专利名称：用于治疗骨质疏松的吲哚衍生物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一些新化合物，这些化合物的制备方法，含有这些化合物的药物组合物和这些化合物及组合物在医学中的应用。
申请号为PCT/EP 96/00157，公布号为WO 96/21644的共同待审的国际专利申请公开了一些式(A)的吲哚衍生物或其盐或溶剂化物
其中(i)Ra′代表基团R5′，该基团是氢、烷基或任选取代的芳基，Rb′代表一个式(a′)基团
其中X′代表羟基或烷氧基，其中烷基可以是取代的或未取代的，或者X′代表基团NRs′Rt′，其中Rs′和Rt′各自独立地代表氢、烷基、取代的烷基、任选取代的链烯基、任选取代的芳基、任选取代的芳烷基、任选取代的杂环基或任选取代的杂环基烷基，或者Rs′和Rt′与它们所连接的氮原子一起形成一个杂环基；R1′代表烷基或者取代或未取代的芳基；R2′、R3′和R4′各自独立地代表氢、烷基、芳基或取代的芳基；或者(ii)Ra′代表上面定义的式(a)基团，Rb′代表上面定义的R5′；R6′和R7′各自独立地代表氢、羟基、氨基、烷氧基、任选取代的芳氧基、任选取代的苄氧基、烷氨基、二烷基氨基、卤素、三氟甲基、三氟甲氧基、硝基、烷基、羧基、烷氧羰基、氨基甲酰基、烷基氨基甲酰基，或者R6′和R7′一起代表亚甲二氧基、羰基二氧基或羰基二氨基；R8′代表氢、羟基、烷酰基、烷基、氨基烷基、羟烷基、羧基烷基、烷氧羰基烷基、氨基甲酰基或氨基磺酰基；该化合物表明能通过抑制破骨细胞H+-腺苷三磷酸酶(ATPase)而减小骨吸收作用。
与骨质损失有关的疾病已知是由于破骨细胞活性过强而引起的。还已知，某些通常与bafilomycin有关的化合物可用于治疗这类疾病，例如国际专利申请WO 91/06296公开了用于治疗影向骨的疾病的一些bafilomycin大环内酯。
然而，bafilomycin衍生物对于人类的破骨细胞没有选择性。因此这些化合物的使用由于普遍抑制其它必需的v-腺苷三磷酸酶而产生不可接受的毒性。确实，至今还没有对人类破骨细胞是选择性的治疗方法。
寻找和人类骨质损失有关的疾病的有效治疗方法的复杂性在于，选择性抑制破骨细胞这一治疗目标的本质是有争议的。例如，Baron等(国际专利申请WO 93/01280)指出，一种特异的泡状腺苷三磷酸酶(V-ATPase)已被确定为破骨细胞内的潜在的治疗目标。但是，Baron的工作是用鸡进行的，而Hall等(骨骼与矿物质(Bone andMineral)27，1994，159-166)在关于哺乳动物的研究中断定，与家禽破骨细胞V-ATPase不同，哺乳动物破骨细胞V-ATPase在药理上与其它细胞的v-ATPase相似，因此它不大可能是好的治疗目标。
我们现已发现，在WO 96/21644范围内的一组新的化合物对于哺乳动物破骨细胞，尤其是人类破骨细胞，具有特异选择性，选择性地抑制了它们的骨吸收活性。这些化合物因此被认为特别适用于治疗和/或预防与骨质损失有关的疾病，例如骨质疏松和有关的骨质减少疾病、佩吉特病、甲状旁腺机能亢进及有关疾病。这些化合物还被认为具有抗肿瘤活性、抗病毒活性(例如抗塞姆利基森林病毒、水泡性口炎病毒、新城疫病毒、流感A和B型病毒、人免疫缺损病毒)、抗溃疡活性(例如这些化合物可用于治疗由幽门螺旋杆菌诱发的慢性胃炎和消化性溃疡)、免疫抑制剂活性、抗脂血症活性、抗动脉粥样硬化活性，并可用于治疗艾滋病和早老性痴呆症。另一方面，这些化合物还被认为可用于抑制血管生成，即，在各类病理条件下，例如类风湿性关节炎、糖尿病性视网膜炎、牛皮癣和固体肿瘤，观察到的新血管的形成(血管生成病)。
因此，在最广泛的含义上本发明提供了一种人类破骨细胞生物活性选择性抑制剂，特别是与骨质反常损失有关的人类破骨细胞骨吸收活性的抑制剂，条件是这种抑制剂不包括WO 96/21644中公开的任何具体的实施例。再一方面，本发明提供了人类破骨细胞的生物活性选择性抑制剂、特别是与骨质反常损失有关的人类破骨细胞骨吸收活性的选择性抑制剂，条件是这种抑制剂不包括此前定义的式(A)化合物。一种人破骨细胞特异性抑制剂是位于人破骨细胞皱状边界处的泡状H+-腺苷三磷酸酶的选择性抑制剂。
一个具体的情况是，这种选择性抑制剂特异地与位于人破骨细胞皱状边界处的泡状H+-腺苷三磷酸酶的16kDa亚基相互作用，该亚基的功能和结构与其它已知的16kDa亚基相似，例如见P.C.Jones等在膜动力学与传输(Membrane Dynamics and Transport)22.805-809(1994)中所报道的。
另一个具体情况是，这种选择性抑制剂特异地与位于人破骨细胞皱状边界处的泡状H+-腺苷三磷酸酶的116kDa亚基相互作用(例如Y.P.Li等在生物化学与生物物理研究通讯(Biochem.Biophys.Res.Commun)218，813-821(1996)中报道的蛋白质)。
具体地说，本发明提供了式(I)化合物或其盐或溶剂化物
其中，Ra代表基团R5，它是氢、烷基或任选取代的芳基，Rb代表一个式(a)基团
其中X代表羟基或烷氧基，其中的烷基可以是取代的或未取代的，或者X代表基团NRsRt，其中Rs和Rt各自独立地代表氢、烷基、取代的烷基、任选取代的链烯基、任选取代的芳基、任选取代的芳烷基、任选取代的杂环基或任选取代的杂环基烷基基团，或者Rs和Rt与它们连接的氮一起形成一个杂环基；R1代表烷基或者取代或未取代的芳基；R2、R3和R4各自独立地代表氢、烷基、芳基或取代的芳基；R6和R7各自独立地代表氢、羟基、氨基、烷氧基、任选取代的芳氧基、任选取代的苄氧基、烷氨基、二烷基氨基、卤素、三氟甲基、三氟甲氧基、硝基、烷基、羧基、烷氧羰基、氨基甲酰基、烷基氨基甲酰基，或者R6和R7一起代表亚甲二氧基、羰基二氧基或羰基二氨基；以及R8代表氢、羟基、烷酰基、烷基、氨基烷基、羟烷基、羧基烷基、烷氧羰基烷基、氨基甲酰基或氨基磺酰基。
一方面，R1代表烷基或者取代的或未取代的苯基。
R1以代表烷基为宜。
R1优选代表C1-4烷基，例如甲基或乙基。
最好是R1代表甲基。
一方面，R2、R3和R4各自独立地代表氢、烷基或苯基。
R2的实例包括氢和甲基。
R2以代表氢为宜。
R3的实例包括氢和甲基或乙基。
R3以代表氢为宜。
R4的实例包括氢、丙基和苯基，尤其是氢和苯基。
R4以代表氢为宜。
一方面，R5是氢、烷基或取代的苯基，或者适当时为未取代的苯基。
R5的实例包括氢、乙基和4-甲氧基苯基，尤其是氢和乙基。
R5以代表氢为宜。
一方面，R6和R7各自独立地代表氢、羟基、氨基、烷氧基、任选取代的苯氧基、任选取代的苄氧基、烷氨基、二烷基氨基、卤素、三氟甲基、硝基、烷基、羧基、烷氧羰基、氨基甲酰基、烷基氨甲酰基，或者R6和R7一起代表亚甲二氧基、羰基二氧基或羰基二氨基。
R6和R7均以独立地代表烷氧基、卤素、三氟甲基、硝基和烷基为宜。
当R6或R7代表烷氧基时，该烷氧基以C1-6烷氧基为宜，例如甲氧基。
当R6或R7代表卤素时，该卤素基以氟、氯或溴基为宜，尤其是氯或溴基。
当R6或R7代表烷基时，该烷基以C1-6烷基为宜，例如丁基。
R6或R7的合适的取代位置是4、5、6或7位，优选5或6位。
当R6或R7都不代表氢时，则双取代的优选位置是5和6位。
R6和R7优选是氢、卤素、三氟甲基和烷氧基。
一方面，R6是氢，以及R6或R7代表氢、烷氧基、卤素、硝基、三氟甲基和烷基。
另一方面，R6和R7各选自氢、卤素和烷氧基，其实例包括R6是卤素和R7是卤素；R6是卤素和R7是烷基；R6是烷氧基和R7是烷氧基。
在优选的情况下，R6是卤素，尤其是5-卤素，且R7是卤素，尤其是6-卤素。
最优选的是R6为氯，尤其是5-氯，且R7为氯，尤其是6-氯。
R8的实例包括氢、甲基和叔丁氧羰基甲基。
R8的另一实例是羧甲基。
R8以代表氢为宜。
当X代表烷氧基时，其中的烷基优选是未取代的烷基。
X代表以上定义的基团NRsRt为宜。
一方面，Rs和Rt各自独立地代表氢、烷基、取代的烷基、任选取代的链烯基、任选取代的芳基、任选取代的芳烷基、任选取代的杂环基或任选取代的杂环基烷基。
Rs和Rt也可以各自独立地代表环烷基或取代的环烷基。
另一方面，Rs和Rt一起代表杂环基。
当Rs或Rt代表烷基或取代的烷基时，合适的烷基是C1-6烷基，例如C1、C2、C3、C4和C5烷基，优选乙基、丙基或丁基当Rs或Rt代表取代的烷基时，优选的基团是2-(二烷基氨基)乙基或3-(二烷基氨基)丙基或4-(二烷基氨基)丁基，或者是杂环基甲基或杂环基乙基或杂环基丙基。
进一步优选的Rs或Rt基团是杂环基烷基，尤其是杂环基C1-C6烷基，特别是杂环基-(CH2)2-或杂环基-(CH2)3-。
烷基的一种优选的杂环基取代基，例如杂环基甲基、杂环基乙基或杂环基丙基包括哌嗪基。
进一步优选的烷基的杂环基取代基，例如杂环基甲基、杂环基乙基或杂环基丙基包括高哌嗪基。
当Rs或Rt代表环烷基或取代的环烷基时，合适的环烷基是C5-9环烷基，例如环戊基或环己基。当Rs或Rt代表链烯基或取代的链烯基时，合适的链烯基是C2-6链烯基，例如C5链烯基。
当Rs或Rt代表芳基或取代的芳基时，合适的芳基是苯基。
在一种优选的情形，Rt是氢。
合适的杂环基包括单环饱和杂环基、单环不饱和杂环基、稠环杂环基。
稠环杂环基包括螺杂环基。
合适的单环不饱和杂环基包括5-、6-或7-元环。
合适的5-元单环不饱和杂环基是呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、三唑基、四唑基、噁唑基、异噁唑基、呋咱基、噻唑基、和异噻唑基；或它们的部分饱和的衍生物，例如4，5-二氢-1，3-噻唑-2-基、1H-咪唑啉基、吡咯啉基、吡唑啉基、噁唑啉基、异噁唑啉基、噻唑啉基。
合适的6元单环不饱和杂环基有比啶基、嘧啶基、哒嗪基、吡嗪基、三嗪基、四嗪基、1，2-或1，3-或1，4-噁嗪基、1，2-或1，3-或1，4-噻嗪基和吡喃基，或是它们的部分饱和的衍生物，例如1，2-或1，3-或1，4-二氢噁嗪基、1，4-二氢吡啶基、二氢哒嗪基、二氢吡嗪基或二氢嘧啶基。
其它合适的6元单环不饱和杂环基是吡啶-2-酮-5-基。
合适的7元单环不饱和杂环基是氮杂_基、氧杂_基、二氮杂_基、硫氮杂_基、氧氮杂_基或它们的部分饱和的衍生物。
合适的单环饱和杂环基含5-、6-或7-元环。
合适的5元单环饱和杂环基是吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、噁唑烷基、异噁唑烷基和四氢呋喃基。
合适的6元单环饱和杂环基是哌啶基、哌嗪基、四氢吡喃基、1，3-二氧杂环己基、四氢-1，4-噻嗪基、吗啉基和吗啉代基团。
合适的哌嗪基是1-哌嗪基，尤其是在第4位上用酰基(优选苯基羰基)、杂环基(如嘧啶基)或任选取代的苯基(如带有选自烷氧基和卤素的1、2或3个取代基的苯基)取代的1-哌嗪基。
合适的7元单环饱和杂环基是六亚甲基亚氨基、氧杂环庚基和硫杂环庚基。
合适的稠环杂环基包括稠合的饱和环、稠和的不饱和环和与不饱和环稠合的饱和环。
优选的稠合环杂环基包括含两个或三个环的基团，其中每个环含4-8个环原子，其中包括1、2或3个，尤其是1或2个杂原子。
合适的杂原子是氮原子。
有稠合的饱和环的合适基团是多环基团，其中各环共用一个原子，一个或一个以上的键，例如2或3个键。具有稠合饱和环的合适基团是奎宁环基、8-氮杂双环〔3.2.1〕辛基、9-氮杂双环〔3.3.1〕壬基、1-氮杂双环〔3.3.3〕十一烷基、1，9-二氮杂双环〔3.3.1〕和1，5-二氮杂双环〔3.3.1〕壬基。
具有稠合的饱和环的其它的合适基团是十氢吡咯并〔2.1.5-cd〕吲嗪基、八氢吲嗪基、八氢-2H-喹嗪基和三环〔3.3.1.13.7〕癸基。
