘脑调控的生理和行为的方法，如减缓焦虑。雌甾烯类固醇的典型代表是17-β-雌二醇(1，3，5(10))-雌三烯-3，17β-二醇，其特征是有一个酚的1，3，5(10)-A环并在其3位被羟基或羟基衍生物如醚或酯取代。某些雌甾烯类固醇对某些哺乳动物具有外激素作用的现象已见于报导。Michael，R.P.等人在Nature(1968)218746已报导认为雌激素(特别是雌二醇)是雄性猕猴的外激素引诱物。Parrot，R.F.，Hormones and Behavior(1976)7207-215，报导了注射雌二醇苯甲酸酯在被切除了卵巢的大鼠中引发出交配行为;猕猴血液中雌二醇水平对雄猴性反应(Phoenix，C.H.，Physiol，and Behavior (1976)16∶305-310)和雌猴性反应(Phoenix，C.H.，Hormones and Behavior (1977)8356-362)的影响也已被报导。另一方面，在以往的文献中，对外激素是否在哺乳类繁殖行为和个体间通信中起任何作用这一点上则没有共同的认识(Beauchamp，G.K.，et al.，"The Pheromone Concopt in Mammalian Chemical CommunicationA Critique"，InMammalian Olfaction，Reproductive Process，and Behavior，Doty，R.L.，Ed.，Academic Press，1976)。
本发明的一个实施方案是以非系统性地，在鼻内施用雌甾烯类固醇从而影响人的某一特定行为或生理反应，例如，缓减不良情感，不良精神状态及不良性格。具体而言，是将一种或多种类固醇，或含有它们的组合物在鼻内与以往所知甚少的神经内分泌结构-通常称为犁鼻器官(“VNO”，亦称作Jacobson氏器)上的神经受体相接触。犁鼻器官在从蛇直至到人的高等动物中是与鼻孔相通的，在某些种类中是特别与接受外激素相关的[见Muller-Schwarze & Silverstein，Chemical Signals，Plenum Press，New York (1980)]。犁鼻器官神经上皮的轴索在腭的上方，组成犁鼻神经并与附嗅球有直接的突触联结，并进而间接地通经灰质中部的前脑杏核体及脑部的下丘脑核。终端神经元的轴索也可起犁鼻器官的神经化学受体的作用[Stensaas，L.J.，et al.，J.Steroid Biochem，and Molec.Biol.(1991) 39553]。该神经与下丘脑有直接的突触联结。
Johnson.A.等人[J.Otolaryngology (1985) 1471-79]报导了大多数成年人均具有犁鼻器官的证据，但其结论是这些犁鼻器官可能不具功能。然而，认为犁鼻器官是具有功能的化学感觉受体的结果可见于Stensaas，L.等人(如前述);及Moran，D.T.等人[Garcia-Velasco，J.and M.Mondragon;Monti-Bloch，L.and B.Grosser-均发表于J.Steroid Biochem.and Molec.Biol.(1991)39]。
显而易见的是，如果能鉴定并合成出人的化学信息素和外激素并制成药品和找到用其影响下丘脑功能的方法则将是非常理想的。本发明正是意外地发现了当在人的鼻内施以某种神经化学配体，特别是某种雌甾烯类固醇或其相关化合物，或含有它们的药用组合物，则这些配体就与鼻神经上皮细胞的化学受体发生专一性结合，这种结合产生一系列神经生理学反应并得以改变个体下丘脑功能。当正确使用时，某些这类化合物对下丘脑所产生的作用就会影响植物神经系统的功能及各种行为性和生理性的表现，例如(不限于)，焦虑，月经前焦躁，恐惧，攻击性，饥饿，血压，以及其它一些通常由下丘脑调控的行为或生理功能[见Otto Appenzeller.The Autonomic Nervous System. An introduction of basic and clinical concepts (1990);Korner，P.I.Central nervous control of autonomic cardiovascular function，and Levy，N.M.and Martin，P.J.Neural control of the heart，both in Handbook of physiology;Section 2Cardiovascular System-the heart，Vol I，Washington DC，1979，American Physiological Society;Fishman，A.P.，et al.editors，Handbook of Physiology.Section 3Respiratory System.Vol.II.Control of breathing.Bethesda MD.1986.American Physiological Society.]在某些情况下，仅施用一种雌甾烯类固醇或其相关化合物，有时则结合施用数种，有时则以一种或多种雌甾烯类固醇与一种或多种雄甾烷类固醇或其相关化合物一同使用。
因而，本发明的目的之一是提供含有人的化学信息素或外激素的并适于鼻内施用的药用组合物。
本发明的另一目的是提供使用这些组合物以改变个体下丘脑功能的方法。
本发明的再一个目的是提供使用这些组合物去影响通常由下丘脑调控的个体的行为及生理功能的方法。
再者，本发明的目的是提供具有以下优点的改变下丘脑功能的方法1)直接施用于鼻腔内和犁鼻器官的化学受体也就是非侵入性的施用，而不用药片或针头。2)一种通过神经系统而非循环系统的药效方式，因此，既可影响脑功能而又不必顾忌血-脑屏障;3)一种直接影响下丘脑的途径，因为在下丘脑与外激素受体间只有一种突触连接;4)提供高度专一性的药效，从而极大地减少不良副作用的可能，因为感觉神经仅作用于脑内特定部位。
本发明的其它目的、优点和新的特征，将会在以下的描述中，在本领域的熟练技术人员审阅本文时，以及在实践本发明时变得一目了然。
本发明的目的是通过提供适于鼻内施用的药用组合物来实现的。该组合物含有药用载体，以及具有如下通式的雌甾烯类固醇
其中R1基本上选自1或2个氢原子、甲基、亚甲基、1或2个卤原子;R2空缺或基本上选自氢和甲基;R3基本上选自氧、羟基、低级烷氧基、低级酰氧基、苯甲酰基、环戊丙基、葡糖苷酸和磺酰基;R4基本选自氢、羟基、低级烷氧基、低级酰氧基、氧和卤原子;R5空缺或基本选自氢、羟基、低级烷氧基和低级酰氧基;R6为氢或卤原子;a代表该类固醇A环上的可选性芳香不饱和化，且a、b、c和d各自均为任选双键;e、f、g、h、i和j各自均为任选双键。在本实施方案中，类固醇最好以含有一种或多种药用载体的药用组合物形式来施用。
优选的一类化合物为a是芳香不饱和结构，且g、h或i为双键的化合物。在h和i位均为双键的也是优选的一类。另一类优选的是b、c或j为双键的化合物。c和d同时为双键的也是优选的一类。再有一类优选的是R2为甲基，且(1)e为双键，(2)R1为亚甲基或为一个氢，或(3)f为双键的化合物。
术语“低级烷基”、“低级烷氧基”等，指碳链含1～6个碳原子，优选1～4个碳原子。卤指氟、氯、溴、碘。
本发明的其它目的是通过提供改变个体下丘脑功能和植物神经功能的方法来实现的。给鼻神经上皮细胞的表面化学受体提供其配体，其中的细胞是组织的一部分而不是嗅上皮细胞;并且配体是施于个体的鼻道内，从而使配体与化学受体专一结合，产生改变该个体下丘脑功能的结果。
本申请的各实施方案均涉及并包括其中所揭示的类固醇、其功能等同物、经修饰的功能等同物，而不论修饰的类固醇是否明确给出。
附图简介
图1说明1，3，5(10)，16-雌四烯-3-醇的合成。
图2A、2B和2C说明局部施用某种类固醇于雄性犁鼻器官(2A)和嗅上皮(2C)所产生的对受体电压的电生理效应。图2B比较了雌甾烯对雄性和雌性犁鼻器官受体电压的效应。图2Bi给出有关1，3，5(10)，16-雌四烯-3-醇的数据;图2Bii给出有关1，3，5(10)，16-雌四烯-3，16α，17β-三醇的数据。
图3说明局部施用某种类固醇于雄性(3A)和雌性(3B)个体的犁鼻器官所产生的电生理效应。
图4A、4B和4C说明雄性个体植物神经系统对1，3，5(10)，16-雌四烯-3-乙酸酯的几种反应。4A为犁鼻神经上皮受体电压;4B为皮肤电反射(千欧);4C为皮肤温度(℃)。
图5比较了1，3，5，(10)，16-雌四烯-3-醇的乙酸酯和甲基醚所造成的犁鼻器官电压变化。
图6说明了用犁鼻素(vomeropherins)刺激犁鼻器官所产生的局部与植物神经反应在性别上的差异。不同的犁鼻素(200微纤摩尔)及对照给雌、雄各30名(年令20至45)以所述方法施用。横道为该群体反应的平均值。
图6A和6B为电犁鼻图谱反应(Electro-vomeronasogram，简写EVG)实测值。6A为雄性，6B为雌性。
图6C和6D为皮肤电反射在雄性(6C)和雌性(6D)的犁鼻器官上施用犁鼻素所产生的变化的实测值(欧姆)。
图6E和6F为脑电图α皮质活性在雄性(6E)和雌性(6F)犁鼻器官受犁鼻素作用后所产生之变化的实测值。
图6G和6H说明雄性(6G)和雌性(6H)的犁鼻器官受犁鼻素作用后所产生的皮肤温度变化的实测值。
