一种脂肪酸—血清白蛋白复合物及其制备方法与流程

本发明属于生物医药领域，涉及一种脂肪酸—血清白蛋白复合物及其制备方法。

背景技术：

血清蛋白是血液中脂肪酸的携带者。当身体需要能量或者需要建造材料时，脂肪细胞就把脂肪酸释放到血液中，脂肪酸被血清蛋白获取，并被运送到需要的部位。血清蛋白同样能够携带许多其它的不溶于水的分子，能够携带着许多药物分子，比如布洛芬。

脂肪酸对身体而言很重要，有两个方面：它们是建造脂质的成分，而脂质又构成了细胞周围和细胞内所有的生物膜；它们又是能量的不竭的源泉。我们的身体有了一个脂肪酸仓库——脂肪。

技术实现要素：

为了解决以上问题，本发明提供了一种脂肪酸—血清白蛋白复合物，复合物能够在水溶液中均匀分散且稳定存在，具有良好的开发前景。

一种脂肪酸—血清白蛋白复合物，所述复合物的原料包括脂肪酸和血清白蛋白，脂肪酸与血清白蛋白投料时的物质的量比为2:1-7:1。

优选的，所述脂肪酸包括油酸和棕榈酸。

优选的，所述血清白蛋白包括人血清白蛋白、动物血清白蛋白和重组血清白蛋白。更优选的为牛血清白蛋白。

另外，本发明还提供了脂肪酸—血清白蛋白复合物的制备方法与应用。

脂肪酸—血清白蛋白复合物的制备方法，包括以下步骤：将脂肪酸粉末溶于酒精得到混合溶液；在配好的混合溶液与NaOH溶液相混合，所得溶液用气吹干或者空气干燥；干燥后，加入PBS，迅速加热至80℃；待下降至50-60℃，加入血清白蛋白，搅拌；最后将所得溶液用过滤器过滤，即得所述的脂肪酸—血清白蛋白复合物。

其中，加入血清白蛋白后的搅拌时间为2-6h。

一种油酸-牛血清白蛋白复合物的制备方法，包括如下步骤：

1)称取0.017～0.179g油酸粉末溶于20mL酒精(100％)；

2)在溶液中加入38μL～398μL的1.6M NaOH；

3)所得溶液用1～4h氮气吹干或者24～72h空气干燥；

4)吹干后，加入20mLPBS，迅速加热至80℃；

5)待温度降至50～60℃，加入20mL 10％～30％BSA，搅拌2～6h；

6)将所得溶液用过滤器过滤；

7)将滤液分装贮存于-80℃～-20℃。

一种棕榈酸-牛血清白蛋白复合物的制备方法，包括如下步骤：

1)称取0.015～0.163g棕榈酸粉末溶于20mL酒精(100％)；

2)在溶液中加入37μL～398μL的1.6M NaOH；

3)所得溶液用1～4h氮气吹干或者24～72h空气干燥；

4)吹干后，加入20mLPBS，迅速加热至80℃；

5)待温度降至50～60℃，加入20mL 10％～30％BSA，搅拌2～6h；

6)将所得溶液用过滤器过滤；

7)将滤液分装贮存于-80℃～-20℃。

另外，本发明还提供了脂肪酸—血清白蛋白复合物在制备药物中的应用。所述药物易溶于水。

脂肪酸—血清白蛋白复合物用于实验室中造细胞的脂肪沉积模型，模型可用于各种医学研究。

本发明的优点：

1.本发明制备的脂肪酸—血清白蛋白复合物模拟人类或各种动物体内的脂肪酸存在方式，便于各种脂肪酸的体外研究；

2.本发明制备的脂肪酸—血清白蛋白复合物能够使本不溶于水的脂肪酸在水溶液中均匀分布且稳定存在，具有良好的开发前景；

3.本发明制备方法简单，制备的复合物使用方便，安全可靠，能够作为一种用于科学研究的药物。

说明书附图

图1细胞内的TG：甘油三酯水平，甘油三酯水平越高说明脂质累积越多。

图2细胞上清中LDH水平：LDH代表乳酸脱氢酶，通过检测细胞培养上清中LDH的酶活性，来检测细胞毒性。LDH水平越高，细胞毒性越强。

具体实施方式

为了便于理解，以下将通过具体的实施例对本发明进行详细地描述。需要特别指出的是，具体实例仅是为了说明，显然本领域的普通技术人员可以根据本文说明，在本发明的范围内对本发明做出各种各样的修正和改变，这些修正和改变也纳入本发明的范围内。

下列实施例中所用方法如无特别说明，均为常规方法。以下实施例中所需要的材料或试剂，如无特殊说明均为市场购得。

实施例1 一种油酸-牛血清白蛋白复合物的制备方法

包括如下步骤：

1)称取0.017～0.179g油酸粉末溶于20mL酒精(100％)；

2)在溶液中加入38μL～398μL的1.6M NaOH；

3)所得溶液用1～4h氮气吹干或者24～72h空气干燥；

4)吹干后，加入20mLPBS，迅速加热至80℃；

5)待温度降至50～60℃，加入20mL 10％～30％BSA，搅拌2～6h；

6)将所得溶液用过滤器过滤；

7)将滤液分装贮存于-80℃～-20℃。

在HepG2细胞中加入制得的油酸-牛血清白蛋白后，检测细胞内的TG(如图1甘油三酯水平，甘油三酯水平越高说明脂质累积越多)。

实施例2 一种棕榈酸-牛血清白蛋白复合物的制备方法

包括如下步骤：

1)称取0.015～0.163g棕榈酸粉末溶于20mL酒精(100％)；

2)在溶液中加入37μL～398μL的1.6M NaOH；

3)所得溶液用1～4h氮气吹干或者24～72h空气干燥；

4)吹干后，加入20mLPBS，迅速加热至80℃；

5)待温度降至50～60℃，加入20mL 10％～30％BSA，搅拌2～6h；

6)将所得溶液用过滤器过滤；

7)将滤液分装贮存于-80℃～-20℃。

在HepG2细胞中加入制得的棕榈酸-牛血清白蛋白后，检测细胞上清中LDH水平(如图2 LDH代表乳酸脱氢酶，通过检测细胞培养上清中LDH的酶活性，来检测细胞毒性。LDH水平越高，细胞毒性越强)。