含有稠合饱和环的另外的合适基团是一种壬基1-氮杂双环〔3.3.1〕壬基、3，7-二氮杂双环〔3.3.1〕壬基。
具有稠合不饱和环的合适基团是吡唑并〔3.4-d〕嘧啶基、1，2，5-噻二唑并〔3.4-b〕吡啶基、异噁唑并〔4.5-b〕吡啶基、噻唑并〔4.5-b〕吡啶基、噁唑并〔4.5-d〕嘧啶基、7H-嘌呤-2-基、喹啉基、异喹啉基、苯并〔b〕噻吩基、苯并呋喃基、异苯并呋喃基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、引嗪基、吲哚基、异吲哚基、吲唑基、2，3-二氮杂萘基、1，5-二氮杂萘基、喹喔啉基、喹唑啉基、噌啉基、喋啶基和β-咔啉基。
具有与不饱和环稠合的饱和环的合适基团包括与苯环稠合的基团，例如四氢喹啉基、4H-喹嗪基、四氢异喹啉基、二氢苯并呋喃基、苯并吡喃基、苯并二氢吡喃基、异苯并二氢吡喃基、二氢吲哚基和异二氢吲哚基。
合适的螺杂环基包括氧杂螺〔4.5〕癸基、氮杂螺〔4.5〕癸基、1，2，4-三氮杂螺〔5.5〕十一烷基、1，4-二氧杂-9-氮杂螺〔4.7〕十二烷基和1-氮杂螺〔5.5〕十一烷基。
Rs的合适代表包括氢、C1-5烷基、一、二和三羟基烷基、烷氧基烷基、羧基烷基、烷氧羰基烷基、双膦基烷基、(取代的)氨基羧基烷基、双乙氧羰基羟基链烯基、二烷基氨基烷基吡啶基、一、二和三烷氧基吡啶基、二烷基氨基烷氧基吡啶基、芳氧基吡啶基、氨基吡啶基、取代的哌嗪基、奎宁环基、饱和杂环基烷基、取代的哌啶基、(二)氮杂双环烷基、取代的苯基、取代的苄基、取代的苯基乙基、1-咪唑基烷基、噻唑啉基、(2-四氢异喹啉基)烷基、1H-吡唑并〔3.4-d〕嘧啶-4-基、7H-嘌呤-2-基、吡啶基烷基、(2-嘧啶基)哌嗪-1-基烷基、取代的哒嗪基、取代的吡嗪基、取代的嘧啶基、喹啉基、异喹啉基、四氢异喹啉基、四氢喹啉基。
Rs的其它合适实例包括(4-取代的)哌嗪烷基和氨基嘧啶基。
优选的Rs包括二乙基氨基丙基、3-氨基-3-羧丙基、4-氨基-4-羧丁基、3-吡啶基、二乙基氨基乙基、3-奎宁环基(或1-氮杂双环〔2.2.2〕辛-3-基)、吗啉代丙基、哌啶子基丙基、1-甲基-2-吡咯烷基乙基、2，2，6，6-四甲基-4-哌啶基、2-甲氧基-5-吡啶基、2-甲基哌啶子基丙基、8-甲基-8-氮杂双环〔3.2.1〕辛-3β-基、-1-甲基-4-哌啶基、1H-吡咯并〔3.4-d〕嘧啶-4-基、2，2，5，5-四甲基-3-吡咯烷基甲基、2-甲氧基-4-吡啶基、-1-乙基-3-哌啶基、3-〔4-(2-嘧啶基)哌嗪-1-基〕丙基。
其它优选的Rs实例包括二甲基氨基丙基、二丁基氨基丙基、2-甲氧基嘧啶-5-基、3-〔4-(3-氯苯基)哌嗪-1-基〕丙基、3-〔4-(2-苯基)哌嗪-1-基〕丙基、3-〔2，6-二甲基-4-(2-嘧啶基)哌嗪-1-基〕丙基、3-二甲基氨基环己基、1-(2-羟乙基)-2，6-二甲基哌啶-4-基、8a βH-5α-甲基八氢吲嗪-7α-基、3-〔4-(2-吡啶基)哌嗪-1-基〕丙基、3-〔4-(2-甲氧基苯基)哌嗪-1-基〕丙基和3-〔4-(2-嘧啶基)高哌嗪-1-基〕丙基。
其它优选的Rs的实例包括1，2，2，6，6-五甲基-4-哌啶基、1，2，6-三甲基-4-哌啶基和1，2，2，6-四甲基-4-哌啶基。
合适的Rt基团包括氢、甲基、C2-5烷基、2-羟基乙基、2-甲氧基乙基、羧甲基、甲氧羰基甲基、4-羟基丁基和2，3-羟丙基，尤其是氢。
在一种优选的情况，Rt代表氢。
一种特殊的6元单环不饱和杂环基是式(H1)基团
其中Z1是N或CX5，其中X5选自氢、烷基、烷氧基、烷基羰基、芳基、芳氧基或芳基羰基，Z2、X3和X4各自独立地选自氢、烷基、芳基、氰基、氨基、杂环基氧基、烷氧基羰基烷氧基、羧基烷氧基、氨基烷氧基、氨基烷氨基、氨基链烯基氨基(尤其是氨基亚甲基氨基)和烷酰氨基。一种特别优选的本发明化合物是式(I)化合物，其中Ra是基团R5，其中R5如同式(I)中的定义；Rb是式(a)基团，其中R1、R2、R3和R4的定义与式(I)中相同，X是基团NRsRt，其中Rs是以上定义的基团(H1)，Rt是氢。
一种优选的NRsRt基团是任选取代的哌啶基，尤其是其中的一个取代基是N-烷基基团。
哌啶基的具体取代基是烷基，尤其是与环氮原子α位上的一个或者最好是两个碳原子连接的烷基。
特别有意义的哌啶基是其中在环氮原子α位上的一个或者最好是两个碳原子被一个或者最好是两个烷基取代的哌啶基。
哌啶基的其它具体的取代基是亚烷基，尤其是与环氮原子α位上的一个或者最好是两个碳原子连接的亚烷基。
一种具体的6元饱和杂环基是式(H2)基团
其中X6、X7、X8、X9、X10、X11、X12和X13各自独立地选自氢、羟基、烷基(优选C1-C6烷基)、环烷基(包括螺接的)、一或多羟基烷基、烷氧基烷基、羟基烷氧基烷基、烷酰基、烷氧羰基、氨基烷基(任选地在氮上烷基化或酰化)；或者X6与X12和X8与X10中的一个代表一个C2-4亚烷基链，而其余的可变基团X7、X13、X9和X11各自独立地代表氢、羟基、烷基(优选的C1-6烷基)、环烷基(包括螺接的)、一或多羟基烷基、烷氧基烷基、羟基烷氧基烷基、烷酰基、烷氧羰基、氨基烷基(任选地在氮上烷基化或酰化)；X14代表氢或烷基，尤其是C1-6烷基，一或多羟基烷基，一或二氨基烷基，氨基羰基，烷基羧基烷基，烷氧羰基烷基、芳基、杂环基、酰基、氨基甲酰基、烷基氨基(氰基亚胺酰基)、氨基烷酰基、羟基烷酰基。
X6、X7、X12和X13适宜各自代表氢。
X8和X9适宜各自独立地代表氢或烷基，尤其是烷基，例如甲基。
X10和X11适宜各自独立地代表氢或烷基，尤其是烷基，例如甲基。
X14适宜代表烷基，例如甲基。
在一种优选的情形，X8、X9、X10和X11各自独立地代表烷基，尤其是甲基，X6、X7、X12和X13各自代表氢。
在最优选的情形，X8、X9、X10和X11各自独立地代表烷基，尤其是甲基，X6、X7、X12和X13各代表氢，X14代表烷基，尤其是甲基。
本发明优选的化合物是式(I)化合物，其中Ra是基团R5，该R5的定义与式(I)中相同；Rb是一个式(a)基团，其中R1、R2、R3和R4同式(I)中的定义，X是基团NRsRt，其中Rs是下面定义的式(f)基团，尤其是其中的k是零且Ho是下面定义的(a)基团的式(f)基团，或是如上定义的基团(H1)或(H2)，且Rt为氢，最好是其中的Rs是式(H1)或(H2)基团，R6、R7和R8如式(I)中的定义。
特别优选的本发明化合物是式(I)化合物，其中Ra是基团R5，该R5与对式(I)的定义相同；Rb是式(a)基团，其中R1、R2、R3和R4与式(I)的定义相同，X是基团NRsRt，其中Rs是如上定义的基团(H2)，Rt是氢，R6、R7和R8同式(I)中的定义。
特别值得提出的是这样的化合物，其中R1是C1-6烷基，尤其是甲基；R2、R3、R4和R8是氢；R6是5-卤素，尤其是5-氯；R7是6-卤素，尤其是6-氯；X是基团NRsRt，其中Rt是氢，Rs是下面定义的式(f)基团或上面定义的(H1)或(H2)基团，最好是其中的Rs是式(H1)或(H2)基团。
值得特别提出的是这样的化合物，其中R1是C1-6烷基，尤其是甲基，R2、R3、R4和R8是氢；R6是5-卤素，尤其是5-氯；R7是6-卤素，尤其是6-氯；X是基团NRsRt，其中Rt是氢，Rs是基团(f)，尤其是其中的k是零且H0是基团(a)的基团(f)。
特别值得提出的是这样的化合物，其中R1是C1-6烷基，尤其是甲基，R2、R3、R4和R8是氢；R6是5-卤素，尤其是5-氯；R7是6-卤素，尤其是6-氯；X是NRsRt，其中Rt是氢，Rs是基团(H1)。
特别值得提出的是这样的化合物，其中R1是C1-6烷基，尤其是甲基，R2、R3、R4和R8是氢；R6是5-卤素，尤其是5-氯；R7是6-卤素，尤其是6-氯；X是NRsRt，其中Rt是氢，Rs是基团(H2)。
本发明的具体实例是实施例1、31、32、34、35、47、48、51、55、56、59、61、62、63、68、74和75的化合物。
最值得提出的是实施例1、55、62、68、74和75的化合物。
本发明不包括上述共同待审的国际专利申请(申请号PCT/EP96/0015，公布号WO 96/21644 )中的实施例本身。因此，WO 96/21644的实施例1至104和在第50页中公开的实施例均不包括在本发明之内。本发明不包括WO 96/21644的实施例49、51、53、59、67、69、83、84、97和100。本发明也不包括WO 96/21644中的实施例33、44、48、57、65、73、91、95、98、99、101和10。此外，本发明不包括WO 96/21644中的实施例47、56、66和70。
这里使用的术语“烷基”包括直链或支链的有1-12、优选1-6、最好是1-4个碳原子的烷基，例如甲基、乙基、正和异丙基、正、异、叔丁基以及戊基，也包括构成其它基团如烷氧基或烷酰基的一部分的烷基。
对于任何烷基，合适的任选取代基包括羟基；烷氧基；式NRuRv基团，其中Ru和Rv各自独立地代表氢、任选取代的烷基、任选取代的环烷基、任选取代的芳基、任选取代的芳烷基、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基烷基、羧基、羧基烷基或烷氧羰基、硝基，或者Ru和Rv与它们连接的氮一起形成一个任选取代的杂环；羧基；烷氧羰基；烷氧羰基烷基；烷基羰氧基；烷基羰基；一和二烷基膦酸基；任选取代的芳基；和任选取代的杂环基。
优选的烷基取代基是NRuRv，其中Ru和Rv各自独立地代表氢、任选取代的芳基、任选取代的芳基烷基、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基烷基，或者Ru和Rv与它们所连接的氮原子一起形成一个任选取代的杂环。
当Rs或Rt代表取代的烷基、尤其是C1-4烷基时，具体的取代基实例是以下的式(a)、(b)、(c)、(d)和(e)基团
其中A代表一个键或亚烷基，优选C1-3亚烷基；A1是亚烷基，优选C1-4亚烷基；Ra、Rb、Rc、Rd、Re、Rf和Rg各自独立地代表氢、烷基、任选取代的芳基或任选取代的杂环基；Ru和Rv的定义同上。
一种合适的烷基取代基是基团(a)。
一种合适的烷基取代基是基团(b)。
一种合适的烷基取代基是基团(c)。
一种合适的烷基取代基是基团(d)。
一种合适的烷基取代基是基团(e)。
在基团(a)中，NRuRv的优选实例是1-哌嗪基，优选在第4位上被以下基团取代酰基，优选苯基羰基，或杂环基，例如嘧啶基，或任选取代的苯基，例如有1、2或3个选自烷氧基、烷基、三氟甲基、卤素(如氯)和甲氧基的取代基的苯基。
Rs或Rf的一个优选的实例是式(f)基团-(CH2)k-(H0) (f)其中k是零、H0是基团(a)，或者k是整数2或3，H0是基团(b)、(c)、(d)和(e)。
优选基团(f)中的k是零，H0是基团(a)。
本文使用的术语“链烯基”包括有2-12个、优选2-6个碳原子的直链或支链烯基，还包括构成其它基团一部分的这类基团，一个实例是丁烯基，例如2-丁烯基。
对于任何链烯基，合适的任选取代基包括上述的烷基取代基。
本文使用的术语“芳基”包括苯基和萘基，尤其是苯基。
对于任何芳基，合适的任选取代基包括选自以下基团的最多5个、优选最多3个取代基烷基，取代的烷基、烷氧基、羟基、卤素、三氟甲基、乙酰基、氰基、硝基、氨基、一和二烷基氨基和烷基羰基氨基。
