本发明涉及某些新型选择性bace1抑制剂、包含所述化合物的药物组合物、使用所述化合物治疗生理病症的方法和可用于合成所述化合物的中间体和方法。本发明属于治疗阿尔兹海默氏病和其它涉及淀粉样β(aβ)肽，淀粉样前体蛋白(app)的神经毒性和高度聚集肽区段的疾病和病症的领域。阿尔兹海默氏病是影响全世界数百万患者的破坏性神经退行性病症。鉴于当前市场上批准的药剂仅向患者提供临时性、症状性益处，而不是阻止、减缓或逆转疾病，因此存在对治疗阿尔兹海默氏病的显著未满足的需求。阿尔兹海默氏病的特征在于aβ在大脑中的产生、聚集和沉积。完全或部分抑制β-分泌酶(β位点淀粉样前体蛋白-裂解酶；bace)已显示对小鼠模型中的斑块（plaque）相关和斑块依赖性病变具有显著影响，其表明即使aβ肽水平的少量降低可导致斑块负荷和突触缺陷的长期显著降低，因此尤其在治疗阿尔兹海默氏病中提供显著治疗益处。此外，已鉴定bace的两种同系物，称其为bace1和bace2，且据信bace1在临床上对于阿尔兹海默氏病的发展是最重要的。bace1主要在神经元中表达，而bace2已显示主要在外围中表达(参见d.oehlrich,bioorg.med.chem.lett.,24,2033-2045(2014))。此外，bace2对色素沉着是重要的，因为已鉴定其在处理色素细胞特异性黑色素细胞蛋白中发挥作用(参见l.rochin,等人,proc.natl.acad.sci.usa,110(26),10658-10663(2013))。需要具有中枢神经系统(cns)渗透作用的bace抑制剂，尤其与bace2相比，对bace1有选择性的抑制剂来提供针对aβ肽介导的病症，诸如阿尔兹海默氏病的治疗。美国专利8,158,620公开了稠合的氨基二氢噻嗪衍生物，其具有bace1抑制活性且进一步公开为可用作由aβ肽引起的神经退行性疾病，诸如阿尔兹海默氏型痴呆症的治疗剂。此外，美国专利8,338,407公开了某些稠合的氨基二氢噻嗪衍生物，所述衍生物具有可用于治疗某些神经退行性疾病，诸如阿兹海默型痴呆症的bace1抑制作用。本发明提供某些作为bace抑制剂的新型化合物。此外，本发明提供某些新型化合物，其是与bace2相比，对bace1有选择性的抑制剂。此外，本发明提供某些渗透cns的新型化合物。本发明还提供具有改善的副作用概况的潜力的某些新型化合物，例如通过相对于bace2，选择性抑制bace1。因此，本发明提供式i化合物：或其药学上可接受的盐。此外，本发明提供式ia化合物：或其药学上可接受的盐。本发明进一步提供式ii化合物：其中r为甲基、乙基或环丙基；或其药学上可接受的盐。此外，本发明提供式iia化合物：或其药学上可接受的盐。本发明还提供治疗患者的阿尔兹海默氏病的方法，其包括向需要此类治疗的患者给药有效量的式i、式ia、式ii或式iia化合物或其药学上可接受的盐。本发明进一步提供治疗患者的轻度认知障碍向阿尔兹海默氏病进展的方法，其包括向需要此类治疗的患者给药有效量的式i、式ia、式ii或式iia化合物或其药学上可接受的盐。本发明还提供用于抑制患者的bace的方法，其包括向需要此类治疗的患者给药有效量的式i、式ia、式ii或式iia化合物或其药学上可接受的盐。本发明还提供用于抑制bace介导的淀粉样前体蛋白裂解的方法，其包括向需要此类治疗的患者给药有效量的式i、式ia、式ii或式iia化合物或其药学上可接受的盐。本发明进一步提供用于抑制产生aβ肽的方法，其包括向需要此类治疗的患者给药有效量的式i、式ia、式ii或式iia化合物或其药学上可接受的盐。此外，本发明提供式i、式ia、式ii或式iia化合物或其药学上可接受的盐，其用于疗法中，尤其用于治疗阿尔兹海默氏病或用于治疗轻度认知障碍向阿尔兹海默氏病的进展。此外，本发明提供式i、式ia、式ii或式iia化合物或其药学上可接受的盐用于制备用于治疗阿尔兹海默氏病的药物的用途。本发明进一步提供药物组合物，其包含式i、式ia、式ii或式iia化合物或其药学上可接受的盐与一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。本发明进一步提供用于制备药物组合物的方法，其包括混合式i、式ia、式ii或式iia化合物或其药学上可接受的盐与一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。本发明还涵盖用于合成式i、式ia、式ii和式iia化合物的新型中间体和方法。基于临床表现和患者展现轻度认知障碍随时间向阿尔兹海默氏痴呆症的进展，轻度认知障碍被定义为与阿尔兹海默氏病相关的痴呆症的潜在前驱阶段。(morris等人，arch.neurol.,58,397-405(2001);petersen,等人，arch.neurol.,56,303-308(1999))。术语“治疗轻度认知障碍向阿尔兹海默氏病的进展”包括抑制、减缓、停止或逆转患者的轻度认知障碍向阿尔兹海默氏病的进展。如本文所用，术语“治疗(treating)”或“治疗(totreat)”包括抑制、减缓、停止或逆转现有症状或病症的进展或严重程度。如本文所用，术语“患者”是指人类。术语“抑制产生aβ肽”意味着减少患者的aβ肽的体内水平。如本文所用，术语“有效量”是指在向患者给药单一或多次剂量时，提供诊断或治疗下的患者中所需效果的本发明化合物或其药学上可接受的盐的量或剂量。有效量可容易地由作为本领域技术人员的主治诊断医师通过使用已知技术并通过观察在类似情况下获得的结果确定。在确定用于患者的有效量时，主治诊断医师考虑多个因素，包括但不限于：患者的物种；其大小、年龄和总体健康状况；所涉及的具体疾病或病症；疾病或病症的涉及程度或严重程度；单个患者的反应；所给药的特定化合物；给药模式；所给药的制备物的生物利用度特征；所选择的剂量方案；合并用药的使用；和其它相关情况。本发明化合物在宽剂量范围内通常是有效的。例如，每日剂量通常落在约0.01mg/kg至约20mg/kg体重的范围内。在一些情况下，低于前述范围的下限的剂量水平可以是完全足够的，而在其它情况下，仍可采用具有可接受副作用的更大剂量，且因此以上剂量范围并不意欲以任何方式限制本发明的范围。本发明化合物优选配制为药物组合物，其通过使得化合物生物可用的任何途径给药，包括口服和经皮途径。最优选地，此类组合物用于口服给药。此类药物组合物和其制备方法是本领域公知的。(参见，例如remington:thescienceandpracticeofpharmacy(d.b.troy,编辑，第21版,lippincott,williams&wilkins,2006)。式i、式ia、式ii或式iia化合物或其药学上可接受的盐尤其可用于本发明的治疗方法，但优选某些基团、取代基和构型。以下段落描述此类优选基团、取代基和构型。应理解，这些优选可适用于治疗方法和本发明的新化合物两者。因此，优选其中稠合双环为顺式构型的式i和式ii化合物或其药学上可接受的盐。例如，本领域普通技术人员将理解，式ia化合物对于如以下方案a中所示的标记为1和2的中心为顺式相对构型。此外，式ia化合物包括在标记为1、2和3的碳原子处含有3个手性中心的核心。本领域技术人员理解，方案a中所用的编号系统可不对应于本文中用于命名化合物的编号系统，且因此，方案a中所用的编号系统用于举例说明的目的。式ia的3个手性中心的优选相对构型显示于方案a中：方案a本发明的其它化合物为：n-[3-[(4as,7as)-2-氨基-5-(1,1-二氟乙基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-(1,2,4-三唑-1-基)吡嗪-2-甲酰胺；n-[3-[(4asr,5sr,7asr)-2-氨基-5-(1,1-二氟乙基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-(1,2,4-三唑-1-基)吡嗪-2-甲酰胺，和其药学上可接受的盐。尽管本发明涵盖所述化合物的所有单独的对映异构体和非对映异构体，以及对映异构体的混合物，包括外消旋体，但尤其优选具有如下所列举的绝对构型的化合物。n-[3-[(4as,5s,7as)-2-氨基-5-(1,1-二氟乙基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-(1,2,4-三唑-1-基)吡嗪-2-甲酰胺，和其药学上可接受的盐；和n-[3-[(4as,5s,7as)-2-氨基-5-(1,1-二氟乙基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-(1,2,4-三唑-1-基)吡嗪-2-甲酰胺水合物。此外，尤其优选n-[3-[(4as,5s,7as)-2-氨基-5-(1,1-二氟乙基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-(1,2,4-三唑-1-基)吡嗪-2-甲酰胺。此外，n-[3-[(4as,5s,7as)-2-氨基-5-(1,1-二氟乙基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-(1,2,4-三唑-1-基)吡嗪-2-甲酰胺丙二酸盐；和n-[3-[(4as,5s,7as)-2-氨基-5-(1,1-二氟乙基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-(1,2,4-三唑-1-基)吡嗪-2-甲酰胺4-甲基苯磺酸盐是尤其优选的。本领域普通技术人员将理解，如以下方案b中所描绘，本发明化合物可以互变异构形式存在。当在本申请中任意提及本发明化合物的特定互变异构体之一时，应理解为涵盖互变异构形式和其所有混合物。方案b此外，以下制备中所述的某些中间体可含有一个或多个氮或氧保护基。应理解，保护基可如本领域技术人员所理解的，根据待进行的具体反应条件和具体转化而变化。保护和脱保护条件是技术人员公知的且描述于文献中(参见例如“greene’sprotectivegroupsinorganicsynthesis”，第四版，peterg.m.wuts和theodoraw.greene,johnwileyandsons,inc.2007)。