一种制备卡非佐米无定型物的方法与流程

本发明属于药物化学领域，涉及一种新型肽类化合物卡非佐米的无定型物的工业化制备方法。

背景技术：

卡非佐米是一种治疗多发性骨髓瘤的药物，商品名为Kyprolis，英文名称为Carfilzomib，本品主治难治性多发性骨髓瘤，最早是由 Onyx Pharmaceuticals 公司研发的卡非佐米注射用冻干粉针剂，于 2012 年 7 月 20 日由美国食品药品监督管理局 (FDA) 批准上市。本品为第二代蛋白酶体抑制剂，可不伤及组成型球体蛋白功能而选择性抑制血液肿瘤细胞中免疫蛋白酶体，从而使癌细胞更易凋亡。本品因高度的选择性而具有不良反应少的特点，而最大优势则是克服了某些蛋白酶体抑制剂所具有的神经毒性，常见不良反应为肺炎、贫血、嗜中性白血球减少和血小板减少症。

目前报道的卡非佐米原料药以无定型和特定晶型两种形态存在。CN101883779A公开了卡非佐米的特定晶型和无定型物。

CN101044157A公开了一种卡非佐米无定型物的制备方法，即将粗品卡非佐米溶解于少量的甲醇中，然后将卡非佐米甲醇溶液缓慢加入到一定量的冰水中，快速搅拌一段时间后得到卡非佐米无定型晶型固体。然而这种利用水及甲醇混合溶剂制备卡非佐米无定型物的方法，在后续干燥过程中，水难以除去，会增加产品纯化难度，产品的稳定性及质量也会受到影响。

CN104402973A公开了一种制备卡非佐米无定型物的方法，该方法采用二氯甲烷，醇类，丙酮等溶剂溶解卡菲佐米后再用真空除去溶剂，从而得到卡非佐米无定型晶型固体的方法，但是，该方法制得到的卡非佐米无定型固体呈泡沫状或絮状且大部粘附于容器底部，不易从容器中取出，而且,取出固体后需进一步再经粉碎，过筛操作方可得到固体粉末，操作较繁琐，不利于GMP条件下大规模生产。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供了一种制备卡非佐米无定型物的方法，该方法无需加热浓缩，直接析出分散的固体无定型粉末，产品不含结晶水或溶剂，易干燥且稳定性好，操作简便，适合工业化生产。

为实现本发明的目的，提供了一种制备卡非佐米无定型物的方法，包括以下步骤：

1)将卡非佐米溶于有机溶剂；

2)加入到非水抗溶剂中，析出无定型固体；

3）分离出的无定型固体。

优选的，上述本发明的方法，所述有机溶剂为二氯甲烷；所述抗溶剂选自正己烷，环己烷，石油醚，正庚烷中的一种或多种，步骤2）中，卡非佐米与抗溶剂混合时的温度为-20℃~50℃，优选为5℃~40℃。

上述本发明的方法，步骤3）中所述分离，包括过滤或离心分离。

在具体实施方案中，一种制备卡非佐米无定型物的方法，包括以下步骤：

1)将卡非佐米溶于有机溶剂二氯甲烷中；

2)卡非佐米二氯甲烷溶液滴加到非水抗溶剂中，所述非水抗溶剂选自正己烷，环己烷，石油醚和正庚烷中的一种或多种，

3）在-20℃~50℃下搅拌 1-3小时，析出无定型固体；

4）分离出无定型固体，干燥即得。

在上述具体实施方案中，本发明的方法，优选的非水抗溶剂为环己烷，所用有机溶剂与卡非佐米的体积质量比至少为2ml:1g；非水抗溶剂的体积与所用有机溶剂的体积之比比至少为7:1，优选的干燥温度40℃~50℃。

本发明的卡非佐米无定型物的制备方法采用两种混合有机溶剂在常温下进行重结晶，无需加入水，使产品不易产生结晶水，而且所用有机溶剂在后续烘干过程易除去，极少残留，使制备得到的卡非佐米无定型物有较好的质量及稳定性。本方法得到的卡非佐米无定型物为分散的白色粉末状固体，制备过程中原料损失极少，便于GMP条件下大规模生产，方法简便，可操作性强。