对于任何芳基，优选的任选取代基选自异丁基、羟基、甲氧基、苯氧基、二乙基氨基乙氧基、吡咯烷基乙氧基、羧基甲氧基、吡啶氧基、氟、氯、氨基、二甲基氨基、氨甲基、吗啉代、二(乙氧羰基)羟甲基。
合适的芳烷基包括芳基-C1-3烷基，例如苯乙基和苄基，尤其是苄基。
取代的芳烷基优选在芳基部分取代。
本文中使用的术语“杂环基”或“杂环的”包括饱和或不饱和的单环或稠合环杂环基，各环有4-11个环原子，尤其是5-8个、优选5、6或7个环原子，该环原子中包括选自O、S或N的1、2或3个杂原子。
本文中使用的“稠环杂环基”包括共有一个原子(如螺环体系)、一个键(如在八氢吲嗪基中)或一个以上键(如在氮杂双环〔3.2.1〕辛-3-α-基中)的多环杂环基。
对于任何杂环基或杂环的基团，合适的任选取代基包括最多5个、优选最多3个选自以下基团的取代基烷基、取代的烷基、烷氧基、羟基、卤素、氨基、一或二烷基氨基、烷氧羰基、羟烷基、烷氧基烷基、羟基烷氧基烷基、烷氧基烷氧烷基、芳基、芳氧基和杂环基。
对于任何杂环基或杂环的基团，优选的任选取代基是选自异丁基、羟基、甲氧基、苯氧基、二乙基氨基乙氧基、吡咯烷基乙氧基、羧基甲氧基、吡啶氧基、氟、氯、氨基、二甲基氨基、氨甲基、吗啉代、二(乙氧羰基)羟甲基。
对于任何杂环基或杂环的基团其它任选的取代基包括选自以下基团的最多5个、优选最多3个取代基异丙基、氰基、氧基、芳基羰基、杂环基氧基、烷氧烷氧基、烷氧羰基烷氧基、羧基烷氧基、氨基烷氧基、氨基烷氨基、氨基烯氨基(尤其是氨基亚甲基氨基)、烷酰氨基、烷氧基氨基、芳基、乙酰氨基、2-(二甲基氨基)乙氨基、2-甲氧基乙氧基、3-羧基丙-2-氧基和2-吡嗪基。
对于任何杂环基或杂环的基团其它任选的取代基包括选自以下基团的最多5个、优选最多3个取代基羰基氨基烷基、氨基羰基烷基和烷基羰基氨基烷基。
为更加明确，本文中提到的“杂环的”包括“杂环基”。
本文中使用的术语“卤素”包括氟、氯、溴和碘，优选氟和氯，最好是氯。
式(I)化合物，例如其中的R1-R8含手性烷基链的式(I)化合物，其中的一些碳原子是手性碳原子，因此可形成式(I)化合物的立体异构体。本发明扩展到式(I)化合物的所有立体异构形式，包括对映体及其混合物，包括外消旋物。不同的立体异构形式可以用常规方法彼此分离或拆分，或者可以用常规的立体特异性合成或不对称合成法得到任何给定的异构体。
式(I)化合物还具有两个双键，因此可以一种或多种几何异构体形式存在。本发明扩展到式(I)化合物的所有这些异构体形式，包括它们的混合物。不同的异构体形式可以用常规方法彼此分离，或者可以用常规的合成方法得到任何给定的异构体。式(I)化合物的合适的盐是可药用的盐。一种优选的异构体是2Z，4E异构体。
本发明的某些化合物可以以各种互变异构体形式存在，例如当羟基是芳基或杂芳基环上的取代基时；应该理解，本发明包括所有这些互变异构形式。
合适的可药用盐包括酸加成盐和羧基的盐。
合适的可药用的酸加成盐包括与无机酸(例如盐酸、氢溴酸、正磷酸或硫酸)或与有机酸(例如甲磺酸、甲苯磺酸、乙酸、丙酸、乳酸、柠檬酸、富马酸、苹果酸、丁二酸、水杨酸、马来酸、甘油磷酸或乙酰基水杨酸)形成的盐。
合适的羧基的可药用盐包括金属盐，例如铝盐、碱金属盐(如钠或钾和锂盐)、碱土金属盐(如钙或镁盐)，和铵盐或取代的铵盐，例如与C1-6烷基胺(如三乙胺)、羟基C1-6烷基胺(如2-羟基乙胺、双(2-羟基乙基)胺或三(2-羟基乙基)胺)、环烷基胺(如二环己基胺)形成的盐，或与普鲁卡因、1，4-二苄基哌啶、N-苄基-β-苯乙胺、脱氢枞胺、N，N＇-双脱氢枞胺、葡糖胺、N-甲基葡糖胺或吡啶型碱(例如吡啶、可力丁或喹啉)形成的碱。
合适的式(I)化合物的溶剂化物是可药用的溶剂化物，例如水合物。
不可药用的式(I)化合物的盐和/或溶剂化物可以在制备可药用的式(I)化合物的盐和/或溶剂化物或式(I)化合物本身中作为中间体，因此构成本发明的另一方面。
一种式(I)化合物或其盐或溶剂化物可用以下方法制备(a)对于其中的Ra代表氢、烷基或任选取代的芳基，Rb代表以上定义的式(a)基团的式(I)化合物，使式(II)化合物
其中R2、R3、R4、R6、R7和R8的定义与式(I)中相同，与一种能将以下基团转化上面定义的式(a)基团的试剂反应
(b)对于其中Ra代表以上定义的式(a)部分、Rb代表氢、烷基或任选取代的芳基的式(I)化合物，用式(IV)化合物处理式(III)化合物
其中R4、R6、R7和R8的定义与式(I)中相关，
其中R1、R2、R3和X的定义与式(I)中相关，R9是C1-4烷基；随后如有必要，进行以下的一个或多个反应(i)将式(I)化合物转化成另一种式(I)化合物；(ii)除去任何保护基；(iii)制备这样形成的化合物的盐或溶剂化物。
在以上反应(a)中，能将以下基团
转化成上面定义的式(a)基团的合适试剂包括用来将C＝O键转化成碳碳双键的常规试剂，例如Wittig或Horner-Emmons试剂，如以下的式(V)化合物
其中R1的定义与式(I)化合物中的相关，X1代表式(I)中定义的X或是可转化成X的基团，X2代表基团(R9O)2P(O)-，其中R9的定义如上或是基团Ph3P-。
式(II)化合物和能将下式基团
转化成式(a)基团的试剂的反应可以在适当的常规条件下进行，这取决于选择的具体试剂，例如当试剂是其中的X2为(R9O)2P(O)-的式(V)化合物时，则反应在常规的Horner-Emmons条件下进行，使用任何合适的非质子溶剂，例如芳烃(如苯、甲苯或二甲苯)、DMF、DMSO、氯仿、二噁烷、二氯甲烷、优选用THF、乙腈、N-甲基吡咯烷酮等或其混合物，优选用无水溶剂在能以合适的速度形成所需产物的温度下进行，可方便地在环境温度下或高温下进行，例如在30-120℃下进行；优选在碱存在下进行反应。
在刚叙述的反应中适用的碱包括有机碱，例如丁基锂、二异丙基氨基化锂(LDA)、N，N-二异丙基乙基胺、1，5-二氮杂双环〔4.3.0〕-5-壬烯(DBN)、1，5-二氮杂双环〔5.4.0〕-5-十一碳烯(DBU)、1，5-二氮杂双环〔2.2.2〕辛烷(DABCO)，和无机碱，例如氢化钠；优选氢化钠，且该反应一般在惰性气氛如氮中进行。
当该试剂是其中的X2为Ph3P-基的式(V)化合物时，则反应在常规的Wittig条件下进行。通常反应在碱存在下在任何合适的非质子溶剂中进行。合适的碱是有机碱，例如三乙胺、三甲胺、N，N-二异丙基乙胺(DIPEA)、吡啶、N，N-二甲基苯胺、N-甲基吗啉、1，5-二氮杂双环〔4.3.0〕-5-壬烯(DBN)、1，5-二氮杂双环〔5.4.0〕-5-十一碳烯(DBU)、1，5-二氮杂双环〔2.2.2〕辛烷(DABCO)，以及无机碱，例如氢化钠、碳酸铯、碳酸钾，优选氢化钠。合适的溶剂是用于这类反应的常规溶剂，例如芳烃、如苯、甲苯或二甲苯等；DMF、DMSO、氯仿、二噁烷、二氯甲烷、THF、乙酸乙酯、乙腈、N-甲基吡咯烷酮或它们的混合物，优选二氯甲烷。此反应在能以适当的速度形成所需产物的任何温度下进行，可方便地在环境温度或在高温下进行，例如在20-140℃下进行，优选从约室温到溶剂的廻流温度。
式(III)化合物和式(IV)的Horner Emmons试剂之间的反应可以在如上所述的常规的Horner Emmons条件下进行。
式(II)化合物可以按照示于以下路线(Ia-c)的反应顺序来制备路线(Ia)
路线(Ib)
路线(Ic)
其中，以下述的限制作为条件，Ra、R2、R3、R4、R6、R7和R8的定义与式(I)化合物中的相关。
式(II)化合物可以利用式(VIII)的酮衍生物与合适的鏻盐或膦酸盐之间的Wittig反应或Horner-Emmons反应来制备，采用本领域公知的反应条件，这些反应条件描叙在例如“Wittig反应”，R.Adams编，第14卷270页(1965)中或应用化学，国际英文版(Angew.Chem.Int.Ed.Engl.)4，645(1965)中。
当R2不是H，例如是烷基时，式(II)化合物按照路线(Ia)由式(VIII)化合物与合适的鏻盐或膦酸盐通过Wittig反应或Horner-Emmons反应直接得到。
当式(VIII)化合物与上述的膦酸盐进行Horner-Emmons反应时，使用的实验条件是在例如以下文献中报道的常规条件四面体快报(Tetrahedron Lett.)1981、461；加拿大化学杂志(Can.J.Chem.)，55，562(1977)；美国化学会志(J.Am.Chem.Soc.)，102，1390(1980)；有机化学杂志(J.Org.Chem.)44，719(1979)；合成(Synthesis)，1982，391；和四面体快报(TetrahedronLett)，1982，2183。
式(VIII)化合物与上述鏻盐的反应是在碱存在下的任何合适溶剂中进行的。合适的碱包括有机碱，例如三乙胺、三甲胺、N，N-二异丙基乙胺(DIPEA)、吡啶、N，N-二甲基苯胺、N-甲基吗啉、1，5-二氮杂双环〔4.3.0〕-5-壬烯(DBN)、1，5-二氮杂双环〔5.4.0〕-5-十一碳烯(DBU)、1，5-二氮杂双环〔2.2.2〕辛烷(DABCO)，和无机碱，例如氢化钠、碳酸铯、碳酸钾。合适的溶剂包括通常使用的溶剂，例如芳烃、如苯、甲苯或二甲苯等；DMF、DMSO、氯仿、二噁烷、二氯甲烷、THF、乙酸乙酯、乙腈、N-甲基吡咯烷酮等或它们的混合物，最好是，反应在约-20℃至140℃的反应温度下进行，优选在约室温至溶剂的廻流温度下进行。
式(VIII)化合物与膦酸盐的反应在常规的Horner-Emmons条件下进行，使用任何合适的非质子溶剂，例如芳烃(如苯、甲苯或二甲苯)、DMF、DMSO、氯仿、二噁烷、二氯甲烷，优选使用THF、乙腈、N-甲基吡咯烷酮等及其混合物，最好是用一种无水的溶剂，在能以适当速度形成所要产物的温度下进行，可方便地在环境温度或升高的温度下例如在30-120℃下进行；该反应优选在碱存在下进行。
在刚刚叙述的反应中所用的合适的碱包括有机碱，例如丁基锂、二异丙基氨基化锂(LDA)、N，N-二异丙基乙胺、1，5-二氮杂双环〔4.3.0〕-5-壬烯(DBN)、1，5-二氮杂双环〔5.4.0〕-5-十一碳烯(DBU)、1，5-二氮杂双环〔2.2.2〕辛烷(DABCO)，以及无机碱，例如氢化钠；优选氢化钠，且反应通常在例如氮的惰性气氛中进行。
当R2＝H时，醛(VII)与式(VI)的脂族醛在碱(例如氢氧化钠或氢氧化钾)存在下采用适当的常规步骤反应，得到路线(Ib)中的化合物(II)。
在另一种情况，当R2＝H时，式(VIII)化合物与取代的乙氧羰基甲基磷盐或乙氧羰基甲基膦酸盐反应(路线(Ic))，得到的羧酸酯(XIV)随后用还原剂转化成相应的醇，优选用复合金属还原剂如氢化锂铝(LiAlH4)、氢化二异丁基铝(DIBAH)或硼氢化锂(LiBH4)，在任何合适的非质子溶剂(如二氯甲烷、氯仿、二噁烷、乙醚或THF)中于能以适当速度形成所要产物的温度下，例如在-30℃至60℃的温度如室温下反应。随后将该中间体醇用氧化剂氧化成醛(II)，氧化剂的实例有二氧化锰、全碘烷(Dess-Martin试剂)、氯铬酸吡啶鎓(PCC)或重铬酸吡啶鎓(PDC)、或草酰氯与DMSO的组合(Swern反应)，优选在二氯甲烷中用二氧化锰。
式(IV)化合物可以按照以下路线(II)中所示的反应顺序制备。
路线(II)
其中，以下述的任何限制为条件，R1、R2和R3的定义与式(I)中的相关，R9同对式(IV)的定义，X1与式(V)中的定义相关。
