专利名称：：黄精多糖及其制备方法以及黄精多糖在制备降血糖、降血脂药物中的应用的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种黄精多糖，具体来说涉及其制备方法和医药用途。
背景技术：
：黄精别名仙人余粮、老虎姜、鸡头参等，是百合科黄精属多年生草本植物。气味平和，质地滋润，有补养肺之阴、润燥生津之功效。近年来，对黄精的活性物质研究报道不少，如黄精多糖的降血糖、延缓果蝇寿命等功能。黄精主要成分有三大类①为脂溶性的甾体皂苷类化物；②为黄酮、葱醌类化合物；③为水溶性成分一黄精多糖。黄精为常用传统中药，广泛应用于临床上，并取了较好的治疗效果。在治咳嗽、癞痒、糖尿病、脑动脉硬化头晕、抗衰老、降血脂等方面具有良好的作用。而这些作用离不开水溶性成分一黄精多糖。作为一种生物活性调节剂，黄精多糖具有极大的开发利用前景。中国专利文献CN1178799A公开了一种黄精多糖的提取方法，是将黄精用低级醇浸提、过滤，滤液加入有机沉淀，沉淀物经过过滤烘干后得黄精多糖粗品；黄精多糖粗品再用弱碱阴离子交换树脂和聚丙烯酰胺凝胶进行三次层析，再经浓縮、冻干得黄精多糖精品。这种制备方法工艺繁琐，设备复杂，处理时间长，得率低，成本高，不适合产业化生产。中国专利文献CN1363611A公开了一种黄精多糖的提取方法，是先用水煮提取，离心，上清液减压浓縮，再用乙醇醇沉，沉淀物水洗，再用乙醇醇沉，沉淀物用乙醇洗涤后，再真空干燥粉碎。此种方法提取的黄精多糖纯度不高，杂质较多，影响黄精多糖的药用效果。
发明内容本发明的第一个目的在于提供一种黄精多糖。本发明的第二个目的还在于提供一种黄精多糖新的制备方法。本发明的第三个目的在于提供本发明涉及的黄精多糖的新的医药用途。本发明第一个目的提供的黄精多糖，是从多年生的百合科草本植物黄精中提取出来的，其分子量为5000100000道尔顿，固态呈白色至灰白色，单糖组成主要为吡喃型e-D-半乳糖、D-葡萄糖和D-甘露糖°本发明的黄精多糖是由下述方法制备(1)、取黄精药材，粉碎，得黄精粉；取黄精粉，加入至少为黄精粉重量4倍量的水，进行加热提取，提取结束后降温至室温，过滤，得滤液①，药渣加入至少2倍量的水加热提取，提取结束后降温至室温，过滤，得滤液②，合并2次滤液，减压浓縮至原有滤液体积量的30%60%,过滤，过滤后得到的滤液备用；(2)、将步骤(1)中最后得到的滤液加入乙醇醇沉，静置，离心，抽滤，取滤液；(3)、将步骤(2)中抽滤得到的滤液加入乙醇醇沉，静置，离心，取沉淀物，沉淀物分别用乙醇和丙酮洗2次，减压干燥，得黄精多糖粗品；(4)、取黄精多糖粗品，加入相当于黄精多糖粗品重量至少10倍量的水溶解，抽滤，滤液用碱调pH值至9.513.5，然后再向滤液中加入季铵盐进行沉淀，静置，离心，抽滤，取滤液；(5)、将步骤(4)抽滤得到的滤液加入乙醇醇沉，静置，离心，取沉淀物；(6)、用相当步骤(5)中得到的沉淀物至少3倍量且质量浓度为5%氯化物溶液溶解，用酸调节pH值至3.05.0，静置，离心，抽滤，取滤液；(7)、向步骤(6)得到的滤液加入乙醇醇沉，静置，沉淀物分别用乙醇和丙酮洗2次，减压干燥，得黄静多糖精品。所述的步骤(4)中的季铵盐可以为十六烷基三甲铵溴化物及其氢氧化物、十六垸基吡啶、碘化N-三甲基壳聚糖季铵盐或壳聚糖羟丙基三甲基氯化铵等。所述的步骤(6)中的氯化物可以为氯化钠、氯化钾等。上述方法中所述的调pH值用的酸可以为盐酸、磷酸、拧檬酸或硫酸。所述的调pH值用的碱为氢氧化钠、氢氧化钙、氢氧化钾、碳酸氢钠或氨水。所述的步骤(1)中第一次提取的温度可以为85。C10(TC，提取时间至少为2小时。第二次提取的温度可以为85。C10(TC，提取时间至少为1小时。所述的步骤(2)中醇沉后醇的最终体积浓度可以为10%30%。