专利名称：榄香烯的羟丙基－β－环糊精包合物及其制剂和制备方法
技术领域：
本发明涉及榄香烯的羟丙基-β-环糊精包合物及制剂和制备方法，该包和物可用来注射、口服、外用，具有抗病毒、抗癌的作用。
背景技术：
榄香烯是自姜科植物蓬莪术Curcuma phaeocaulis Valeton.或广西莪术Curcuma kwangsiensis S.G.Lee et C.F.或温郁金CurcumaWenyujin Y.H.chen et C.Ling或香茅草提取的植物有效成分，英文名为Elemene，化学名为1-甲基-1-乙烯基-2，4-二异丙烯基环己烷，分子式为C15H24，榄香烯中含有多种异构体，主要有α-榄香烯、β-榄香烯、γ-榄香烯、δ-榄香烯，以及含有姜黄烯、丁香烯，榄香烯具有抗癌、抗病毒等作用，以榄香烯制成的乳注射剂已广泛应用于临床上，临床应用中取得了较好的疗效。榄香烯的制备方法已有较多文献报道，一般从上述植物中提取精制，或从莪术油中直接分离，如中国专利CN1060038和中国专利CN1200266中都有描述。
榄香烯为脂溶性成分，难溶于水，临床上一般制成乳剂或加有助溶剂的注射液应用，如已经上市的按中国专利CN1060038方法制备的榄香烯乳注射剂，该制剂稳定性较差，易分层，颗粒大，给临床应用带来潜在的危险。也有一些文献报道采用一些表面活性剂助溶，如吐温等。在中国专利CN1076613A中描述采用聚氧乙烯甘油三蓖麻油酸脂35助溶制备成注射液，采用这些表面活性剂助溶制备注射液通常具有刺激性大、不稳定、溶血、易过敏等弱点，限制了榄香烯的应用。曾有文献报道(王丽君，中草药2001.4.314.316；陈星灿，中草药1990-8 11-18)，采用β-环糊精，对含有榄香烯的莪术油进行包合，取得了成功，包合后的莪术油包合物可溶于水，稳定性提高，并提高了生物利用度，但β-环糊精有溶血反应，不易做注射剂。另外在中国专利申请02109680.5也曾描述莪术油可被羟丙基-β-环糊精包合，形成的包合物极易溶于水。这些文献和专利均未说明是否包合榄香烯，检索国内外其他文献及专利，未发现有关于榄香烯采用羟丙基-β-环糊精对榄香烯进行包合的专利及文献。
发明内容
本发明的目的是提供一种榄香烯的羟丙基-β-环糊精包合物及冻干粉针制剂和制备方法以及其他制剂制备方法。该方法利用环糊精包合作用，将榄香烯包合，形成稳定的包合物，使其易溶于水。
本发明中的榄香烯可以是符合中国西药质量标准WS-048(X-040)-96的β-榄香烯、γ-榄香烯、δ-榄香烯混合物，可以是α-榄香烯、β-榄香烯、γ-榄香烯、δ-榄香烯及姜黄烯、丁香烯等的混合物，也可以是榄香烯单体化合物，或α-榄香烯，或β-榄香烯，或γ-榄香烯，或δ-榄香烯，或姜黄烯，或丁香烯。
羟丙基-β-环糊精(HPCD)为β-环糊精的衍生物，具有筒状分子结构，分子量为1540，极易溶于水，包合量大，无溶血反应，毒性低，可应用于注射剂。由于榄香烯为具有较小分子量的环状分子，分析羟丙基-β-环糊精容易将其包合。经试验，榄香烯与羟丙基-β-环糊精(HPCD)按一定的重量比包合后，溶解度可达到10％以上，由不溶于水达到易溶于水，稳定性也有较大提高。经冷冻干燥后，由液体状态变成固体状态。