式(X)化合物的制备方法包括，使最好是无水的式(IX)氯代醛或氯代酮与合适的鏻化合物按照上述Wittig反应的适当的常规步骤反应；将中间化合物(X)转化成所要化合物(IV)可通过与合适的亚磷酸三烷基酯(R9O)3P反应来进行，其中R9的定义如上，该反应在通常使用的任何溶剂中，优选在亚磷酸三烷基酯中，在合适的反应温度下，优选在溶剂的沸点下进行。例如在路线(II)中氯乙醛(IX)在氯仿中于DIPEA存在下用溴化2-甲氧基-2-(三苯鏻)乙酸甲酯处理，再将这样得到的中间体(X)通过在亚磷酸三甲酯中廻流，转化成化合物(IV)。
式(V)化合物可以按照以下路线(III)所示的反应程序制备
路线(III)
其中，以下述的任何限制为条件，R1和R9的定义与式(I)相关，X1的定义与式(V)中相关。
起始物是一种式(XJ)的α-烷氧基羧酸酯，它有市售商品或可按照本领域已知的方法制备，例如在Rodd’s有机化合物化学(Rodd’sChemistry of Organic Compounds)第ID卷，96页(1965)(S.Coffey编，Elseviers)中所述。式(XI)化合物与N-卤代酰亚胺(例如N-溴代丁二酰亚胺)在产生游离基的试剂(如偶氮双异丁腈或过氧化苯甲酰)存在下在合适的溶剂(如四氯化碳、苯)例如四氯化碳中反应，反应温度为-30℃至80℃，例如室温；此类反应的实例可在文献中找到，例如有机化学杂志(J.Org.Chem)，41，2846(1976)。所得到的式(XII)卤代化合物随后与三苯膦或与亚磷酸三烷基酯P(OR9)3反应，得到如路线(III)中所示的所需的式(V)化合物。
当式(XII)化合物与三苯膦反应时，反应在通常使用的任何溶剂中进行，例如乙醚、二噁烷、四氢呋喃、苯、二甲苯，或者最好是用甲苯，在从-30℃至80℃的合适温度下，例如在室温下进行(这一转化的实例在文献中有报道，例如化学报告(Chem.Ber.)，97，1713(1964))。
当式(XII)化合物与亚磷酸三烷基酯P(OR9)3反应时，该反应在任何常用的溶剂中，优选在亚磷酸三烷基酯中，于合适的反应温度下，优选在溶剂的沸腾温度下进行(此转化反应的实例在文献中有报道，例如李必希化学记事(Liebigs Ann.Chem.，699，53(1966))。
或者是，其中R2是(R9O)2PO的式(V)化合物可以用路线(III)所示的程序制备，使式(XIII)的重氮膦酰基乙酸酯与式R1OH的醇或酚(其中R1的定义与式(I)中相关)在乙酸铑(II)存在下反应，如在例如四面体(Tetrahedron)，50，3177(1994)或四面体，48，3991(1992)等文献中所述。
式(III)、(VII)和(VIII)化合物是已知化合物或可按照与制备已知化合物相似的方法制备，例如在以下文献中描述的方法有机化学杂志(J.Org.Chem)，47，757(1982)；杂环(Heterocycles)，22，1211(1984)；四面体(Tetrahedron)，44.443(1988)；李必希化学记事(Liebigs Ann.Chem.)，1986，438；化学与药学通报(Chem.Pharm.Bull.)20，76，1972)。
式(VI)、(IX)和(XI)化合物是已知化合物，或者可以利用与制备已知化合物相似的方法制备，例如在J.March的高等有机化学(Advanced Organic Chemistry)第三版(1985，Wiley Interscience)中所述的方法。
式(I)化合物向另一种式(I)化合物合适的转化反应包括将其中的X代表羟基或烷氧基的式(I)化合物转化成其中的X代表不同的烷氧基或上面定义的式NRsRt基团的化合物。这种转化如下面路线(IV)中所示
路线(IV)
其中，以下述的任何限制为条件，R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8和X与对式(I)化合物的定义相关，Rs′是Rs或其被保护的形式，Rt′是Rt或其被保护的形式，当X是烷氧基时R′为X。
式(I)化合物向另一种式(I)化合物的转化可以用合适的常规步骤进行；例如，上述的其中X代表羟基或烷氧基的化合物向其中X代表上面定义的式NRsRt基团的化合物转化可以进行如下(1)当X是烷氧基时，利用例如氢氧化钾进行碱性水解，得到其中X为羟基的式(I)化合物，随后(a)为制备其中X代表上面定义的式NRsRt基团的化合物，用式HNRs′Rt′化合物进行处理，其中Rs′和Rt′的定义如上，或(b)为制备其中X为烷氧基的化合物，用式R′OH化合物进行处理，其中R′是所要的烷基；然后任选地去保护；或(2)当X是羟基时，采用与以上(i)中叙述的类似步骤。
与式HNRs′Rt′化合物或与式R′OH的反应优选在羧基活化后进行。
羧基可以用常规方式活化，例如转化成酸酐、酰基卤、酰基叠氮或活化的酯，例如氰基甲酯、硫代苯酯、对硝基苯酯、对硝基硫代苯酯、2，4，6-三氯苯酯、五氯苯酯、五氟苯基酯、N-羟基苯二甲酰亚氨基酯、8-羟基哌啶酯、N-羟基丁二酰亚胺酯、N-羟基苯并三唑酯，或者可以在羟基苯并三唑(HOBt)或1-羟基-7-氮杂苯并三唑(HOAt)存在或不存在下用碳化二亚胺如N，N′-二环己基碳化二亚胺(DCC)或1-乙基-3-〔3-(二甲基氨基)丙基〕碳化二亚胺盐酸盐(WSC)将羧基活化；或者可以用N，N′-羰基二咪唑、Woodward-K试剂、Castro试剂或异噁唑鎓盐活化。
活化的羧基与氨基或醇基的缩合可以在碱存在下于任何合适的溶剂中进行。合适的碱包括有机碱，例如三乙胺、三甲胺、N，N-二异丙基乙胺(DIPEA)、吡啶、N，N-二甲基苯胺、4-二甲基氨基吡啶(DMAP)、N-甲基吗啉、1，5-二氮杂双环〔4.3.0〕-5-壬烯(DBN)、1，5-二氮杂双环〔5.4.0〕-5-十一碳烯(DBU)、1，5-二氮杂双环〔2.2.2〕辛烷(DABCO)，以及无机碱，例如碳酸钾。合适的溶剂包括常用的溶剂，例如DMF、二甲基亚砜(DMSO)、吡啶、氯仿、二噁烷、二氯甲烷、THF、乙酸乙酯、乙腈、N-甲基吡咯烷酮和六甲基磷酸三酰胺以及它们的混合物。反应温度可以是在这类缩合反应常用的温度范围内，一般为约-40℃至约60℃，优选为约-20℃至约40℃。
当反应是在合适的缩合剂例如碳化二亚胺、N，N′-羰基二咪唑、Woodward-K试剂、Castro试剂等存在下进行时，缩合剂的用量优选为起始物摩尔量的等摩尔至5倍，且反应是在合适的溶剂中进行，例如卤化烃类，如二氯甲烷、氯仿、四氯化碳、四氯乙烷等；醚类，如二噁烷、THF、二甲氧基乙烷等；酮类，如丙酮、甲乙酮等；乙腈、乙酸乙酯、DMF、二甲基乙酰胺、DMSO等。最好是缩聚反应在无水溶剂中于约-10℃至60℃、优选约0℃至室温的反应温度下进行。
或者是，其中X是O-烷基的式(I)化合物向其中X是NRsRt的另一种式(I)化合物的转化可以按照已知的步骤，例如在四面体快报(Tetrahedron Lett)，48，4171(1977)中所述的步骤，用式HNRs′Rt′化合物在三烷基铝试剂(如三甲基铝或三乙基铝)存在下直接处理所述的式(I)化合物来进行；必要时将其中X是NRs′Rt′的式(I)化合物去保护或转化成其中X是NRsRt的式(I)化合物。
上述反应中的三烷基铝试剂的用量通常是起始物摩尔量的等摩尔量或约5倍，优选为起始物的2-3倍摩尔量，反应在合适的溶剂中进行，例如卤代烃，如二氯甲烷、氯仿、四氯化碳、四氯乙烷等；醚类，如二噁烷、THF、二甲氧基乙烷等。缩合反应优选在无水溶剂中进行，反应温度一般为约-20℃至120℃，优选为约0℃至溶剂的廻流温度。
通式为HNRsRt的胺可以用本领域已知的制备胺的方法制备，如在Houben-Weil的有机化学方法(Methoden der OrganischenChemie)第XI/1卷(1957)和第E16d/2卷(1992)(Georg ThiemeVerlag，Stuttgart)中所述。
具体地说，其中的Rs和Rt中一个代表氢、另一个代表如上定义的基团(a)、(b)、(c)、(d)、(e)或其具体实例的通式HNRsRt的胺，按照在下面反应路线(V)中概述的方法制备
其中R是烷基或芳基，Ru和Rv的定义如上，X6至X14同对(H2)的定义，A是一个键或一个亚烷基链，R10是氢(在(ii)和(vii)中)或卤素(在(iii)中)，和R11是烷基，R12是烷基或芳基，L和L1是离去基团，例如卤素和甲磺酸根，Y是卤素，Y1是离去基团如卤素，以及Y1和Y2是离去基团如卤素，例如Y1是氯和Y2是溴，Z1是N或CY3，其中Y3选自氢、烷基、烷氧基、烷基羰基、芳基、芳氧基或芳基羰基。
(i)中的缩合反应在常规的反应条件下进行，如在J.March，高等有机化学，第三版，1985(Wiley Interscience)中所述。
(i)中的酰胺官能基的还原反应宜用已知方法进行，例如使用混合氢化物还原剂，如在有机合成论文集(Org.Synth Coll)第四卷564页中所述的氢化铝锂及方法。
(i)中伯胺基的保护可以使用经典的氨基甲酸酯保护剂，例如叔丁氧羰基(Boc)、苄氧羰基(Cbz)或芴基甲氧羰基(Fmoc)，或使用苯二甲酰亚氨基保护基团。这种保护基团的合成和去除在例如“有机合成中的保护基”(Protective Groups in Organic Synthesis)一书中有说明，该书编者为T.W.Green，Wiley New York，1981年出版。
(i)中的腈的还原适合用已知方法进行，例如按照在医药化学杂志(J.Med.Chem.)，39，1514(1996)中所述的步骤。
(ii)中的硝基吡啶的还原适合用在有机化学杂志(J.Org.Chem.)，58，4742(1993)中描述的方法进行。
(ii)中的羟基硝基吡啶的烷基化可以用在有机化学杂志(J.Org.Chem.)，55，2964(1990)中所述的方法进行。
(iii)和(vii)中的置换反应适合用瑞士化学学报(HelveticaChemica Acta)，47(2)，45(1964)中所述的方法进行。
(v)中的腈的还原适合用在氧化铂上催化加氢进行。
(vii)中的硝基的还原适合用有机化学杂志(J.Org.Chem.)，58，4742(1993)中所述的方法进行。
(iv)中酰基卤NC-A-COY生成膦酸二烷基酯的反应按照在有机化学杂志(J.Org.Chem.)，36，3843(1971)中所述的步骤进行。
(v)中叠氮化物与三苯膦的反应按法国化学会通报(Bull.Soc.Chim.Fr.)，1985，815中所述在含水四氢呋喃中进行。
(v)中的叠氮化物按照合成(Synthesis)，1995，376中所述步骤用叠氮基三甲基硅烷制备。
(v)中化合物Y1-A-Y2和胺衍生物的反应在常规的置换反应条件下进行。
(vi)中的反应可以按在J.March“高等有机化学”(AdvancedOrganic Chemistry)第三版，1985，Wiley Interscience中所述，用已知的常规方法进行。例如，氧化可以用氧化剂如铬酸(Jones试剂)进行；酮的还原胺化可以用苄胺进行以形成亚胺中间体，随后用已知方法和例如硼氢化钠或氢化铝锂等还原剂将该中间体还原。脱苄基作用随后可用常规方法完成，例如在催化剂如钯/碳存在下用氢完成。以乙二醇缩酮形式保护酮可以用乙二醇在酸性催化条件下进行；酰化或烷基化可以用酰基卤化物或烷基卤化物在无机或有机碱存在下处理合适的哌啶衍生物来完成；二氧戊环去保护形成酮可以通过在水或醇溶剂中用酸处理来进行。4-氨基哌啶的伯氨基的保护要使用经典的氨基甲酸酯保护剂，例如叔丁氧羰基(Boc)、苄氧羰基(Cbz)或芴基甲氧羰基(Fmoc)，或使用苯二甲酰亚氨基保护基；这类保护基的合成与去除在例如“有机合成中的保护基”(Protective Groups in OrganicSynthesis)(T.W.Greene编，Wiley，New York，1981)中有说明。4-氧代哌啶可以通过在合适的溶剂中用羟胺或烷氧基胺处理以转化成相应的肟；肟还原成胺可以用常规的还原剂如氢化铝锂或氰基硼氢化钠来完成。