其中所用的化合物为A＝1，3，5(10)，16-雌四烯-3-乙酸酯B＝雄甾-4.16-二烯-3-酮C＝1，3，5(10)，16-雌四烯-3-醇D＝3-甲氧基-雌甾-1，3，5(10)，16-四烯E＝雄甾-4，16-二烯-3α-醇F＝雄甾-4，16-二烯-3β-醇图7说明用嗅觉活性物及犁鼻素刺激雄体和雌体嗅上皮所引起的电-嗅图谱(Electro-Olfactgrams)的结果，图中a部份使用400微纤摩尔嗅觉活性物1-香芹酮、桉树脑，以及200微纤摩尔的嗅素A、B、C、D和F，以及E的立体异构体按每秒一次的速率分别施于雌、雄各20位的嗅上皮所获电-嗅图谱的结果;其中嗅觉活性物和嗅素E、B产生显著的局部反应(P＜0.01)。图中b部分说明施用400微纤摩尔嗅觉活性物1-香芹酮和桉树脑于雌、雄体犁鼻器并不引起显著的电-嗅图谱的变化。
图8A、8B和8C说明对20名雌体的犁鼻器官施用以下各犁鼻素所产生的电生理效应G＝雄甾-4-烯-3-酮H＝雄甾-4，16-二烯-3，6-二酮J＝10，17-二甲基甾-4，13(17)-二烯-3-酮K＝1，3，5(10)，16-雌甾四烯-3-醇-甲基醚L＝1，3，5(10)，16-雌甾四烯-3-丙酸酯
EVG＝电-犁鼻图谱(Electro-vomeronasogram)GSR＝皮肤电反应＝(EDA)Electrodermal ActivityST＝皮肤温度图9A、9B和9C说明施用犁鼻素于20位雄体的犁鼻器所产生的电生理效应。
其中M＝1，3，5(10)-雌三烯-3-醇。
图10说明雌甾1，3，5(10)，6-四烯-3-醇以及雌甾-4，16-二烯-3-醇的合成。
图11说明实施例16至19中所述化合物的合成。
“情感”(affect)是一种临时感觉状态。典型的不良情感如神经过敏、紧张、羞耻、忧虑、易怒、气愤、暴怒等等。“情绪”(Mood)是一种能持续较长时间的感觉状态，如内疚、悲哀、失望、自卑、悔恨、痛苦、不高兴等等。“性格”是个体具有的更为永久性的个性。典型的不良性格如过于敏感、懊悔、自责、固执、记仇、愁苦、胆怯、懒散等等。
“雄甾烷类固醇”指脂肪族多环烃中带有四环类固醇结构且在10位和13位被甲基化的一类化合物。雄甾烯是雄甾烷的一个亚组，通常指带有至少一个双键的化合物，一般来讲，除非被描述为甾烷，则认为该类化合物具有18个碳。然而，在本文中，18-降-雄甾烷均称作雄甾烷类固醇。此外，所有具有上述特征的衍生物均被称作雄甾烷类固醇。
“雌甾烯类固醇”在本文中指带有四环类固醇结构的脂肪族多环烃，且在A环上至少有一个双键，在10位上没有被甲基化，在3位上为氧代、羟基或羟基衍生物，如烷氧化物、酯、苯甲酸酯环戊基丙酸酯、硫酸酯或葡糖苷酸。含以上结构特征的衍生物也被称作雌甾烯类固醇。雌甾烯类固醇在美国专利申请07/638，185号中也被称作雌激素类固醇，这两个词为同义词。
下式为16-雄甾烯和雌甾烯类固醇所共有的四环类固醇结构。为具体描述各基团和取代基的位置，使用了如下所示的编号系统。
“性别差异”(Sexually Dimorphic)指同种的雌、雄体对同一药品产生不同的反应，或一个药品在同种雌、雄体之间产生不同效果。
“有效量”指对患者能产生预期的生理和/或心理效果的药物用量和/或浓度范围值。在此，患者指需要下丘脑调整和调节的对象，或其通常受下丘脑调控的生理或行为特征需要改善的对象。某一具体药物的有效量会依施药途径而不同。例如，当把类固醇以溶液形式施于患者面部时，其有效浓度为约1～100μg/ml，优选约10～50μg/ml，最优选20～30μg/ml。当把类固醇直接施于犁鼻器官时，其有效量为约1pg至1ng，优选10～50pg。当以膏剂，乳剂或气雾剂等形式将类固醇施于鼻道内时，其有效量为约1pg至约100μg，优选约1ng至约10μg。此外，有些药物以某些途径用药时有效，而以另外一些途径用药时则无效。
“下丘脑”是间脑的一部分，包括下丘脑下方的第三脑室的前侧壁，形成脑室底部的结构，视交叉，灰结节，下丘脑漏斗和乳头体。下丘脑调控植物神经系统并控制一些生理和行为功能，例如，斗争和飞行反应(fight and flight responses)、性动机、水平衡、糖代谢和脂肪代谢、饥饿感、体温调节、内分泌等。下丘脑还是调控血压的后叶加压素及诱导分娩和产乳的催产素的源泉。所有下丘脑功能都可能受到本化学信息疗法的改善。
“配体”在本文中指起化学信号作用的一种分子，它与受体细胞表面分布的受体分子发生专一性结合，从而引发穿过细胞表面的信号转导。配体与化学感受体的结合是可测量的。化学感受组织如犁鼻神经上皮，嗅神经上皮，均含有众多的神经受体细胞，每个细胞至少有一个细胞表面受体。很多受体分子具有相同的配体专一性。因此，当这种组织暴露于对其为专一性的配体时(如将犁鼻器官暴露于化学信息素)，细胞表面受体电压的总和就是可测的。
“低级烷基”在此指含1～4个碳原子的、分支或不分支的饱和烃，例如，甲基、乙基、正丙基、异丁基等。“烷氧基”在此取其常规含义，即指-OR基因，且R是如前述的烷基。
“外激素”指种内成员通过分泌和鼻子接受而进行化学通讯的物质。在哺乳类中，外激素通常是由鼻子内的犁鼻器官上的受体接受的。一般而言，外激素作用于发育，繁殖及其有关行为。“化学信息素”是更为广义的术语，包括外激素，指无论源于何处且能起化学感受信使作用，并与专一神经上皮受体结合进而引起生理或行为效应的物质。“犁鼻素”是化学信息素的一种，它的生理学效应是通过犁鼻器官调控的。
1pg(微微克)是0.001ng(毫微克)。1ng是0.001μg(微克)。1μg(微克)是0.001mg(毫克)。
A.本发明所用的雌甾烯本发明的一部分涉及一组结构上与雌甾二醇(又称1，3，5(10)-雌三烯-3，17β-二醇)相关的雌甾烯类固醇。这一组类固醇的特征是芳香族1，3，5(10)A环且在3位上有一个羟基或羟基衍生物的取代。
优选的雌甾烯包括1，3，5(10)-雌三烯-3，17β-二醇;1，3，5(10)-雌三烯-3，16α，17β-三醇;1，3，5(10)-雌三烯-3-醇-17-酮;1，3，5(10)，16-雌四烯-3-醇甲基醚;1，3，5，(10)，16-雌四烯-3-丙酸酯;1，3，5，(10)，16-雌四烯-3-乙酸酯。
大多数的这些类固醇及其葡糖苷酸、硫酸酯、环戊基丙酸酯、苯甲酸酯衍生物都是公知和商品化的，例如，可购自于Sigma Chemical CO.，和Aldrich Chemical CO.，等公司。其烷氧基衍生物及其合成可见于美国专利2，984，677号，该文本的内容在此合并于本文。
1，3，5(10)，16-雌四烯-3-醇可由Research Plus，Inc和Sterloids，Inc.获得。该化合物的乙酸酯和丙酸酯衍生物将在以下给出。
表1给出本发明涉及的雌甾烯，但不限于此。其后的合成流程示意图说明制备这些雌甾烯的中间体和亚结构的合成。
表1雌甾烯
亚结构的合成参照前表，以下按竖行(E1-12)或横列(N1-4)列举了某些中间体的合成。
E型 其商品化的结构如雌酮(ESTRONE)。
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因而，可合成的化合物包括以上所述，以及它们的衍生物，例如，17-甲基-N1，17β-甲基-N2，或14α-甲基-N4等与E1、E2、E3、E5、E6、E7、E8、E11或E12的结合产物。
卤代雌甾烯 George A. Boswell in patent C.A. 7058140g，following.
G. Michael Blackburn， Brian F. Taylor， and Andrew F. Worrall， Journal of Labelled Compounds and Radiopharmaceuticals，1986，Vol. XXIII， No. 2， p. 197.
因而，可合成的化合物包括以上所述及它们的衍生物，例如，17-氟-N1与E1、E2、E3、E5、E6、E7、E8、E11或E12的结合产物。17-碘-N1与E2、E6或E12的结合产物。
B.本发明所用的雄甾烯本发明还涉及前述雌甾烯类固醇与某些雄甾烷类固醇相结合的药用组合物及其使用方法，并且优选具如下通式的雄甾烷 式中P1选自氧、α-(β)-羟基、α-(β)-丙酰氧基、α-(β)-甲氧基、α-(β)-低级酰氧基、α-(β)-低级烷氧基和α-(β)-苯甲酰氧基;P2选自甲基、羟甲基、酰氧甲基、烷氧甲基、低级烷基、羟烷基、酰氧烷基和烷氧烷基;P3空缺或选自甲基、羟甲基、酰氧甲基、烷氧甲基、低级烷基、羟烷基、酰氧烷基和烷氧烷基;P4选自氢、氧、卤素、羟基、烷氧基和酰氧基;P5为一个或两个取代基，可分别为一个或两个氢原子、甲基、亚甲基，也可为一个或两个卤原子;P6为氢或卤素;a、b、c、d、e、f、g、h是可选的双键位置。
优选的一组类固醇是在b位为双键，特别是同时在c或d位也为双键的类固醇。另一组优选的是在a和c位同时为双键的类固醇。再一类优选的是在P3为甲基、h位是任选双键且P5为亚甲基或1个或2个氢原子的类固醇。在a位或b位为双键的也是优选的一组类固醇。
优选的类固醇包括雄甾-4，16-二烯-3-酮(P1为氧代，a位为双键，P2为甲基，可由Steraloids，Inc.购买到)，雄甾-4，16-二烯-3α-醇(P1为α-OH，a位为双键，P2为甲基)，雄甾-4，16-二烯-3β-醇(P1为β-OH，a为双键，P2为甲基)，这些化合物的合成可参见本申请人所有的题为“雄甾烷类固醇作为改变人下丘脑功能的神经化学启动物以及相关的药用组合物和方法”的美国待审专利申请，该申请是1992年6月24日提交的美国专利申请07/903，604号的部分继续申请，该申请在此一并合于本申请。