本发明的目的是通过如下技术方案实现的它是由下述原料按重量比组成榄香烯∶羟丙基-β-环糊精＝1∶1-100本发明的制备方法为选择符合中国西药质量标准WS-048(X-040)-96的榄香烯或榄香烯单体，将按上述重量比量的榄香烯溶于适量的有机溶媒中，一般为甲醇、乙醇、丙酮等，加入量(榄香烯或榄香烯单体的重量有机溶媒的体积)约为1∶1-5或更多范围内；将按上述重量比的羟丙基-β-环糊精(HPCD)溶于蒸馏水中，水加入量按HPCD计算(HPCD的重量∶水的体积)，在1∶5-50范围内；将含HPCD的水溶液强烈搅拌，缓慢滴加榄香烯溶液，全部加完后，继续搅拌0.5-24小时，在洁净度百级车间中，使用0.45μm或0.22μm微孔滤膜过滤，滤液冷冻干燥，得疏松白色粉末，即为榄香烯的羟丙基-β-环糊精包合物。得到的包合物也可以采用乙醚洗涤，以除掉未包合的榄香烯。
本发明的包合物也可以采用其它方法制备，如超声波法，即将上述含榄香烯溶液加到HPCD溶液后，置于超声波发生器中，如超声波清洗机，振荡机等中，进行超声振荡代替上述搅拌，也可得到包合物。或采用研磨法，即将榄香烯溶液加入HPCD中，加入适量水研均，低温干燥得包合物。其干燥方法，也可以采用喷雾干燥方法制备。
本发明中的包合物中榄香烯与HPCD重量比为1∶1-100，其中以1∶2-5比例溶解度较大，包合率较高，含量最高，羟丙基-β-环糊精用量最少。而两者重量比为1∶1时，即有包合物形成，其中以1∶5包合率、含量最为适宜，包合率可达95％以上，含量为19％。
按本发明得到的包合物特征为含有榄香烯和羟丙基-β-环糊精化学成分，且易溶于水。其薄层色谱图谱，包括榄香烯，榄香烯包合物醇提取物，榄香烯包和物醚提取物样品，经展开后斑点显示，榄香烯与榄香烯包和物醇提取物斑点(化学成分)完全一致，而榄香烯包和物醚提取物未显示上述斑点成分，说明榄香烯与HPCD形成了包合物，且包合物中含有榄香烯所有成分；其红外光谱(IR谱)榄香烯包合物IR谱不同于羟丙基-β-环糊精及榄香烯和榄香烯与HPCD混和物IR谱；其DSC差热扫描图谱，榄香烯的羟丙基-β-环糊精包合物与榄香烯的HPCD混和物和榄香烯及HPCD明显不同；相溶解度法证实，随着HPCD浓度提高，榄香烯溶解度增大。
本发明的包合物，在百级净化车间，经过超滤除热源和无菌过滤(0.22μm)，经过冷冻干燥后，可制成冻干粉针。本发明的包合物，可加入适量的辅料，制备成栓剂，软膏剂和滴眼剂，片剂，胶囊等。本发明的包合物中羟丙基-β-环糊精可以采用β-环糊精替代，制成口服的片剂、胶囊、栓剂等。
本发明优点在于提供了一种易溶于水的榄香烯的羟丙基-β-环糊精包和物，同时可提高其稳定性，提高其生物利用度，提供了可注射用的榄香烯及冻干粉针制备方法。其制剂极易溶于水，稳定性好，没有溶血反应，无刺激，不过敏，在临床上使用很方便。
