本发明属于生物技术领域，尤其涉及一种胡萝卜叶蛋白的制备方法。
技术背景
胡萝卜，别名红萝卜、丁香萝卜、葫芦菔金，又被称为胡芦菔、红菜头、黄萝卜等，有地下“小人参”之称，是伞形二年生草本植物，以呈肉质的根作为蔬菜来食用。
胡萝卜叶丛生于短缩茎上，为三回羽状复叶。叶柄细长，叶色浓绿，叶面积小，占胡萝卜总体的40%以上。
胡萝卜的叶子的功效
1、胡萝卜叶子可以治便秘:胡萝卜叶子中有一些叶绿素、膳食纤维以及叶酸存在，另外还有多种维生素，人们食用胡萝卜叶子以后，会加快胃肠的运动，也能让人体生成的大便软化，减少它们在人体中积存的时间，让大便快速排出体外，从而也就起到了缓解和治疗便秘的作用。
2、胡萝卜叶子可理气止痛:理气止痛也是胡萝卜叶子的重要功效，综可以用于人类的脘腹疼痛的治疗，具体治疗方法是把干燥以后的胡萝卜叶子加三十到六十克，另入适量的清水，慢慢煎制，煎好药液进行过滤，一天饮用一次，连用七天止痛效果出色。
3、胡萝卜叶子可以利水:利水也是胡萝卜叶子的重工功效之一，它可以缓解人类的浮肿和小便不利以及淋痛等多种疾病的症状，也能预防这些疾病的发生，想让胡萝卜叶子起到利水的作用，除了可以煎制饮用以外，还可以把它切成碎末以后放在锅中蒸熟后当配菜食用。
因此，胡萝卜叶具有很重要的食用和药用价值。但现实生活中常被废弃掉或做为饲料，十分可惜。
胡萝卜叶的粗蛋白含量可达全叶干重的45.65%，是一种很好的植物蛋白原料，目前尚无对胡萝卜叶蛋白利用的报道。
技术实现要素：
本发明的目的在于针对现有技术中存在的不足，提供了一种胡萝卜叶蛋白的制备方法，其特征在于，是通过以下步骤实现的：
(1) 打浆、酶解、过滤：采用料液比1: 3-5，用打浆机将洗净沥干的胡萝卜叶打浆3-5min，然后加入（胡萝卜叶浆质量0.1-0.3%）蛋白酶充分搅拌后静置1-2 h 进行酶解后， 用 800-2000 目滤网过滤取上清液备用。
（2）加热、发酵：将(1) 所取上清液迅速放入沸水中加热到40-45℃后加入保加利亚乳酸杆菌((1) 所取上清液质量0.01-0.03%)、嗜热链球菌((1) 所取上清液质量0.01-0.03%)、在密闭条件下发酵 36-48 小时。
（3）膜分离：将经（2）发酵过的胡萝卜叶液用10000-50000 道尔顿膜超滤，分离出乳清溶液和蛋白溶液。
（4）吸附、酶氧化脱色：将经（3）分离出的蛋白溶液中放入活性炭粉吸附5-10 min，然后过滤将活性炭粉清除，再加入( 蛋白溶液质量0.3-0.5%) 脂肪氧合酶充分搅拌后静置1-2 h 进行酶解。
（5）干燥：将经（4）吸附、酶氧化脱色后的胡萝卜叶蛋白溶液采用真空冷冻干燥制得白色胡萝卜叶蛋白粉。冻干工艺参数：物料厚度8-9 mm，预冻温度-35--40℃，预冻时间2-2.5h，升华时加热板温度45-50℃，干燥仓工作压力22-26Pa，解析时加热板温度60-65℃。
步骤（1）中的蛋白酶含量为胡萝卜叶浆质量的0.1-0.3%。
步骤（2）中保加利亚乳酸杆菌含量为所取步骤(1) 上清液质量0.01-0.03%、嗜热链球菌含量为步骤(1) 所取上清液质量0.01-0.03%。
步骤（4）中脂肪氧合酶含量为蛋白溶液质量的0.3-0.5%。
本发明的优点 ：本发明以胡萝卜叶为原料经→打浆→酶解→过滤→加热→发酵→膜分离→吸附→酶氧化脱色→真空冷冻干燥，得到的胡萝卜叶蛋白的提取率为50.32%，胡萝卜叶蛋白得率为7.45%，胡萝卜叶蛋白的颜色为白色，无草腥味，蛋白质量分数为63.24%。
具体实施方式