本领域普通技术人员可在合成本发明化合物中的任何适宜点通过方法诸如选择性结晶技术或手性色谱法分离或解析单独异构体、对映异构体和非对映异构体(参见例如，j.jacques等人，"enantiomers,racemates,andresolutions",johnwileyandsons,inc.,1981,以及e.l.eliel和s.h.wilen,”stereochemistryoforganiccompounds”,wiley-interscience,1994)。可例如通过在本领域中公知的标准条件下使本发明化合物的合适的游离碱、合适的药学上可接受的酸诸如盐酸在适合的溶剂诸如二乙醚中反应来形成本发明化合物的药学上可接受的盐，诸如盐酸盐。此外，此类盐的形成可在氮保护基脱保护时同时发生。此类盐的形成是本领域中公知且理解的。参见例如，gould,p.l.,“saltselectionforbasicdrugs,”internationaljournalofpharmaceutics,33:201-217(1986);bastin,r.j.,等人“saltselectionandoptimizationproceduresforpharmaceuticalnewchemicalentities,”organicprocessresearchanddevelopment,4:427-435(2000);和berge,s.m.,等人,“pharmaceuticalsalts,”journalofpharmaceuticalsciences,66:1-19,(1977)。某些缩写定义如下：“app”是指淀粉样前体蛋白；“bsa”是指牛血清白蛋白；“cdi”是指1,1'-羰基二咪唑；“cdna”是指互补脱氧核糖核酸；“dcc”是指1,3-二环己基碳二亚胺；“deoxo-fluor®”是指三氟化双(2-甲氧基乙基)胺基硫；“dic”是指1,3-二异丙基碳二亚胺；“dmap”是指4-二甲基氨基吡啶；“dmem”是指dulbecco氏改良的eagle氏培养基)；“dmso”是指二甲亚砜；“ebss”是指earle氏平衡盐溶液；“edci”是指1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐；“elisa”是指酶联免疫吸附测定法；“f12”是指ham氏f12培养基；“fbs”是指胎牛血清；“fc”是指可结晶片段；“fluolead™”是指三氟化4-叔丁基-2,6-二甲基苯基硫；“fret”是指荧光共振能量转移；“hatu”是指(二甲基氨基)-n,n-二甲基(3h-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基氧基)亚甲铵（methaniminium）六氟磷酸盐；“hbtu”是指(1h-苯并三唑-1-基氧基)(二甲基氨基)-n,n-二甲基亚甲铵六氟磷酸盐；“hek”是指人胚肾；“hf-吡啶”是指氟化氢吡啶或olah试剂或聚(氟化吡啶)（poly(pyridinefluoride)）；“hoat”是指1-羟基-7-氮杂苯并三唑；“hobt”是指1-羟基苯并三唑水合物；“ic50”是指可能对于该试剂产生50%最大抑制响应的试剂浓度；“igg1”是指免疫球蛋白样结构域fc-γ受体；“mem”是指最低必需培养基；“pbs”是指磷酸盐缓冲盐水；“pdapp”是指血小板衍生淀粉样前体蛋白；“ph”是指苯基；“pybop”是指(苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基鏻六氟磷酸盐)；“pybrop”是指三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸盐；“rfu”是指相对荧光单位；“rt-pcr”是指逆转录聚合酶链反应；“sds-page”是指十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳；“scx”是指强阳离子交换；“sfc”是指超临界色谱；“t3p®”是指丙基膦酸酐；“thf”是指四氢呋喃；“tempo”是指(2,2,6,6-四甲基-哌啶-1-基)氧基；“tmem”是指跨膜蛋白；“三苯甲基”是指式“(ph)3c-”的基团；“xtalfluor-e®或dast二氟锍盐（sulfinium）”是指(二乙基氨基)二氟锍四氟硼酸盐或n,n-二乙基-s,s-二氟硫亚铵（sulfilimunium）四氟硼酸盐；且“xtalfluor-m®或吗啉-dast二氟锍盐”是指二氟(吗啉基)锍四氟硼酸盐或二氟-4-吗啉基锍四氟硼酸盐。本领域普通技术人员应理解，术语“甲苯磺酸盐”、“甲苯磺酸”、“对甲苯磺酸”和“4-甲基苯磺酸”是指以下结构的化合物：。可通过本领域普通技术人员已知的多种程序制备本发明化合物或其盐，其中一些在以下方案、制备和实例中举例说明。本领域普通技术人员认识到，各所述途径的特定合成步骤可以不同方式组合，或与不同方案的步骤组合来制备本发明化合物或其盐。在以下方案中，各步骤的产物可通过本领域中公知的常规方法回收，包括萃取、蒸发、沉淀、色谱、过滤、研磨和结晶。在以下方案中，除非另外指明，否则所有取代基均如先前所定义。试剂和起始材料是本领域普通技术人员容易获得的。以下方案、制备和实例进一步举例说明本发明。方案1在方案1，步骤a中，在约-50℃的温度下在溶剂诸如thf中用有机碱诸如正丁基锂处理三甲基锍碘化物。随后在-10℃下将受保护的氧基甲基环氧乙烷(用合适保护基诸如三苯甲基保护)添加至碱性溶液中并将其搅拌约2小时以产生方案1，步骤a的受保护产物。“pg”是针对氨基或氧基开发的保护基，诸如氨基甲酸酯、酰胺或醚。此类保护基是本领域中公知且理解的。在约室温下，在溶剂诸如甲苯和无机碱诸如氢氧化钠的水溶液中，使用四-n-丁基硫酸铵或其它季铵盐相转移催化剂使步骤a的受保护产物与α-卤酯诸如溴乙酸叔丁酯（tert-butoxybromoacetate）反应，以产生方案1，步骤b的化合物。此类烷基化是本领域中公知的。或者，可使用碱诸如油中的60%氢化钠与溶剂诸如n,n-二甲基甲酰胺或thf和0℃至100℃的温度以产生步骤b的受保护产物。经两步程序将乙酸叔丁酯转化为肟。在约-70℃的温度下逐滴添加还原剂诸如己烷中的氢化异丁基铝，随后在约-60℃的温度下逐滴添加酸的水溶液，诸如盐酸。用有机萃取完成后处理，以产生中间体材料。将此材料溶解于有机溶剂诸如二氯甲烷中并用乙酸钠，随后用盐酸羟胺处理，以产生步骤c的肟产物。可通过几种方法在3+2环化反应中将方案1，步骤c的肟产物转化为步骤d的双环4,5-二氢异噁唑产物，所述方法诸如，在约10-15℃的温度下或在加热的情况下使用次氯酸钠或替代氧化剂诸如n-氯代琥珀酰亚胺的水溶液和在溶剂诸如叔丁基甲基醚、甲苯、二氯甲烷或二甲苯中。可通过生成有机金属试剂将2-氟苯基、5-溴苯基添加至二氢异噁唑。可使用与试剂诸如正丁基锂或异丙基氯化镁氯化锂配合物的卤素-金属交换，由4-溴-1-氟-2-碘-苯生成有机金属试剂并在约-78℃至15℃的温度范围下将其逐滴添加至溶剂诸如thf中。随后添加路易斯酸诸如三氟化硼二乙醚配合物，以产生方案1，步骤e的产物。可在乙酸中用锌处理所得双环四氢异噁唑，以形成方案1，步骤f的开环产物。打开异噁唑环的替代方法是在极性溶剂诸如乙醇中在压力和氢化条件下使用雷尼镍(raneynickel)。随后可使步骤f的产物与异硫氰酸苯甲酰酯在溶剂诸如二氯甲烷或thf中在约5℃至室温的温度下反应，以产生步骤g的硫脲化合物。可使用三氟甲磺酸酐和有机碱诸如吡啶在溶剂诸如二氯甲烷中在约-20℃的温度下形成噻嗪环，以产生步骤h的产物。可在方案1，步骤i中使用本领域中公知的方法，诸如在室温下用甲酸或在溶剂诸如二氯甲烷和甲醇中用对甲苯磺酸一水合物移除羟甲基保护基诸如三苯甲基，以产生步骤i的化合物。可使用氧化剂诸如2-碘酰基苯甲酸(ibx)在0-22℃的温度下在溶剂诸如dmso中，或在溶剂诸如乙腈或乙腈和水中在约5-25℃的温度搅拌下逐份或一次性添加(二乙酰氧基碘)苯，将羟甲基氧化为羧酸，以产生方案1，步骤j的化合物。tempo也可在氧化中用作催化剂。在方案1，步骤k中通过添加n,o-二甲基盐酸羟胺、有机碱诸如三乙胺和偶联试剂诸如hatu来由步骤j的酸产物制备weinreb酰胺。在室温下搅拌混合物以产生步骤k的产物。可使用的其它偶联剂包括cdi、碳二亚胺(诸如dcc、dic或edci)，或非亲核性阴离子的其它脲鎓盐或鏻盐，诸如hbtu、pybop和pybrop。随后在步骤l中使用有机金属试剂诸如grignard试剂或有机锂试剂在溶剂诸如thf中将weinreb酰胺转化为酮。适当的grignard试剂可以作为溶剂诸如乙醚或2-甲基四氢呋喃中的溶液在约-78℃至0℃的温度下添加至weinreb酰胺中，以产生步骤l的酮。在方案1，步骤m中，可使用deoxo-f1uor®在溶剂诸如二氯甲烷中在约-78℃至室温下将步骤l的化合物的r和酮基转化为二氟-r基。另一替代程序涉及将氟化试剂诸如deoxo-fluor®与三氟化硼二乙醚配合物预混合，随后添加方案1，步骤l的产物和三乙胺三氢氟酸盐，以产生方案1，步骤m的产物。或者，本领域中公知的其它可用氟化剂为三氟化二乙基氨基硫(也称作“dast”)、含有添加剂诸如三乙胺三氢氟酸盐的xtalfluor-e®或xtalfluor-m®或使用添加剂诸如hf-吡啶的fluolead™。在溶剂诸如乙醇中使用(1r,2r)-n,n'-二甲基-1,2-环己二胺或反式-n,n'-二甲基环己烷-1,2-二胺，并添加叠氮化钠，随后添加l-抗坏血酸钠和硫酸铜将苯基的5-溴转化为胺。将反应物加热至约80-100℃持续几小时且随后使用溶剂诸如乙酸乙酯用萃取进行后处理。随后在氢化条件下，在约40psi至50psi的氢气压力下在溶剂诸如甲醇或乙醇和thf中使用碳载钯诸如5-10%钯还原中间体，以产生方案1，步骤n的苯胺产物。方案2或者在方案2中，可在约5℃的温度下在溶剂诸如甲苯中用4-(2-氯乙酰基)吗啉和碱诸如四丁基硫酸氢铵处理方案1，步骤a的受保护产物，以产生方案2，步骤a的产物。