以上反应(i)、(ii)、(iii)、(iv)、(v)、(vi)和(vii)中的起始物是已知的有市售商品的化合物。
按照标准的化学步骤，可以由上述方法中分离出式(I)化合物或其溶剂化物。
式(I)化合物的盐和/或溶剂化物的制备可以用适当的常规步骤进行。
如果需要，本发明化合物异构体的混合物可以用常规方法，例如使用旋光性酸作为拆分剂，分离成单个的立体异构体和非对映异构体。可作为拆分剂的合适的旋光性酸在“立体化学概论”(Topics inStereochemistry)第6卷(Wiley Interscience，1971，Allinger，N.L.和Eliel，W.L编)中有说明。
或者，本发明化合物的任何对映体均可用已知构型的旋光性纯的物质通过立体特异性合成来得到。
化合物的绝对构型可以用例如X射线结晶学技术等常规方法测定。
任何活性基团或原子的保护均可在所述方法中的任何合适的阶段进行。合适的保护基包括本领域对于要保护的特定基团或原子通常使用的基团。保护基可以用适当的常规步骤制备或去除，例如OH基，包括二醇基，可以通过用合适的甲硅烷基化试剂如二叔丁基甲硅烷基双(三氟甲磺酸酯)处理以甲硅烷基化的衍生物形式被保护，甲硅烷基随后可用常规步骤去除，例如用氟化氢(优选以吡啶络合物的形式并任选地在氧化铝存在下)处理，或在甲醇中用乙酰氯处理。或者，可以用苄氧基保护酚基，该苄氧基可以使用例如氯化钯(II)或10％钯/碳作为催化剂通过催化加氢除去。
氨基可以用任何常用的保护基保护，例如用二碳酸二叔丁酯处理氨基可以形成氨基甲酸的叔丁酯，通过将该酯在酸性条件下水解，例如在乙酸乙酯中用氯化氢或在二氯甲烷中用三氟乙酸，可以使氨基再生。氨基可以以苄基衍生物的形式被保护，这可由适当的胺与苄基卤在碱性条件下制备，该苄基使用例如钯/炭催化剂通过催化氢解去除。
吲哚NH基和类似基团可以用任何常用的基团保护，例如苯磺酰基、甲磺酰基、甲苯磺酰基、甲酰基、乙酰基(它们全可通过用碱性试剂处理来去掉)、苄基(可在液氨中用钠或在甲苯中用AlCl3去掉)、烯丙基(可用氯化铑(III)在酸性条件下去掉)、苄氧羰基(可通过催化加氢或碱性处理去掉)、三氟乙酰基(可用碱或酸处理去除)、叔丁基二甲基甲硅烷基(可用四丁基氟化铵处理去除)、2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基(SEM)(可用四丁基氟化铵在乙二胺存在下去除)、甲氧基甲基(MOM)或甲氧基乙基(MEM)基团(可用中等酸性处理去除)。
羧基可以以烷基酯形式被保护，例如甲酯，该酯可以用常规步骤制备和去除，将甲氧羰基转化成羧基的一种方便的方法是使用氢氧化锂水溶液。
离去基团或原子是在反应条件下会从起始物上裂解下的任何基团或原子，因此在特定的部位促进反应。除非另外指明，这类基团的合适实例是卤原子、甲磺酰氧基、对硝基磺酰氧基和甲苯磺酰氧基。
本文所述化合物的盐、酯、酰胺和溶剂化物在需要时可用本领域的常规方法制备例如，酸加成盐可以通过用合适的酸处理式(I)化合物来制备。
羧酸的酯可以用常规的酯化步骤制备，例如，烷基酯可以用合适的链烷醇处理所要的羧酸来制备，通常在酸性条件下处理。
酰胺可以用常规的酰胺化步骤制备，例如式CONRsRt的酰胺可以用式HNRsRt的胺(其中Rs和Rt定义如上)处理相关的羧酸来制备。或者是，可以用上面定义的式HNRsRt的胺处理该酸的C1-6烷基酯，如甲酯，以得到所要的酰胺。
如上所述，本发明化合物被认为具有有用的治疗性质。
因此，本发明提供了一种治疗和/或预防与哺乳动物中破骨细胞活性过强有关的疾病的方法，该方法包括服用有效和无毒数量的哺乳动物破骨细胞的选择性抑制剂。
一种合适的哺乳动物破骨细胞选择性抑制剂是位于哺乳动物破骨细胞皱状边界处的泡状腺苷三磷酸酶的选择性抑制剂。
一种特异的哺乳动物泡状腺苷三磷酸酶的选择性抑制剂是式(I)化合物，或其可药用的盐，或其可药用的溶剂化物。
因此，本发明还提供了用于治疗人或非人哺乳动物中骨质疏松及有关的骨质减少疾病的方法，该方法包括使需要治疗的人或非人哺乳动物服用有效和无毒数量的式(I)化合物或其可药用的溶剂化物。
在另一方面，本发明提供了一种哺乳动物(尤其是人)破骨细胞的抑制剂，例如式(I)化合物或其可药用的盐，或其可药用的溶剂化物，用来作为活性治疗物质。
优选的哺乳动物是人。哺乳动物破骨细胞优选是人破骨细胞。
特别是，本发明提供了用于治疗和/或预防骨质疏松及有关的骨质减少疾病的式(I)化合物或其可药用盐和/或可药用溶剂化物。
特别有意义的是与临近绝经期和绝经后有关的骨质疏松。还包括治疗和预防佩吉氏病，与骨瘤有关的血钙过多，以及按照病因学分类如下的所有各类骨质疏松疾病。初级骨质疏松更年期I类或绝经后II类或老年期青少年年轻成人中自发性二级骨质疏松内分泌反常甲状腺机能亢进性腺机能衰退先天性卵巢发育不全或特纳氏综合症肾上腺皮质机能亢进或库兴氏综合症甲状旁腺机能亢进骨髓反常多发性骨髓瘤及有关疾病全身性肥大细胞增多症弥散性癌戈谢病结缔组织反常成骨不全高胱氨酸尿埃勒斯-当洛斯综合症进行性痉挛性截瘫门克士综合症其它各种原因固定术或失重状态外伤后骨质疏松慢性阻塞性肺部疾病慢性酒精中毒长期服用肝素长期摄入抗惊厥药物此外，本发明包括治疗肿瘤，尤其是与肾癌、黑素瘤、结肠癌、肺癌和白血病有关的肿瘤，病毒性疾病(例如与塞姆利基森林病毒、水泡性口炎病毒、新城疫病毒、流感A和B病毒、人类免疫缺损病毒有关的疾病)，溃疡症(例如由幽门螺旋杆菌引起的慢性胃炎和消化性溃疡)，在自身免疫病和移植术中作为免疫抑制剂，治疗和/或预防血胆固醇过多和动脉粥样硬化症的抗高脂血剂，并可用于治疗艾滋病和早老性痴呆症。这些化合物还被认为可用于治疗血管形成病，即，依赖于血管形成的病理状况，例如类风湿性关节炎、糖尿病性视网膜病、牛皮癣及固体肿瘤。
人破骨细胞病理活性的选择性抑制剂，例如式(I)化合物或其可药用的盐和/或溶剂化物，本身可以施用，或者优选作为还含有可药用载体的药物组合物服用。
因此，本发明还提供了一种药物组合物，其中含有人破骨细胞药理活性、特别是与骨质反常损失有关的人破骨细胞骨吸收活性的选择性抑制剂，以及它的有药用的载体。
特异的人破骨细胞抑制剂是人破骨细胞泡状腺苷三磷酸酶的选择性抑制剂，例如式(I)化合物，或其可药用盐或溶剂化物，以及它的可药用载体。
活性化合物或其可药用盐和/或可药用的溶剂化物通常以单位剂量形式施用。
能有效治疗上述疾病的量取决于多种因素，例如活性化合物的效力、所选择的可药用盐或可药用溶剂化物的特异性、要治疗的疾病的本质和严重程度和哺乳动物的重量。但是，单位剂量通常含0.01-50mg、例如1-25mg本发明化合物。通常每天施用单位剂量一次或一次以上，例如1、2、3、4、5或6次，更常见的是每天1-3次或2-4次，从而使每天的总剂量对于70kg的成年人一般为0.01-250mg，更常见的是1-100mg，例如5-70mg，这相当于约0.0001-3.5mg/kg/天，更常见的是0.01-1.5mg/kg/天，例如0.05-0.7mg/kg/天。
在上述剂量范围内，本发明化合物不显示毒理作用。
本发明还提供了一种用于治疗人和非人哺乳动物下述疾病的方法肿瘤，尤其是与肾癌、黑素瘤、结肠癌、肺癌和白血病有关的肿瘤；病毒性疾病(例如涉及塞姆利基森林病毒、水泡性口炎病毒、新城疫病毒、流感A和B病毒、人类免疫缺损病毒的疾病)；溃疡(例如由幽门螺旋杆菌引起的慢性胃炎和消化性溃疡)；自身免疫病和移植术；用于治疗和/或预防血胆固醇过多和动脉粥样硬化症；艾滋病和早老性痴呆症；血管形成病，例如类风湿性关节炎、糖尿病性视网膜病、牛皮癣和固体肿瘤。该方法包括使需要治疗的哺乳动物服用有效和无毒数量的式(I)化合物或其可药用的溶剂化物。
在所述治疗中，活性化合物可以任何合适的途径施用，例如口服、非肠道给药或局部给药。对于这种应用，化合物通常以与人用或兽用药物载体、稀释剂和/或赋形剂相结合的药物组合物的形式使用，但组合物的确切形式自然要取决于用药方式。
组合物通过混合方法配制，适合口服、非肠道或局部给药，因此可以是片剂、胶囊、口服液体制剂、粉末、粒剂、锭剂、芳香熏剂、可重组的粉剂、可注射和输注的溶液或悬浮液、栓剂和经皮给药等形式。优选可口服的组合物，特别是成型的口服组合物，因为它们更便于普通使用。
用于口服给药的片剂和胶囊通常制成单位剂量的形式，且含有常规的赋形剂，例如粘合剂、填料、稀释剂、片剂、润滑剂、崩解剂、着色剂、矫味剂和润湿剂。片剂可以按照本领域熟知的方法包衣。
适用的填料包括纤维素、甘露醇、乳糖及其它的类似试剂。合适的崩解剂包括淀粉、聚乙烯吡咯烷酮和淀粉衍生物(如羟基乙酸淀粉钠)。合适的润滑剂包括例如硬脂酸镁。合适的可药用润湿剂包括十二烷基硫酸钠。
这些固态的口服组合物可以用掺混、填充、压片等常规方法制备。可以采用反复掺混操作以使活性试剂均匀分布在使用大量填料的组合物中。此操作当然是本领域的常规操作。
口服液体制剂可以是例如水基或油基的悬浮液、溶液、乳状液、浆液或酏剂，或者可以是干产物形式，在使用前与水或其它合适的载液重新组合。这种液体制剂可以含有常规的添加剂，例如悬浮剂，如山梨醇、糖浆、甲基纤维素、明胶、羟乙基纤维素、羧甲基纤维素、硬脂酸铝凝胶或氢化的食用脂肪；乳化剂，如卵磷脂、失水山梨醇单油酸酯或阿拉伯胶；非水载液(可包括食用油)，例如杏仁油、分级的椰子油、油性酯类如甘油的酯、丙二醇或乙醇；防腐剂，例如对羟基苯甲酸甲酯或丙酯，或山梨酸；如果需要，还可含有常用的矫味剂或着色剂。
对于非肠道给药，制备含有本发明化合物和一种灭菌载液的流体单位剂量形式。根据载液和浓度，化合物可以是悬浮态或是溶解的。非肠道给药的溶液的制备方法通常是将化合物溶在载液中，过滤灭菌，然后装入合适的小瓶或安瓿瓶中并且密封。益于在载液中溶入辅助剂，例如局部麻醉剂、防腐剂和缓冲剂。为提高稳定性，在装入小瓶并在真空下除水之后可以将组合物冷冻。
非肠道给药的悬浮液的制备方式基本相同，只是化合物是悬浮在而不是溶在载液中，并且化合物在悬浮于灭菌的载液中之前先暴露在环氧乙烷中以进行灭菌。组合物中益于含有表面活性剂或润湿剂以促进活性化合物的均匀分散。
对于局部给药，组合物可以是透皮药膏或贴剂的形式以便系统性释放活性化合物，它们可用常规方式制备，例如在“皮肤病制剂”(Dermatological Formulation)，B.W.Barry(药物和药学科学，Dekker)或Harrys的“美容学”(Cosmeticology)等标准教科书中所述。
本发明还提供了作为人类破骨细胞生物活性的选择性抑制剂，特别是与骨质反常损失有关的人破骨细胞骨吸收活性的选择性抑制剂，式(I)化合物或其可药用的盐或溶剂化物在制造用于治疗和/或预防与哺乳动物中破骨细胞活性过强有关的疾病。例如治疗和/或预防骨质疏松及有关的骨质减少病的药物中的应用。
本发明还提供了人破骨细胞生物活性的选择性抑制剂，特别是与骨质反常损失有关的人破骨细胞骨吸收活性的选择性抑制剂，在制造用于治疗以下病症的药物中的应用肿瘤、尤其是与肾癌、黑素瘤、结肠癌、肺癌和白血病有关的肿瘤；病毒性疾病(例如涉及塞姆利基森林病毒、水泡性口炎病毒、新城疫病毒、流感A和B病毒、人类免疫缺损病毒的疾病)，溃疡(例如由幽门螺旋杆菌引起的慢性胃炎和消化性溃疡)，自身免疫性病和移植术，治疗和/或预防血胆固醇过高和动脉粥样硬化症，艾滋病和早老性痴呆症，血管形成病，例如风湿性关节炎、糖尿病性视网膜炎、牛皮癣和固体肿瘤。
