本发明属于农业种植技术领域，具体涉及一种从甜叶菊中提取甜菊糖苷的方法。
背景技术：
甜叶菊(stevia rebaudiana)别名甜菊﹑糖草，属菊科(Compositae), 斯台维亚属，原产地在南美亚热带地区。我国自1976年开始由南京中山植物园、中国农业科学院等科研单位先后从日本引进甜叶菊试种成功。甜叶菊含有14种微量元素﹑32种营养成分，在体内不代谢、不蓄积、不致癌、无毒性，其安全性已得到国际FAO和WHO以及美国FAD等组织的认可，因此它既是极好的糖源，又是良好的营养来源。
甜叶菊糖苷，简称甜菊苷，是从干燥后的甜叶菊叶片中提取出来的一类具甜味的萜烯类配糖体，主要包含8种具有不同甜度的糖苷。甜菊苷具有高甜度(为蔗糖的200-300倍)﹑低热量(仅为蔗糖的1/300)的特性，长期食用不会使人发胖，特别适宜肥胖病、糖尿病、高血压、动脉硬化、龋齿病患者使用，而且物理、化学性能稳定、无发酵性，可延长甜叶菊糖苷制品的保质期。因而日益引起人们的关注和重视，被广泛应用在食品和药物行业中，被誉为继蔗糖、甜菜糖之后的第三种天然糖源，是最有发展前途的新糖源。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种从甜叶菊中提取甜菊糖苷的方法。
本发明提供了如下的技术方案：
一种从甜叶菊中提取甜菊糖苷的方法，包含如下步骤，
1）叶片处理，将甜叶菊叶片剔除杂质和色泽灰暗后，真空冷冻干燥，粉碎、过筛子，得到甜叶菊粉末；
2）第一次除杂，向步骤1)中得到的甜叶菊粉末加入其重量3-5倍的正己烷，搅拌20-40分钟、过滤、回收溶剂，取甜叶菊滤饼、烘干、得到第一除杂粉末；
3）提取，在加热搅拌装置中加入步骤2）中得到的第一除杂粉末和其重量3-5倍的乙醇与水混合溶液，加热搅拌装置的加热温度为40-60℃，搅拌速度为200-300转/分钟，处理时间为20-40分钟，然后过滤，取滤液，重复提取1-3次后合并滤液，将滤液干燥，得到甜菊糖苷粗品；
4）第二次除杂，将步骤3）中得到的甜菊糖苷粗品溶于适量的水，加入聚合硫酸铁后用氢氧化钙调节pH至7.5，搅拌5-15分钟后，静置10-20分钟，过滤、得到第二除杂过滤液；
5）树脂吸附；用经过预处理的HPD-100大孔吸附树脂纯化步骤4）中得到的第二除杂过滤液，将第二除杂过滤液减压浓缩后上样，HPD-100树脂吸附时的流速为2 BV/h，吸附饱和后，先用流速为4 BV/h的纯水冲洗5-15分钟，然后用乙醇与乙酸乙酯混合溶剂进行洗脱，洗脱速度为3 BV/h，收集乙醇与乙酸乙酯混合溶剂的洗脱液，所述乙醇与乙酸乙酯混合液中，乙醇与乙酸乙酯的体积比为5:2；
6）收集，将收集的乙醇与乙酸乙酯混合溶剂洗脱液蒸发浓缩、烘干，即得甜菊糖苷。
优选的，所述步骤3）中乙醇与水混合溶剂，乙醇的质量百分比为40%-60%。
一般吸附树脂里含有一些惰性溶剂，故使用前须根据应用需要，进行不同深度预处理：首先在提取柱内，用清水逆流洗树脂1-2小时，再正流洗1-2小时。放净水后，加入高于树脂层20-30厘米的乙醇浸泡3-4小时，然后放净洗涤液，为一次清洗过程。用同样方法反复洗至出口洗涤液取样在试管中加3倍量水不显浑浊为止，然后用清水充分淋洗至无明显乙醇气味，即完成预处理过程。
本发明的有益效果是：提取效果好，得到的甜菊糖苷纯度高，平均为95%以上。
具体实施方式
实施例1
一种从甜叶菊中提取甜菊糖苷的方法，将甜叶菊叶片剔除杂质和色泽灰暗后，真空冷冻干燥，粉碎、过筛子，得到甜叶菊粉末；
