天然双黄酮I3,II8‑Biapgienin和RidiculuflavoneA的制备方法与流程

本发明属于新化合物制备方法及药物领域，尤其是天然双黄酮化合物I3,II8-Biapgienin和RidiculuflavoneA的制备。

背景技术：

I3,II8-Biapgienin是从贯叶连翘((Hypericum perfortum L)中提取得到的一种双黄酮类化合物，贯叶连翘在欧美等国又名圣约翰草(St.John's Wort)。贯叶连翘在德国用于治疗抑郁症已有几百年历史，有报道显示I3,II8-Biapgienin具有较好的抗抑郁、抗肿瘤、抗氧化、抗炎、抗肝损伤活性，还对雌激素受体、苯二氮受体和CYP有抑制活性，在药品开发与应用方面具有广阔的前景。

Ridiculuflavone A是从一种马铃薯科的植物Aristolochia ridicula中提取的天然双黄酮化合物。由于其来源的稀少，限制了对其活性的研究。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供两个双黄酮化合物制备方法，本发明合成出天然双黄酮化合物I3,II8-Biapgienin和Ridiculuflavone A，且合成和纯化方法简单。

本发明的目的通过以下技术方案实现的：

双黄酮化合物I3,II8-Biapgienin和Ridiculuflavone A的结构式如下：

所述衍生物为5,5',7,7'-四羟基-2,2'-双(4-羟基苯基)-4H,4'H-[3,8'-二苯并吡喃]-4,4'-二酮。

所述衍生物为2'-(3,4-二羟基苯基)-5,5',7,7'-四羟基-2-(4-羟基苯基)-4H,4'H-[3,6'-二苯并吡喃]-4,4'-二酮。

天然双黄酮I3,II8-Biapgienin的制备方法，步骤如下

天然双黄酮Ridiculuflavone A的制备方法，步骤如下：

本发明的优点和积极效果：

本发明制备的双黄酮化合物I3,II8-Biapgienin和Ridiculuflavone A具有广泛的生物活性，本发明首次实现了这两种天然产物的全合成，且合成、纯化方法简单。解决了因化合物来源稀少而对它们活性研究的限制，为其进一步开发和应用创造条件。

附图说明

图1为5,5',7,7'-四羟基-2,2'-双(4-羟基苯基)-4H,4'H-[3,8'-二苯并吡喃]-4,4'-二酮的核磁共振氢谱。

图2为(2'-(3,4-二羟基苯基)-5,5',7,7'-四羟基-2-(4-羟基苯基)-4H,4'H-[3,6'-二苯并吡喃]-4,4'-二酮的核磁共振氢谱。

图3为(2'-(3,4-二羟基苯基)-5,5',7,7'-四羟基-2-(4-羟基苯基)-4H,4'H-[3,6'-二苯并吡喃]-4,4'-二酮的核磁共振碳谱。

具体实施方式

为了理解本发明，下面结合实施例对本发明作进一步说明；下述实施例是说明性的，不是限定性的，不能以下述实施例来限定本发明的保护范围。

本发明提供化合物1和2

本发明特别包括化合物：

(1)5,5',7,7'-四羟基-2,2'-双(4-羟基苯基)-4H,4'H-[3,8'-二苯并吡喃]-4,4'-二酮

(2)2'-(3,4-二羟基苯基)-5,5',7,7'-四羟基-2-(4-羟基苯基)-4H,4'H-[3,6'-二苯并吡喃]-4,4'-二酮

化合物1和2的合成路线

说明1

5,5',7,7'-四羟基-2,2'-双(4-羟基苯基)-4H,4'H-[3,8'-二苯并吡喃]-4,4'-二酮

取2-羟基-4,6-二甲氧基苯乙酮2.0g(0.010mol)和4-异丙氧基苯甲醛2.0g(0.012mol)加入到3mL乙醇中并搅拌5min。然后滴加6ml 50％的KOH水溶液到该反应混合物中，60℃加热，搅拌8h。冷却至室温后，将混合物倾入冰水中，用6mol/L盐酸调节pH到6，将析出的黄色沉淀抽滤，用水洗涤并从乙醇重结晶得到2'-羟基-4',6'-二甲氧基-4-异丙氧基查耳酮3.2g，为黄色结晶，产率91％。

