一种从动物肺中提取肝素钠的方法及该肝素钠与流程

文档序号:12242884阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种从动物肺中提取肝素钠的方法,其特征在于,包括以下步骤:

(1)绞碎打浆:动物肺经预处理、绞碎、匀浆后加水,搅拌混匀,得到肺浆液;

(2)酶解脱脂:用NaOH调节步骤(1)中的肺浆液的pH值至8.5 -9.2,升温至40-45℃,加入脂肪酶,保温酶解,过滤,收集滤渣,加水搅拌得脱脂肺浆液;

(3)盐解提取:往步骤(2)中的脱脂肺浆液中加入氯化钠,调节pH值,升温至50-55℃并保温,再升温并进行过滤,得到盐解液;

(4)酶解除蛋白:将步骤(3)中的盐解液降温至55℃,调节pH值至8.0-9.0,加入蛋白酶,保温酶解,然后升温灭酶并进行过滤,得到酶解液;

(5)吸附:将步骤(4)中的酶解液降温至60℃,调整其盐度和pH值,加入D-254树脂,保温吸附处理10-12小时后,收集吸附后的树脂;

(6)洗脱:

(6-1):用水反复冲洗步骤(5)中的吸附后的树脂至水变清为止,滤干树脂,再以完全浸没树脂为量,加入质量分数为5-7%的氯化钠溶液,温度保持在50-55℃,搅拌30-60min,滤干得洗涤后的树脂;

(6-2):以完全浸没步骤(6-1)中的洗涤后的树脂为量,加入质量分数为20-25%的氯化钠溶液,温度保持在50-55℃,搅拌3-4小时后,分离树脂,收集洗脱液;

(6-3):重复步骤(6-2)一次,将两次收集的洗脱液合并,并用100目滤袋过滤,收集洗脱液待用;

(7)调酸除蛋白:往步骤(6-3)中的洗脱液加入其重量0.1-0.3%的保护剂搅拌均匀后,用稀盐酸调节pH值至3.0-3.5,静置10分钟,用100目滤袋过滤,收集滤液待用;

(8)调碱除蛋白:用NaOH调节步骤(7)中的滤液的pH值至11.0,搅拌均匀后静置30分钟,用100目滤袋过滤,收集滤液待用;

(9)沉淀脱盐:用稀盐酸调节步骤(8)中的滤液的pH值至7.0-8.0,加入其体积1.8-2.2倍的质量分数为80-85%的预冷过的乙醇,搅拌均匀后密封沉淀18-24小时,倾出上层乙醇清液,收集沉淀物待用;

(10)复沉精制:

(10-1):往步骤(9)中的沉淀物中加入其重量10倍的质量分数为3%的氯化钠溶液,搅拌溶解后,升温至80℃并保温,然后降温并进行过滤,收集滤液,加入乙醇,静置,收集沉淀物;

(10-2):往步骤(10-1)中的沉淀物中加入其重量10倍的质量分数为3%的氯化钠溶液,充分搅拌溶解后,升温至80℃并保温,然后降温并进行过滤,收集滤液,加入乙醇,静置,收集沉淀物;

(11)脱水干燥:往步骤(10-2)中的沉淀物中加入其重量2倍的质量分数为95-100%的乙醇脱水2-3次,收集沉淀物,置于60-70℃下干燥10-15小时即得肝素钠。

2.根据权利要求1所述的从动物肺中提取肝素钠的方法,其特征在于,在上述步骤(1)中,在所述动物肺经预处理、绞碎、匀浆后加水,搅拌混匀,得到肺浆液的过程中,具体包括以下步骤:取新鲜(或经冷冻保存后自然解冻)动物肺清洗去污,剥离气管,去除皮质脂肪,用斩拌机绞碎成肉糜状,再经细磨机研磨匀浆5-10min,得到肺浆料,然后添加肺浆料2-3倍重量的水,搅拌混匀,得到肺浆液。

3.根据权利要求1所述的从动物肺中提取肝素钠的方法,其特征在于,在上述步骤(2)中,在所述升温至40-45℃,加入脂肪酶,保温酶解,过滤,收集滤渣,加水搅拌得脱脂肺浆液的过程中,具体包括以下步骤:升温至40-45℃,按每公斤肺添加1.2-2.5克的比例加入脂肪酶,保温酶解30-60分钟,酶解结束后用80目滤袋过滤,收集滤渣,往滤渣中加入3-5倍重量的水,搅拌均匀后得脱脂肺浆液;所述脂肪酶为碱性脂肪酶,酶活力为10000-30000U/g。

4.根据权利要求1所述的从动物肺中提取肝素钠的方法,其特征在于,在上述步骤(3)中,在所述往脱脂肺浆液中加入氯化钠,调节pH值,升温至50-55℃并保温,再升温保温并进行过滤,得到盐解液的过程中,具体包括以下步骤:按每公斤肺添加300-400克的比例往脱脂肺浆液中加入氯化钠,调pH值至9.0,搅拌下升温至50-55℃,保温反应3-5小时,整个反应过程中保持pH值在8.5-9.0之间,反应结束后快速升温至100℃,保温10min,趁热用80目滤袋过滤,收集滤液得盐解液,滤渣经干燥可作饲料用。

5.根据权利要求1所述的从动物肺中提取肝素钠的方法,其特征在于,在上述步骤(4)中,在所述加入蛋白酶,保温酶解,然后升温灭酶并进行过滤,得到酶解液的过程中,具体包括以下步骤:按每公斤肺添加3-5克的比例加入2709蛋白酶,保温50-55℃,酶解3-5小时后,升温至85℃,保温30min后,趁热用100目滤袋过滤,收集滤液得酶解液。

6.根据权利要求1所述的从动物肺中提取肝素钠的方法,其特征在于,在上述步骤(5)中所述将酶解液降温至60℃,调整其盐度和PH值,加入D-254树脂,保温吸附处理10-12小时后,收集吸附后的树脂的过程中,具体包括以下步骤:将酶解液降温至60℃,调整其盐度为2.0-2.8波美度,调节其PH值为8.0-8.5,然后按每公斤肺添加30-40克比例加入D-254树脂,搅拌状态下保持温度55-60℃吸附处理10-12小时后,过滤,收集吸附后的树脂。

7.根据权利要求1所述的从动物肺中提取肝素钠的方法,其特征在于,在上述步骤(7)中,所述保护剂为亚硫酸氢钠。

8.根据权利要求1所述的从动物肺中提取肝素钠的方法,其特征在于,在上述步骤(10-1)中,在所述升温至80℃并保温,然后降温并进行过滤,收集滤液,加入乙醇,静置,收集沉淀物的过程中,具体包括以下步骤:升温至80℃,保温10分钟后,冷却到常温,用100目滤袋过滤,收集滤液,再往滤液中加入其体积1-1.2倍的质量分数为95%的预冷过的乙醇,搅拌均匀后静置30分钟,倾出上层乙醇清液,收集沉淀物。

9.根据权利要求1所述的从动物肺中提取肝素钠的方法,其特征在于,在上述步骤(10-2)中,在所述升温至80℃并保温,然后降温并进行过滤,收集滤液,加入乙醇,静置,收集沉淀物的过程中,具体包括以下步骤:升温至80℃,保温10分钟后,冷却到常温,用100目滤袋过滤,收集滤液,再往滤液中加入其体积0.5-0.8倍的质量分数为95%的预冷过的乙醇,搅拌均匀后静置30分钟,倾出上层乙醇清液,收集沉淀物。

10.一种根据权利要求1-9任一项所述的从动物肺中提取肝素钠的方法所制备的肝素钠。

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