吗啉基随后可在方案2，步骤b中充当离去基团。例如，可用适当的grignard试剂处理方案2，步骤a的产物，所述grignard试剂可由异丙基氯化镁氯化锂配合物和4-溴-1-氟-2-碘苯原位制备，或者如果可获得适当的grignard试剂，则可在约5℃的温度下将试剂直接添加至方案2，步骤a的产物中，以产生方案2，步骤b的产物。可通过加热至约50℃用盐酸羟胺和乙酸钠将羰基乙酸酯转化为肟，以产生方案2，步骤c的产物。可随后在溶剂诸如甲苯中使用氢醌并加热至回流而将方案2，步骤c的肟产物转化为方案2，步骤d的产物(与方案1，步骤e相同的产物)。可在约0-5℃的温度下在溶剂诸如二氯甲烷中使用有机碱诸如dmap和吡啶用乙酰氯酰化方案2，步骤d的胺产物，以产生方案2，步骤e的产物。可随后将方案2，步骤e的产物转化为如下文所讨论的方案3，步骤a的产物。方案3在替代途径中，如方案3中所述，用乙酰基保护方案1，步骤e的化合物的异噁唑氮，并在两步骤程序中移除羟甲基的保护基。例如，在溶剂诸如二氯甲烷中用有机碱诸如dmap和吡啶处理四氢异噁唑并添加乙酰氯。将温度维持在低于约10℃且随后将其在约室温下搅拌。用水稀释反应物并用溶剂诸如二氯甲烷萃取。用酸的水溶液诸如1n盐酸洗涤有机萃取物，并再次用溶剂诸如二氯甲烷萃取水溶液，随后用水溶液洗涤。可部分移除有机溶剂并可添加溶剂诸如二氯甲烷和甲醇中的酸诸如甲酸或对甲苯磺酸一水合物以将羟甲基脱保护。可在室温下搅拌混合物或将其加热至约40℃的温度直至羟基的脱保护完全，以产生方案3，步骤a的化合物。可以与方案1，步骤j中所述的程序类似的方式将方案3，步骤a的羟甲基产物氧化为方案3，步骤b的羧酸产物，且可以与方案1，步骤k中所述的程序类似的方式使用逐份添加或一次性添加的偶联剂诸如cdi和溶剂诸如二氯甲烷，冷却至-20℃并搅拌约1小时，且逐份或一次性添加n,o-二甲基盐酸羟胺来进一步制备weinreb酰胺。有机碱诸如三乙胺也可用于促进反应。可进一步添加cdi和n,o-二甲基羟胺直至观察到完全反应，以产生方案3，步骤c的weinreb酰胺产物。可由weinreb酰胺以与方案1，步骤l中所述的程序类似的方式形成方案3，步骤d的酮。可以与方案1，步骤m中所述的程序类似的方式将步骤d的酮转化为二氟-r基团，以产生方案3，步骤e的产物。可在本领域中公知的酸性条件下，诸如使用盐酸并加热至约100℃来将乙酰基四氢异噁唑脱保护，以产生方案3，步骤f的产物。可以与方案1，步骤f中所述的程序类似的方式用乙酸中的锌处理双环四氢异噁唑，以形成方案3，步骤g的开环产物。可以与方案1，步骤g中所述的程序类似的方式在一锅法2步骤反应中使用异硫氰酸苯甲酰酯制备方案3，步骤h的噻嗪产物。蒸发混合物，产生残余物并添加环己烷。将混合物加热至约60℃并添加甲基叔丁基醚以溶解残余物。过滤溶液并浓缩至干燥。可随后以与方案1，步骤h中所述的程序类似的方式形成噻嗪环，以产生方案3，步骤h的产物。方案4在方案4，步骤a中，可利用本领域中公知的偶联条件使方案1，步骤n的苯胺产物与杂芳族羧酸偶联。本领域技术人员将认识到，存在多种方法和试剂用于由羧酸与胺的反应形成酰胺。例如，在偶联剂和胺碱诸如二异丙基乙胺或三乙胺存在下，适当的苯胺与适当的酸的反应将产生方案4，步骤a的化合物。偶联剂包括碳二亚胺诸如dcc、dic、edci和芳族肟诸如hobt和hoat。此外，可使用非亲核性阴离子的脲鎓盐或鏻盐，诸如hbtu、hatu、pybop和pybrop或环状磷酸酐诸如t3p®代替更传统的偶联剂。可使用添加剂诸如dmap来增强反应。或者，可在碱诸如三乙胺或吡啶存在下，使用取代的苯甲酰氯将苯胺胺酰化。在方案4，步骤b中，可随后在溶剂诸如thf和乙醇和有机碱诸如吡啶中用有机碱诸如吡啶和o-甲基盐酸羟胺将受保护的噻嗪胺脱保护以提供式ii化合物。或者，可使用无机碱诸如甲醇中的氢氧化锂将噻嗪脱保护以提供式ii化合物。方案5或者，在方案5中，使用三氟乙酰胺、碘化铜、二胺诸如反式外消旋-n,n'-二甲基-1,2-环己二胺、无机碱诸如碳酸钾和碘化钠并加热至约100℃至130℃而将方案1，步骤m的溴化物产物转化为受保护的苯胺，以产生方案5，步骤a的受保护的苯胺产物。可随后将受保护的苯胺和噻嗪胺逐步脱保护。可使用碱诸如甲醇中的7n氨水解三氟乙酰胺，以产生苯胺和受保护的噻嗪，方案1，步骤n的相同产物。可随后在本领域中公知和方案4，步骤b中所述的条件下，使用溶剂诸如乙醇和thf中的o-甲基盐酸羟胺与有机碱诸如吡啶来将噻嗪脱保护，随后加热至约55℃或在室温下搅拌，随后浓缩并纯化，以产生方案5，步骤b的产物。或者，可颠倒脱保护的顺序，首先将噻嗪脱保护且最后将苯胺脱保护。在方案5，步骤c中，可随后使步骤b的苯胺产物与如方案4，步骤a中所述的适当的羧酸或酰氯反应，以产生式ii的产物。可例如在本领域中公知的标准条件下，在合适溶剂诸如二乙醚中，通过使适当的式i、式ia、式ii或式iia的游离碱和适当的药学上可接受的酸，诸如盐酸、对甲苯磺酸或丙二酸反应来形成本发明化合物的药学上可接受的盐，诸如盐酸盐。此外，此类盐的形成可在氮保护基的脱保护时同时发生。此类盐的形成是本领域中公知且理解的。参见例如，gould,p.l.,“saltselectionforbasicdrugs,”internationaljournalofpharmaceutics,33:201-217(1986);bastin,r.j.,等人“saltselectionandoptimizationproceduresforpharmaceuticalnewchemicalentities,”。以下制备和实施例进一步举例说明本发明。制备1(2s)-1-三苯甲基氧基丁-3-烯-2-醇方案1，步骤a：将thf(1264ml)中的三甲基锍碘化物(193.5g，948.2mmol)在环境温度下搅拌75分钟。将混合物冷却至-50℃并经30分钟经由插管添加正丁基锂(2.5mol/l，于己烷中，379ml，948.2mmol)。将反应物逐渐温热至-30℃并搅拌60分钟。逐份添加(2s)-2-三苯甲基氧基甲基环氧乙烷(100g，316.1mmol)，将温度保持在低于-10℃。添加完成之后，将反应混合物温热至室温并搅拌2小时。将反应物倒入饱和氯化铵中，分离各相，并用乙酸乙酯萃取水相。合并有机层并经硫酸镁干燥。过滤并在减压下浓缩，以产生残余物。通过硅胶色谱法，用甲基叔丁基醚：己烷(10%-15%梯度)洗脱纯化残余物，以产生标题化合物(56.22g，54%)。es/msm/z353(m+na)。替代制备1(2s)-1-三苯甲基氧基丁-3-烯-2-醇方案2，步骤a起始材料：将三苯基甲基氯(287g，947.1mmol)、dmap(7.71g，63.1mmol)和三乙胺(140g，1383.5mmol)添加至(2s)-丁-2-烯-1,2-二醇(如jacs,1999,121,8649中所制备)(64.5g，631mmol)于二氯甲烷(850ml)中的溶液中。在24℃下搅拌24小时。添加1n柠檬酸水溶液(425ml)。分离各层并在减压下将有机萃取物浓缩至干燥。添加甲醇(900ml)并冷却至5℃持续1小时。通过过滤收集固体并用5℃甲醇(50ml)洗涤。丢弃固体并在减压下将母液浓缩至干燥。添加甲苯(800ml)并浓缩至268g的质量以获得甲苯的48重量%溶液中的标题化合物(129g，67%)。制备21-吗啉基-2-[(1s)-1-(三苯甲基氧基甲基)烯丙基氧基]乙酮方案2，步骤a：将四丁基硫酸氢铵(83.2g，245.0mmol)和4-(2-氯乙酰基)吗啉(638.50g，3902.7mmol)添加至0℃与5℃之间的1-三苯甲基氧基丁-3-烯-2-醇（832.4,2519mmol）于甲苯(5800ml)中的溶液中。将氢氧化钠(1008.0g，25202mmol)添加至水(1041ml)中。在0℃与5℃之间搅拌19小时。添加水(2500ml)和甲苯(2500ml)。分离各层并用水(2×3500ml)洗涤有机萃取物。在减压下将有机萃取物浓缩至干燥。将甲苯(2500ml)添加至残余物中且随后缓慢添加正庚烷(7500ml)。搅拌16小时。通过过滤收集所得固体并用正庚烷(1200ml)洗涤。在真空下干燥固体，以获得标题化合物(1075.7g，98%)。制备31-(5-溴-2-氟-苯基)-2-[(1s)-1-(三苯甲基氧基甲基)烯丙基氧基]乙酮方案2，步骤b：以将反应温度维持在低于5℃的速率将异丙基氯化镁氯化锂配合物(3079ml，2000mmol)于thf中的1.3m溶液添加至4-溴-1-氟-2-碘苯(673.2g，2237.5mmol)于甲苯(2500ml)的溶液中。搅拌1小时。以将反应温度维持在低于5℃的速率将所得grignard溶液(5150ml)添加至1-吗啉基-2-[(1s)-1-(三苯甲基氧基甲基)烯丙基氧基]乙酮(500g,1093mmol)于甲苯(5000ml)中的溶液中。将温度维持在低于5℃搅拌3小时。添加额外制备的grignard溶液(429ml)并搅拌1小时。以将温度维持在低于5℃的速率添加1n柠檬酸水溶液(5000ml)。分离各层并用水(5000ml)洗涤有机萃取物。在减压下将溶液浓缩至干燥。将甲醇(2000ml)添加至残余物中并浓缩，以产生作为残余物的标题化合物(793g，73.4%功效，83%)。制备41-(5-溴-2-氟-苯基)-2-[(1s)-1-(三苯甲基氧基甲基)烯丙基氧基]乙酮肟方案2，步骤c：将盐酸羟胺(98.3g)添加至甲醇(3800ml)中的1-(5-溴-2-氟-苯基)-2-[(1s)-1-(三苯甲基氧基甲基)烯丙基氧基]乙酮(450g,707mmol)和乙酸钠(174g)中。将溶液加热至50℃持续2小时。冷却至24℃并浓缩。将水(1000ml)和甲苯(1500ml)添加至残余物中。分离各层并用甲苯(500ml)萃取水相。合并有机萃取物并用水(2×400ml)洗涤。在减压下浓缩溶液，以产生作为残余物的标题化合物(567g，61.4%功效，88%)。制备52-[(1s)-1-(三苯甲基氧基甲基)烯丙基氧基]乙酸叔丁酯方案1，步骤b：将(2s)-1-三苯甲基氧基丁-3-烯-2-醇(74.67g,226.0mmol)添加至四-n-丁基硫酸铵(13.26g，22.6mmol)于甲苯(376ml)中的溶液中。