本发明属于棉花育种领域，具体涉及一种转基因抗虫棉花新品系的培育方法。
背景技术：
棉花是锦葵科棉属植物的种籽纤维，原产于亚热带。植株灌木状，在热带地区栽培可长到6米高，一般为1到2米。花朵乳白色，开花后不久转成深红色然后凋谢，留下绿色小型的蒴果，称为棉铃。棉铃内有棉籽，棉籽上的茸毛从棉籽表皮长出，塞满棉铃内部，棉铃成熟时裂开，露出柔软的纤维。纤维白色或白中带黄，长约2至4厘米，含纤维素约87～90％，水5～8％，其他物质4～6％。
棉花苗期虫害较为严重，靠棉花为生的最具破坏性的昆虫物种有玉米果穗螟蛉或棉铃虫、美洲棉铃虫、烟青虫等。不同的危害时间和危害方式，给棉苗生长带来较大影响，也对田间防治带来一定难度。害虫的发生有的传播病毒、有的影响棉长推迟发育，还有的失去生长点变成公棉花、或是断茎造成无头棵。
技术实现要素：
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种转基因抗虫棉花新品系的培育方法。
为实现以上目的，本发明的技术方案如下：
一种转基因抗虫棉花新品系的培育方法，包括以下步骤：
A.以棉铃虫蜕皮调节转录因子HaHR3为靶标基因，筛选出HaHR3的干扰片段并构建HaHR3的植物表达干扰载体；
B.将步骤A获得的HaHR3的植物表达干扰载体导入湘杂棉19号的父本中，进行卡拉霉素筛选，筛选出阳性株进行繁殖。
进一步，步骤B中，采用花粉管通道法将步骤A获得的HaHR3的植物表达干扰载体导入湘杂棉19号的父本中。
进一步，步骤B中，筛选出阳性株进行南繁。
进一步，步骤B所述卡拉霉素筛选的具体过程为：在棉花四叶期后到现蕾期前，用硫酸卡拉霉素溶液，涂抹于棉株顶端完全展开的叶，3-4天后观察叶片颜色，变黄表明该株棉花为阴性株，不变黄表明该株棉花为阳性株。
进一步，所述硫酸卡拉霉素溶液的浓度为3000ppm。
本发明的有益效果在于：
本申请所述方法得到的棉花新品系的抗虫性好，为农业害虫防治和植物保护技术提供了新的选项，为利用RNAi来防治棉铃虫及其它农业害虫提供了实验证据。同时，与现有技术相比，本申请所述方法得到的棉花新品系的由圆锥形突变为卵圆形，铃壳显著变薄，吐絮由原来的不畅不好检花到吐絮畅好捡花。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。优选实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件。
实施例1
以棉铃虫蜕皮调节转录因子HaHR3为靶标基因，筛选出HaHR3的干扰片段并构建HaHR3的植物表达干扰载体，此部分工作内容委托植物保护研究所完成。具体为：1)根据靶标基因HaHR3mRNA二级结构预测结果，分别设计引物并扩增得到靶标基因的4个不同干扰片段，共构建了4个dsRNA原核表达载体。2)分别将不同的dsRNA原核表达载体转化大肠杆菌突变菌株HT115，并通过诱导使靶标基因HaHR3不同片段dsRNA得到成功表达并鉴定。3)以dsRNAs饲喂棉铃虫幼虫一周后，生测观察到处理组棉铃虫幼虫死亡率，dsRNA-Frag.1的平均死亡率为36.22％；其它处理组的死亡率约为～30.00％，均与对照组存在显著性差异；荧光定量PCR结果表明，昆虫取食不同处理组dsRNA48h后，在转录水平上均能有效沉默靶标基因HaHR3。
实施例2
将实施例1获得的HaHR3的植物表达干扰载体采用花粉管通道法导入湘杂棉19号的父本中，2013年在湖南省棉花科学研究所茅湾试验地进行卡拉霉素筛选(具体过程为：在棉花四叶期后到现蕾期前，用浓度为3000ppm的医用硫酸卡拉霉素溶液，涂抹于棉株顶端完全展开的叶，3-4天后观察叶片颜色，变黄表明该株棉花为阴性株，不变黄表明该株棉花为阳性株)，筛选出26个阳性株，同年对26个阳性单株进行南繁，用卡拉筛选出19个阳性单株；2014年在湖南省棉花科学研究所茅湾试验地种植19个阳性株系(13N85-1，13N85-2，13N85-3……13N85-19)，同时与受体材料F15进行了抗虫性、农艺性状的比较试验，每个材料种植1垄(30株)，成熟期调查单株铃数，室内考种考查衣分、单铃重，棉样送农业部棉花品质监督检验测试中心测定纤维品质。
表1 F15及19个阳性单株抗虫性实验数据
与F15相比，棉铃外形由圆锥形突变为卵圆形，铃壳显著变薄；吐絮由原来的不畅不好检花到吐絮畅好捡花。F15及19个阳性单株综合农艺形状实验数据如下表所示：
表2 F15及19个阳性单株综合农艺形状实验数据
最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的宗旨和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。