本发明的一个优选的方面包括哺乳动物(包括人)破骨细胞生物活性的选择性抑制剂的组合物、治疗方法和药学应用，但是96/21644的式(I)化合物的组合物、治疗方法和药学应用以及另一方面WO96/21644的具体实施例被排除在外。
当本发明化合物按照本发明用药时，预期没有不可接受的毒理作用。作为通常的作法，组合物一般都配有用于所涉及的药物治疗的书写或印制的用法说明。
以下的描叙、实施例和药理方法说明了本发明，但不以任何方式构成限制。制备1α-氧代-3-(2-硝基-4，5-二氯苯基)丙酸乙酯在氮气下于4小时内向钾(49.2g，1.26mol)在无水乙醚(500ml)的悬浮液中逐滴加入无水乙醇(319ml)和无水乙醚(260ml)的溶液。所形成的溶液用无水乙醚(1200ml)稀释，然后在约30分钟内逐滴加入草酸二乙酯(171ml，1.26mol)。在室温下于1小时内向所形成的黄色混合物中逐滴加入按照Cohen和Dakin在英国化学会志(J.Chem.Soc.)79，1133中所述制备的2-硝基-4，5-二氯甲苯(260g，1.26mmol)的无水乙醚(450ml)溶液。再继续搅拌3小时，使深褐色的混合物在室温下沉降二天。抽气过滤收集钾盐，干燥后得到深褐色粉末。将其悬浮在水(400ml)和乙酸乙酯(400ml)的混合物中，然后用10％HCl酸化。有机相依次用盐水、饱和NaHCO3水溶液和盐水洗，然后用MgSO4干燥。蒸发后得到239g标题化合物(781mmol，产率62.0％)，为浅褐色粉末，原样用于下一步骤，熔点92-94℃。制备25，6-二氯吲哚-2-羧酸乙酯将α-氧代-3-(2-硝基-4，5-二氯苯基)丙酸乙酯(200g，653mmol)和铁粉(320g，5.75mol)在乙醇/乙酸(1∶1，2.5l)中的混合物廻流2小时。冷却后将形成的混合物减压蒸发，固体残余物溶在四氢呋喃(4l)中。在Fluosil上过滤，用另外的2l四氢呋喃洗。收集的有机相浓缩后得到深色残余物(203g)。将其用乙酸乙酯/二氯甲烷处理，滤除剩余的固体。蒸发后得120g标题化合物(465mmol，产率71.2％)，它原样用于下一步骤，熔点215-218℃。制备35，6-二氯吲哚-2-甲醇在氩气和搅拌下，向LiAlH4在无水四氢呋喃中的冰冷的1M溶液(800ml，800mmol)逐滴加入溶在无水四氢呋喃(1l)中的5，6-二氯吲哚-2-羧酸乙酯(118g，457mmol)，同时保持温度低于5℃。在0℃下继续搅拌l小时，然后用水(35ml)、l5％NaOH水溶液(35ml)和水(70ml)使反应停止。混合物经硅藻土垫过滤，用四氢呋喃(2×500ml)洗。有机相用MgSO4干燥、浓缩，得到80g残余物，用1∶2的乙酸乙酯/庚烷层析，得到52.0g纯标题化合物(241mmol，产率52.7％)，为油状物。制备45，6-二氯吲哚-2-甲醛5，6-二氯吲哚-2-甲醇(43g，199mmol)的乙醚(1.3l)溶液在室温下用活化过的MnO2(64g，730mmol)处理并搅拌15小时。再加入MnO2(20g，230mmol)，继续搅拌5小时。在硅藻土垫上过滤该悬浮液，然后用乙醚和温热的丙酮洗过滤垫。合并的有机相浓缩后得38.5g标题化合物(180mmol，产率90.4％)，它原样用于下一步骤，熔点207-208℃。制备5方法A)(E)-3-(5，6-二氯吲哚-2-基)-2-丙烯酸乙酯将5，6-二氯吲哚-2-甲醛(35g，164mmol)于氩气下溶在甲苯(1.5l)中，然后加入(乙氧羰基亚甲基)三苯基正膦(60g，176mmol)，将溶液廻流3小时。减压蒸除溶剂，残余物在硅胶上用1∶4的乙酸乙酯/正庚烷层析，得到28.0g纯标题化合物，熔点188-190℃(产率60.1％)。方法B)(E)-3-(5，6-二氯吲哚-2-基)-2-丙烯酸乙酯在氮气下向膦酰基乙酸三乙酯(32.9g，147mmol)的四氢呋喃(150ml)溶液中于30分钟内分批加入NaH(5.95g，148mmol)，同时保持温度在0-5℃之间。在达到室温以后，逐滴加入溶在四氢呋喃(200ml)中的5，6-二氯-1H-吲哚-2-甲醛(29g，135.5mmol)，保持内部温度为20℃左右(约1小时)。减压蒸除溶剂，残余物用水(200ml)和乙酸乙酯(500ml)处理。有机相用盐水洗，用Na2SO4干燥，蒸发至干，得到的残余物与己烷一起研磨，过滤，真空干燥，得到34.5g标题化合物，熔点188-190℃(产率＝89.6％)。制备6(E)-3-(5，6-二氯吲哚-2-基)-2-丙烯-1-醇在氩气和-20℃下向搅动着的(E)-3-(5，6-二氯吲哚-2-基)-2-丙烯酸乙酯(28g，98.5mmol)在无水四氢呋喃(500ml)中的溶液逐滴加入DIBAL(1M己烷溶液，200mmol)，同时保持温度低于-20℃。继续搅拌1小时，然后用水(70ml)使反应停止。温热至室温后，加入350ml乙醚，将此悬浮液在硅藻土垫上过滤。用乙醚(3×100ml)洗垫，然后用MgSO4将合并的有机相干燥，蒸发，得到23.85g标题化合物(98.5mmol，产率100％)，原样用于下一步骤。制备7(E)-3-(5，6-二氯吲哚-2-基)-2-丙烯醛向(E)3-(5，6-二氯吲哚-2-基)-2-丙烯-1-醇(23.8g，98.3mmol)的乙醚(800ml)溶液中加入活化的MnO2(71g，8.76mol)和NaCl(60g)，所形成的悬浮液在室温下搅拌一天。然后在硅藻土垫上过滤，用乙酸乙酯反复洗，将有机相干燥(MgSO4)，蒸发，得到21.0g标题化合物(87.5mmol，产率89.0％)，原样用于下一步骤。制备8(2Z，4E)-5-(5，6-二氯吲哚-2-基)-2-甲氧基-2，4-戊二烯酸甲酯将(E)3-(5，6-二氯吲哚-2-基)-2-丙烯醛(15g，62.5mmol)、溴化2-甲氧基-2-(三苯鏻)乙酸甲酯(31g，69.6mmol)和DBU(10.5ml，70.1mmol)的溶液廻流4小时。将溶剂蒸发，粗产物在硅胶上用乙酸乙酯/正庚烷(1∶4)层析，与二异丙基醚一起研磨后得到14.5g纯标题化合物(44.5mmol，产率71.1％)，熔点203-204℃。制备9(2Z，4E)-5-(5，6-二氯吲哚-2-基)-2-甲氧基-2，4-戊二烯酸将(2Z，4E)-5-(5，6-二氯吲哚-2-基)-2-甲氧基-2，4-戊二烯酸甲酯(10g，30.7mmol)和KOH(3.6g，64.2mmol)在乙醇/水(1∶1，460ml)中的悬浮液回流3小时。悬浮液冷却至室温后倒入1.5l水中，用2N HCl将其酸化，用乙酸乙酯(2×1l)萃取。有机相用水洗，干燥(MgSO4)后浓缩，残余物溶在CH2Cl2中。过滤，在50℃烘箱中干燥，得到9.5g纯标题化合物(30.4mmol，产率99.1％)，熔点249-250℃。1H-NMR(DMSO-d6)11.81(bs，1H)；7.77(s，1H)；7.53(s，1H)；7.20(dd，1H)；6.95(d，1H)；6.84(d，1H)；6.61(s，1H)；3.74(s，3H)。制备101，2，2，6，6-五甲基-4-哌啶酮氢碘化物将2，2，6，6-四甲基-4-哌啶酮一水合物(40g，23.1mmol)和甲基碘(98.31g，69.3mmol)在异丙醇(25ml)中的溶液于室温下搅拌48小时。将形成的悬浮液过滤，固体残余物干燥并自甲醇中重结晶。过滤并用甲醇反复洗涤后，将固体干燥，得到纯的标题化合物(31.6g，10.6mmol，产率46％)，为浅褐色晶体。制备111，2，2，6，6-五甲基-4-哌啶酮肟将1，2，2，6，6-五甲基-4-哌啶酮氢碘化物(3g，10.1mmol)和盐酸羟胺(980mg，14mmol)在6ml水中的悬浮液于室温下搅拌15分钟。加入固体NaOH直至呈碱性pH且悬浮液变稠。加3ml水，在室温下继续搅拌过夜。将悬浮液过滤，固体用水(几毫升)洗，干燥。随后将固体溶在乙醚中，将溶液干燥(MgSO4)、浓缩，干燥后得到纯标题化合物(1.55g，8.41 mmol，产率83.3％)，为白色晶体。制备124-氨基-1，2，2，6，6-五甲基-4-哌啶在0℃和Ar气下向无水四氢呋喃(100ml)中加入LiAlH4(925mg，24.4mmol)，随后加入1，2，2，6，6-五甲基-4-哌啶酮肟(1.50g，8.14mmol)。将悬浮液廻流2小时，然后冷却至室温并搅拌过夜。在冷却到0℃后，仔细地逐滴加入水(0.9ml)、15％NaOH水溶液(0.9ml)和水(2.8ml)。将悬浮液在室温下搅拌15分钟，然后加入MgSO4，继续搅拌30分钟。过滤后将液体浓缩，油质残余物在硅胶上层析(CH2Cl2/甲醇/氨水，95/5/1)。将收集的级分合并，浓缩，得到纯的标题化合物(750mg，4.40mmol，产率54.1％)，为黄色油状物。制备13(2Z，4E)-5-(吲哚-2-基)-2-甲氧基-2，4-戊二烯酸是用在制备5-9中所述的反应程序由2-吲哚甲醛制备的(杂环(Heterocycles)，1984，22，1211)。熔点189-190℃。制备145-三氟甲基-2-吲哚羧酸乙酯5-三氟甲基苯基肼(5g，28.4mmol)用丙酮酸乙酯(3.3ml，30mmol)在乙醇(15ml)中处理，过滤后得5.4g白色粉末状的相应的苯腙，熔点134-137℃。将此化合物(5.4g，19.7mmol)在甲苯(150ml)中于无水对甲苯磺酸(6g，34.8mmol)存在下廻流3小时，得到0.9g(18％)标题化合物，为黄色粉末，熔点153-154℃。制备15(2Z，4E)-5-(5-三氟甲基吲哚-2-基)-2-甲氧基-2，4-戊二烯酸是采用制备3-9中所述的反应顺序由5-三氟甲基-2-吲哚羧酸乙酯制备的。熔点191-193℃。制备165-溴-2-吲哚羧酸乙酯是采用制备14中所述的反应步骤由5-溴苯基肼和丙酮酸乙酯制备的，熔点160-164℃。制备17(2Z，4E)-5-(5-溴吲哚-2-基)-2-甲氧基-2，4-戊二烯酸是采用制备3-9中所述的反应程序由5-溴-2-吲哚羧酸乙酯制备的，熔点208-210℃。制备182，6-二甲基-4-(2-嘧啶基)哌嗪二盐酸盐将1.71g(15mmol)2，6-二甲基哌嗪和1.14g(10mmol)2-氯嘧啶在25ml乙醇中的溶液廻流16小时。反应混合物减压浓缩，溶在25ml水中，用50ml二氯甲烷萃取二次。有机相用MgSO4干燥，减压浓缩。残余物溶在乙腈中，用无水HCl的乙醇溶液处理。滤出盐，真空干燥，得到1.70g标题化合物。制备193-〔2，6-二甲基-4-(2-嘧啶基)哌嗪-1-基〕丙酰胺将1.1g(4.1mmol)2，6-二甲基-4-(2-嘧啶基)哌嗪二盐酸盐、0.45g(4.1mmol)3 氯丙酰胺、3g 30％的KF/Clarcel_在25ml乙腈中的混合物在密闭容器中于150℃下加热72小时。冷却至室温后，将混合物在过滤装置上过滤，减压浓缩。残余物溶于水中，用1NNaOH水溶液将其碱化，用25ml二氯甲烷萃取2次。有机相用MgSO4干燥，减压液浓缩。残余物随后在硅胶上层析纯化(乙酸乙酯，乙醇NH4OH，45∶5∶1)，得到O.2g标题化合物，熔点125℃。制备203-〔2，6-二甲基-4-(2-嘧啶基)哌嗪-1-基〕丙胺将50mg(1.54mmol)LiAlH4加到0.2g(0.77mmol)3-〔2，6-二甲基-4-(2-嘧啶基)哌嗪-1-基〕丙酰胺在5ml乙醚和5ml四氢呋喃中的溶液里。在室温下搅拌该混合物1小时，在廻流下再搅拌1小时，然后依次加入50μl水、50μl 15％NaOH水溶液和3×50μl水使反应停止。混合物用乙醚稀释，过滤，用MgSO4干燥，减压浓缩。残余物在硅胶上用柱层析法纯化(CH2Cl2，乙醇，NH4OH，45∶5∶1)，得到0.037g标题化合物。