C.合成方法本领域的熟练技术人员均知道类固醇合成反应的一般步骤(例如，可参见Fieser，L.F.和M. Fieser，Steroids，Reinhold，N.Y.1959)。当反应时间和温度需要得到确定时，可用常规方法确定之。当加入所需试剂后，在惰性气体条件下搅拌该混合物，按小时为间隔收取等分试样。用薄层色谱分析各等分试样来检查起始物消失的时刻，也就是后续处理开始进行的时刻。如果24小时内起始物还没有被消耗完，则对混合物进行加热回流处理，并按前述收取和分析等分试样，直至没有起始物残留为止。在这种情况下，可以在合成过程开始前使混合物得到冷却。
雌甾烯的烷氧基衍生物是用其相应的羟基类固醇，在惰性含氯有机溶剂如二氯甲烷中，与烷基化试剂如三甲氧代鎓氟硼盐、三乙氧代鎓氟硼酯或甲基氟硫酸酯反应而制成。另外，也可以在极性非质子溶剂如DMF、DMSO和六甲基磷酰胺(HMPA)中，以烷基化试剂如烷基卤、对甲苯磺酸烷基酯、甲磺酸烷基酯、二烷基硫酸烷基酯与一种碱如氧化银、氧化钡结合使用来实现这一合成。此外，当用乙醇或丙酮作为溶剂时，也可使用K2CO3作为碱类。
产物的纯化是用本领域熟练技术人员公知的色谱法和/或结晶法来完成的。
D.药用组合物及其使用方法本发明的实施方案之一是改变个体下丘脑功能的方法。另一方案是改善个体的植物神经系统功能。植物神经系统功能包括但不限于心律、呼吸律、脑电波形态(α皮质活性所占百分比)、体温等。其它的方案包括但不限于减除不良情感、不良情绪和不良性格。另一实施方案是减除女性经前反应。所有这些实施方案均是通过非系统性地、鼻内施用某种雌甾烯类固醇，或施用某些雌甾烯类固醇，或施用一种或多种雌甾烯类固醇与一种或多种雄甾烷类固醇的结合物来实现的。
这一特殊的施药方式，即在鼻内施用类固醇配体使其直接与犁鼻骨器官(VNO)相接触，是与诸如摄取、注射等其它施药方式有着几方面的重要区别。在本发明的方法中，适宜的配体是直接施于鼻道内和犁鼻器上的化学受体上，也就是非侵入性的方法而不用药片和针头。药效是通过配体与鼻神经上皮细胞特别是犁鼻器上分布的专一性受体的结合来调控的。这是通过神经系统而非循环系统的药效方式，因此，既可影响脑功能，而又不必去顾忌血脑屏障。这些治疗方法提供了通过神经系统直接影响下丘脑的方式，因为在下丘脑与外激素受体之间只有一个突触联接。由于感觉神经只作用于脑的特定部位，所以本方法具有特异的药效，同时也极大地减小了产生副作用的可能性。
犁鼻器官(VNO)接触的重要性在于它与外激素/化学受体功能相关。犁鼻器官包括一对盲管憩室，位于鼻中隔的内缘。犁鼻器官上有神经上皮细胞，其轴突与扁桃体有直接的突触联接，进而通到下丘脑。大多数的陆生脊椎动物，包括人的胎儿都具有犁鼻器官，对此已有众多的文献报导;然而，一般均认为犁鼻器官在成人中为退化器官(见Johnson等，同上述)。
此处所述的活性化合物，以及其硫酸酯、环戊基丙酸酯，苯甲酸酯、丙酸酯、卤化物或葡糖苷酸衍生物均可以直接施用，但优选以组合物的形式施用。可制成液剂，例如，药液、悬浮液等，优选制成在单位剂型内含适于单独施用的准确剂量的形式。药液可用滴鼻的形式或气雾剂的形式施用。
此外，活性化合物还可制成膏剂或乳剂而施于鼻腔内。另外一种为缓释方式，即用合成的聚合物如硅胶，或用天然聚合物如明胶或纤维素将活性化合物按常量或按微量包裹起来。通过选择适易的聚合物可以控制扩散率从而控制药物的释放率(Langer，R.S. and Peppas，N.A.，Biomaterials 2， 201，1981)。天然聚合物如明胶和纤维素会随着时间在数分钟或数小时内缓慢地溶解，而硅胶则可保持数月不被溶解。药用组合物中可含有常规的药用载体或赋形剂，一种或一种以上的如通式I的活性雌甾烯化合物，而且还可以含或不含一种或一种以上的雄甾烷类固醇。此外，组合物中还可以含有其它的药剂、医疗剂、载体、辅剂等。
被称为人外激素的最可能的通讯方式是吸入存在于他人皮肤上的天然外激素。
某些16-雄甾烯类固醇，例如5α-雄甾-16-烯-3α-醇、5α-雄甾-16-烯-3-酮，4，16-雄甾二烯-3-酮、5α-雄甾二烯-3β-醇，也许还有5α-雄甾二烯-3α-醇，是天然产生于人体的，也许存在于人的皮肤上。据估计，天然存在于人体皮肤上的16-雄甾烯类固醇的最大浓度为2-7ng/cm2。据估计，在亲密接触行为中，人所受到暴露的天然类固醇不会超过700ng。由于这些化合物是相对不挥发的，因此，即便是在亲密接触行为时，其中一方由另一方皮肤上吸入的天然类固醇不会超过0.7pg。而且只有吸入量的约1%能到达犁鼻器官上的受体。因此，天然外激素的自然暴露的最大估计值为0.007pg。
活性化合物的施用量当然要依施用对象、患病程度、施用途径、施用频率以及开方医师而有所不同。然而，将至少约10pg剂量的活性化合物一次直接施于犁鼻器官腔内可以引起临时的植物神经反应。当施用于鼻腔内时，其剂量约为100pg至100μg，优选约1ng至10μg，最优选约10ng至1μg。施用频率应在数小时一次至数月一次的范围之内，优选每日8次至每隔天一次，更优选的是每日1～3次。含有一种或一种以上活性化合物的膏剂，还可以将辅药加入载体中，如水、生理盐水、葡萄糖液、甘油、乙醇等，在其制备时，还可加入基底，如凡士林、猪脂、羊毛脂等。
液态的药用组合物，可将如上所述的活性化合物及任选辅药溶解或分散于载体中，例如水、生理盐水、葡萄糖液、甘油、乙醇等，从而形成溶液或悬浮液而得到制备。如果需要的话，还可在药用组合物中加入少量的非毒性助剂，例如，湿润剂、乳化剂、pH缓冲剂，例如，乙酸钠、脱水山梨醇甘油月桂酸酯、三乙醇胺乙酸钠、三乙醇胺油酸酯等。制备这些剂型的具体方法是本领域熟练技术人员所公知的，或是显而易见的，例如，可参见Remington′s Pharmaceutical Sciences，Mack Publishing Co.，Easton，PA，15thEd.，1975。在任何情况下，药用组合物配方中，均应含有一种或一种以上活性化合物，且含量要能使患者症状得到改善。
气雾剂中的活性化合物优选细碎状的，并配以表面活性剂和推进剂。活性组分的比例一般为0.001～2%(重量)，优选0.004～0.10%。
表面活性剂必须是非毒性的，优选能溶于推进剂的为好，例如，含6～22个碳原子的脂肪酸的酯或其部分酯化物，例如，已酸、辛酸、月桂酸、棕榈酸、硬脂酸、亚油酸、油硬脂酸和油酸与脂肪族多元醇或其环状酐如1，2-亚乙基二醇、甘油、赤藓醇、阿糖醇，甘露糖醇、山梨醇和由山梨醇衍生来的已糖醇酐(用商标“SPANS”来销售的脱水山梨醇酯)形成的酯，以及这些酯化物的聚氧乙烯和聚氧丙烯衍生物。也可使用混合酯，如混合的或天然的甘油酯。优选的表面活性剂是油酸酯和脱水山梨醇，例如，用下列商标出售的产品，“Aracel C”(脱水山梨醇倍半油酸酯，“Span 80”(脱水山梨醇单油酸酯)“Span 85”(脱水山梨醇三油酸酯)。表面活性剂可占组合物重量的0.1～20%，优选0.25～5%。
组合物的其余部分用推进剂配齐。液化的推进剂在常温常压下一般为气体，在加压条件下为浓缩体。适宜的推进剂为含不超过5个碳的烷烃，例如，丁烷或丙烷，以商标“Freon”出售的氟化烷或氟氯化烷。亦可使用上述的混合物。
在制备气雾剂时，在带有合适阀门的容器内灌以含有细微状活性成份及表面活性剂的合适的推进剂。因此，各成份均保持在加压条件下直至打开阀门释放出来时为止。
另一种施用途径是在皮肤上局部外用挥发性的组合物，优选施于面部。这类组合物通常含有醇类，如乙醇或异丙醇。在这类组合物中还可加入香味。
E.感受、情绪及性格的测量与情感、情绪、性格相关的感觉状态一般用答题形式测量。例如，可给答问者一组由描述感觉状态的形容词组成的问题。答问者根据其感觉强弱在一个数字尺度上标出来。每组相关形容词的组成以及对答题者给每个形容词的评定的统计分析就为测量各感觉状态提供了基础。
此外，感觉状态也可根据植物神经系统的变化来测量，正如在多种波动描记器评定中一样(皮肤电反应，脉搏等)[参见Cabandc，M. Annual Review of Physiology (1975)37415;Hardy，J.D.，“Body Temperature Regulation”，Chapter 59，pp. 1417.InMedical Physiology.Vol.IIEd.VB Mountastle(1980);Wolfram Bouscein，Electrodermal Activity (Plenum Press 1992)]。此外，非语言性的暗示，如面部表情和身体动作也可被评估。
F.在治疗某些心理障碍中的应用适用于局部和/或鼻内施用的含一种或一种以上的本文所述的类固醇的组合物，对治疗某些心理障碍，特别是神经官能症也是有效制剂。在优选的实施方案中，本发明的组合物是根据尽量减少粘膜吸收和皮肤吸收而设计的，而不像其它的药剂均是为产生一个系统的效应而设计的，这是因为本发明组合物中的成分的作用方式是刺激鼻内的，特别是犁鼻器官上的神经受体。本发明的组合物是通过刺激犁鼻器官上化学神经受体而不是由进入循环系统起作用的，因此，将活性组分吸收到或介入到循环系统中是不会产生效果的，反而可能增大产生副作用的可能性。这些组合物只在按将其所含的一种或一种以上的雌甾烯或16-雄甾烯施于患者犁鼻器官上的方法使用时才是有效的。
可治疗的神经官能症包括急性、临时性、持续性和复发性的神经官能症。这些病症一般均有非正常的症状，例如情绪变化(焦虑、痛苦、压抑)，或思路不正常(强迫观念、不合理的恐惧)，或行为异常(盲目遵从仪式或强迫行为、假性神经病转换征兆或癔病转换征兆)。对这些神经紊乱症状，本发明的组合物在短期内可有效，特别是通过消除与之相伴随的焦虑和压抑等。