添加水(119ml)中的氢氧化钠(50质量%)，随后添加2-溴乙酸叔丁酯(110.20g，565.0mmol)。在环境温度下搅拌反应混合物18小时。倒入水中，分离各相，并用乙酸乙酯萃取水相。合并有机层并经硫酸镁干燥。过滤混合物并在减压下浓缩，以产生标题化合物(77.86g，77%)。es/msm/z467(m+na)。制备6(1e)-2-[(1s)-1-(三苯甲基氧基甲基)烯丙基氧基]乙醛肟方案1，步骤c：将2-[(1s)-1-(三苯甲基氧基甲基)烯丙基氧基]乙酸叔丁酯(77.66g，174.7mmol)于二氯甲烷(582.2ml)中的溶液冷却至-78℃。经35分钟逐滴添加二异丁基氢化铝于己烷中的溶液(1mol/l，174.7ml)并将温度维持在低于-70℃。在-78℃下搅拌5小时。将水中的盐酸(2mol/l，192.1ml)逐滴添加至反应混合物中，将温度保持在低于-60℃。将反应物逐渐温热至环境温度并搅拌60分钟。分离有机萃取物并用饱和碳酸氢钠洗涤。经硫酸镁干燥溶液，过滤，并在减压下浓缩以产生残余物。在二氯甲烷中溶解残余物。添加乙酸钠(28.66g，349.3mmol)，随后添加盐酸羟胺(18.21g，262.0mmol)。在环境温度下搅拌18小时。倒入水中，分离各相，并用二氯甲烷萃取水相。合并有机层并经硫酸镁干燥。过滤混合物并在减压下浓缩，以产生标题化合物(68.38g，101%)。es/msm/z386(m-h)。制备7(3ar,4s)-4-(三苯甲基氧基甲基)-3,3a,4,6-四氢呋喃并[3,4-c]异噁唑方案1，步骤d：将(1e)-2-[(1s)-1-(三苯甲基氧基甲基)烯丙基氧基]乙醛肟(55.57g,143.4mmol)于叔丁基甲基醚(717ml)中的溶液冷却至5℃。逐滴添加次氯酸钠(5%，于水中，591ml，430.2mmol)，将温度保持在低于10℃。在10℃下搅拌30分钟。将反应物温热至15℃。在15℃下搅拌18小时。用乙酸乙酯稀释反应混合物并用饱和碳酸氢钠洗涤。分离各相，用5%亚硫酸氢钠溶液和盐水洗涤有机相。经硫酸镁干燥溶液，过滤，并在减压下浓缩以产生残余物。通过硅胶色谱法，用50%甲基叔丁基醚/二氯甲烷：己烷(20%-27%梯度)洗脱纯化残余物，以产生标题化合物(35.84g，65%)。es/msm/z408(m+na)。制备8(3ar,4s,6ar)-6a-(5-溴-2-氟-苯基)-4-(三苯甲基氧基甲基)-3,3a,4,6-四氢呋喃并[3,4-c]异噁唑方案1，步骤e：将4-溴-1-氟-2-碘-苯(86.94g，288.9mmol)于thf(144.5ml)和甲苯(1445ml)中的溶液冷却至-78℃。逐滴添加正丁基锂(2.5m，于己烷中，120ml，288.9mmol)，将温度保持在低于-70℃。在-78℃下搅拌30分钟。逐滴添加三氟化硼二乙醚配合物(36.5ml，288.9mmol)，将温度保持在低于-70℃。在-78℃下搅拌溶液30分钟。经30分钟将(3ar,4s)-4-(三苯甲基氧基甲基)-3,3a,4,6-四氢呋喃并[3,4-c]异噁唑(55.69g,144.5mmol)于thf(482ml)中的溶液逐滴添加至反应物中，将温度保持在低于-65℃。在-78℃下搅拌90分钟。快速添加饱和氯化铵，将温度保持在低于-60℃。倒入盐水中，并用乙酸乙酯萃取水相。合并有机萃取物并经硫酸镁干燥。过滤并在减压下浓缩，以产生残余物。通过硅胶色谱法，用10%-15%二乙醚：己烷(0%-70%梯度)洗脱纯化残余物，以产生标题化合物(36.52g，45%)。es/msm/e(79br/81br)560/562[m+h]。替代制备8方案2，步骤d：在氮气下将1-(5-溴-2-氟-苯基)-2-[(1s)-1-(三苯甲基氧基甲基)烯丙基氧基]乙酮肟(458g,502mmol)和氢醌(56.3g，511mmol)于甲苯(4000ml)中的溶液加热至回流持续27小时。将溶液冷却至24℃并添加碳酸钠水溶液(800ml)。分离各层并用甲苯(300ml)萃取水相。合并有机萃取物并用水(2×500ml)洗涤。在减压下浓缩溶液，以产生残余物。添加异丙醇(1500ml)并加热至回流。冷却至24℃并通过过滤收集固体。在真空下干燥固体，以获得标题化合物(212g，75%)。制备91-[(3ar,4s,6as)-6a-(5-溴-2-氟-苯基)-4-(三苯甲基氧基甲基)-3,3a,4,6-四氢呋喃并[3,4-c]异噁唑-1-基]乙酮方案2，步骤e：在氮气下将乙酰氯(35.56g，503.9mmol)添加至(3ar,4s,6ar)-6a-(5-溴-2-氟-苯基)-4-(三苯甲基氧基甲基)-3,3a,4,6-四氢呋喃并[3,4-c]异噁唑(235.3g,420mmol)、dmap(5.13g,42.0mmol)和吡啶(66.45g,840.1mmol)于二氯甲烷(720ml)中的溶液中，将内部温度保持在低于5℃。搅拌1小时且随后添加水(300ml)和1m硫酸(300ml)。搅拌混合物10分钟并使各层分离。收集有机萃取物并用饱和碳酸钠(500ml)和水(500ml)洗涤。经硫酸镁干燥溶液。过滤并在减压下浓缩，以产生作为灰色固体的1-[(3ar,4s,6as)-6a-(5-溴-2-氟-苯基)-4-(三苯甲基氧基甲基)-3,3a,4,6-四氢呋喃并[3,4-c]异噁唑-1-基]乙酮(235g,93%)。制备101-[(3ar,4s,6as)-6a-(5-溴-2-氟苯基)-4-(羟基甲基)四氢-1h,3h-呋喃并[3,4-c][1,2]噁唑-1-基]乙酮方案3，步骤a：在20l夹套反应器中在氮气下将乙酰氯(290ml，4075mmol)添加至(3ar,4s,6ar)-6a-(5-溴-2-氟-苯基)-4-(三苯甲基氧基甲基)-3,3a,4,6-四氢呋喃并[3,4-c]异噁唑(1996g,3384mmol)、dmap(56.0g,458mmol)、吡啶(500ml,6180mmol)于二氯甲烷(10l)中的溶液中，将内部温度保持在低于10℃。添加完成之后(1小时)温热至20℃并搅拌过夜。如果反应不完全，则添加乙酰氯、dmap、吡啶和二氯甲烷直至观察到完全反应。将反应混合物冷却至0℃并缓慢添加水(5l)，在10℃下搅拌反应混合物30分钟并使各层分离。收集有机萃取物并用二氯甲烷(1l)洗涤水溶液。用1n盐酸水溶液(2×4l)洗涤合并的有机萃取物，用二氯甲烷(2×1l)萃取水溶液。用水(4l)洗涤合并的有机萃取物并在减压下移除溶剂，产生大约5l的总体积。添加90%甲酸(1800ml)并在环境温度下静置3天。温热至40℃持续2小时，随后在减压下移除溶剂。用甲醇(4l)稀释残余物并缓慢添加饱和碳酸钠水溶液(3l)。添加固体碳酸钠(375g)以将ph调节至8-9。在45℃下搅拌1小时，随后冷却至环境温度。通过过滤移除固体、用甲醇(4×500ml)洗涤，随后用2n氢氧化钠水溶液(100ml)处理并在环境温度下静置1小时。通过过滤移除固体、用甲醇(2×100ml)洗涤。在减压下蒸发溶剂并在乙酸乙酯(5l)与水(2l)之间分配残余物。用乙酸乙酯(2l)萃取水溶液并用盐水(2×1l)洗涤合并的有机萃取物。在减压下移除溶剂，添加甲基叔丁基醚(2.5l)并蒸发至干燥。添加甲基叔丁基醚(4l)并在65℃下搅拌1小时，冷却至环境温度并通过过滤收集固体，用甲基叔丁基醚(3×500ml)洗涤。在真空下干燥成米色固体。在甲苯(7.5l)中将此固体加热至110℃直至完全溶解，经1小时冷却至18℃，并在此温度下搅拌1小时。温热至40℃且当形成沉淀时，再次冷却至18℃。搅拌45分钟，随后通过过滤收集固体，用甲苯(2×500ml)洗涤。在真空下干燥固体，以获得标题化合物(443.1g，36%，通过lcms的95%纯度)。在真空下蒸发滤液，以产生残余物。通过硅胶快速色谱法，用异己烷中的20%至100%乙酸乙酯洗脱纯化残余物。在60℃下使含有级分的产物在甲基叔丁基醚(2l)中浆化（slurry）30分钟，冷却至环境温度，并通过过滤收集固体，用甲基叔丁基醚(2×200ml)洗涤。在真空下干燥固体，以产生作为米色结晶固体的标题化合物(304g，24%，通过lcms的88%纯度)。在真空下蒸发滤液，产生残余物。通过硅胶快速色谱法，用异己烷中的20%至100%乙酸乙酯洗脱纯化残余物，以产生标题化合物(57.8g，5%，通过lcms的88%纯度)。es/ms:m/z(79br/81br)360.0/362.0[m+h]。替代制备10方案3，步骤a：将1-[(3ar,4s,6as)-6a-(5-溴-2-氟-苯基)-4-(三苯甲基氧基甲基)-3,3a,4,6-四氢呋喃并[3,4-c]异噁唑-1-基]乙酮(69g,114.5mmol)添加至对甲苯磺酸一水合物(2.2g，11.45mmol)、二氯甲烷(280ml)和甲醇(700ml)的15℃溶液中。搅拌18小时且随后在减压下移除溶剂。用二氯甲烷(350ml)稀释残余物并添加1m碳酸钠水溶液(140ml)和水(140ml)。分离各层并在减压下蒸发有机层。将甲苯(350ml)添加至残余物中并加热至回流持续1小时。以10℃/h的速率冷却至10-15℃。通过过滤收集固体并用甲苯(70ml)洗涤。在真空下干燥固体，以获得作为灰色固体的标题化合物(30g，65%)。制备11(3ar,4s,6as)-1-乙酰基-6a-(5-溴-2-氟-苯基)-3,3a,4,6-四氢呋喃并[3,4-c]异噁唑-4-甲酸方案3，步骤b：在20l夹套反应器中将水(2l)添加至1-[(4s,6as)-6a-(5-溴-2-氟-苯基)-4-(羟基甲基)-3,3a,4,6-四氢呋喃并[3,4-c]异噁唑-1-基]乙酮(804.9g,2177mmol)、tempo(40.0g，251mmol)于乙腈(4.5l)中的悬浮液中，并冷却至5℃的内部温度。经30分钟逐份添加(二乙酰氧基碘)苯(1693g，4993.43mmol)。使用反应器冷却来控制放热，且随后保持在20℃直至lcms显示完全反应。在环境温度下缓慢添加亚硫酸氢钠(70g，672.68mmol)于水(300ml)中的悬浮液，将内部温度保持在低于25℃。