专利名称：D－果糖－1,6－二磷酸钠镁其制备方法及其用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及新的化合物D-果糖-1,6-二磷酸钠镁，其制备方法以及这种新化合物作为有效成份的治疗心肌缺血药和抗高血压药的用途。
结构式为Ⅱ的D-果糖-1,6-二磷酸(D-Fructose-1,6-DiphosphoricAcid)，为体内糖代谢的重要中间体，并具有调节糖代谢中若干酶的作用。D-果糖-1,6-二磷酸能改善组织缺血缺氧条件下的能量代谢，即FDP可为组织细胞提供能源，又具有代谢调控剂的作用，激活若干酶，缓解细胞糖代谢紊乱。但式Ⅱ本身很不稳定，实现其药用价值困难。已知结构式为Ⅲ的D-果糖-1,6-二磷酸三钠盐(D-Fructose-1,6-diphosphate trisodium Salt)，具有治疗心肌缺血等缺血缺氧性疾病的作用，并已作为药品应用(Diana Massimo,Ger Offen DE 3446927,1985)。
Mg2+是机体内必要的重要离子，是体内许多酶保持活性，不可缺少的一种辅酶，即Mg2+对组织细胞功能有调节和参与作用。其体内功能可对中枢神经系统产生镇静，抗惊厥作用；松驰血管平滑肌而降压，扩张冠脉；减少儿茶酚胺释放治疗心律失常；防止洋地黄中毒等。而目前临床所补充的Mg2+即硫酸镁，不能为机体提供能源，以致在病变过程中组织细胞可因能源不足产生功能紊乱。
目前除已知硫酸镁作为药品在治疗急性心肌梗塞，心肌缺血已在临床应用外，未见有文献未报道过D-果糖-1,6-二磷酸钠镁这种化合物，及其在治疗心肌缺血和抗高血压药中的应用。
现有技术中已有的制备结构式Ⅱ的化合物的D-果糖-1,6-二磷酸的方法，如芬兰赫尔辛基大学的Matti Leisala在《Acta Chemica Scandinavica》B28 1974年公开的采用以葡萄糖，磷酸盐和啤酒酵母为主要原料，经酶促连续磷酸化反应得到结构式Ⅱ的化合物的D-果糖-1,6-二磷酸的方法。
本发明的目的一是提供新型治疗心肌缺血和抗高血压作用的化合物D-果糖-1,6-二磷酸钠镁；二是提供制备该化合物作为药品的工业生产的简便方法，三是该化合物作为有效成份的治疗心肌缺血药和抗高血压药的用途。
本发明提供的新型治疗心肌缺血和抗高血压作用的化合物D-果糖-1,6-二磷酸钠镁，其特征是
本发明提供的制备结构式Ⅰ的化合物的方法采用的是这样的步骤即首先将由葡萄糖、磷酸盐和啤酒酵母经酶促连续磷酸化反应得到的发酵液制备的结构式果糖二磷酸，与氧化镁或碱式镁盐反应，再用氢氧化钠与之中和，然后加入乙醇中，搅拌、离心，待沉淀产生后再用乙醇对其重结晶，最后将结晶体进行干燥后即得结构式Ⅰ的化合物。
本发明的上述方法可以通过附图
及实施例进一步说明。
附图为本发明实施例的工艺流程图。
首先制备发酵液，1升发酵液的制备包括5-10％的葡萄糖，磷酸盐6-8％，啤酒酵母400-600克，用氢氧化钠调整溶液的pH值至5-6，在40℃的温度下，经过四小时的发酵即得。将1.5升发酵液离心，弃去酵母。用20％三氯醋酸沉淀以除去蛋白质，离心，取上清液加入氨水调节PH值至8-9，有沉淀生成。离心弃去沉淀。在搅拌下加入约200ml50％CaCl2溶液，即有大量沉淀生成，得果糖二磷酸钙粗制品；将粗制品置于200ml蒸馏水中搅拌，缓慢滴加1M盐酸溶液至沉淀溶解；离心，弃去不溶物。上清液中加入氢氧化钠溶液至PH值8.0，离心，收集沉淀。重复操作一次。减压过滤，收集沉淀于真空干燥器中干燥，干燥后得到果糖二磷酸钙白色粉末，约重40g。按发酵液中果糖二磷酸计算收率约为50％。取纯化的果糖二磷酸钙50g，置于250ml蒸馏水中搅拌，加入强酸性阳离子交换树脂使果糖二磷酸钙脱钙，转化成果糖二磷酸Ⅱ，用氧化镁或碱式镁盐反应后，以氢氧化钠中和，加入乙醇中，待反应完毕，离心，沉淀用乙醇溶液重结晶，干燥后可得40克结构式Ⅰ的化合物D-果糖-1,6-二磷酸钠镁。产品用高度专一性的酶法测定果糖二磷酸Ⅱ的含量。其中酶试剂采用甘油磷酸脱氢酶一磷酸丙糖异构酶混悬液(GDH/TIM)，还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)，醛缩酶(Aldolose)。用化学法测定金属离子含量。结果是果糖二磷酸Ⅱ71.0％，镁6.2％，钠5.4％，结晶水17.4％。按C6H10O12P2Na2Mg分子式计算，接近理论值。
本发明提供的结构式Ⅰ的化合物既可通过其阴离子给病变组织或器官细胞提供能源，又可通过Mg2+调节或参与其生理生化功能，两者的协同作用能达到防治组织或器官细胞功能紊乱及其细胞病理性损害，有益于组织恢复其功能。
本发明化合物，毒性小，制备方法简单。动物药效学试验证明，经拮抗垂体所至冠脉血管收缩模型证实，能改善冠脉缺血缺氧所致心肌损伤，有明显抗心肌缺血作用。本发明化合物能明提高小鼠常压下耐缺氧能力。此外经大鼠试验证明，本发明化合物有明显降压作用。
权利要求
1．一种化合物D-果糖-1,6-二磷酸钠镁(Sodium Magnasium-D-Fructose-1,6-diphosphate)I，其特征是具有如下的结构式
2．一种制备权利要求1所述结构式Ⅰ化合物的方法，其特征在于采用这样的步骤即首先将由葡萄糖、磷酸盐和啤酒酵母经酶促连续磷酸化反应得到的发酵液制备的果糖二磷酸，与氧化镁或碱式镁盐反应，再用氢氧化钠与之中和，然后加入乙醇中，搅拌、离心，待沉淀产生后再用乙醇对其重结晶，最后将结晶体进行干燥后即得结构式Ⅰ的化合物。
3．权利要求1所述的结构式Ⅰ的化合物D-果糖-1,6-二磷酸钠镁在治疗心肌缺血药和抗高血压药中的应用。
全文摘要
本发明涉及新的结构式Ⅰ的化合物D－果糖－1,6－二磷酸钠镁,及其制备方法,以及这种新化合物作为有效成份在治疗心肌缺血药和高血压药中的应用。
文档编号C07H11/00GK1211577SQ98112218
公开日1999年3月24日 申请日期1998年8月28日 优先权日1998年8月28日
发明者王驰, 徐昌喜, 周远大, 余惠媛, 沈佩娟 申请人:重庆医科大学, 重庆啤酒(集团)有限责任公司