制备213-〔4-(2，6-二甲基苯基)哌嗪-1-基〕丙胺将4-(2，6-二甲基苯基)哌嗪(1g，5.23mmol)的甲醇(10ml)溶液冷却到10℃，加入0.305g(5.73mmol)丙烯腈。反应混合物在室温下搅拌过夜，减压蒸发，得到1g粗制的3-〔4-(2，6-二甲基苯基)哌嗪-1-基〕丙腈，为蜡状固体。将此化合物溶于甲醇(60ml)和2ml 37％HCl中，在加压(40psi)下用0.2g 10％Pd/c氢化。将反应混合物过滤并蒸发至干，得到1g标题化合物，为盐酸盐，不经纯化直接用于下面的反应。实施例1(2Z，4E)-5-(5，6-二氯-1H-吲哚-2-基)-2-甲氧基-N-(1，2，2，6，6-五甲基哌啶-4-基)-2，4-戊二烯酰胺将(2Z，4E)-5-(5，6-二氯-1H-吲哚-2-基)-2-甲氧基-2，4-戊二烯酸(736mg，3.65mmol)、4-氨基-1，2，2，6，6-五甲基哌啶(620mg，3.65mmol)、1-羟基-7-氮杂苯并三唑水合物(474.5mg，3.65mmol)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(693.5mg，3.65mmol)在DMF(2ml)中的溶液于室温下搅拌过夜。将该溶液倒入盐水(20ml)中，用乙酸乙酯反复萃取。有机相用5％碳酸钙水溶液洗，用MgSO4干燥，减压蒸发。残余物在硅胶上用90∶10∶2的乙酸乙酯∶甲醇∶氨水(32％)作为洗脱剂层析。收集的级分产生纯标题化合物(0.8g，产率73％)，为黄色晶体，熔点212℃。1H-NMR(200MHz，DMSO-d6)1.02(s，6H)；1.08(s，6H)；1.44(t，2H)；1.62(m，2H)；2.18(s，3H)；3.70(s，3H)；4.07(m，1H)；6.6(m，2H)；6.84(d，1H)；7.14(dd，1H)；7.51(s，1H)；7.75(s，1H)；7.91(d，1H)；11.74 (s，1H，与D2O交换)由柱层析分离出两种其它异构体(2Z，4E)-5-(5，6-二氯-1H-吲哚-2-基)-2-甲氧基-N-(1，2，2，6，6-五甲基哌啶-4-基)-2，4-戊二烯酰胺1H-NMR(200MHz，THF-d8，)10.76(s br，1H)；8.19(dd，1H)；7.54(s，1H)；7.40(s，1H)；6.93(d br，1H)；6.51(d，1H)；6.32(d，1H)；5.92(d，1H)；4.25-4.12(m，1H)；3.70(s，3H)；2.25(s，3H)；1.72(m，2H)1.32(dd，2H)；1.10(s，12H)(2Z，4E)-5-(5，6-二氯-1H-吲哚-2-基)-2-甲氧基-N-(1，2，2，6，6-五甲基哌啶-4-基)-2，4-戊二烯酰胺1H-NMR(200MHz，THF-d8，)10.48(s br，1H)；7.58(s，1H)；7.44(s，1H)；7.22(d，1H)；6.99(d br，1H)；6.61(s br.1H)；6.59(dd，1H)；6.42(d，1H)；4.25-4.12(m，1H)；3.75(s，3H)；2.28(s，3H)；1.72(m，2H)；1.33(dd，2H)；1.11(s，12H).
以下化合物按照实施例1的步骤制备。
在以上制备和实施例中使用的缩写符号Florisil 注册商标Celite 硅藻土的注册商标DMF 一甲基甲酰胺EI 电子轰击AcOEt乙酸乙酯FAB POS 快中子轰击/正离子检测MS 质谱THF 四氢呋喃TSP 热喷雾生物试验背景已知，由于附着在骨上，产生电的H+-腺苷三磷酸酶(ATPase)被极化到破骨细胞/骨界面。该泵将大量的质子传输到再吸收微环境中，以影响骨矿物质的活动和产生由胶原酶降解骨基质所需的酸性pH。
破骨细胞质子泵的空泡性本质最初是由Blair发现〔H C.Blair等，科学(Science)245，855(1989)〕，随后经Bekker〔P.J.Bekker等，骨骼与矿物质研究杂志(J.Bone Min.Res.)5，569(1990)〕和V__n_nen〔K.K.V__n_nen等，细胞生物学杂志(J.Cell.Biol.)，111.1305(1990)〕证实。证据是以由家禽破骨细胞(由极缺钙的下蛋母鸡的髓骨得到)得到的皱状膜碎片的制剂为基础。所形成的膜泡囊由于ATP而酸化，这容易通过测定吖啶橙的荧光猝灭来判定，吖啶橙是一种会在酸性空间内积聚的弱碱。
生物化学的图象表明破骨细胞质子泵属于泡状腺苷三磷酸酶，因为质子传递受到N-乙基马来酰亚胺(NEM，一种巯基试剂)和bafilomycin A1(泡状H+-腺苷三磷酸酶的选择性抑制剂)的抑制〔J.E.Bowman等，美国国家科学院院报(Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.)，85，7972(1988)〕，而它不受G毒毛旋花苷(一种Na+/K+腺苷三磷酸酶抑制剂)、原钒酸钠(一种P-腺苷三磷酸酶抑制剂)或者奥美拉唑或SCH 28080(二者均为肠H+/K+-腺苷三磷酸酶的抑制剂)的抑制〔J.P.Mattson等，斯堪的那维亚生理学报(Acta Physiol.Scand.)，146，253(1992)〕。
已知泡状腺苷三磷酸酶的特异抑制剂，例如bafilomycin A1，能抑制破骨细胞培养物中的骨吸收作用〔K.Sundquist等，生物化学与生物物理研究快报(Biochem.Biophys.Res.Commun.)168，309-313(1990)〕。膜泡囊中的质子传递和v-腺苷三磷酸酶活性的抑制由严重缺钙的下蛋母鸡制备骨微粒体粗品由严重缺钙至少15天的下蛋母鸡的胫骨和股骨得到的髓骨制成囊泡。简单地说，将骨的片断用一只24号的解剖刀破碎，悬浮在40ml分离培养基(0.2M蔗糖、50mM KCl、10mM Hepes、1mMEGTA、2mM二硫苏糖醇，pH7.4)中，经过一只100μm孔径的尼龙筛过滤。整个步骤在4℃下进行。在波特氏匀浆器(20冲程)中于40ml分离培养基内均化后进行初步离心(6500g最大×20分钟)以除去线粒体和溶酶体。将上层清液在100,000×g最大下离心1小时，沉淀收集在1ml分离培养基中，分成200μl的小份立即在液氮中冷冻并在-80℃下贮存。蛋白质含量用Biorad比色盒按Bradford的方法测定〔M.Bradford，分析生物化学(Anal.Biochem.)，72.248(1976)〕。对于质子传递测定，使用5-10μl膜。破骨细胞膜的纯化将以上制备的1ml微粒体囊泡粗品施加在由3.5ml的15％、30％和45％(w/w)蔗糖/分离培养基组成的蔗糖阶式梯度的顶部(每管约0.2ml)，在280,000g最大下离心2小时(SW 41 Ti转子)。在离心后，收集30-45％蔗糖界面，在分离培养中将其稀释约20倍，在100,000gmax下沉降1小时(SW 28转子)。将沉淀物再悬浮于1ml分离培养基中，分成小份并于液氮中冷冻，使用前在-80℃下贮存。人肾膜按照文献中关于牛肾报告的方法〔S.Gluck，生物化学杂志(J.Biol.Chem)，265，21957(1990)〕，由手术后立即冷冻的人肾的皮质得到。膜囊泡中的质子传递用以下方法半定量地测定在1ml含0.2M蔗糖、50mM KCl、10mM Hepes pH7.4、1mM ATP.Na2、1mM CDTA、5μM缬氨霉素和4μM吖啶橙的缓冲液中加入5-20μl膜泡囊后，测定吖啶橙的荧光猝灭的初始斜率(激发光490nm，发射光530nm)。加入5mMMgSO4开始反应，结果表示成两个对照样平均值的百分数。对bafilomycin敏感的腺苷三磷酸酶活性的抑制在纯化过的膜囊泡中于bafilomycin Al存在或不存在下通过测量在96孔板中于37℃下培养30分钟期间无机磷酸盐(Pi)的释放来分析。反应介质中含1mM ATP、10mM Hepes-Tris pH8、50mMKCl、5μM缬氨霉素、5μM尼日利亚霉素、1mM CDTA-Tris、100μM钼酸铵、0.2M蔗糖和膜(20μg蛋白质/ml)反应用MgSO4(8臂移液管)引发，30分钟后通过加入4倍体积按Chan方法制备的孔雀石绿试剂(96臂移液管)使反应停止〔分析生物化学(Anal.Biochem.)，157，375(1986)〕。2分钟后用微量板读数器测定650nm下的吸收。结果表示成μmol(Pi)×mg蛋白质-1×小时-1，对各实验均用三次重复试验的平均值±标准平均偏差(mean±sem)表示。药理学数据鸡破骨细胞中bafilomycin敏感性腺苷三磷酸酶的抑制本发明化合物在18-1000nM范围内能抑制鸡破骨细胞内bafilomycin敏感性腺苷三磷酸酶。具体数据是
骨吸收的抑制体外试验1)解聚的鼠破骨细胞的骨吸收作用可以按文献中已叙述的方法测定〔T.J.Chambers等，内分泌学(Endocrinology)，1985，116，234〕。简言之，将新生鼠长骨的破骨细胞机械解聚到Hepes缓冲的培养基199(Flow公司，英国)中。悬浮液用一只吸管搅动，令较大的碎片沉降30秒。随后将细胞加到含有骨切片(每次测定12mm2)的多孔平皿中。在37℃下15分钟后取出各个骨切片，在培养基199中洗，放在96孔板的各孔中。将其在总体积2ml的培养基中于药物存在或不存在下培养24小时，培养基内含有在Hanks缓冲的MEM中的10％胎牛血清。用共焦激光扫描显微镜(CLSM)定量测定破骨细胞的数目和骨吸收将骨切片用2％戊二醛/0.2M二甲基胂酸盐缓冲液固定，将各骨切片上的破骨细胞对耐酒石酸的酸性磷酸酶染色。在计数了大的多核化的染成红色的细胞之后，将骨切片浸在10％次氯酸钠中5分钟以除掉细胞，在蒸馏水中洗，用金溅涂。随后用CLSM检查各骨切片的整个表面。记录破骨细胞陷凹部位的数目和尺寸、平面面积和被吸收的骨的体积。将结果表示成每个骨切片的平均凹陷数目、每个破骨细胞的平均凹陷数、各破骨细胞的平均面积或平均体积。
2)人破骨细胞的骨吸收作用可以利用改良的上述方法测定。简言之，将得自人巨细胞肿瘤的人破骨细胞利用Pan Human HLA II抗体与Dynal磁珠相结合通过阴性选择来纯化。将破骨细胞接种在Hepes缓冲介质199(Flow，英国)中的牛骨切片上。30分钟后，将骨切片转移到一只24孔的多孔板中(每孔4片)，每孔中含2ml由10％的胎牛血清/D-MEN组成的培养基。一小时后，加入载液(DMSO)或不同浓度的试验化合物的DMSO溶液，继续培养47小时。然后按照上述对鼠破骨细胞测定的方法进行骨切片的处理与分析。