附图说明

图 1 为实施例1制备得到的卡非佐米无定型固体的 HPLC 图谱；

图 2 为实施例1方法得到的卡非佐米无定型固体的 XRPD 图谱；

图3为实施例1制备得到的卡非佐米无定型固体的TGA图谱；

图4为实施例1制备得到的卡非佐米无定型固体的DSC图谱。

具体实施方式

实施例1

以下实施例用于进一步理解本发明的实质，但不以此限制本发明的范围。

将300g卡非佐米用750ml二氯甲烷溶解后，过滤除去机械杂质后，将其滤液滴加入装有6000ml环己烷的三口瓶中，控制反应温度在0℃~10℃，滴加的过程中产生大量白色固体，滴加完毕后保持0℃~10℃继续搅拌1~3h，后抽滤，所得白色固体再用300ml环己烷洗涤2次， 30min后取出所得白色固体，放置于瓷盘中，密封后放入真空干燥箱中，烘干后得到卡非佐米无定型固体294.6g，收率：98.2%。所得卡非佐米经HPLC和XRPD测试，为无定型物，见图1及图2所示。

实施例2

将100g卡非佐米用300ml二氯甲烷溶解后，过滤除去机械杂质后，将其滤液滴加入装有2250ml正庚烷的三口瓶中，控制反应温度在30℃~40℃，滴加的过程中产生大量白色固体，滴加完毕后保持30℃ ~40℃继续搅拌1~3h，后抽滤，所得白色固体再用100ml正庚烷洗涤2次， 30min后取出所得白色固体，放置于瓷盘中，密封后放入真空干燥箱中，烘干后得到卡非佐米无定型固体97.8g，收率：97.8%。所得卡非佐米无定型物的XRPD图与图2基本相同。

实施例3

将100g卡非佐米用250ml二氯甲烷溶解后，过滤除去机械杂质后，将其滤液滴加入装有2000ml正己烷的三口瓶中，控制反应温度在-20℃~0℃，滴加的过程中产生大量白色固体，滴加完毕后保持-20℃ ~0℃继续搅拌1~3h，后抽滤，所得白色固体再用100ml正己烷洗涤2次， 30min后取出所得白色固体，放置于瓷盘中，密封后放入真空干燥箱中，烘干后得到卡非佐米无定型物固体98.6g，收率：98.6%。所得卡非佐米无定型物的XRPD图与图2基本相同。

实施例4

将100g卡非佐米用400ml二氯甲烷溶解后，过滤除去机械杂质后，将其滤液倒入3000ml三口瓶中，后缓慢滴加入环己烷2800ml，控制反应温度在5℃~20℃，滴加的过程中产生大量白色固体，滴加完毕后保持5℃~20℃继续搅拌1~3h，有部分固体粘附于瓶底，后抽滤，所得白色固体再用100ml环己烷洗涤2次，30min后取出所得白色固体，放置于瓷盘中，密封后放入真空干燥箱中，烘干后得到卡非佐米无定型固体94.6g，收率：94.6%。所得卡非佐米经HPLC和XRPD测试，为无定型物，所得卡非佐米无定型物的XRPD图与图2基本相同。

所得卡非佐米无定型物做粉末X-射线衍射分析，所用仪器为X^，Pert Pro MPDX-射线衍射仪，具体试验方法为取本品适量，以40kv的铜钯作为X射线辐射源，在2~40 ^o范围内，衍射角以每分钟2^o的速率作连续扫描。 从本品的粉末X-射线衍射图（XRPD图）可知，本品衍射图呈弥散状，没有任何尖锐的衍射峰，以无定型形式存在，其X-射线粉末衍射图的特征与CN101883779A中报道的无定型一致。

结论：X-射线粉未衍射试验表明本品为无定型，与专利CN101883779A报道的X-射线粉末衍射图特征一致。

将本发明的方法如实施例1制备得到的卡非佐米无定型物固体进行后续质量研究后发现，本品经热重分析，检测得到的TGA图显示在220℃前基本无失重，说明本品不含结晶水、游离水和结晶溶剂，在220℃前受热稳定性较好；约在220℃开始失重，至350℃左右失重约55%，说明本品在220℃后开始急剧分解，见图3所示。本品用示差扫描量热法分析，检测得到的DSC图谱显示在160~200℃区间出现一个放热峰，化合物在约180^oC有急剧的吸热最高值，应为本品晶型转变的放热峰，说明本品在受热过程中发生了转晶；在约213℃出现吸热峰，吸热峰尖锐而陡峭，是熔融峰的特征；见图4所示。

用本发明的方法制备得到的卡非佐米无定型固体粉末送HPLC分析，采用HPLC 检测的方法测得到的卡非佐米无定型物的纯度≥ 99.80％，见图 1所示，卡非佐米纯品在HPLC谱图中的时间约在31.244min，杂质较少，最大单个杂质含量小于 0.05％。

用本方法制备得到的卡非佐米无定型固体为分散的白色粉末状固体，与其它现有技术的方法制得的无定型卡非佐米相比，产品性状更好，操作规范性更强，制备条件更温和不易引起产品变质，更易于在GMP条件下大规模生产，具有较好的经济性和实用性。