搅拌30分钟且随后冷却至5℃。添加水(2l)，随后经1小时缓慢添加47重量%氢氧化钠水溶液(780ml)，将内部温度保持在低于10℃。添加乙酸乙酯(2l)和异己烷(5l)，剧烈搅拌并分离各层。用水(1l)萃取两相有机层并用甲基叔丁基醚(2.5l)洗涤合并的水溶液。将萃取物水溶液冷却至5℃并经30分钟缓慢添加37%盐酸(1.4l)，将内部温度保持在约5℃。添加乙酸乙酯(5l)，分离各层并用盐水(3×1l)洗涤有机物。用乙酸乙酯(2.5l)萃取合并的萃取物水溶液，用盐水(1l)洗涤合并的有机物，随后用硫酸钠干燥并过滤。用庚烷(2.5l)稀释有机物并在减压下蒸发至干燥。添加甲基叔丁基醚(1.5l)和庚烷(1.5l)并蒸发至干燥。添加庚烷(2.5l)并蒸发至干燥两次。添加庚烷(500ml)和甲基叔丁基醚(500ml)并在40℃下搅拌30分钟，随后通过过滤收集沉淀物，用庚烷/甲基叔丁基醚(1：1，1l)洗涤，随后用甲基叔丁基醚(3×300ml)洗涤并风干，以产生作为米色结晶固体的标题化合物(779g，91%)。es/ms:m/z(79br/81br)374.0/376.0[m+h]。[α]d20=-19.0°(c=1.004,氯仿)。替代制备11方案3，步骤b：将水(150ml)和乙腈(150ml)添加至1-[(4s,6as)-6a-(5-溴-2-氟-苯基)-4-(羟基甲基)-3,3a,4,6-四氢呋喃并[3,4-c]异噁唑-1-基]乙酮(30g，73.3mmol)、tempo(1.14g，7.30mmol)和(二乙酰氧基碘)苯(51.9g，161mmol)中。冷却至15℃并搅拌2小时。在环境温度下缓慢添加水(150ml)中的硫代硫酸钠(21g)和碳酸钾(22g)。搅拌1小时且随后添加甲基叔丁基醚(150ml)。分离各层并用浓硫酸将水层的ph调节至2-3。添加乙酸乙酯(150ml)并分离各层。在减压下将有机层蒸发至干燥。添加正庚烷(90ml)并加热至回流持续1小时。冷却至15℃且随后通过过滤收集沉淀物，用正庚烷(90ml)洗涤。在真空下干燥，产生作为白色固体的标题化合物(27g，98%)。制备12(3ar,4s,6as)-1-乙酰基-6a-(5-溴-2-氟苯基)-n-甲氧基-n-甲基四氢-1h,3h-呋喃并[3,4-c][1,2]噁唑-4-甲酰胺方案3，步骤c：在10l夹套反应器中，在氮气下将(3ar,4s,6as)-1-乙酰基-6a-(5-溴-2-氟-苯基)-3,3a,4,6-四氢呋喃并[3,4-c]异噁唑-4-甲酸(771g,2019mmol)于二氯甲烷(7.0l)中的溶液冷却至0℃，并经40分钟逐份添加cdi(400g，2421mmol)。将反应器夹套冷却至-20℃并搅拌1小时，且随后经约30分钟逐份添加n,o-二甲基盐酸羟胺(260.0g，2612mmol)。在-20℃下搅拌1小时，在0℃下搅拌2小时，并在10℃下搅拌7小时。添加cdi(175g，1058mmol)并在10℃下搅拌过夜。在10℃下进一步添加cdi(180g，1088mmol)并搅拌1小时，随后在10℃下添加n,o-二甲基盐酸羟胺(140g，1407mmol)并继续搅拌。如果反应不完全，则可进一步装填cdi，随后装填n,o-二甲基盐酸羟胺，直至观察到完全反应。将反应混合物冷却至5℃并用1n盐酸水溶液(5l)，随后用2n盐酸水溶液(5l)洗涤。用二氯甲烷(1l)萃取合并的水溶液，合并有机萃取物并用水(2.5l)、1n氢氧化钠水溶液(2.5l)和水(2.5l)洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并在减压下蒸发，以产生残余物。添加甲基叔丁基醚(3l)并在减压下蒸发。进一步添加甲基叔丁基醚(2l)并在50℃下搅拌1小时，冷却至25℃并搅拌30分钟。通过过滤收集所得固体，用甲基叔丁基醚(2×500ml)洗涤并在真空下干燥，以产生作为白色固体的标题化合物(760g，88%)。es/ms:m/z(79br/81br)417.0/419.0[m+h]。替代制备12方案3，步骤c：在氮气下将(3ar,4s,6as)-1-乙酰基-6a-(5-溴-2-氟-苯基)-3,3a,4,6-四氢呋喃并[3,4-c]异噁唑-4-甲酸(27g,70.7mmol)于n,n-二甲基甲酰胺(135ml)中的溶液冷却至0℃并添加cdi(14.9g，91.9mmol)。搅拌1小时且随后添加n,o-二甲基盐酸羟胺(9.0g，92mmol)和三乙胺(14.3g，141mmol)。在15℃下搅拌16小时。将反应混合物冷却至0℃并添加0.5m硫酸水溶液(675ml)。搅拌1小时。通过过滤收集所得固体。在甲基叔丁基醚(90ml)中浆化固体1小时。通过过滤收集固体，用甲基叔丁基醚(30ml)洗涤。在真空下干燥，产生作为固体的标题化合物(23g，78%)。制备131-[(3ar,4s,6as)-1-乙酰基-6a-(5-溴-2-氟-苯基)-3,3a,4,6-四氢呋喃并[3,4-c]异噁唑-4-基]乙酮方案3，步骤d：在20l夹套反应器中，将(3ar,4s,6as)-1-乙酰基-6a-(5-溴-2-氟苯基)-n-甲氧基-n-甲基四氢-1h,3h-呋喃并[3,4-c][1,2]噁唑-4-甲酰胺(654.0g,1536mmol)于thf(10l)中的溶液冷却至-60℃并逐滴添加甲基溴化镁于2-甲基四氢呋喃中的3.2m溶液(660ml，2110mmol)，同时将内部温度保持在低于-40℃。在-40℃下搅拌反应混合物30分钟，随后冷却至-50℃并添加1n盐酸水溶液(2l)于thf(2l)中的溶液，将内部温度保持在低于-38℃。将温度升高至10℃并添加乙酸乙酯(5l)和水(1l)，搅拌并使内部温度达至5℃并分离各层。用乙酸乙酯(1l)萃取水层并合并有机萃取物。用水(2l)洗涤有机萃取物并用乙酸乙酯(1l)萃取水层。合并有机萃取物并用盐水(3×2l)洗涤，随后经硫酸镁干燥，过滤，并在减压下蒸发产生残余物。添加环己烷(2.5l)，在60℃下搅拌1小时，随后在20℃下搅拌30分钟，并通过过滤收集固体，用环己烷(500ml)洗涤。在真空下干燥固体，以获得作为白色固体的标题化合物(565g，99%)。es/ms:m/z(79br/81br)372.0/374.0[m+h],[α]d20=-58.0°(c=1.000,氯仿)。替代制备13方案3，步骤d：将(3ar,4s,6as)-1-乙酰基-6a-(5-溴-2-氟苯基)-n-甲氧基-n-甲基四氢-1h,3h-呋喃并[3,4-c][1,2]噁唑-4-甲酰胺(4.0g,9.59mmol)于thf(60ml)中的溶液冷却至-5℃，并逐滴添加甲基溴化镁于2-甲基四氢呋喃中的3.0m溶液(5.0ml，15mmol)，同时将内部温度保持在-5℃与0℃之间。在-5℃与0℃之间搅拌反应混合物60分钟，随后添加饱和氯化铵溶液(20ml)。添加甲基叔丁基醚(40ml)，使内部温度达到5℃并分离各层。在减压下蒸发有机层产生残余物。添加正庚烷(50ml)，搅拌，并通过过滤收集固体。在真空下干燥固体，以获得作为固体的标题化合物(3.0g，77%)。制备141-[(3ar,4s,6as)-6a-(5-溴-2-氟苯基)-4-(1,1-二氟乙基)四氢-1h,3h-呋喃并[3,4-c][1,2]噁唑-1-基]乙酮方案3，步骤e：在0℃-5℃下将1-[(3ar,4s,6as)-1-乙酰基-6a-(5-溴-2-氟-苯基)-3,3a,4,6-四氢呋喃并[3,4-c]异噁唑-4-基]乙酮(5.08g,13.6mmol)一次性添加至xtalfluor-m®(10.02g,39.18mmol)于无水二氯甲烷(100ml)中的搅拌悬浮液中。搅拌混合物10分钟并经10分钟逐滴添加三乙胺三氢氟酸盐(4.5ml，27mmol)。在冰浴中搅拌反应混合物8小时，随后温热至环境温度并搅拌过夜。添加饱和碳酸钠水溶液(100ml)并搅拌1小时。分离各层并用二氯甲烷(2×50ml)萃取水溶液。合并有机萃取物并用饱和碳酸氢钠水溶液(100ml)、2n盐酸水溶液(2×100ml)和盐水(100ml)洗涤。蒸发至干燥产生淡棕色固体，并在60℃下将其溶解于甲基叔丁基醚(300ml)中。过滤热溶液并蒸发滤液，以产生棕色固体(5.3g，81%，通过lcms的82%纯度)，其未经进一步纯化即使用。es/ms:m/z(79br/81br)393.8/395.8[m+h]。替代制备14方案3，步骤e：在-14℃下，将xtalfluor-m®(1.21kg,4.73mol)分份添加至1-[(3ar,4s,6as)-1-乙酰基-6a-(5-溴-2-氟-苯基)-3,3a,4,6-四氢呋喃并[3,4-c]异噁唑-4-基]乙酮(565g,1.51mol)于无水二氯甲烷(5l)中的搅拌溶液中。搅拌混合物10分钟，并经20分钟逐滴添加三乙胺三氢氟酸盐(550g，3.34mol)。在-10℃下搅拌反应混合物大约10小时，随后温热至环境温度并搅拌过夜。缓慢添加50%氢氧化钠水溶液(750ml)，将内部温度保持在低于10℃，随后添加水(1.5l)和饱和碳酸氢钠水溶液(1l)并搅拌30分钟。分离各层并用二氯甲烷(1l)萃取水溶液。合并有机萃取物并用盐水(3l)、2n盐酸水溶液(5l)和盐水(3l)洗涤。蒸发以产生残余物并通过硅胶色谱法，用异己烷中的50%-100%二氯甲烷，随后用二氯甲烷中的10%甲基叔丁基醚洗脱纯化，产生作为白色粉末的标题化合物(467g，73%，通过lcms的94%纯度)。es/ms:m/z(79br/81br)393.8/395.8[m+h]。制备15(3ar,4s,6as)-6a-(5-溴-2-氟-苯基)-4-(1,1-二氟乙基)-3,3a,4,6-四氢-1h-呋喃并[3,4-c]异噁唑方案3，步骤f：在10l夹套反应器中，将37重量%盐酸水溶液(1.3l，16mol)添加至1-[(3ar,4s,6as)-6a-(5-溴-2-氟苯基)-4-(1,1-二氟乙基)四氢-1h,3h-呋喃并[3,4-c][1,2]噁唑-1-基]乙酮(570g,1.45mol)于1,4-二氧杂环己烷(5l)中的溶液中，并在100℃下搅拌大约3小时或直至lcms显示完全反应。