本发明中的包合物主要通过如下方法证明，其一采用薄层色谱法测定其包合物是否形成。其方法为取榄香烯乙醇溶液(1→1ml)，榄香烯包合物乙醇溶液(1→1ml)，榄香烯包合物石油醚溶液(1→3ml)，分别点样1-5μl，在硅胶G-CMC板上展开，展开剂为石油醚-丙酮-乙酸乙酯(94∶5∶1)，显色剂为5％香草醛冰醋酸-高氯酸(5∶1)溶液，结果，薄层色谱图显示榄香烯与榄香烯包合物乙醇溶液斑点完全一致，而榄香烯石油醚溶液无斑点，说明榄香烯HPCD形成了包合物。其二对榄香烯包合物，榄香烯与HPCD混和物和HPCD，榄香烯做了红外光谱(IR谱)，采用溴化钾压片法，榄香烯采用涂膜法，用聚苯乙烯薄膜校正，进行上述IR谱比较，发现榄香烯包合物IR谱不同于榄香烯与HPCD混和物IR谱，说明形成了榄香烯HPCD的包合物。其三对上述样品做了差热扫描分析DSC，发现榄香烯包合物DSC谱不同于榄香烯与HPCD混和物DSC谱，判断形成了包合物。其四，采用相溶解度法测定其包合物形成，其方法为取0.1g榄香烯，加入至不同浓度的HPCD溶液中，搅拌24小时，0.45μm滤膜过滤，石油醚洗去未包合油类，采用GC气相色谱法，以β-榄香烯为对照品，测定其浓度，以β-榄香烯浓度对HPCD浓度做图，得溶解度曲线，曲线显示，随着HPCD的浓度加大，榄香烯浓度增高，证明形成了包合物。
榄香烯中的榄香烯含量分析测定方法采用气相色谱法，参照中国西药质量标准WS-048(X-040)-96，以β-榄香烯为对照品(中国药典对照品)，以外标法测定，其测定条件为聚乙醇20M(PEG20M)为固定相，涂布浓度为10％，shimalit W担体，60-80目，柱温135℃-140℃，理论板数按β-榄香烯峰计算不低于1000。
具体实施例方式
实施例1取榄香烯0.1g，溶于0.5ml乙醇中，取羟丙基-β-环糊精0.5g，溶于20ml注射用水中，将榄香烯乙醇溶液逐滴加入HPCD溶液中，室温磁力搅拌3小时，使用0.45μm微孔滤膜过滤冷冻，得白色疏松粉末，经薄层色谱证实，形成了榄香烯与羟丙基-β-环糊精包合物。气相色谱测定，包合率为95％。
实施例2将例1得到的包合物粉末，用乙醚洗涤，挥尽乙醚得白色包合物粉末。
实施例3其它同例1，将磁力搅拌法改为超声振荡法，室温，振荡20分钟，将包合后溶液经0.45μm微孔滤膜过滤，滤液冷冻干燥，得白色疏松粉末，经薄层色谱证实，形成了包合物，经气相色谱测定，包合率为90％。
实施例4其它同例1，将磁力搅拌法改为研磨法，研均后，乙醚洗，挥尽乙醚，低温减压干燥，得白色粉末，经薄层色谱证实，形成了包合物，经气相色谱测定，包合率为62％。
实施例5将例1得到的滤液，进行喷雾干燥，得到包合物。
实施例6自例1，包合后溶液经0.45μm微孔滤膜过滤后，采用超滤法，用载留分子量5000-10000的滤膜超滤，除热原之后，再经0.22μm滤膜过滤除菌，得到滤液在百级净化车间无菌分装，冷冻干燥得到注射用榄香烯冻干粉针。
实施例7将例1中磁力搅拌法改为超声振蒎20分钟，其它同例6。
实施例8将例6中超滤除热原法改为活性炭法，其它同例6。
实施例9将例1中羟丙基-β-环糊精0.5g改为0.1g，其他同例1，经气相色谱测定，包合率为70％。
实施例10将例1中羟丙基-β-环糊精0.5g改为10g，其他同例1，经气相色谱测定，包合率为98，含量1.0％。
实施例11将例1得到的包合物，加入适量辅料，调节渗透压，配成滴眼剂。
实施例12将例1得到的包合物，加入适量的辅料，制成速溶舌下片剂。
实施例13将例1得到的包合物，加入适量的辅料，制成胶囊、栓剂。
实施例14将例1中羟丙基-β-环糊精替换为β-环糊精，其他同例1，制成包合物，加入适量的辅料，制成片剂、胶囊、栓剂。