所述的步骤(3)、(5)中醇沉后醇的最终体积浓度可以为40%95%。还提供了本发明的黄精多糖在制备降血糖、降血脂药物中的应用。本发明采用现代科学方法，对所述的黄精多糖进行分离、提纯，所制得的黄精多糖产品安全无毒，制备工艺简单易行，原料易得，反应条件温和，收率高，纯度好，环保，稳定性好，对制备设备及场所要求也很低，适合于大规模工业化生产。根据药理、药效学研究的结果表明，本发明所制得的黄精多糖产品对心血管系统具有明显的作用，可开发成降血糖、降血脂类药物。具体实施例方式下面通过具体实施例对本发明作进一步详细描述，以助于理解本发明的内容。实施例取黄精药材lkg，加入药材重量10倍的水量煮沸提取3h，抽滤，药渣加入8倍的水煮沸提取lh，合并2次滤液，减压浓縮至原有滤液体积量50%,抽滤，滤液加入95%(v/v,下同)乙醇至醇终浓度20%(v/v，下同)，静置，高速离心机离心，抽滤，滤液加入95%乙醇至醇终浓度70%，静置，离心，取沉淀，沉淀分别用95%乙醇和丙酮洗2次，减压干燥，得黄精多糖粗品40.34g。取黄精多糖粗品，加入相当于粗品重量25倍的水溶解，抽滤，滤液用40%(w%)NaOH调pH值至12.5，加入5%(w%)十六烷基三甲铵溴化物溶液至十六烷基三甲铵溴化物溶液终浓度为1.5%(w%)(此步骤达到了进一步纯化黄精多糖的作用)，静置，离心，抽滤，滤液加入95%乙醇至醇终浓度70%，静置，离心，取沉淀，用相当沉淀重量5倍量的5%(w%)NaCl溶液溶解，用6mol/LHC1调pH值至3.5(该步骤的作用是除掉季铵盐)，静置，离心，抽滤，滤液加入95%乙醇至醇终浓度70%，静置，离心，取沉淀，沉淀分别用95%乙醇和丙酮洗2次，减压干燥，得黄精多糖精品4.24g。取样进行含量测定，分子量测定等检测，备用。检验结果1.多糖鉴别苯酚一硫酸试剂反应(阳性)2.多糖含量91.21%(用苯酚一硫酸法测定)3.多糖分子量测定37813道尔顿(参考2005年药典二部附录VH)。4.黄精多糖单糖组分测定测得黄精多糖含有吡喃型0-D-半乳糖、D-葡萄糖、D-甘露糖，且吡喃型e-D-半乳糖、D-葡萄糖、D-甘露糖的总量为88.42%。(中国药典2005年版一部附录VID)实验例药效试验结果I、样品来源黄精多糖样品按实施例方法自制，纯度为85%以上。II、实验动物昆明种小鼠，由昆明医学院实验动物中心提供。III、试验方法与结果(一)、黄精多糖预防小鼠高脂血症的作用取昆明种小鼠若干，随机分成6组，如表1与表2。连续灌胃给药10天，空白组给予生理盐水，其他组分别给予相应的药物。以末次给药1小时后腹腔注射蛋黄乳0.5ml/25g。空白组腹腔注射0.5ml的生理盐水。20小时后眼眶取血(禁食不禁水12小时)，低温离心2500转/分钟，取上清血清测量TC和TG两项指标。表l黄精多糖预防小鼠的高胆固醇血症的作用剂量小鼠数TC平均值抑制率(g/kg)(只)(腿o1/1)生理盐水组—105.17——模型组—1010.81——黄精多糖组①0.100105.6347.92黄精多糖组②0.200105.0553.28黄精多糖组③0.300104.8155.50辛伐他汀组104.5258.19实验结果表明，剂量为0.300g/kg的黄精多糖组和辛伐他汀组作用相当，所以黄精多糖对对预防小鼠的高胆固醇血症有非常显著的效果。表2黄精多糖预防小鼠甘油三脂的作用<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>实验结果表明，剂量为0.300g/kg的黄精多糖组和辛伐他汀组作用相当，所以黄精多糖对对预防小鼠的甘油三脂有非常显著的效果。(二)、黄精多糖降低小鼠血糖的作用。取雄性昆明种小鼠若干，随机分为8组。实验前小鼠禁食12小时后，尾静脉注射70mg/kg的四氧嘧啶。