将反应混合物冷却至10℃，用水(1l)稀释并缓慢添加50重量%氢氧化钠水溶液(800ml)和水(1l)的混合物，将内部温度保持在低于20℃。添加乙酸乙酯(2.5l)并剧烈搅拌，随后分离各层并用盐水(2l)，进一步用盐水(1l)和水(1l)洗涤有机相。经硫酸镁干燥，过滤，并在减压下浓缩至干燥，以产生残余物。添加环己烷(2.5l)并蒸发至干燥，随后重复，以获得作为棕色油的标题化合物(527g，89%，通过lcms的86%纯度)。es/ms:m/z(79br/81br)351.8/353.8[m+h]。制备16[(2s,3r,4s)-4-氨基-4-(5-溴-2-氟苯基)-2-(1,1-二氟乙基)四氢呋喃-3-基]甲醇方案3，步骤g：在环境温度下，将锌粉(6.0g，92mmol)添加至(3ar,4s,6as)-6a-(5-溴-2-氟-苯基)-4-(1,1-二氟乙基)-3,3a,4,6-四氢-1h-呋喃并[3,4-c]异噁唑(5.06g,13.4mmol)于乙酸(100ml)中的溶液中并搅拌过夜。用乙酸乙酯(200ml)和水(300ml)稀释混合物并剧烈搅拌，同时添加碳酸钠(97g，915mmol)。分离各层并用盐水(2×200ml)洗涤有机层，经硫酸镁干燥，过滤，并浓缩以产生残余物。通过硅胶色谱法，用异己烷中的0%至100%甲基叔丁基醚洗脱纯化残余物，以产生作为蜡状固体的标题化合物(4.67g，89%，通过lcms的90%纯度)。es/ms:m/z(79br/81br)354.0/356.0[m+h]。替代制备16方案3，步骤g：在20℃下，将锌粉(200g，3.06mol)逐份添加至(3ar,4s,6as)-6a-(5-溴-2-氟-苯基)-4-(1,1-二氟乙基)-3,3a,4,6-四氢-1h-呋喃并[3,4-c]异噁唑(304g，75%纯度，647mmol)于乙酸(2l)和水(2l)中的溶液中，随后温热至40℃并搅拌过夜。用水(2l)稀释混合物并剧烈搅拌，同时添加碳酸钠(4kg，43.4mol)，随后进一步用碳酸钠调节至ph8-9。添加乙酸乙酯(5l)和水(2.5l)，搅拌30分钟并经由硅藻土过滤，用2:1乙腈/水洗涤。分离各层，用乙酸乙酯(2×2.5l)萃取水溶液并用盐水(2×2.5l)洗涤合并的有机萃取物，经硫酸镁干燥，过滤，并浓缩以产生残余物。通过sfc，柱：chiralpakad-h(5)，50×250mm；洗脱剂：12%乙醇(co2中的0.2%二乙基甲胺)；流速：在uv220nm下340g/min来纯化残余物，以产生作为白色固体的标题化合物(197.7g，84%)。[α]d20=-6.93°(c=0.678，氯仿)。es/ms:m/z(79br/81br)354.0/356.0[m+h]。制备17[(2s,3r,4s)-4-氨基-4-(5-溴-2-氟-苯基)-2-(三苯甲基氧基甲基)四氢呋喃-3-基]甲醇方案1，步骤f：将(3ar,4s,6ar)-6a-(5-溴-2-氟-苯基)-4-(三苯甲基氧基甲基)-3,3a,4,6-四氢呋喃并[3,4-c]异噁唑(31.30g,55.9mmol)添加至乙酸(186ml)中以产生悬浮液。添加锌(25.6g，391mmol)并剧烈搅拌反应混合物18小时。用甲苯稀释混合物并经由硅藻土过滤。在减压下浓缩滤液。用乙酸乙酯溶解残余物，用盐水和饱和碳酸氢钠洗涤。分离各相，经硫酸镁干燥，过滤并在减压下浓缩，以产生标题化合物(31.35g，99%)。es/msm/e(79br/81br)562/564[m+h]。制备18n-[[(3s,4r,5s)-3-(5-溴-2-氟-苯基)-4-(羟基甲基)-5-(三苯甲基氧基甲基)四氢呋喃-3-基]硫代氨基甲酰基]苯甲酰胺方案1，步骤g：将[(2s,3r,4s)-4-氨基-4-(5-溴-2-氟-苯基)-2-(三苯甲基氧基甲基)四氢呋喃-3-基]甲醇(31.35g,55.73mmol)溶解于二氯甲烷(557ml)中并冷却至5℃。添加异硫氰酸苯甲酰酯(9.74ml，72.45mmol)。添加完成之后，将反应混合物温热至室温并搅拌2小时。倒入饱和碳酸氢钠中，分离各相，并用二氯甲烷萃取水相。合并有机萃取物并经硫酸镁干燥。过滤溶液并在减压下浓缩，以产生标题化合物(42.95g，106%)。es/msm/e(79br/81br)747/749[m+na]。制备19n-[(4as,5s,7as)-7a-(5-溴-2-氟苯基)-5-(1,1-二氟乙基)-4a,5,7,7a-四氢-4h-呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-基]苯甲酰胺方案3，步骤h：在环境温度下将异硫氰酸苯甲酰酯(1.80ml，13.3mmol)添加至[(2s,3r,4s)-4-氨基-4-(5-溴-2-氟苯基)-2-(1,1-二氟乙基)四氢呋喃-3-基]甲醇(4.67g,11.9mmol)于二氯甲烷(20ml)中的溶液中持续1小时直至lcms显示完成反应。在真空下蒸发反应混合物，产生残余物。添加环己烷(50ml)，温热至60℃并添加甲基叔丁基醚直至沉淀物完全溶解(100ml)。过滤热溶液，冷却至室温并在减压下缓慢蒸发直至形成白色沉淀物。在减压下移除溶剂并将残余物溶解于无水二氯甲烷(30ml)中，添加吡啶(2.4ml，30mmol)，并将溶液冷却至-25℃。经30分钟逐滴添加三氟甲磺酸酐(2.2ml，13mmol)并经1小时将其温热至0℃。用水(25ml)、2n盐酸水溶液(25ml)、水(25ml)、饱和碳酸氢钠水溶液(25ml)和水(25ml)洗涤反应混合物，经硫酸镁干燥，过滤，并浓缩至干燥。通过硅胶色谱法，用二氯甲烷中的5%甲基叔丁基醚洗脱纯化残余物，以产生作为淡黄色泡沫的标题化合物(5.0g，76%，通过lcms的90%纯度)。es/ms:m/z(79br/81br)499.0/501.0[m+h]。替代制备19方案3，步骤h：在30℃下将异硫氰酸苯甲酰酯(98ml，724.9mmol)添加至[(2s,3r,4s)-4-氨基-4-(5-溴-2-氟苯基)-2-(1,1-二氟乙基)四氢呋喃-3-基]甲醇(197.6g,546.7mmol)于二氯甲烷(1.2l)中的溶液中持续1小时。添加cdi(101g，610.4mmol)并在环境温度下搅拌3小时。可进一步装填cdi以确保硫脲中间体的完全消耗。加热至90℃持续42小时并将溶液冷却至环境温度。用乙酸乙酯(2l)稀释反应混合物并添加2n盐酸水溶液(2l)，搅拌，添加盐水(1l)并分离各层。用2n盐酸水溶液(0.5l)、盐水(2×1l)和饱和碳酸氢钠水溶液(1l)洗涤有机层。经硫酸镁干燥，过滤，并浓缩以产生残余物。通过硅胶色谱法，用异己烷中的0-100%乙酸乙酯洗脱纯化残余物，以产生作为淡黄色固体的标题化合物(234g，83%)。es/ms:m/z(79br/81br)499.0/501.0[m+h]。制备20n-[(4as,5s,7as)-7a-(5-溴-2-氟-苯基)-5-(三苯甲基氧基甲基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-基]苯甲酰胺方案1，步骤h：将n-[[(3s,4r,5s)-3-(5-溴-2-氟-苯基)-4-(羟基甲基)-5-(三苯甲基氧基甲基)四氢呋喃-3-基]硫代氨基甲酰基]苯甲酰胺(42.95g,59.18mmol)溶解于二氯甲烷(591ml)中并冷却至-20℃。添加吡啶(12.0ml，148.0mmol)，之后添加三氟甲磺酸酐(10.97ml，65.10mmol)。监测添加，将温度保持在低于-20℃。在-20℃搅拌反应混合物30分钟。将反应混合物温热至室温。倒入饱和氯化铵中，分离各相，并用二氯甲烷萃取水相。合并有机萃取物并经硫酸镁干燥。过滤溶液并在减压下浓缩，以产生标题化合物(45.24g，108%)。es/msm/e(79br/81br)707/709[m+h]。制备21n-[(4as,5s,7as)-7a-(5-溴-2-氟-苯基)-5-(羟基甲基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-基]苯甲酰胺方案1，步骤i：将n-[(4as,5s,7as)-7a-(5-溴-2-氟-苯基)-5-(三苯甲基氧基甲基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-基]苯甲酰胺(45.24,63.93mmol)溶解于甲酸(160ml)中并在环境温度下搅拌1小时。经5分钟添加水(29ml)。搅拌50分钟。在减压下浓缩混合物，产生残余物。将残余物溶解于甲醇(639ml)中，添加三乙胺(26.7ml，191.8mmol)，并在环境温度下搅拌过夜。倒入盐水中，分离各相，并用氯仿萃取水相。合并有机萃取物并经硫酸镁干燥。过滤并在减压下浓缩，以产生残余物。通过硅胶色谱法，用丙酮：己烷(25%-38%梯度)洗脱纯化残余物，以产生标题化合物(16.04g，54%)。es/msm/e(79br/81br)465/467[m+h]。制备22(4as,5s,7as)-2-苯甲酰胺基-7a-(5-溴-2-氟-苯基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-5-甲酸方案1，步骤j：将n-[(4as,5s,7as)-7a-(5-溴-2-氟-苯基)-5-(羟基甲基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-基]苯甲酰胺(16.04g，34.47mmol)添加至dmso(172ml)中。添加2-碘酰基苯甲酸(35.56g，120.70mmol)并在环境温度下搅拌3小时。用氯仿(300ml)稀释反应混合物并倒入饱和氯化铵(400ml)中。分离有机相并经硫酸镁干燥。过滤溶液并在减压下浓缩，以产生残余物。将残余物溶解于乙酸乙酯(400ml)中并用饱和氯化铵(2×250ml)洗涤。分离有机相，经硫酸镁干燥，过滤，并在减压下浓缩以产生残余物。将残余物溶解于二氯甲烷：甲醇混合物中并添加二乙醚直至固体沉淀。通过过滤收集固体并在减压下干燥，以产生标题化合物(5.78g，35%)。