鼻内施用本发明的组合物还可缓解其它性格紊乱症。这些症状包括个性的特征，例如，类妄想狂、逃避、精神变态、疑病等;或行为特征，如酗酒及滥用其它物质，违反或偏离社会期望的反常行为。
在某些身体和生理状态下，包括正常的状态(如月经)和与疾病或受伤相关的状态(如慢性病)，都可能包含有心理成份并表现为精神紊乱，神经紊乱，或焦虑心情及压抑情绪。按本发明的方法，将一种或一种以上的雌甾烯或雄甾烯的组合物施于患者犁鼻器官，也可以缓解这些症状。
1、焦虑是一种令人讨厌的情感状态，其特征为感觉不安、有危险临近感、挂念或紧张。以含有本发明的一种或一种以上的雌甾烯类固醇的组合物施于患者鼻内，可以有效地缓解焦虑。这种紊乱有很多表现，包括从轻微的不安直至造成机能不全的综合症。焦虑不仅是众多精神紊乱的主要症状，它也是许多生理状态和社会行为的组成部份。此外，焦虑的各种症状一般均伴有压抑，而精神抑郁症(神经机能紊乱)和许多个性紊乱则更是如此。焦虑型的紊乱可具体分为惊恐型、恐怖型、普遍化的焦虑，外伤后的紧张焦虑，强迫观念与行为的焦虑。
2、用于治疗焦虑的药物药物治疗是焦虑症的主要治疗方法，通常与行为治疗相结合使用。治疗焦虑症最常用的药物为利眼宁。利眼宁有催眠、镇静、抗焦虑、抗惊厥以及放松肌肉的作用。因此，它也被广泛地用于除焦虑以外的许多其它症状(例如，失眠、戒酒、肌肉痉挛、癫痫，也可作为内窥镜手术的麻醉和镇静剂)。这种药物相对来说是安全的，比以往使用的巴比妥类具有更多的优点。这类药具有快速的起始作用，并能产生欣快的感觉。然而，尽管利眠宁具有很好的安全记录，但它们的一些性质，例如，镇静作用、运动失调、记忆减弱、消弱运动协调、危险的嗜瘾效应，特别是伴随饮酒行为等，均限制了这类药物的应用。医生们及患者们都日益明显地认识到了这种上瘾的可能性，因此，都更加倾向于避免长期使用这类药物。
近来，新的一类非利眠宁的抗焦虑药-重氮螺旋癸二酮(Azaspirodecanediones)已被批准上市，它们具有更好的抗焦虑选择性。其中最先上市的是丁螺旋酮。据报道，这种药对广泛的焦虑症(Generalized Anxiety Disorder)具有与利眠宁相同的有效性。同利眠宁相比，丁螺旋酮的镇静作用较弱，对酒精的增强作用较弱，上瘾的可能性较小。然而，在临床使用时，对于已经使用利眠宁的患者则很难用丁螺旋酮来取代利眠宁，因为丁螺旋酮并不产生欣快感，因而患者就感觉不到使用利眠宁时所具有的满意感觉。此外，丁螺旋酮的开始产生药效所需时间较长(1～3周)。因而也限制了它在治疗急性焦虑症时的应用。系统性地使用丁螺旋酮抗焦虑药已经显示出对中枢神经系统5羟色胺5-HT受体有高度的亲和力，这一点被认为是抗焦虑药的作用方式。
另一类新的抗焦虑药是系统性使用的苯并呋喃衍生物。这些物质对中枢神经系统的多巴胺D2受体有高度亲和力。
3.情感紊乱本发明的组合物也可用于治疗某些情感紊乱的一些症状。情感紊乱，如严重的压抑症、躁狂症等，其主要临床表现的特征是情感的变化。极端的情感变化可伴随有精神病，特征是妄想和妄觉，一般均与主导情绪相一致。通常，精神病均伴有情感变化或继发性情感变化。相似地，正常的悲痛、悲哀、失望、因患病而产生的烦躁不安或情绪低落，或与疾病及正常的周期性机能不良如与月经相伴的烦躁不安等，也可用本发明的组合物在鼻内施用而得到减轻。
4.本发明组合物的作用原理本发明组合物的作用原理与任何以往所报导过的作用原理均有很大不同。本发明的活性类固醇及其类似物刺激/结合于局部施药所接触的犁鼻器官上的受体。并不需要直接接触中枢神经系统的受体。对这些受体的刺激产生一个信号并被经过神经通道传导到患者脑部的下丘脑区，从而产生神经精神反应。这个反应表现为各种植物神经功能的分散变化，包括但不限于脉搏、呼吸频率、脑电图波形、唤醒电位、皮肤温度、皮肤电反应和瞳孔直径等。该反应还表现为不良情感和情绪的明显缓解。虽然改变下丘脑功能与治疗精神紊乱之间的关系还不完全清楚，但明显的是本发明的组合物在减缓自身否定消极情绪和不良个性方面均是有效的。这些变化均伴有由下丘脑控制的植物神经变化，并与副交感神经的增强(或说与交感神经的减弱)相一致。
因为本发明的活性化合物的专一性与外激素相似，因而，它们均显示出其刺激及活性的种的专一性，因此，它们的效能是无法用动物实验来检验的。
Ⅲ.实施例以下的实施例是为了说明而非限制本发明。
各实施例中所用的缩写定义如下aq＝水的;RT＝室温;PE＝石油醚(沸点50-70℃);DMF＝N，N-二甲基酰胺;DMSO＝二甲亚砜;THF＝四氢呋喃。
实施例1雌甾-1，3，5(10)，16-四烯-3-醇(28)的合成以下的合成方法参见图1雌酮对甲苯磺酰腙(27)雌酮(26)(270克，1.00摩尔)与对甲苯磺酰肼(232.8克，1.25摩尔)于无水甲醇(2.5升)中加热回流20小时。反应混合物转移到锥形瓶中并冷却。减压过滤出结晶物，再用甲醇(300ml)洗该混合物。随后，进行一系列的蒸发处理使滤液分别成为200ml、800ml和400ml体积，每次蒸发中均收集结晶物。总共得到433.5克产物(99%)。
1，3，5(10)，16-雌四烯-3-醇(28)雌酮对甲苯磺酰腙(27)(219.0克，500毫摩尔)置于无水四氢呋喃(8.0升)中，并于氯化钠/冰浴中冷却。机械搅拌该混合物并同时用双头针(double needle)加入正丁基锂(800ml的于己烷中2.5摩尔的溶液，2.00摩尔)。该混合物在高温下搅拌三天。加入冰(250克)，再加入饱和氯化铵溶液(500ml)。搅拌混合两相，然后静置。用聚四氟乙烯管子吸出水相，然后用乙醚(500ml)提取。对两个不同的有机相用相同的方式先用饱和碳酸氢钠溶液(500ml)再用饱和氯化钠溶液(500ml)洗。对有机层进行干燥(MgSO4)并于真空中蒸发后得到初产物。对初产物用500克硅胶60(230～400筛目)进行闪滤，用乙酸乙酯/已烷(25∶75，2.5升)洗脱。滤液于真空中蒸发得到结晶物。所得产物在甲醇(300ml)/水(75ml)中进行重结晶，并用甲醇(80ml)/水(20ml)洗。再用乙酸乙酯/已烷(12.5∶87.5)进一步重结晶得到纯净产物(88.9克，70%)。
实施例2合成1，3，5(10)，16-雌四烯-3-醇的酰基衍生物向置于乙醚(10ml)中的1，3，5(10)，16-雌四烯-3-醇(254毫克、1.00毫摩尔)加入乙酸酐(0.25ml)(如要得到丙酯衍生物，则加入丙酸酐)，再加入吡啶(0.25ml)，所得混合物在室温下搅拌16小时。混合物倒入冰/水中，再用乙醚(2×20ml)提取。有机提取相分别用水、饱和硫酸酮溶液、水、饱和氯化物钠溶液洗，干燥(MgSO4)，真空蒸发后得到初产物。再于17.5克硅胶60(230～400筛目)上进行闪色谱，用10%～12%的乙酸乙酯/已烷洗脱，得到纯净产物(192毫克，65%)。
实施例3合成雌甾-4，16-二烯-3-酮(1)向置于8.6毫升无水四氢呋喃中的雌甾-1，3，5(10)，16-四烯-3-甲基醚(551.5毫克、2.055毫摩尔)中，加入约30毫升的无水氨，6.76克叔丁基醇及切成小段的锂丝(0.24克，35毫克-原子)。混合物在氩气条件下回流4.5小时，随后加入甲醇(2.3毫升)，过夜煮沸除去氨。残留物溶于25毫升甲醇，再用5N HCl酸化至约pH 1。在55℃～70℃的油浴中加热15分钟，冷却后的水解物用25毫升水和50毫升乙酸乙酯分配，用25毫升提取水相。合并有机相，用25毫升饱和碳酸氢钠和25毫升盐水洗该有机相，用硫酸镁干燥，然后过滤。减压除去溶剂，得到0.57g油性残留物，用硅胶闪色谱提纯(以15%乙酸乙酯/已烷洗脱)，类似于薄层色谱，再以戊烷重结晶，得到晶体(206.1毫克，39%)，熔点67℃～71℃。
实施例4合成雌甾-2，5(10)，16-三烯-3-甲基醚(2)向置于19毫升无水四氢呋喃、14.99克叔丁醇和约70毫升无水氨中的雌甾-1，3，5(10)，16-四烯-3-甲基醚(1.22克、4.54毫摩尔)，加入切成小段的锂丝(0.53克，76毫克-原子)。在氩气条件下回流6小时，向反应物中加入5毫升甲醇使之骤冷，过夜煮沸除去氨。残留物悬浮于100毫升水中，再分两次各用100毫升乙酸乙酯提取，合并有机层，用盐水洗，再以硫酸镁干燥。减压除去溶剂，再过硅胶闪色谱，与薄层色谱类似，用1%乙酸乙酯/已烷洗脱，再经绝对乙醇重结晶，得到松散的白色晶体(884.1毫克，3.269毫摩尔，72%)，熔点72～73℃。
实施例5合成雌甾-5(10)，16-二烯-3-酮(3)雌甾-2，5，(10)，16-三烯-3-甲基醚(2)(646.3毫克，2.390毫摩尔)溶于50毫升丙酮中，再用草酸二水合物(0.84克，6.7毫摩尔)在室温下水解6小时。用25毫升饱和碳酸氢钠使反应混合物骤冷，再经两次乙酸乙酯提取，每次25毫升。合并萃取的有机层，用盐水洗，以硫酸镁干燥，过滤，减压浓缩。残留物再于已烷中重结晶得到产物(462.5毫克，1.804毫摩尔，75%)，熔点112～116℃。
实施例6合成雌甾-5(10)，16-二烯-3-醇(4)在6毫升无水乙醚中的雌甾-5(10)，16-二烯-3-酮(3)(301.1毫克，1.174毫摩尔)，用氢化锂铝(50.0毫克，1.32毫摩尔)于室温下还原1小时。该悬浮液用脱水硫酸钠(2.00g)骤冷10分钟，再以硅藻土过滤，残留物用乙醚洗四次，每次25毫升。合并滤液，减压蒸馏，用闪色谱提纯(硅胶，5%乙酸乙酯/已烷为洗脱液)，合并收集到的各部份，再以制备薄层色谱提纯。所得的极性较强的产物再用水乙醇重结晶，得到4.8毫克固体，损失明显。极性较弱的产物用水乙醇重结晶，得到白色晶体(59.5毫克)，熔点98～100℃。总产量为64.3毫克(0.249毫摩尔，21%)。