取2'-羟基-4',6'-二甲氧基-4-异丙氧基查耳酮2.5g(7.3mmol)和碘单质0.2g(0.8mmol)加入到20mL二甲基亚砜中。将反应混合物在130℃下搅拌6小时。反应完成后，加入100ml水和50ml饱和硫代硫酸钠溶液，再用二氯甲烷(3×50mL)萃取混合物，合并有机层，并用100mL饱和食盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥后减压浓缩。将粗产物用展开剂石油醚/乙酸乙酯＝1:1，200-300目硅胶柱层析纯化纯化，得到4'-异丙氧基-5,7-二甲氧基芹菜素2g，为白色固体，产率80％。

取4'-异丙氧基-5,7-二甲氧基芹菜素1.1g(3.2mmol)和N-碘代丁二酰亚胺0.9g(4.0mmol)加入到的20mL N,N-二甲基甲酰胺中，并将所得反应液在60℃下搅拌8h。反应完成后，冷却至室温，将反应混合物倾入100mL水中，并用二氯甲烷(3×30mL)萃取，合并有机层，用饱和食盐水洗涤(3×100mL)，经无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将粗产物用展开剂石油醚/乙酸乙酯＝1:1，200-300目硅胶柱层析纯化纯化，得到8-碘-4'-异丙氧基-5,7-二甲氧基芹菜素1.3g，为白色固体，产率86％。

在氩气下取8-碘-4'-异丙氧基-5,7-二甲氧基芹菜素1g(2.1mmol)、对甲氧基苯乙炔1.1g(8.58mmol)、PdCl₂(PPh₃)₂75mg(0.11mmol)和CuI 20mg(0.11mmol)加入到的4mL无水乙腈中。然后慢慢滴加1mL三乙胺。加入后，在氩气下将所得悬浮液在80℃下搅拌8h。冷却至室温后，加入20mL二氯甲烷。然后将反应悬浮液通过硅藻土过滤并用二氯甲烷洗涤，将有机相减压浓缩。将粗产物用展开剂石油醚/乙酸乙酯＝1:1，200-300目硅胶柱层析纯化纯化，得到4'-异丙氧基-5,7-二甲氧基-8-((4-对甲氧基苯基)乙炔基)芹菜素0.8g，为白色固体，产率80％。

取4'-异丙氧基-5,7-二甲氧基-8-((4-对甲氧基苯基)乙炔基)芹菜素500mg(1.1mmol)，2-羟基-4,6-二异丙基苯甲醛506mg(2.1mmol)，[{RhCl(cod)}₂]52mg(0.1mmol)，1,2,3,4-四苯基-1,3-环戊二烯157mg(0.4mmol)和醋酸铜一水合物424mg(2.1mmol)加入到5mL邻二甲苯中，将所得悬浮液在氩气下加热至140℃，搅拌12h。冷却到室温后，将反应液用展开剂二氯甲烷/甲醇＝100:1，200-300目硅胶柱层析纯化纯化，得到5,7-二异丙基-2'-(4-异丙氧基苯基)-5',7'-二甲氧基-2-(4-甲氧基苯基)-4H,4'H-[3,8'-二苯并吡喃]-4,4'-二酮525mg，为白色固体，产率70％。

取5,7-二异丙基-2'-(4-异丙氧基苯基)-5',7'-二甲氧基-2-(4-甲氧基苯基)-4H,4'H-[3,8'-二苯并吡喃]-4,4'-二酮100mg(0.14mmol)于25mL圆底烧瓶中，用5mL1,2-二氯乙烷溶解，置于-78℃下搅拌10min，三溴化硼709mg(2.8mmol)逐滴加入，反应液温度缓慢升高到100℃反应12h。搅拌条件下，向反应液加入过量的冰水猝灭反应，减压除去1,2-二氯乙烷，并对悬浮物抽滤，干燥得5,5',7,7'-四羟基-2,2'-双(4-羟基苯基)-4H,4'H-[3,8'-二苯并吡喃]-4,4'-二酮70mg，产率92％。