es/msm/e(79br/81br)479/481[m+h]。制备23(4as,5s,7as)-2-苯甲酰胺基-7a-(5-溴-2-氟-苯基)-n-甲氧基-n-甲基-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-5-甲酰胺方案1，步骤k：将(4as,5s,7as)-2-苯甲酰胺基-7a-(5-溴-2-氟-苯基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-5-甲酸(5.78g，12.1mmol)溶解于二氯甲烷(201ml)和n,o-二甲基盐酸羟胺(1.76g，18.1mmol)中。添加三乙胺(5.29ml，36.2mmol)，之后添加hatu(7.02g，18.1mmol)。在环境温度下搅拌3天。倒入饱和氯化铵中，分离各相，并用乙酸乙酯萃取水相。合并有机萃取物并经硫酸镁干燥。过滤并在减压下浓缩，以产生残余物。通过硅胶色谱法，用乙酸乙酯：二氯甲烷(0-50%梯度)洗脱纯化残余物，以产生标题化合物(4.15g，66%)。es/msm/e(79br/81br)522/524[m+h]。制备24n-[(4as,5s,7as)-5-乙酰基-7a-(5-溴-2-氟-苯基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-基]苯甲酰胺方案1，步骤l：向(4as,5s,7as)-2-苯甲酰胺基-7a-(5-溴-2-氟-苯基)-n-甲氧基-n-甲基-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-5-甲酰胺(1.51g，2.89mmol)于thf(57.8ml)中的-78℃溶液中逐滴添加甲基溴化镁(3.0mol/l，于二乙醚中，4.8ml，14.5mmol)。在-78℃下搅拌反应物5分钟并将其逐渐温热至环境温度。搅拌30分钟。用甲醇(4ml)淬灭反应，用饱和氯化铵稀释，并用乙酸乙酯萃取。合并有机萃取物并经硫酸钠干燥。过滤并在减压下浓缩，以产生残余物。通过硅胶色谱法，用乙酸乙酯：己烷(0-100%梯度)洗脱纯化残余物，以产生标题化合物(1.28g，93%)。es/msm/e(79br/81br)477/479[m+na]。制备24bn-[(5s,7as)-7a-(5-溴-2-氟苯基)-5-丙酰基-4a,5,7,7a-四氢-4h-呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-基]苯甲酰胺方案1，步骤l：在氮气下将(4as,5s,7as)-2-苯甲酰胺基-7a-(5-溴-2-氟-苯基)-n-甲氧基-n-甲基-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-5-甲酰胺(3.00g，5.74mmol)添加至thf(115ml)中并冷却至-78℃。将乙基溴化镁于thf中的溶液(1.0mol/l)(28.7ml，28.7mmol)逐滴添加至反应物中，将温度保持在-78℃。1小时之后，一次性添加甲醇(10ml)并随后倒在饱和氯化铵溶液上。用乙酸乙酯萃取混合物，经硫酸镁干燥有机萃取物，过滤，并在真空下浓缩以产生残余物。通过硅胶色谱法，用己烷/乙酸乙酯(100%-40%梯度)洗脱纯化残余物，以产生标题化合物(2.844g，5.788mmol，100%)。es/msm/z(79br/81br)491/493/513/515(m+h/na)。制备24cn-[(5s,7as)-7a-(5-溴-2-氟苯基)-5-(环丙基羰基)-4a,5,7,7a-四氢-4h-呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-基]苯甲酰胺方案1，步骤l：向(4as,5s,7as)-2-苯甲酰胺基-7a-(5-溴-2-氟-苯基)-n-甲氧基-n-甲基-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-5-甲酰胺(1.51g，2.89mmol)于thf(51.2ml)中的-78℃溶液中逐滴添加环丙基溴化镁(1.0mol/l，于2-甲基四氢呋喃中，14ml，14.4mmol)。在-78℃下搅拌反应物5分钟并将其逐渐温热至环境温度。搅拌30分钟。用甲醇(4ml)淬灭反应，用饱和氯化铵稀释，并用乙酸乙酯萃取。合并有机萃取物并经硫酸钠干燥。过滤并在减压下浓缩，以产生残余物。通过硅胶色谱法，用乙酸乙酯：己烷(0-100%梯度)洗脱纯化残余物，以产生标题化合物(1.299g，89%)。es/msm/z(79br/81br)503/505[m+h]。制备25n-[(4as,5s,7as)-7a-(5-溴-2-氟-苯基)-5-(1,1-二氟乙基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-基]苯甲酰胺方案1，步骤m：一起添加二氯甲烷(34ml)、deoxo-fluor®(1.52ml，6.88mmol)和三氟化硼二乙醚配合物(0.89ml，6.88mmol)。在环境温度下搅拌2小时。一次性添加n-[(4as,5s,7as)-5-乙酰基-7a-(5-溴-2-氟-苯基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-基]苯甲酰胺(0.821g，1.72mmol)，之后添加三乙胺三氢氟酸盐(1.13ml，6.88mmol)。在环境温度下搅拌18小时。倒入饱和氯化铵中，分离各相，并用乙酸乙酯萃取水相。合并有机萃取物并经硫酸镁干燥。过滤并在减压下浓缩，以产生残余物。通过硅胶色谱法，用二氯甲烷：己烷(80%-100%梯度)洗脱纯化残余物，以产生标题化合物(0.552g，64%)。es/msm/e(79br/81br)499/501[m+h]。制备25bn-[(4as,5s,7as)-7a-(5-溴-2-氟苯基)-5-(1,1-二氟丙基)-4a,5,7,7a-四氢-4h-呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-基]苯甲酰胺方案1，步骤m：在氮气下在-78℃下将n-[(5s,7as)-7a-(5-溴-2-氟苯基)-5-丙酰基-4a,5,7,7a-四氢-4h-呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-基]苯甲酰胺(0.486g，0.989mmol)添加至二氯甲烷(19.8ml)中，之后添加deoxo-fluor®(1.75g，1.75ml，3.96mmol)。在-78℃下搅拌30分钟且随后温热至室温过夜。将反应物倒至饱和碳酸氢钠溶液上并用二氯甲烷萃取。使用疏水玻璃料(hydrophobicfrit)分离有机物并在真空中浓缩以产生残余物。通过硅胶色谱法，用己烷/乙酸乙酯(100%-50%梯度)洗脱纯化残余物，以产生具有杂质的粗标题化合物(0.230g，0.448mmol，45%)，其未经进一步纯化即使用。es/msm/z513/515(m+h)。制备25cn-[(4as,5s,7as)-7a-(5-溴-2-氟-苯基)-5-[环丙基(二氟)甲基]-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-基]苯甲酰胺方案1，步骤m：将deoxo-fluor®(1.9ml，6.68mmol)添加至n-[(5s,7as)-7a-(5-溴-2-氟苯基)-5-(环丙基羰基)-4a,5,7,7a-四氢-4h-呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-基]苯甲酰胺(0.812g，1.61mmol)于二氯甲烷(24ml)中的环境温度下的溶液中。在环境温度下搅拌18小时。倒入饱和碳酸氢钠中并用乙酸乙酯(3×)萃取水相。合并有机萃取物并经硫酸钠干燥。过滤并在减压下浓缩，以产生残余物。通过硅胶色谱法，用乙酸乙酯：己烷(5%-100%梯度)洗脱纯化残余物，以产生标题化合物(41mg，5%)。es/msm/z(79br/81br)525/527[m+h]。制备26n-[(5s,7as)-5-(1,1-二氟乙基)-7a-{2-氟-5-[(三氟乙酰基)氨基]苯基}-4a,5,7,7a-四氢-4h-呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-基]苯甲酰胺方案4，步骤a：将n-[(4as,5s,7as)-7a-(5-溴-2-氟苯基)-5-(1,1-二氟乙基)-4a,5,7,7a-四氢-4h-呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-基]苯甲酰胺(234g,454.6mmol)溶解于1,4-二氧杂环己烷(2l)中，并在氮气物流下添加4å分子筛(37g)、2,2,2-三氟乙酰胺(91g，780.9mmol)、细磨碳酸钾(114g，824.9mmol)，碘化钠(117g，780.6mmol)、碘化铜(i)(17.5g，91.9mmol)和外消旋反式-n,n'-二甲基-1,2-环己二胺(20g，140.6mmol)。用3次真空氮气切换（switches）吹扫容器并加热至123℃持续18小时。冷却至环境温度并经由硅藻土过滤溶液，并用乙酸乙酯洗涤。添加饱和氯化铵水溶液(2l)并剧烈搅拌45分钟。分离各层并用饱和氯化铵水溶液(3×1l)、盐水(300ml)洗涤有机层，经硫酸镁干燥，过滤并蒸发以产生残余物。通过硅胶色谱法，用异己烷中的0-100%乙酸乙酯洗脱纯化残余物，以产生作为淡黄色固体的标题化合物(297.9g，95%，81%纯度)。es/ms:m/z532.0[m+h]。