4小时后尾静脉注射5.0%葡萄糖0.4ml。实验的第3天待血糖升至高峰期的时候测血糖值，选血糖值〉16.6mmo1/1的小鼠做为给药对象。各组灌胃给予相应的药物，每天一次，阳性药早晚各给药一次，连续给药七天。末次给药2小时后测各组实验小鼠的血糖值。表3黄精多糖降低小鼠血糖的作用<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>与空白对照组比较P〈0.01实验结果表明模型和空白比较有显著性差异(P〈0.01)。各个给药组和模型组比较统计学上有显著性差异，其中黄精多糖组③的降血糖效果最好。试验结果表明黄精多糖具有显著的降低小鼠血糖的作用。权利要求1、一种黄精多糖，是从多年生的百合科草本植物黄精中提取出来的，其特征在于其分子量为5000～100000道尔顿，固态呈白色至灰白色，单糖组成主要为吡喃型β-D-半乳糖、D-葡萄糖和D-甘露糖。2、一种黄精多糖的制备方法，依次包括如下过程(1)、取黄精药材，粉碎，得黄精粉；取黄精粉，加入至少为黄精粉的重量4倍量的水，加热提取，提取结束后降温至室温，过滤，得滤液；药渣加入至少2倍量的水加热提取，提取结束后降温至室温，过滤，得滤液；合并2次滤液，减压浓縮至原有滤液体积量的30%60%,过滤，过滤后得到的滤液备用；(2)、将步骤(1)中最后得到的滤液加入乙醇醇沉，静置，离心，抽滤，取滤液；(3)、将步骤(2)中抽滤得到的滤液加入乙醇醇沉，静置，离心，取沉淀物，沉淀物分别用乙醇和丙酮洗2次，减压干燥，得黄精多糖粗品；(4)、取黄精多糖粗品，加入相当于黄精多糖粗品重量至少10倍量的水溶解，抽滤，滤液用碱调pH值至9.513.5，然后再向滤液中加入季铵盐进行沉淀，静置，离心，抽滤，取滤液；(5)、将步骤(4)抽滤得到的滤液加入乙醇醇沉，静置，离心，取沉淀物；(6)、用相当步骤(5)中得到的沉淀物重量至少3倍且质量浓度为5%氯化物溶液溶解，用酸调节pH值至3.05.0，静置，离心，抽滤，取滤液；(7)、向步骤(6)得到的滤液加入乙醇醇沉，静置，分离出沉淀物分别用乙醇和丙酮洗2次，减压干燥，得黄静多糖精品。3、如权利要求2所述的制备方法，其特征在于所述的步骤(4)中的季铵盐为十六烷基三甲铵溴化物及其氢氧化物、十六烷基吡疲、碘化N-三甲基壳聚糖季铵盐或壳聚糖羟丙基三甲基氯化铵。4、如权利要求2或3所述的制备方法，其特征在于所述的步骤(6)中的氯化物为氯化钠或氯化钾。5、如权利要求2或3所述的制备方法，其特征在于所述的调pH值用的酸为盐酸、磷酸、柠檬酸或硫酸。6、如权利要求2或3所述的制备方法，其特征在于所述的调pH值用的碱为氢氧化钠、氢氧化钙、氢氧化钾、碳酸氢钠或氨水。7、如权利要求2或3所述的制备方法，其特征在于所述的步骤(1)中第一次提取的温度为85°C100°C，提取时间至少为2小时；第二次提取的温度为85。C10(TC，提取时间至少为l小时。8、如权利要求2或3所述的制备方法，其特征在于所述的步骤(2)中醇沉后醇的最终体积浓度为10%30%。9、如权利要求2或3所述的制备方法，其特征在于所述的步骤(3)、(5)中醇沉后醇的最终体积浓度为40%95%。10、一种权利要求1所述的黄精多糖在制备降血糖、降血脂药物中的应用。全文摘要本发明提供一种黄精多糖及其制备方法，黄精多糖是从多年生的百合科草本植物黄精中提取出来的，其分子量为5000与100000道尔顿之间，固态呈灰白色或白色，单糖组成主要为吡喃型β-D-半乳糖、D-葡萄糖和D-甘露糖，该制品可开发成降血糖、降血脂药物，其制备方法可靠易行，适合大规模生产，不污染环境，成本低。文档编号C08B37/00GK101456918SQ20091000053公开日2009年6月17日申请日期2009年1月16日优先权日2009年1月16日发明者韩金光申请人:韩金光