实施例7合成雌甾-4，9，16-三烯-3-酮(5)在吡啶(5.0毫升，62毫摩尔)中的雌甾-5(10)，16-二烯-3-酮(3)(0.38克，1.5毫摩尔)，用冰盐浴冷却至-13℃，少量多次加入溴化过溴化吡啶鎓(1.58克，4.94毫摩尔)使T＜-4℃。振荡1分钟后，加入苯酚(0.25克，2.7毫摩尔)，在室温下继续反应24小时。加入(50毫升)乙酸乙酯，反应混合物用25毫升1N盐酸洗一次，用饱和硫酸铜洗两次，每次25毫升，用25毫升5%氢氧化钠洗一次，再用25毫升盐水洗一次。用硫酸镁干燥，过滤，减压浓缩，残留物用10毫升绝对乙醇溶解，加入铝粒(0.33克，5.0毫克-原子)，混合物回流0.5小时。移去上清液，用10毫升绝对乙醇洗残留物，合并上清液，减压浓缩。所得树脂经硅胶闪色谱，以15%乙酸乙酯/已烷洗脱。合并相应的收集组分，浓缩，再用已烷重结晶后得到固体产物(117.5毫克，0.4619毫摩尔，31%)，熔点为87～92℃。
实施例8合成雌甾-1，3，5(10)，16-四烯-6-酮-3-乙酸酯(6)
三氧化铬(13.40克，0.1340摩尔)悬浮于200毫升二氯甲烷，再于冰-盐浴中冷却至-10℃。加入3，5-二甲基吡唑(12.90克，0.1342摩尔)，混合物搅拌20分钟。加入20毫升冷却的雌甾-1，3，5(10)，16-四烯-3-乙酸酯(4.00克，13.5毫摩尔)的二氯甲烷溶液，搅拌下反应2小时，其间保持T＜-8℃。混合物用200克硅胶过滤，用二氯甲烷洗脱。相同的收集组分经合并与浓缩后，粗产物用硅胶闪色谱提纯，以15%乙酸乙酯/已烷为洗脱剂。合并相应的组分，减压浓缩，得到白色固体(0.92克，3.0毫摩尔，22%)，熔点为87～103℃。
实施例9合成雌甾-1，3，5(10)，16-四烯-3-醇-6-酮(7)将雌甾-1，3，5(10)，16-四烯-6-酮-3-乙酸酯(203.1毫克，0.6543毫摩尔)置于30毫升甲醇中，用1.5毫升5%(W/W)氢氧化钠对其皂化40分钟。反应混合物经减压浓缩，用50毫升水溶解，用1N盐酸中和，用二氯甲烷提取三次，每次25毫升。合并有机相，用50毫升盐水洗，硫酸镁干燥，过滤，浓缩得到白色固体，再用苯/已烷重结晶，用制备性薄层色谱提纯得到白色晶体(52.8毫克，0.197毫摩尔，30%)，熔点188～191℃。
实施例10合成雌甾-1，3，5(10)，16-四烯-6α-醇-3-乙酸酯(8)雌甾-1，3，5(10)，16-四烯-6-酮-3-乙酸酯(6)(421.4毫克，1.358毫摩尔)悬浮于35毫升95%乙醇中，并于室温下用硼氢化钠(98.8毫克，2.61毫摩尔)还原100分钟。减压浓缩后，残留物溶于25毫升水，用1N盐酸中和，用二氯甲烷提取三次，每次25毫升。合并有机层并以25毫升盐水洗，硫酸镁干燥，过滤，浓缩。所获白色泡沫状物过硅胶闪色谱，用25%乙酸乙酯/已烷洗脱。合并收集组分，浓缩后得白色固体(0.12克，0.38毫摩尔，28%)，熔点为209～212℃。
实施例11合成雌甾-1，3，5(10)，16-四烯-3，6-二醇(9)向悬浮于5毫升无水四氢呋喃中的氢化铝锂(LAH，95%，46.9毫克，1.17毫摩尔)，在搅拌条件下滴入置于5毫升无水四氢呋喃中的雌甾-1，3，5(10)，16-四烯-6-酮-3-乙酸酯(6)(422.9毫克，1.360毫摩尔)。搅拌反应50分钟，再加入氢化铝锂(46.5毫克，1.16毫摩尔)，继续搅拌22小时。回流4小时后，薄层色谱仍显示有反应原料。用0.5毫升水+0.5毫升20%(W/W)硫酸骤冷反应物，减压浓缩。用热乙酸乙酯提取残留物四次，每次10毫升，再用硅藻土过滤。合并滤液，浓缩，用闪色谱提纯两次，得到产物(0.05克，0.2毫摩尔，10%)，熔点150～157℃。
实施例12合成雌甾-1，3，5(10)，7-四烯-3-醇(10)向悬浮于2毫升二甘醇的马烯雌酮(100.2mg，0.3733毫摩尔)中加入肼(59微升，1.9毫摩尔)和氢氧化钾(0.04克，0.7毫摩尔)。混合物在200～214℃的油浴中搅拌2小时，冷却后，加入10毫升水稀释，用1N盐酸中和，用乙醚提取三次，每次25毫升。合并有机相，用10毫升盐水洗，硫酸镁干燥，过滤，浓缩，经制备性薄层色谱纯化(硅胶，15%乙酸乙酯/已烷洗脱)得到黄色树脂。对该产物用活性炭进一步纯化脱色，再于乙醇水中重结晶得到褐色晶体(13.2毫克，51.9微摩尔，14%)，熔点为130～134℃。
实施例13合成20-高甾-1，3，5(10)，6，8，17-已烯-3-醇(11)2.1毫升无水二甲基亚砜中悬浮有三苯甲溴化磷鎓(67.10毫克，1.878毫克)和叔丁氧基钾(212.1毫克，1.890毫摩尔)，在氩气条件下于76～86℃热浴中加热1小时，随后加入于2.1毫升无水二甲基亚砜中的马萘雌酮(100.1毫克，0.3579毫摩尔)，将绿色溶液搅拌1小时。冷却后，加入10毫升1N冰盐酸，用乙醚提取三次，每次10毫升。合并的有机相用10毫升饱和碳酸氢钠+10毫升盐水洗，用硫酸镁干燥，用硅藻土过滤，减压浓缩。橙黄色油状残留物用制备性薄层色谱(硅胶，25%，乙酸乙酯/已烷洗脱)纯化得到产物(75.5毫克，0.286毫摩尔，76%)，与薄层色谱类似，熔点为113～121℃。
实施例14合成雌甾-1，3，5(10)，6-四烯-3-醇(17)1.8毫升二甘醇中含有雌甾-1，3，5(10)，6-四烯-3-醇-17-酮(91.1毫克，0.339毫摩尔)，肼(54微升，1.7毫摩尔)和氢氧化钾(0.06克)，在氩气条件下于200℃热浴上加热2小时。冷却至室温后，加入10毫升水，再用1N盐酸使溶液酸化至pH≈2。用乙醚提取所形成的悬浮液三次，每次10毫升。合并有机相，用10毫升盐水洗，硫酸镁干燥，以硅藻土过滤，减压浓缩。固体初产物用制备性薄层色谱(25%乙酸乙酯/已烷洗脱，硅胶)纯化，得到产物(5.9毫克，23微摩尔，7%)与薄层色谱类似。
实施例15合成雌甾-4.16-二烯-3-醇(18)1.7毫升无水乙醚中含有雌甾-4.16-二烯-3-酮(1)(87.2毫克，0.340毫摩尔)，向其中加入氢化铝锂(15.0毫克，0.395毫摩尔)并搅拌该悬浮液17分钟。加入0.50克脱水硫酸钠搅动反应物10分钟，用硅藻土过滤。残留物用乙醚洗三次，每次10毫升，合并洗脱液，减压浓缩。经制备性薄层色谱(硅胶，5%乙酸乙酯/二氯甲烷洗脱)得黄色树脂状粗产物(50.0毫克)。可以重复进行色谱提纯直至满意为止。
实施例16雌甾-4，16-二烯-3-酮(9)本合成如图11所示。19-降睾丸酮(XIX)是商品，例如，可购自Chemical Dynamics Corp.。它是19-降-16-雄甾烯衍生物D的起始物。19-降-睾丸酮(XIX)被乙酰氢化物和吡啶转换为其乙酸酯(见Hartman，J.A.et al.， J.Am.Chem.Soc.(1956)785662)，(a)D的乙酸酯(4.8克，15.17毫摩尔)于甲苯(10毫升)中的溶液(b)置于装满石英片的玻璃管中在540℃(200毫米汞柱，缓慢氮气流)的条件下热解。所获得热解粗产物(3.1克)用硅胶(150)色谱，以二氯甲烷洗脱，得1.1克(28%)均质油状酮9;+57.9°(Cl)[(27)熔点71～73°];IR.(CHCl3)1660s，1615m，1585w;1H-NMR.(90MHz)0.84(S，3H);5.82(m，2H);5.87(br，S，1H)。
实施例17雌-16-烯-3-酮(10)本合成如图11所示。19-降睾丸酮被锂和氨还原为19-降-5a-雄甾-17-醇-3-酮(XX)(C)，所用的方法见(Villotti，R.，et al.J.Am.Chem.Soc.(1960)825693)。雄甾-5a，17-二醇-3-酮(XX)被乙酰氢化物和吡啶转化为其乙酸酯(a)[Hartman，J.A.et al.， J.Am.Chem.Soc.(1956)78∶5662)]。17β-乙酰氧基-5a-雌甾-3-酮(8.0克，25.1毫摩尔)于辛烷/丙酮(10∶1)中的溶液(22毫升)在550℃热解(220毫米汞柱，缓慢氮气流)(b)。经硅胶(600克)色谱提纯粗产物，以CH2Cl2洗脱，将匀质组分以纸电泳重结晶得到3.13克纯酮10(48.3%)。熔点51～54℃，[a]＝+72.8°(C 1.0);IR.(CHCl3)1705s，1585w;1H-NMR.(90MHz)0.79(s，3H)，5.71(m，1H);5.87(m，1H)。
实施例18雌甾-16-烯-3α-醇(11)
本合成如图11所示。L-Selectride(d，三(仲丁基)氢化硼酸锂，4毫升的1M的四氢呋喃溶液，4毫摩尔)于0℃滴入酮10(800毫克，3.10毫摩尔)于无水乙醚中(5毫升)的溶液。在0℃搅拌1小时后，加入水(10毫升)。加入10%NaoH溶液(5毫升)，再加入30%H2O2溶液于室温下搅拌3小时使甲硼烷氧化，用乙醚提取后，粗产物(790毫克，Ca.9∶1的11与12的混合物)经硅胶色谱，以CH2Cl2洗脱得到700毫克(87%)纯净的醇11。熔点119～120°→-123～124℃(纸电泳)，[a]D+40.6°(C＝1.0)。IR.(CHCl3)3640m，3500Br，1585w.1H-NMR.(90MHz)0.78(s，3H);4.09(m，W1/2≈8，1H);5.71(m，1H)，5.87(m，1H)。