3)对PTH激发的45Ca2+自预标记的胎鼠长骨中释放的抑制作用此测定按Raisz所述测定(临床研究杂志(J.Clin.Invest)，44.103-116，1965)。交配期的Sprague-Dawley鼠在妊娠的第18天皮下注射200mCi的45CaCl2。在第2天，无菌地取出胎儿，切下桡骨和尺骨，去掉周围的软组织和软骨端，然后在含1mg/ml BSA的BGJ培养基中于37℃下培养24小时。将骨转移到含试验化合物(0.1-50μM)的有或没有PTH(12nM)的新鲜培养基中，再培养48小时。收集各培养基，萃取该骨，用闪烁计数法测定钙释放的平均百分数。结果报道成与只用PTH培养时释放出的钙量相比较时的抑制百分数。体内试验防止类视色素诱发的高钙血症采用Trechsel等所述的方法(临床研究杂志，80，1679-1686，1987)。简言之，将重160-200g的雄性Sprague-Dawley鼠(每组10只)进行甲状腺甲状旁腺切除，并皮下注射类视色素Ro 13-6298(30μg/天)三天，发现血清钙显著增加4-5mg/100ml。为抑制此效应，将鼠同时按0.1-100mg/kg的剂量用试验化合物静脉注射或口服给药，或服用载液，在治疗前和最后给药的一天之后按照上述测定血钙。结果与服用载液的动物相比表示成抑制％。在由卵巢切除术和石膏固定术引起的骨质疏松中防止骨损失将10只一组的7组Sprague-Dawley鼠(200g)进行卵巢切除和右后肢坐骨神经切除，同时对一组按Hayashi等所述方法(骨骼(Bone)，10，25-28，1989)进行假手术。在手术后6-12周显示出小梁骨的损失量达到稳定状态。在6周时间内，作过手术的动物接受试验化合物(0.1-100mg/kg，口服或皮内)或载液。在此处理期结束时，将动物宰杀，取下后肢的胫骨和股骨。测定胫骨的湿重和干重，还测定密度(水置换)和灰分(总重量，钙和磷含量)。股骨在10％福尔马林中固定，在5％甲酸中脱矿物质，切下干骺远端的冠状中干和纵截面，并用苏木精和曙红染色。用半自动图象分析仪(Immagini& Computer，Milan，意大利)鉴定组织形态。测定所有动物骺骨远端中继发性海绵体里小梁骨面积的％(这是由离骺生长板1mm处到离中干4mm处的小梁骨，总面积5mm2)以及小梁的数目(根据Parfitt等，骨与矿物质研究杂志(J.Bone Min.Res.)，2595(1987))。在中干内，测定髓部、皮质(CA)和总(TA)横截面积，由公式CI＝CA/TA确定皮质指数(CI)。防止卵巢切除的成年鼠的骨损失所用的方法以Wronsky等人所述〔骨与矿物质研究(J.Bone Min.Res.)6，387(1991)〕为根据。手术后发生的骨损失，主要是疏质骨损失，用以下方法监测，双发射X射线吸收光度法(DEXA)测定长骨的骨矿物质密度(BMD)，和HPLC测定骨胶原裂解产物，如交联的吡啶啉残余物(PYD)、脱氧吡啶啉和赖氨酸糖苷(即，半乳糖基羧基赖氨酸(GHYL)和葡糖基半乳糖基羟基赖氨酸(GGHYL))，的尿中含量。使用每组7-10只约90天龄的雌性Sprague-Dawley鼠，重约200-250g。将鼠用戊巴比妥纳麻醉(35mg/kg，静脉内)，剖腹并除去双侧卵巢。将伤口适当地消毒和缝合。一组鼠进行假手术。在4周实验时间内，手术后的动物接受在适当载液中的试验化合物(0.1-100mg/kg，口服与皮内)或只接受载液。在手术前与手术后的2、4、8、11、15、18、22和25天收集24小时尿样测定PYD、DPD、GHYL和GGHYL。将各份尿样冷冻并在进行HPLC分析之前于-20℃下贮存。
在实验之前和实验结束时，使用轻度麻醉的动物在体内评价左侧远端股骨和近端胫骨的干骺端矿物质密度。结果与用载液处理的动物相比表示成骨损失防止％，使用以下公式，其中BMD代表在实验结束时的骨矿物质密度，用卵巢切除前基线的百分数表示
实施例I化合物的生物学数据人破骨细胞吸收试验 IC50＝3.4nM人肾腺苷三磷酸酶试验 IC50＝363nM以10mg/kg口服时对切除卵巢的成鼠骨损失的保护作用 76％其它治疗用途本发明化合物对于本文所述其它用途的活性可以根据收编在本文中的以下方法测定1.抗肿瘤活性可以根据国际专利申请93/18652中公开的方法测定，特别是在M.R.Boyd等的“NCI临床前抗肿瘤药物发现筛选的状况；肿瘤学原理与实践”，3(10)，1989年10月(Lippincott)中采用的筛选方法，实验细节和参考书目。
2.抗病毒活性可以采用H.Ochiai等在抗病毒研究(AntiviralResearch)，27，425-430(1995)或C.Serra等在药理学研究(Pharmacol.Res)，29.359(1994)中报道的体外试验法测定。抗HIV活性可以按文献中报道的方法，例如S.Velasquez等在医药化学杂志(J.Med.Chem.)，38，1641-1649(1995)中报道的方法试验。
3.抗溃疡活性可以用文献中报道的方法体内试验，例如C.J.Pfeiffer在“消化性溃疡”(Peptic Ulcer)(C.J.Pfeiffer编，Munksgaard Publ.，Copenaghen，1971)中所述。抑制由幽门螺旋杆菌诱发的空泡化的体外试验在例如E.Papini等的欧洲微生物学学会微生物学快报(FEMS Microbiol Lett)，113，155-160(1993)中有说明。
4.在治疗早老性痴呆症方面的用途可以用模型体外试验，例如在J.Knops等于生物化学杂志(J.Biol.Chem.)，270.2419-2422(1995)中所述的对amiloyd-β的产生的抑制作用；或者用模型体内试验，例如D.Games等在自然(Nature)，373.523-527(1995)中报道的超量表达人APP的转基因小鼠模型。
5.免疫抑制剂活性可以如文献中报道的试验，例如M.K.Hu等，医药化学杂志(J.Med.Chem.)，38，4164-4170(1995)。
6.抗脂血症活性可如文献中所述试验，例如E.A.L.Biessen等，医药化学杂志(J.Med.Chem.)，38，1846-1852(1995)。抗动脉粥样硬化活性可以用动脉粥样硬化动物模型试验，例如动脉粥样硬化兔模型，这在文献中有报道，如R.J.Lee等，药理学与实验治疗杂志(J.Pharm.Exp.Ther.)，184.105-112(1973)。
7.血管抑制活性可以用文献中报道的方法试验，例如T.Ishii等在抗生素杂志(J.Antibiot)，48，12(1995)中所述。
权利要求
1.一种人破骨细胞生物活性选择性抑制剂，条件是这种抑制剂不包括WO 96/21644中公开的任何具体实施例。
2.根据权利要求1所述的抑制剂，它对于位于人破骨细胞皱状边界处的泡状H+-腺苷三磷酸酶具有选择性。
3.根据权利要求1或2所述的抑制剂，它与位于人破骨细胞皱状边界处的泡状H+-腺苷三磷酸酶的16kDa亚基或116kDa亚基特异地相互作用。
4.式(I)化合物或其盐或溶剂化物
其中Ra代表基团R5，它是氢、烷基或任选取代的芳基和Rb代表以下的式(a)基团
其中X代表羟基或烷氧基，其中烷基可以是取代的或未取代的，或者X代表基团NRsRt，其中Rs和Rt各自独立地代表氢、烷基、取代的烷基、任选取代的链烯基、任选取代的芳基、任选取代的芳烷基、任选取代的杂环基或任选取代的杂环基烷基，或者Rs和Rt与它们所连接的氮一起形成一个杂环基；R1代表烷基或者取代或未取代的芳基；和R2、R3和R4各自独立地代表氢、烷基、芳基或取代的芳基；R6和R7各自独立地代表氢、羟基、氨基、烷氧基、任选取代的芳氧基、任选取代的苄氧基、烷氨基、二烷基氨基、卤素、三氟甲基、三氟甲氧基、硝基、烷基、羧基、烷氧羰基、氨基甲酰基、烷基氨基甲酰基，或者R6与R7一起代表亚甲二氧基、羰基二氧基或羰基二氨基；和R8代表氢、羟基、烷酰基、烷基、氨基烷基、羟烷基、羧基烷基、烷氧羰基烷基、氨基甲酰基或氨基磺酰基；条件是，这种抑制剂不包括WO 96/21644中公开的任何具体实施例。
5.根据权利要求4所述的化合物，其中R1代表甲基。
6.根据权利要求4或5所述的化合物，其中R2、R3和R4各自独立地代表氢、烷基或苯基。
7.根据权利要求4至6中任一项所述的化合物，其中R5是氢。
8.根据权利要求4至7中任一项所述的化合物，其中R6和R7是氢、卤素、三氟甲基和烷氧基。
9.根据权利要求4至8中任一项所述的化合物，其中R6是5-氯，以及R7是6-氯。
10.根据权利要求4至9中任一项所述的化合物，其中R8代表氢。
11.根据权利要求4至10中任一项所述的化合物，其中X代表NRsRt。
12.根据权利要求11所述的化合物，其中Rs和Rt各自独立地代表氢、烷基、取代的烷基、任选取代的链烯基、任选取代的芳基、任选取代的芳烷基、任选取代的杂环基或任选取代的杂环基烷基。
13.根据权利要求11或12所述的化合物，其中Rs和Rt一起代表一个杂环基。
14.根据权利要求13所述的化合物，其中Rs和Rt一起代表一个式(H1)基团
其中Z1是N或CX5、X5选自氢、烷基、烷氧基、烷基羰基、芳基、芳氧基或芳基羰基，以及Z2、X3和X4各自独立地选自氢、烷基、芳基、氰基、氨基、杂环基氧基、烷氧基、羰基烷氧基、羧基烷氧基、氨基烷氧基、氨基烷氧基、氨基链烯基氨基(尤其是氨基亚甲基氨基)和烷酰氨基。
15.根据权利要求13所述的化合物，其中Rs和Rt一起代表式(H2)基团
其中X6、X7、X8、X9、X10、X11、X12和X13各自独立地选自氢、羟基、烷基(优选C1-6烷基)、环烷基(包括螺接)、一或多羟基烷基、烷氧基烷基、羟基烷氧基烷基、烷酰基、烷氧羰基、氨基烷基(任选在氮上烷基化或酰基化)；或者X6与X12和X8与X10中之一代表一个C2-4亚烷基链，以及其余的可变基团X7、X13、X9和X11各自独立地代表氢、羟基、烷基(优选C1-6烷基)、环烷基(优选螺接)、一或多羟基烷基、烷氧烷基、羟基烷氧烷基、烷酰基、烷氧羰基、氨基烷基(任选地在氮上烷基化或酰基化)；以及X14代表氢或低级烷基，一或多羟基烷基，一或二氨基烷基，氨基羰基，烷基、羧基烷基，烷氧羰基烷基、芳基、杂环基、酰基、氨基甲酰基、烷基氨基(氰基亚胺酰基)、氨基烷酰基、羟基烷酰基；X6、X7、X12和X13各自代表氢。
16.根据权利要求15所述的化合物，其中X8和X9各自独立地代表氢或烷基。
17.根据权利要求15所述的化合物，其中X10和X11各自独立地代表氢或烷基。
18.根据权利要求15所述的化合物，其中X14代表烷基。
19.根据权利要求15所述的化合物，其中X8、X9、X10和X11各自独立地代表甲基，以及X6、X7、X12和X13各自代表氢。
20.根据权利要求1所述的化合物，其中R1是C1-6烷基，R2、R3、R4和R8是氢，R6是5-氯，R7是6-氯，以及X是基团NRsRt，其中Rt是氢，和Rs是式(f)基团或者式(H1)或(H2)基团。
21.根据权利要求1所述的化合物，该化合物选自实施例1-79中的任何一个，或其盐或其溶剂化物。
22.根据权利要求1所述的化合物，该化合物选自实施例31、32、34、35、47、51、55、56、59、68和74，或其盐或其溶剂化物。
23.制备式(I)化合物或其盐或其溶剂化物的方法，该方法包括使式(II)化合物
其中R2、R3、R4、R6、R7和R8的定义与对式(I)的定义相同，与一种能将下式基团
转化成上面定义的式(a)基团的试剂反应，随后若有必要，进行以下的一个或多个反应(1)将一种式(I)化合物转化成另一种式(I)化合物；(2)除掉任何保护基团；(3)制备所形成的化合物的盐或溶剂化物。
24.一种药物组合物，其中含有权利要求1的人破骨细胞药理活性的选择性抑制剂及其可药用的载体。
25.权利要求1的哺乳动物破骨细胞抑制剂作为活性治疗物质使用。
26.权利要求1的人破骨细胞生物活性选择性抑制剂在制造治疗和/或预防与哺乳动物中破骨细胞活性过强有关疾病的药物方面的用途。
27.一种治疗和/或预防与哺乳动物中破骨细胞活性过强有关的疾病的方法，该方法包括服用药学上有效和无毒数量的权利要求1的哺乳动物破骨细胞选择性抑制剂。
全文摘要
一种式(Ⅰ)化合物或其盐或溶剂化物,制备该化合物的方法,含有该化合物的药物组合物及该化合物在医药中的应用,其中R
文档编号C07D401/00GK1241184SQ97197563
公开日2000年1月12日 申请日期1997年7月3日 优先权日1997年7月3日
发明者C·法里纳, S·加利亚尔迪, G·M·M·G·纳德勒 申请人:史密丝克莱恩比彻姆股份公司, 史密斯克莱恩比彻姆药物实验室