一种可以裂解大肠杆菌及沙门氏菌的噬菌体裂解酶的制备方法与流程

文档序号:12608813阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种可以裂解大肠杆菌及沙门氏菌的噬菌体裂解酶的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:

S1. 扩增噬菌体ECGD1的裂解酶lysin基因;与质粒相连,并转入基因工程菌获得含lysin重组质粒的基因工程菌;

S2. 培养所述含lysin重组质粒的基因工程菌至菌液的OD值为0.6~0.8,用IPTG诱导含lysin重组质粒的基因工程菌,获得可溶性重组蛋白TrxA-lysin;所述裂解酶lysin基因的序列如SEQ ID NO:1所示。

2.根据权利要求1所述的噬菌体裂解酶的制备方法,其特征在于,S1所述裂解酶lysin基因由引物P1和P2扩增获得,所述引物P1和P2的序列如SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示。

3.根据权利要求1所述的噬菌体裂解酶的制备方法,其特征在于,S2所述IPTG诱导的条件为:IPTG的终浓度为1mM,诱导时间为2h,诱导温度为37℃。

4.根据权利要求1所述的噬菌体裂解酶的制备方法,其特征在于,还包括纯化可溶性重组蛋白TrxA-lysin的步骤。

5.权利要求1至4任一项方法获得的噬菌体裂解酶重组蛋白TrxA-lysin。

6.权利要求5所述噬菌体裂解酶重组蛋白TrxA-lysin在裂解细菌方面的应用。

7.权利要求5所述噬菌体裂解酶重组蛋白TrxA-lysin在制备预防和/或治疗细菌感染的药物方面的应用。

8.根据权利要求6或7所述的应用,其特征在于,所述细菌为大肠杆菌和/或沙门氏菌。

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