实施例19雌甾-16-烯-3β-醇(12)本合成如图11所示。酮10(800毫克，3.10毫摩尔)于无水乙醚(5毫升)中的溶液于室温下滴入LiAlH4(38毫克，1毫摩尔)于乙醚(3毫升)中的浆液(e)。1小时后，用H2SO4溶液水解该混合物。经乙醚提取后，粗产物(802毫克，12与11的9∶1的混合物)经硅胶色谱，用CH2Cl2洗脱。首先洗脱出来的是少量11(70毫克)，然后洗脱出主要组份12(705毫克，87%)。熔点113～115°，[α]D+36.3°(C＝1.0)。IR，(CHCl3)3640m，3500br，1585w。1H-NMR.(90MHz)0.78(S，3H);3.60(m，W1/2≈(m，20，1H);5.71(m，1H)，5.87(m，1H)。
实施例20雌甾烯刺激人犁鼻器官和嗅上皮的电生理学人犁鼻器官和嗅上皮局部电压的记录方法是非侵入性的。对这两个嗅觉结构的局部气体刺激分别使用特别设计的连接到多通道供药系统上的导管/电极。犁鼻器官和嗅上皮的局部反应显示出对配体刺激物浓度的相关性。
试验对象为10名(筛选过)正常临床志愿者，2男，8女，年龄在18至85岁之间。试验过程中没有进行任何局部或全身麻醉。
所设计的导管/电极能在进行局部刺激的同时记录下反应。当记录犁鼻器官反应时，用鼻镜探察右鼻前庭，犁鼻骨的开口位于靠近犁鼻骨前缘与鼻底板的交切处。导管/电极被轻轻地插入犁鼻开口并将电极的尖端放置于犁鼻腔内距开口处1～3毫米处。随后取出鼻镜。在记录嗅上皮反应时的程序基本相同，只是将导管/电极轻置于中鼻管后半部，触及嗅粘膜。
局部的气体刺激是经导管/电极完成的。一股室温、潮湿、无味和清洁的气流，恒量不停地通过刺激系统的一条通道。配体刺激物由丙二醇稀释，与湿润空气相混合，以1-2秒的间隔从导管/电极喷出。据估计，这种方法给鼻腔提供的类固醇配体约为25微微克。
试验的结果见图2。反应以毫伏秒计(mVxS)。1，3，5(10)，16-雌四烯-3-醇在男性中引起的犁鼻器官反应明显强于其它供试化合物(图2A)。1，3，5(10)-雌三烯-3，16α，17β-三醇也引起强的犁鼻器官反应。此外，犁鼻器官对这两种雌稀的反应是有性别差异的-对男性的作用约为对女性作用的4倍(图2B)。相反，嗅上皮的反应，相比之下，不论对男性或女性均比强味刺激如丁子香所引起的反应为弱(图2C)。
实施例21测量犁鼻器官神经上皮的受体电压对不同类固醇的反应变化测量了40名女性(图3A)和40名男性(图3B)受体电压对七种不同配体所发生的变化。每个对象均被给予如图中所示的每种物质60微微克。供给这些物质的方法如实施例20所述，每种物质供应间隔为1秒。犁鼻器官神经上皮的电压变化即时记录下来，40个对象的电压变化值的整数取平均。结果表示在图中。比较图3A和图3B可以看出，每种类固醇的活性均是有性别差异的，某些配体物对男性作用强，而另一些则对女性作用大。
实施例22测量雌甾烯刺激犁鼻器官所引起的植物神经反应依实施例20所述方法给40名男性施用1，3，5(10)，16-雌四烯-3-乙酸酯，测量各种植物神经参数。丙二醇用作对照物。施用配体时采用一秒为一节律。植物神经的功能在施用后的2秒内就有变化且可延续到45秒。如图4所示，与丙二醇相比，雌甾烯在犁鼻器官整合受体电压(4A)、皮肤电反应(4B)和皮肤温度(4C)各参数上引起了显著的变化。
实施例23两种雌甾烯类固醇所引起的受体电压变化的比较按实施例21所述，对男性施以两种类固醇和丙二醇各60微微克。如图5所示，1，3，5(10)，16-雌四烯-3-醇-甲基醚所引起的受体电压变化比由1，3，5(10)，16-雌四稀-3-乙酸酯引起的变化大。
实施例24雌甾烯刺激犁鼻器官所引起的心理生理效应雌甾烯刺激犁鼻器官的心理生理学效应的侧量是由给对象施以外激素，然后比较该对象在接受刺激物前后回答问题的差异来进行的。所问的问题包括作为标准底罗盖替斯性别调查评价(Derogatis Sexual Inventory)之一部分的一组形容词。
40名健康对象随机选20名接受安慰剂，另20名按实施例3所述接受约20微微克1，3，5(10)，16-雌四烯-3-醇。每个受试对象，无论接受安慰剂或接受试验物质，均在马上将要接受物质之前及接受物质之后30分钟时，回答一份70道题目的调查表来描述自己的感觉。题目中的70个形容词是随机抽取的，然后又依它们与每种情绪、情感或性格的相关性而集合排列以便测试。
实施例25电生理学的研究以下电生理学研究的对象是60名正常临床志愿者，两种性别均有(30名男，30名女)，年令在20至45之间。没有使用麻醉剂且孕妇被排除了。
刺激及记录系统中包括“多功能微探子”，具体可见[Monti-Bloch，L.and Grosser，B.I.(1991)“Effect of Putaive pheromones on the electrical activity of the human vomeronasal organ and olfactory epithelium”，J.Steroid.Biochem.Molec.Biol.39573-582.]。记录电极是0.3毫米的银球，连接在用特氟隆(TeflonR)为绝缘体的银线上。电极的表面先受到处理以产生氯化银界面，然后复盖上明胶。该电极置于小口径的(直径为5毫米)特氟隆导管内，使其尖端突出约2毫米。该特氟隆导管长10厘米，作为多通道供药系统的终端延伸，该系统供应间断性载有化学感受刺激物的连续气流。该气流首先通过一个小室，然后以气泡的形式穿过某溶液，该溶液可以含有犁鼻素，或在稀释液中的嗅素，或稀释剂本身。有一个螺丝管被用来迅速地将由小室出来的气体导向一条绕过小室的路径。这样，就能在气流中产生刺激物脉冲。另外，导管/电极组件外边包有直径为2毫米的特氟隆管，其中端连通到产生持续吸力3毫升/秒的抽气机上。这个同轴安装的外周抽气管保证所放出的化学感受刺激物被集中到“微区域”(Minifield)(约直径1毫米)，并能避免使刺激物扩散到所选定的刺激位点之外或进入呼吸系统。这一整个刺激及记录组件可以被放到犁鼻器内的神经感觉上皮上，或放到嗅上皮表面，或放到呼吸上皮表面。
电-犁鼻图谱(EVG)记录在静室中进行，对象仰卧;通过置于鼻前庭的鼻索开器把多功能微探子先稳定在鼻腔内。由银片(8毫米)组成的参考和地极均放在眉间。
犁鼻器官的入口，可称犁鼻窝，是经过先扩张鼻孔和鼻前庭而找到的。用带有卤光的6倍双目放大镜将特氟隆导管和记录电极的组合体的尖端放入犁鼻器官开口内，并使其稳定在犁鼻器官开口约1毫米处。记录电极的最佳放置位置是在对试验物进行适当的去极化测试后而确定的。
来自记录电极的电信号先进入直流放大器，然后数字化，并用计算机检验和存储。信号的峰值之间的辐度也被记录，去极化波以下的区域被结合起来，同时仍用计算机屏幕和示波器继续监测信号。通过训练受试对象关闭腭咽的口呼吸的方式来消除因呼吸动作而产生的赝象。
化学感受刺激物嗅觉试验所用的物质是桉树脑、1-香芹酮;犁鼻素A、B、C、E和F。(犁鼻素由美国加利福尼亚州，门岁园的Pherin Corp.提供)各犁鼻素的样品以25～800纤微摩尔的浓度送入连续气流中，送入时间为300毫秒至1秒之间。通常，每一系列短试验脉冲之间有3～5分钟的间隔。载有试验刺激物的全线各部件均由特氟隆、玻璃或不锈钢制成，且在使用前均仔细清洗并消毒。
电-嗅图谱(EOG)嗅觉记录试验使用了与犁鼻试验相同的刺激和记录多功能探子。慢慢地导入探子的尖端直至记录电极触到嗅粘膜。适合的位置由对气味试验物脉冲的反应的去极化来指示。
用犁鼻素刺激犁鼻器官，以300毫秒脉冲的气味刺激嗅觉产生皮质唤醒电位。记录使用的是标准脑电图(EEG)电极，其位置放在国际10120系统的CZ-Al和TZ-Al位置。地极位于乳突。电皮电压(EDA)的记录使用标准的8毫米银电极，其通过凝胶界面与中指和无名指的掌皮相接触。皮肤温度(ST)的记录使用的是小型热敏电阻探针放在右耳叶上。外周动脉搏动(PAP)是用体积描计器放在食指指尖上测量的。呼吸频率(PF)是用可调应变计放在胸部侧量的。所有电信号均被直流放大，被数字化(MP-100，Biopac System)，并且用计算机继续监测。
统计分析EAG与EOGS的各数值、峰值之间的变化、其它参数的频率变化均被测量和进行统计分析。结果的显著性是根据成对t检验或方差分析(ANOVA)来决定的。
犁鼻素对EVG的效应每种犁鼻素均发现产生有性别差异性受体电压(图6A～B)。对EVG的记录是选了30名男性和30名女性(年龄在20至40之间)进行的。犁鼻素先被稀释，再以1秒脉冲形式施于犁鼻器官，各脉冲之间有6分钟的间隔，当向受试对象提问时，受试者是不能“闻”到或清楚地察觉到任何犁鼻素。这一发现与以前的报导相一致[Monti-Bloch，L.and Grosser，B.I.(1991)“Effect of putative pheromones on the electrical activity of the humam vomeronasal organ and olfactory epithelium”，J.Steroid Biochem.Molec.Biol.39573-582]，其表明，按所试的浓度将受试犁鼻素或嗅素施于犁鼻器官上均不能产生可察觉到的感觉。