¹H NMR(400MHz,Acetonitrile-d3)_δ13.05(s,1H),12.78(s,1H),7.78(s,3H),7.57(d,J＝8.8Hz,2H),7.39(d,J＝8.8Hz,2H),6.82(d,J＝8.8Hz,2H),6.69(d,J＝8.8Hz,2H),6.56(s,1H),6.54(d,J＝2.0Hz,1H),6.31(d,J＝2.0Hz,1H),6.28(s,1H).与文献(Schmidt B,Jaroszewski J W,Bro R,et al.Analytical Chemistry,2008,80(6):1978-87.)报道谱图数据一致。

说明2

(2'-(3,4-二羟基苯基)-5,5',7,7'-四羟基-2-(4-羟基苯基)-4H,4'H-[3,6'-二苯并吡喃]-4,4'-二酮

在氩气下取6-碘-3’,4’,5,7-四异丙基木犀草素1g(2.1mmol)、1.1g对甲氧基苯乙炔(8.58mmol)、75mg PdCl₂(PPh₃)₂(0.11mmol)和20mg CuI(0.11mmol)加入到的4mL无水乙腈中。然后慢慢滴加1mL三乙胺。加入后，在氩气下将所得悬浮液在80℃下搅拌8h。冷却至室温后，加入20mL。然后将反应悬浮液通过硅藻土过滤并用二氯甲烷洗涤，将有机相减压浓缩。将粗产物用展开剂二氯甲烷/甲醇＝100:1，200-300目硅胶柱层析纯化纯化，得到化合物6-(对甲氧苯乙炔基)-3’,4’,5,7-四异丙基木犀草素0.83g，为白色固体，产率83％。

取6-(对甲氧苯乙炔基)-3’,4’,5,7-四异丙基木犀草素450mg(0.95mmol)，2-羟基-4,6-二异丙基苯甲醛454mg(1.9mmol)，[{RhCl(cod)}₂]47mg(0.095mmol)，1,2,3,4-四苯基-1,3-环戊二烯141mg(0.38mmol)和醋酸铜一水合物570mg(2.8mmol)加入到5mL邻二甲苯中，将所得悬浮液在氩气下加热至140℃，搅拌12h。冷却到室温后，将反应液用展开剂二氯甲烷/甲醇＝100:1，200-300目硅胶柱层析纯化纯化，得到2'-(3,4-二甲氧基苯基)-5,7,-二异丙氧基-5',7'-二甲氧基-2-(4-甲氧基苯基)-4H,4'H-[3,6'-二苯并吡喃]-4,4'-二酮365mg，为白色固体，产率54％。

取2'-(3,4-二甲氧基苯基)-5,7,-二异丙氧基-5',7'-二甲氧基-2-(4-甲氧基苯基)-4H,4'H-[3,6'-二苯并吡喃]-4,4'-二酮100mg(0.14mmol)于25mL圆底烧瓶中，用5mL1,2-二氯乙烷溶解，置于-78℃下搅拌10min，三溴化硼777mg(3.1mmol)逐滴加入，反应液温度缓慢升高到100℃反应12h。搅拌条件下，向反应液加入过量的冰水猝灭反应，减压除去1,2-二氯乙烷，并对悬浮物抽滤，干燥得2'-(3,4-二羟基苯基)-5,5',7,7'-四羟基-2-(4-羟基苯基)-4H,4'H-[3,6'-二苯并吡喃]-4,4'-二酮70mg，产率90％。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.18(s,1H),12.93(s,1H),10.81(s,2H),10.08(s,2H),9.48(s,1H),7.44–7.38(m,4H),6.89(d,J＝8.4Hz,1H),6.71(d,J＝8.8Hz,2H),6.69(s,1H),6.51(s,1H),6.44(d,J＝2.0Hz,1H),6.23(d,J＝2.0Hz,1H).¹³C NMR(100 MHz,Chloroform-d)δ182.11,181.06,164.78,164.44,163.44,162.79,162.01,160.23,160.00,157.80,157.21,150.25,146.22,130.15,123.56,121.93,119.55,116.52,115.66,113.84,111.25,104.63,103.86,103.58,103.36,99.32,94.11,94.00；HRMS(ESI)m/z:Calcd for C₃₀H₁₇O₁₁[M-H]^-553.0776；found,553.0772。