取上述甜叶菊粉末500 g加入1.5 Kg正己烷，搅拌20分钟、过滤、回收溶剂，取甜叶菊滤饼、烘干、得到第一除杂粉末；在加热搅拌装置中加入第一除杂粉末和其重量3倍的乙醇与水混合溶液，所述乙醇与水混合溶剂中，乙醇的质量百分比为40%，加热搅拌装置的加热温度为40℃，搅拌速度为200转/分钟，处理时间为20分钟，然后过滤，取滤液，将滤液干燥，得到甜菊糖苷粗品；将甜菊糖苷粗品溶于适量的水，加入聚合硫酸铁后用氢氧化钙调节pH至7.5，搅拌5分钟后，静置10分钟，过滤、得到第二除杂过滤液；用经过预处理的HPD-100大孔吸附树脂纯化第二除杂过滤液，将第二除杂过滤液减压浓缩后上样，HPD-100树脂吸附时的流速为2 BV/h，吸附饱和后，先用流速为4 BV/h的纯水冲洗5分钟，然后用乙醇与乙酸乙酯混合溶剂进行洗脱，洗脱速度为3 BV/h，收集乙醇与乙酸乙酯混合溶剂的洗脱液，所述乙醇与乙酸乙酯混合液中，乙醇与乙酸乙酯的体积比为5:2；将收集的乙醇与乙酸乙酯混合溶剂洗脱液蒸发浓缩、烘干，即得甜菊糖苷，所得甜菊糖苷的纯度为95.8%。
实施例2
一种从甜叶菊中提取甜菊糖苷的方法，将甜叶菊叶片剔除杂质和色泽灰暗后，真空冷冻干燥，粉碎、过筛子，得到甜叶菊粉末；
取上述甜叶菊粉末500 g加入2.0 Kg正己烷，搅拌30分钟、过滤、回收溶剂，取甜叶菊滤饼、烘干、得到第一除杂粉末；在加热搅拌装置中加入第一除杂粉末和其重量4倍的乙醇与水混合溶液，所述乙醇与水混合溶剂中，乙醇的质量百分比为50%，加热搅拌装置的加热温度为50℃，搅拌速度为250转/分钟，处理时间为30分钟，然后过滤，取滤液，将滤液干燥，得到甜菊糖苷粗品；将甜菊糖苷粗品溶于适量的水，加入聚合硫酸铁后用氢氧化钙调节pH至7.5，搅拌10分钟后，静置15分钟，过滤、得到第二除杂过滤液；用经过预处理的HPD-100大孔吸附树脂纯化第二除杂过滤液，将第二除杂过滤液减压浓缩后上样，HPD-100树脂吸附时的流速为2 BV/h，吸附饱和后，先用流速为4 BV/h的纯水冲洗10分钟，然后用乙醇与乙酸乙酯混合溶剂进行洗脱，洗脱速度为3 BV/h，收集乙醇与乙酸乙酯混合溶剂的洗脱液，所述乙醇与乙酸乙酯混合液中，乙醇与乙酸乙酯的体积比为5:2；将收集的乙醇与乙酸乙酯混合溶剂洗脱液蒸发浓缩、烘干，即得甜菊糖苷，所得甜菊糖苷的纯度为96.5%。
实施例3
一种从甜叶菊中提取甜菊糖苷的方法，将甜叶菊叶片剔除杂质和色泽灰暗后，真空冷冻干燥，粉碎、过筛子，得到甜叶菊粉末；
取上述甜叶菊粉末500 g加入2.5 Kg正己烷，搅拌40分钟、过滤、回收溶剂，取甜叶菊滤饼、烘干、得到第一除杂粉末；在加热搅拌装置中加入第一除杂粉末和其重量5倍的乙醇与水混合溶液，所述乙醇与水混合溶剂中，乙醇的质量百分比为60%，加热搅拌装置的加热温度为60℃，搅拌速度为300转/分钟，处理时间为40分钟，然后过滤，取滤液，将滤液干燥，得到甜菊糖苷粗品；将甜菊糖苷粗品溶于适量的水，加入聚合硫酸铁后用氢氧化钙调节pH至7.5，搅拌15分钟后，静置20分钟，过滤、得到第二除杂过滤液；用经过预处理的HPD-100大孔吸附树脂纯化第二除杂过滤液，将第二除杂过滤液减压浓缩后上样，HPD-100树脂吸附时的流速为2 BV/h，吸附饱和后，先用流速为4 BV/h的纯水冲洗15分钟，然后用乙醇与乙酸乙酯混合溶剂进行洗脱，洗脱速度为3 BV/h，收集乙醇与乙酸乙酯混合溶剂的洗脱液，所述乙醇与乙酸乙酯混合液中，乙醇与乙酸乙酯的体积比为5:2；将收集的乙醇与乙酸乙酯混合溶剂洗脱液蒸发浓缩、烘干，即得甜菊糖苷，所得甜菊糖苷的纯度为97.2%。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。