图6A表示男性(年龄为20至38岁)分别对稀释剂、等摩尔量(100纤微摩尔)的五种犁鼻素(A、B、C、D和F)，以及E，即F的立体异构体反应的平均值。每种物质在所有受试对象中所引起的反应的情况大致相同，无论年龄如何，在t检验和方差分析均没有显著性差异。例如，A、C和D在所有对象中均产生显著效应(M15＝11.4mV，SD＝3.6mV;M16＝6.4mV，SD＝2.5mV，M84＝15.1mV，SD＝4.9mV;p＜0.01)。其它的犁鼻素对犁鼻器受体的去极化的程序均小得多，但在个体间保持平均的反应振幅。对男性有活性的犁鼻素所产生的反应比稀释物大(P＜0.01)。B、F和相似浓度的嗅素对男性犁鼻器官所产生的反应则明显地弱很多(图6A及图7)。
遵循相同的实施原理，对30名女性(年令在20至45之间)进行了试验。在各种犁鼻素中，F(100纤维摩尔)在同一组中产生的反应最为不同(图6B)。其中，A引起了比较小的效应，它与F所引起的效应显著不同(p＜0.01)。在两组受试对象中，活性犁鼻素所引起的受体反应之间有着很大的标准偏差(图6)。分析由A和F在男性与女性中所引起的效应的频率分布，我们发现了双峰分布。
犁鼻素E，即F的立体异构体，对女性的犁鼻器官不起刺激作用，而F则起作用(图6B)。这正说明犁鼻器官识别犁鼻素的专一性。而对此值得注意的是，虽然F是更好的犁鼻素，但E所引起的嗅觉效应则比F要强(图6B和图7)。
犁鼻素在EOG上所产生的效应20名受试对象的嗅上皮受体电压的集合被记录下来，其中10名为男性，10名为女性。与犁鼻器官对犁鼻素的敏感性相反，嗅上皮对这些物质的敏感性则弱的多。这一点在男性或女性中均一样(图7a)。受体电压的平均振幅在2.3mV至0.78mV之间。在此试验中，B是唯一对嗅上皮产生显著效应的犁鼻素(p＜0.02)。当给受试对象施以刺激物之后，立即询问这些对象的气味感应，16名对象回答说没有嗅觉感觉，三男一女说B是一种难闻的味道。这一点说明，依本试验中所用浓度的犁鼻素大多对嗅上皮受体无刺激，但均明显地对犁鼻受体有作用。
嗅素对EVG和EOG的效应与犁鼻素相反，嗅素1-香芹酮和桉树脑对犁鼻器官只产生微小的局部作用(图7b)。这一点对男、女均一样。正如所料，当对男、女受试对象的嗅上皮局部施用这些嗅素时，均产生较强的反应(图7a)(p＜0.01)。稀释物对嗅觉受体的去极化作用比桉树脑和1-香芹酮要小(p＜0.01)，并不产生嗅觉感觉。
犁鼻素的反射效应这一试验研究的是以犁鼻素刺激犁鼻器官所引起的中枢神经系统的反射效应。用犁鼻素所引起的局部反应的性别差异(图6A和6B)，被反映到男、女对象的自主性反应中。在男性中(图6C)，A和C降低了皮肤阻力[电皮肤敏感性(EDS)](p＜0.01，n＝30)。在女性中，F和B所引起的EDA降低比A和C的大(p＜0.01，n＝30)。
在30名男性中，犁鼻素A和C引起了皮肤温度(ST)的明显升高(图6G)(p＜0.01)，而D则使皮肤温度明显降低(p＜0.01)。在30名女性中，与A和C相比，B和F则使皮肤温度明显上升(图6H)(p＜0.01)。在女性中，犁鼻素对EDA和ST所产生的变化所具有的标准偏差均比在男性中的大。
分别给男性和女性受试对象的犁鼻器官施用含200纤微摩尔犁鼻素的气流脉冲，并在Cz位和Tz位记录皮质活动(图6G和6H)。对男性而言(图6E)，A、C和D均显著地提高了α-皮质活性，但有270～380毫秒的滞后。D和A的效果最强(p＜0.01)。当用活性物质进行一次脉冲刺激后，脑电图的同步化可延续1.5至2.7分钟。对女性而言(图6F)，用B或F的一次脉冲刺激犁鼻器官所引起的α皮质活性的增强是独立于嗅觉受体的反应。我们发现，人犁鼻器官及嗅上皮各自具有其反应的专一性，这一点说明它们是各自独立的功能系统，且各有其与中枢神经系统的联结[Brookover，C.(1914)。The nervus terminalis in adult man.J.Comp.Neurol.24131-135.]。已经有一些初步的证据说明EVG与三叉伤害感受器末稍并不相关，因为，在鼻腔内给嗅上皮以局部麻醉(2%利多卡因)并不能封闭或减弱EVG[Monti-Bloch，L.and Grosser，B.I.(1991)“Effect of putative pheromones on the electrical activity of the human vomeronasal organ and olfactory epithelium”，J. Steroid Biochem.Molec.Biol.39∶573-582.]，此外，用本方法刺激受试对象的结果是各位对象均没有痛觉。
犁鼻器受体对犁鼻素的敏感性明显大于其对其它供试验的嗅素的敏感性，反过来，在嗅觉受体也是如此。虽然嗅上皮也可能有对某些犁鼻素的感受位点，然而犁鼻器官的反应专一性则明显不同。
有两组犁鼻素，即A、C、D为一组，B和F为一组，它们的专一性和效应均有性别差异。这就提出了存在与受体相关的性别差异的假设。这一发现，也就提出了用犁鼻素刺激成年人的犁鼻器官从而起动植物神经系统某一部分的可能。
进而，以上结果提出了犁鼻素刺激犁鼻器官可以产生脑电图的同步作用(图6G和6H)。因此，这些证据就说明，犁鼻系统会对各种化学感受刺激物产生反应，其中某些刺激性可以诱导植物神经反射。
权利要求
1.一种适用于人的鼻内施用的药物组合物，该组合物包括雌甾烯类固醇，药用载体，所述的雌甾烯类固醇具有以下通式 其中R1基本上选自1或2个氢原子、甲基、亚甲基，1或2个卤原子；R2空缺或基本上选自氢和甲基；R3基本上选自氧、羟基、低级烷氧基、低级酰氧基、苯基，环戊丙基，葡糖苷酸和磺酰基；R4基本选自氢、羟基、低级烷氧基、低级酰氧基、氧和卤原子；R5空缺或基本选自氢、羟基、低级烷氧基和低级酰氧基；R6为氢或卤原子；a代表该类固醇A环上的可选的芳香不饱和化，且a、b、c和d各自均为可任选双键；e、f、g、h、i和j各自均为任选的双键。
2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述的a确实存在。
3.根据权利要求2所述的组合物，其中所述的类固醇选自以下的一组物质1，3，5(10)，16-雌四烯-3-醇、1，3，5(10)-雌三烯-3-醇、17-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3-醇、17-甲甾烷-1，3，5(10)，17(13)-四烯-3-醇、1，3，5(10)，16-雌四烯-6-酮-3-醇，1，3，5(10)-雌三烯-6-酮-3-醇、17-甲基-1，3，5(10)-雌三烯-6-酮-3-醇、17-甲甾烷-1，3，5(10)，17(13)-四烯-6-酮-3-醇、1，3，5，(10)，16-雌四烯-3，6α-二醇、1，3，5(10)-雌三烯-3，6α-二醇、17-亚甲基-雌-1，3，5(10)-三烯-3.6α-二醇、17-甲甾烷-1，3，5(10)，17(13)-四烯-3，6α-二醇。
4.根据权利要求2所述的组合物，其中g、h或i为可选的双键。
5.根据权利要求4所述的组合物，其中所述的类固醇选自以下的一组1，3，5(10)，6，16-雌五烯-3-醇、1，3，5(10)，16-雌四烯-3-醇、17-亚甲基-1，3，5(10)，6-雌四烯-3-醇、17-甲甾烷-1，3，5(10)，6，17(13)-五烯-3-醇、1，3，5(10)，7，16-雌五烯-3-醇、1，3，5(10)，7-雌四烯-3-醇、17-亚甲基-雌-1，3，5(10)，7-四烯-3-醇、17-甲基甾烷-1，3，5(10)，7，17(13)-五烯-3-醇，1，3，5(10)，6，8(9)，16-雌六烯-3-醇、1，3，5(10)，6，8，(9)-雌五烯-3-醇，17-亚甲基-雌-1，3，5(10)，6，8(9)-五烯-3-醇、17-甲基甾烷-1，3，5(10)，6，8(19)，17(13)-六烯-3-醇。
6.根据权利要求1所述的组合物，其中所述的b是双键。
7.根据权利要求4所述的组合物，其中所述的类固醇选自以下的一组4，16-雌二烯-3α-醇、雌-4-烯-3α-醇、17-亚甲基-雌-4-烯-3α-醇，17-甲基-甾烷-4，17(13)-二烯-3α-醇。
8.根据权利要求6所述的组合物，其中所述的R3是氧。
9.根据权利要求8所述的组合物，其中所述的类固醇选自以下的一组4，16-雌二烯-3-酮、雌-4-烯-3-酮、17-亚甲基-雌-4烯-3-酮、17-甲基-甾烷-4，17(13)-二烯-3-酮、雌-4，16-二烯-10α-醇-3-酮、雌-4-烯-10α-醇-3-酮、17-亚甲基-雌-4-烯-10α-醇-3-酮、17-甲基-甾烷-4，17(13)-二烯-10α-醇-3-酮。
10.根据权利要求6所述的组合物，其中所述的j是双键。
11.根据权利要求10所述的组合物，其中所述的类固醇选自以下的一组4，9(10)，16-雌三烯-3-酮、4，9(10)-雌二烯-3-酮、17-亚甲基-雌-4，9(10)-二烯-3-酮、17-甲基-甾烷-4，9(10)，17(13)-三烯-3-酮。
12.根据权利要求1所述的组合物，其中所述的C为双键。
13.根据权利要求12所述的组合物，其中所述的类固醇选自以下的一组5(10)，16-雌二烯-3α-醇、雌-5(10)-烯-3α-醇、17-亚甲基-雌-5(10)-烯-3α-醇、17-甲基-雌-5(10)，17(13)-二烯-3α-醇。
14.根据权利要求12所述的组合物，其中所述的d是另一个双键。