权利要求
1.一种榄香烯的羟丙基-β-环糊精包合物，它是由下述原料按重量比组成榄香烯∶羟丙基-β-环糊精＝1∶1-100)；通过将溶于有机溶媒的榄香烯加入到含羟丙基-β-环糊精的水溶液中，搅拌后，经干燥形成易溶于水的包合物；所述的榄香烯可以是符合中国西药质量标准WS-048(X-040)-96的β-榄香烯、γ-榄香烯、δ-榄香烯混合物，可以是α-榄香烯、β-榄香烯、γ-榄香烯、δ-榄香烯及姜黄烯、丁香烯的混合物，也可以是榄香烯单体化合物，或α-榄香烯、或β-榄香烯、或γ-榄香烯、或δ-榄香烯、或姜黄烯、或丁香烯；所述的有机溶媒为乙醇，也可以是甲醇、丙酮。
2.按权利要求1所述的榄香烯的羟丙基-β-环糊精包合物，它是由下述原料按重量比组成榄香烯∶羟丙基-β-环糊精＝1∶2-5。
3.一种榄香烯的羟丙基-β-环糊精包合物的制备方法，它是由下述原料按重量比组成榄香烯∶羟丙基-β-环糊精＝1∶1-100；按上述重量比将榄香烯溶于1-5倍的有机溶媒中，按上述重量比将羟丙基-β-环糊精溶于5-50的蒸馏水中，将含羟丙基-β-环糊精的水溶液强烈搅拌，缓慢滴加榄香烯溶液，全部加完后，继续搅拌0.5-24小时，使用微孔滤膜过滤，滤液冷冻干燥，得疏松白色粉末，即为榄香烯的羟丙基-β-环糊精包合物。
4.按权利要求3所述的榄香烯的羟丙基-β-环糊精包合物的制备方法，也可以采用超声波法，即将上述含榄香烯溶液加到羟丙基-β-环糊精溶液后，置于超声波发生器中，进行超声振荡代替上述搅拌，也可得到包合物。
5.按权利要求3所述的榄香烯的羟丙基-β-环糊精包合物的制备方法，还可以采用研磨法，即将榄香烯溶液加入羟丙基-β-环糊精中，加入适量水研均，低温干燥得包合物。
6.按权利要求3所述的榄香烯的羟丙基-β-环糊精包合物制剂的制备方法，所述的榄香烯的羟丙基-β-环糊精包合物，包合后溶液经微孔滤膜过滤，除热原之后，再经滤膜过滤除菌，得到滤液在百级净化车间无菌分装，冷冻干燥得到注射用榄香烯冻干粉针。
7.按权利要求1或2所述的榄香烯的羟丙基-β-环糊精包合物，将所述的包合物，加入辅料，调节渗透压，配成滴眼剂。
8.按权利要求1或2所述的榄香烯的羟丙基-β-环糊精包合物，将所述的包合物，加入辅料，制成速溶舌下片剂。
9.按权利要求1或2所述的榄香烯的羟丙基-β-环糊精包合物，将所述的包合物，加入辅料，制成栓剂、胶囊。
10.按权利要求8或9所述榄香烯的羟丙基-β-环糊精包合物，羟丙基-β-环糊精可以用β-环糊精替代。
全文摘要
本发明涉及一种榄香烯的羟丙基－β－环糊精包合物及制剂和制备方法，它是由下述原料按重量比组成榄香烯∶羟丙基－β－环糊精＝1∶1－100；通过将溶于有机溶媒的榄香烯加入到含羟丙基－β－环糊精的水溶液中，经搅拌后，冷冻干燥形成易溶于水的包合物；包合后水溶液，经超滤和0.22μm微孔滤膜过滤后，冷冻干燥制成注射用冻干粉针。得到的包合物，配以其它辅料，可制成栓剂、软膏剂、片剂胶囊剂。
文档编号C08L5/00GK1508176SQ0214494
公开日2004年6月30日 申请日期2002年12月18日 优先权日2002年12月18日
发明者董英杰, 艾莉, 张乃先 申请人:沈阳市万嘉生物技术研究所