实施例1
(1) 打浆、酶解、过滤：采用料液比1: 3，用打浆机将洗净沥干的胡萝卜叶打浆3min，然后加入（胡萝卜叶浆质量0.1%）蛋白酶充分搅拌后静置1h 进行酶解后， 用 800 目滤网过滤取上清液备用。
（2）加热、发酵：将(1) 所取上清液迅速放入沸水中加热到40℃后加入保加利亚乳酸杆菌((1) 所取上清液质量0.01%)、嗜热链球菌((1) 所取上清液质量0.01%)，在密闭条件下发酵 36 小时。
（3）膜分离：将经（2）发酵过的胡萝卜叶液用10000 道尔顿膜超滤，分离出乳清溶液和蛋白溶液。
（4）吸附、酶氧化脱色：将经（3）分离出的蛋白溶液中放入活性炭粉吸附5 min，然后过滤将活性炭粉清除，再加入( 蛋白溶液质量0.3%) 脂肪氧合酶充分搅拌后静置1 h进行酶解。
（5）干燥：将经（4）吸附、酶氧化脱色后的胡萝卜叶蛋白溶液采用真空冷冻干燥制得白色胡萝卜叶蛋白粉。冻干工艺参数：物料厚度8 mm，预冻温度-35℃，预冻时间2h，升华时加热板温度45℃，干燥仓工作压力22Pa，解析时加热板温度60℃。
实施例2
(1) 打浆、酶解、过滤：采用料液比1: 5，用打浆机将洗净沥干的胡萝卜叶打浆5min，然后加入（胡萝卜叶浆质量0.3%）蛋白酶充分搅拌后静置2 h 进行酶解后， 用2000 目滤网过滤取上清液备用。
（2）加热、发酵：将(1) 所取上清液迅速放入沸水中加热到45℃后加入保加利亚乳酸杆菌((1) 所取上清液质量0.02%)、嗜热链球菌((1) 所取上清液质量0.02%)，在密闭条件下发酵48 小时。
（3）膜分离：将经（2）发酵过的胡萝卜叶液用50000 道尔顿膜超滤，分离出乳清溶液和蛋白溶液。
（4）吸附、酶氧化脱色：将经（3）分离出的蛋白溶液中放入活性炭粉吸附10 min，然后过滤将活性炭粉清除，再加入( 蛋白溶液质量0.5%) 脂肪氧合酶充分搅拌后静1-2 h进行酶解。
（5）干燥：将经（4）吸附、酶氧化脱色后的胡萝卜叶蛋白溶液采用真空冷冻干燥制得白色胡萝卜叶蛋白粉。冻干工艺参数：物料厚度9 mm，预冻温度-40℃，预冻时间2.5 h，升华时加热板温度50℃，干燥仓工作压力26Pa，解析时加热板温度65℃。
实施例3
(1) 打浆、酶解、过滤：采用料液比1: 4，用打浆机将洗净沥干的胡萝卜叶打浆4min，然后加入（胡萝卜叶浆质量0.2%）蛋白酶充分搅拌后静置1.5 h 进行酶解后， 用 1500 目滤网过滤取上清液备用。
（2）加热、发酵：将(1) 所取上清液迅速放入沸水中加热到42℃后加入保加利亚乳酸杆菌((1) 所取上清液质量0.03%)、嗜热链球菌((1) 所取上清液质量0.03%)，在密闭条件下发酵 40 小时。
（3）膜分离：将经（2）发酵过的胡萝卜叶液用30000 道尔顿膜超滤，分离出乳清溶液和蛋白溶液。
（4）吸附、酶氧化脱色：将经（3）分离出的蛋白溶液中放入活性炭粉吸附5-10min，然后过滤将活性炭粉清除，再加入( 蛋白溶液质量0.4%) 脂肪氧合酶充分搅拌后静置1.5 h 进行酶解。
（5）干燥：将经（4）吸附、酶氧化脱色后的胡萝卜叶蛋白溶液采用真空冷冻干燥制得白色胡萝卜叶蛋白粉。冻干工艺参数：物料厚度8 mm，预冻温度-37℃，预冻时间2 h，升华时加热板温度47℃，干燥仓工作压力24Pa，解析时加热板温度62℃。
以上关于本发明的具体描述，仅用于说明本发明而并非受限于本发明实施例索描述的技术方案，本领域的普通技术人员应当理解，仍然可以对本发明进行修改或等同替换。