15.根据权利要求14所述的组合物，其中所述的类固醇选自以下的一组3-甲氧基-雌-2，5(10)，16-三烯、3-甲氧基-雌-2，5(10)-二烯、3-甲氧基-17-亚甲基-雌-2，5(10)-二烯、3-甲氧基-17-甲基-甾烷-2，5(10)，17(13)-三烯。
16.根据权利要求1所述的组合物，其中所述的R2是甲基。
17.根据权利要求16所述的组合物，其中所述的类固醇选自以下的一组雌-4-烯-3-酮、1，3，5(10)-雌三烯-3-醇、雌-4-烯-3α-醇、1，3，5(10)，6-雌四烯-3-醇、4，9(10)-雌二烯-3-酮、1，3，5(10)-雌三烯-3-醇-6-酮、雌-4-烯-10α-醇-3-酮、3-甲氧基-雌-2，5(10)-二烯、1，3，5(10)，7-雌四烯-3-醇、1，3，5(10)，6，8(9)-雌五烯-3-醇、雌-5(10)-烯-3α-醇、1，3，5(10)-雌三烯-3，6α-二醇。
18.根据权利要求16所述的组合物，其中所述的e是双键。
19.根据权利要求18所述的组合物，其中所述的类固醇选自以下的一组4，16-雌二烯-3-酮、1，3，5(10)，16-雌四烯-3-醇、4，6-雌二烯-3α-醇、1，3，5(10)，6，16-雌五烯-3-醇、4，9(10)，16-雌三烯-3-酮、1，3，5(10)，16-雌四烯-3-醇-6-酮、4，16-雌二烯-10α-醇-3-酮、3-甲氧基-雌-2，5(10)，16-三烯、1，3，5(10)，7，16-雌五烯-3-醇、1，3，5(10)，6，8(9)，16-雌六烯-3-醇、5(10)，16-雌二烯-3α-醇、1，3，5(10)，16-雌四烯-3，6α-二醇。
20.根据权利要求16所述的组合物，其中所述的R1为亚甲基。
21.根据权利要求20所述的组合物，其中所述的类固醇选自以下的一组17-亚甲基-雌-4-烯-3-酮、17-亚甲基-1，3，5(10)-雌三烯-3-醇、17-亚甲基-雌-4-烯-3α-醇、17-亚甲基-1，3，5(10)，6-雌四烯-3-醇、17-亚甲基-4，9(10)-雌二烯-3-酮、17-亚甲基-1，3，5(10)-雌三烯-3-醇-6-酮、17-亚甲基-雌-4-烯-10α-醇-3-酮、3-甲氧基-17-亚甲基-2，5(10)-雌二烯、17-亚甲基-1，3，5(10)，7-雌四烯-3-醇、17-亚甲基-1，3，5(10)，6，8(9)-雌五烯-3-醇、17-亚甲基-雌-5(10)-烯-3α-醇、17-亚甲基-1，3，5(10)-雌三烯-3，6α-二醇。
22.根据权利要求1所述的组合物，其中所述的f是双键，且所述的R1是甲基。
23.根据权利要求22所述的组合物，其中所述的类固醇选自以下的一组17-甲基-甾烷-4，17(13)-2烯-3-酮、17-甲基-1，3，5(10)、17(13)-甾四烯-3-醇、17-甲基-4，17(13)-甾二烯-3α-醇、17-甲基-1，3，5(10)，6，17(13)-甾烷五烯-3-醇、17-甲基-4，9(10)，17(13)-甾烷三烯-3-酮、17-甲基-1，3，5(10)，17(13)-甾烷四烯-3-醇-6-酮、17-甲基-4，17(13)-甾烷二烯-10α-醇-3-酮、3-甲氧基-17-甲基-2，5(10)，17(13)-甾三烯、17-甲基-1，3，5(10)，7，17(13)-甾烷五烯-3-醇、17-甲基-1，3，5(10)，6，8(9)，17(13)-甾烷六烯-3-醇、17-甲基-甾烷-5(10)，17(13)-二烯-3α-醇、17-甲基-1，3，5(10)，17(13)-甾烷四烯-3-6α-二醇。
24.根据权利要求1至23中任意一项所述的药用组合物，其中所述雌甾烯类固醇的至少一种被溶于所述的载体。
25.根据权利要求1至23中任意一项所述的药用组合物，其中所述的组合物为液体形式。
26.根据权利要求1至23中任意一项所述的药用组合物，其中所述的组合物进一步含有药用膏剂基底物。
27.根据权利要求1至23中任意一项所述的药用组合物，其中所含有的雌甾烯类固醇不超过一种。
28.根据权利要求1至23中任意一项所述的药用组合物，其中含有一种以上的雌甾烯类固醇。
29.根据权利要求1至23中任意一项所述的药用组合物，还进一步含有16-雌甾烯类固醇。
30.一种改变个体下丘脑功能的方法，所述方法包括给所述个体的鼻神经上皮细胞表面的化学感受体提供配体，其中所述的细胞是组织的一部份而不是嗅上皮细胞;并且在所述个体鼻道内施以配体并使所述配体与所述受体专一结合从而改变所述个体的下丘脑功能的施用方法。
31.一种改变个体植物神经功能的方法，所述方法包括给所述个体的鼻神经上皮细胞表面的化学感受体提供配体，其中所述的细胞是组织的一部分而不是嗅上皮细胞;并且在所述个体鼻道内施以配体并使所述配体与所述受体专一结合从而改变所述个体的下丘脑功能的施用方法。
32.根据权利要求31所述的方法，其中所述的神经上皮细胞位于所述个体的犁鼻器官上。
33.根据权利要求32所述的方法，其中所述的配体是雌甾烯类固醇。
34.根据权利要求33所述的方法，其中所述的配体是具以下通式的雌甾烯类固醇; 其中R1基本上选自1或2个氢原子、甲基、亚甲基，1或2个卤原子;R2空缺或基本选自氢和甲基;R3基本上选自氧、羟基、低级烷氧基、低级酰氧基、苯基、环戊丙基、葡糖苷酸和磺酰基;R4基本选自氢、羟基、低级烷氧基、低级酰氧基和卤原子;R5空缺或基本选自氢、羟基、低级烷氧基和低级酰氧基;R6是氢或卤原子;a代表该类固醇A环上的可选性芳香不饱和化，且a、b、c和d各自均是任选双键;e、f、g、h、i和j各自均为任选双键。
35.根据权利要求34所述的方法，其中a确实存在，并且g、h或i是可选性双键。
36.根据权利要求35所述的方法，其中h和i同为双键。
37.根据权利要求34所述的方法，其中所述的b是双键。
38.根据权利要求34所述的方法，其中所述的j是双键。
39.根据权利要求34所述的方法，其中所述的c为双键。
40.根据权利要求34所述的方法，其中所述的c和d同为双键。
41.根据权利要求34所述的方法，其中所述的R2是甲基且e是双键。
42.根据权利要求34所述的方法，其中所述的类固醇选自以下的一组雌甾-4，6-二烯-3-酮、雌甾-1，3，5(10)，16-四烯-3-醇、雌甾-4，16-二烯-3-α-醇、雌甾-4，9(10)，16-三烯-3-酮、雌甾-1，3，5(10)，16-四烯-3-醇-6-酮、3-甲氧基-雌甾-2，5(10)，16-三烯、雌甾-5(10)，16-二烯-3α-醇和雌甾-1，3，5(10)，16-雌四烯-3，6α-二醇。
43.根据权利要求34所述的方法，其中所述的R2是甲基。
44.根据权利要求43所述的方法，其中所述的类固醇选自以下的一组雌甾-1，3，5(10)-三烯-3-醇、雌甾-1，3，5(10)，6-四烯-3-醇和雌甾-1，3，5(10)，7-四烯-3-醇。
45.根据权利要求34所述的方法，其中所述的R1是亚甲基。
46.根据权利要求45所述的方法，其中所述的类固醇是17-亚甲基-雌甾-1，3，5(10)，6，8(9)已烯-3-醇。
47.根据权利要求34所述的方法，其中所述的R1是亚甲基或一个氢，R2是甲基。
48.根据权利要求34所述的方法，其中f是双键，R2是甲基。
49.根据权利要求48所述的方法，其中至少一种雌甾类固醇选自以下的一组1，3，5(10)，16-雌四烯-3-醇、1，3，5(10)，16-雌四烯-3-醇-甲基醚、1，3，5(10)，16-雌四烯-3-乙酸酯和1，3，5(10)，16-雌四烯-3-丙酸酯。
50.根据权利要求49所述的方法，其中所述的雌甾烯类固醇是1，3，5(10)，16-雌四烯-3-醇。
51.根据权利要求34至50中任意一项所述的方法，其中所述配体的用量为至少100微微克。
52.根据权利要求34至50中任意一项所述的方法，其中所述配体的用量为至少1毫微克，但不多于10微克。
53.根据权利要求34至50中任意一项所述的方法，其中所述配体的用量为至少10毫微克，但不多于1微克。
54.根据权利要求34至50中任意一项所述的方法，进一步包括将所述配体溶于药用载体而制成药用组合物的方法。
55.根据权利要求34至50中任意一项所述的方法，其中所述的药用组合物是软膏。
56.根据权利要求34至50中任意一项所述的方法，其中所述的药用组合物为液体。
57.根据权利要求34至50中任意一项所述的方法，其中所述的施用是气雾剂形式。
58.根据权利要求34至50中任意一项所述的方法，其中施用一种以上的雌甾烯类固醇。
59.根据权利要求34至50中任意一项所述的方法，进一步包括给所述鼻腔内同时施用一种16-雄甾类固醇。
60.根据权利要求34至50中任意一项所述的方法，其中所述的个体为男性。
61.根据权利要求34所述的方法，其中所述的功能是缓和神经官能症、压抑和焦虑的症状。
全文摘要
雌甾烯类固醇作为改变人下丘脑功能的神经化学启动物以及相关的药用组合物和方法。本发明涉及改变人体下丘脑功能的方法。这一方法包括在鼻内施用人的化学信息素，例如，雌甾烯类固醇或其药用组合物，从而使该配体与专一的神经上皮受体发生化学信息性的结合。施用的优选方式为含有一种或一种以上药用载体的药用组合物。本发明的其它实施方案包括含有类固醇的各种药用组合物。
文档编号C07J1/00GK1101648SQ94106649
公开日1995年4月19日 申请日期1994年6月15日 优先权日1993年6月15日
发明者戴维·L·伯林纳, 内森·W·亚当斯, 克莱夫·L·詹宁斯·怀特 申请人:弗林公司