制备27n-[(4as,5s,7as)-7a-(5-氨基-2-氟-苯基)-5-(1,1-二氟乙基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-基]苯甲酰胺方案1，步骤n：在乙醇(30ml)中合并n-[(4as,5s,7as)-7a-(5-溴-2-氟-苯基)-5-(1,1-二氟乙基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-基]苯甲酰胺(0.372g，0.74mmol)和(1r,2r)-n,n'-二甲基-1,2-环己二胺(0.037ml，0.22mmol)。添加叠氮化钠(0.194g，2.98mmol)，之后添加l-抗坏血酸钠(0.66m溶液，0.50ml，0.33mmol)。用氮气吹扫烧瓶顶部并添加硫酸铜(0.33m溶液，0.68ml，0.22mmol)。将反应混合物加热至80℃并搅拌5小时。冷却反应物并添加冷水。用乙酸乙酯萃取混合物。合并有机萃取物并经硫酸钠干燥。过滤并在减压下浓缩，以产生残余物。在乙醇(50ml)和thf(10ml)中合并残余物与钯(碳上的10质量%，0.35g，0.16mmol)。用氮气和氢气吹扫混合物。在50psi的氢气下在环境温度下搅拌1小时。过滤掉催化剂并用乙酸乙酯洗涤。在减压下浓缩溶液，以产生残余物。通过硅胶色谱法，用乙酸乙酯：二氯甲烷(0-20%梯度)洗脱纯化残余物，以产生标题化合物(0.2184g，67%)。es/msm/z436(m+h)。替代制备27方案4，步骤b：在室温下将甲醇中的7n氨(600ml,4.2mol)添加至n-[(5s,7as)-5-(1,1-二氟乙基)-7a-{2-氟-5-[(三氟乙酰基)氨基]苯基}-4a,5,7,7a-四氢-4h-呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-基]苯甲酰胺(250g，80%纯度，376.3mmol)于甲醇(200ml)中的搅拌悬浮液中，并在环境温度下搅拌18小时。蒸发至干燥，以产生作为棕色胶状物的标题化合物(190g，375.2mmol，86%纯度)。es/ms:m/z436.0[m+h]。制备27b(4as,5s,7as)-7a-(5-氨基-2-氟苯基)-5-(1,1-二氟丙基)-4a,5,7,7a-四氢-4h-呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-胺方案1，步骤n：一起添加n-[(4as,5s,7as)-7a-(5-溴-2-氟苯基)-5-(1,1-二氟丙基)-4a,5,7,7a-四氢-4h-呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-基]苯甲酰胺(0.567g，1.104mmol)、1,4-二氧杂环己烷(4.802ml)和乙醇(11.04ml)，之后添加叠氮化钠(0.2154g，3.313mmol)、反式-n,n'-二甲基环己烷-1,2-二胺(0.04760g，0.0528ml，0.3313mmol)、0.66ml-抗坏血酸钠(0.74g，0.74ml，0.4859mmol)和水(0.1699ml)。最后添加0.33m硫酸铜(0.74g，0.74ml，0.2430mmol)并加热至100℃。在90℃下搅拌过夜。进一步添加0.33m硫酸铜(0.74g，0.74ml，0.2430mmol)、0.66ml-抗坏血酸钠(0.74g，0.74ml，0.4859mmol)、叠氮化钠(0.2154g，3.313mmol)和反式-n,n'-二甲基环己烷-1,2-二胺(0.04760g，0.0528ml，0.3313mmol)。在100℃下加热反应物1小时，且随后冷却至室温。将反应物倒入盐水中并用氯仿萃取产物。经由硅藻土过滤混合物并分离有机物，经硫酸镁干燥，过滤并在真空中浓缩。将材料转移至具有lindlar催化剂(0.113g，0.0533mmol)中的钯(5质量%)的parr烧瓶中，并在氮气下添加甲醇(55.22ml)。在276kpa氢气压力下在剧烈摇晃下氢化3小时。进一步添加lindlar催化剂(0.113g，0.0533mmol)中的钯(5质量%)并在345kpa氢气压力下再氢化4小时。经由硅藻土过滤反应物，并用氯仿洗涤。在真空中浓缩滤液且随后添加甲醇(55.22ml)，随后添加氢氧化锂水合物(0.4634g，0.182ml，11.04mmol)。将反应混合物加热至70℃持续3小时且随后冷却至室温。将反应物倒入盐水中并用氯仿萃取。用甲醇稀释有机物，并倒入scx-2滤筒（cartridge）中。用一个柱体积的甲醇冲洗滤筒并将其丢弃。随后用一个柱体积的7m甲醇中的氨（methanolicammonia）冲洗scx-2滤筒并在真空中浓缩，以产生标题化合物(0.290g，0.840mmol，76%)。es/msm/z346(m+h)。制备27cn-[(4as,5s,7as)-7a-(5-氨基-2-氟-苯基)-5-[环丙基(二氟)甲基]-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-基]苯甲酰胺方案1，步骤n：在乙醇(3ml)中合并n-[(4as,5s,7as)-7a-(5-溴-2-氟-苯基)-5-[环丙基(二氟)甲基]-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-基]苯甲酰胺(31mg，0.059mmol)和(1r,2r)-n,n'-二甲基-1,2-环己二胺(0.0049ml，0.030mmol)。添加叠氮化钠(31mg，0.47mmol)，之后添加l-抗坏血酸钠(0.66m溶液，0.089ml，0.059mmol)。用氮气吹扫烧瓶顶部并添加硫酸铜(0.33m溶液，0.18ml，0.059mmol)。将反应混合物加热至80℃并搅拌3小时。冷却反应物并添加冷水。用乙酸乙酯萃取混合物。合并有机萃取物并经硫酸钠干燥。过滤并在减压下浓缩，以产生残余物。在乙醇(20ml)和thf(5ml)中合并残余物与钯(碳上的10质量%，30mg，0.014mmol)。用氮气和氢气吹扫混合物。在环境温度下在40psi氢气下搅拌4小时。过滤掉催化剂并用乙酸乙酯进行洗涤。在减压下浓缩溶液，以产生残余物。通过硅胶色谱法，用乙酸乙酯：己烷(0-100%梯度)洗脱纯化残余物，以产生标题化合物(21mg，77%)。es/msm/z462(m+h)。制备28(4as,5s,7as)-7a-(5-氨基-2-氟苯基)-5-(1,1-二氟乙基)-4a,5,7,7a-四氢-4h-呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-胺方案4，步骤b：将n-[(4as,5s,7as)-7a-(5-氨基-2-氟-苯基)-5-(1,1-二氟乙基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-基]苯甲酰胺(216.4g，88%纯度，435.9mmol)溶解于吡啶(400ml)、乙醇(100ml)和thf(300ml)中。添加o-甲基盐酸羟胺(190g，2275.0mmol)并在环境温度下搅拌18小时。用2-甲基四氢呋喃(1l)稀释并用水(2×300ml)进行洗涤。分离有机层并将35%氢氧化铵水溶液(100ml)添加至水溶液中。用2-甲基四氢呋喃(300ml)萃取，随后用氯化钠饱和并用2-甲基四氢呋喃(2×300ml)萃取。合并有机萃取物，用盐水(300ml)洗涤并蒸发产生残余物。溶解于甲醇(200ml)中，添加甲醇中的7n氨(100ml，700mmol)并在室温下搅拌18小时。如果残留任何三氟乙酰胺杂质，则可进一步添加氨。在减压下移除溶剂并将残余物溶解于2n盐酸水溶液(1.5l)中。用二氯甲烷(6×500ml)萃取，合并有机层并在减压下移除溶剂，产生约1l的总体积。用2n盐酸水溶液(300ml)洗涤并合并全部水洗涤液。添加2-甲基四氢呋喃(1l)并剧烈搅拌，同时用碳酸氢钠将ph调节至碱性，直至观察到没有气体逸出。分离各层并用2-甲基四氢呋喃(2×500ml)萃取水溶液。用硫酸镁干燥合并的有机萃取物，过滤并蒸发以产生棕色固体。通过硅胶色谱法，用thf中的0-100%二氯甲烷洗脱纯化残余物。用乙酸乙酯/庚烷蒸发含有产物的级分，以产生作为米色细粉的标题化合物(106g，70%，95%纯度)。es/ms:m/z332.0[m+h],[α]d20=+42.11°(c=0.532,氯仿)。制备295-(1h-1,2,4-三唑-1-基)吡嗪-2-甲酸在100℃下将5-氯吡嗪-2-甲酸甲酯(124g，718.55mmol)、1h-1,2,4-三唑(198.5g，2874.2mmol)和碳酸钾(297.92g，2155.6mmol)于n,n-二甲基甲酰胺(1l)中的混合物搅拌15小时。冷却至环境温度并倒入水(2l)中。使用浓盐酸水溶液(约500ml)将溶液的ph调节至2-3并搅拌30分钟。通过过滤收集所得固体并用水洗涤。添加水(500ml)和乙醇(500ml)，加热至50℃-60℃持续4小时，并冷却至环境温度。通过过滤收集固体并在40℃下在真空下干燥，以产生作为白色固体的标题化合物。es/ms:m/z190.0(m-h)。制备30n-[3-[(4as,5s,7as)-2-苯甲酰胺基-5-(1,1-二氟乙基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-(1,2,4-三唑-1-基)吡嗪-2-甲酰胺方案3，步骤a：在二氯甲烷(4ml)：二甲基甲酰胺(1ml)中一起添加n-[(4as,5s,7as)-7a-(5-氨基-2-氟-苯基)-5-(1,1-二氟乙基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-基]苯甲酰胺(0.139g，0.32mmol)、5-(1h-1,2,4-三唑-1-基)吡嗪-2-甲酸(0.0852g，0.45mmol)和hoat(0.0575g，0.41mmol)。将n,n-二异丙基乙胺(0.11ml，0.63mmol)添加至溶液中，之后一次性添加edci(0.079g，0.41mmol)。在环境温度下将反应混合物搅拌18小时。用乙酸乙酯稀释溶液，用水和盐水进行洗涤，并分离各相。用乙酸乙酯萃取。合并有机萃取物并经硫酸镁干燥。过滤溶液并在减压下浓缩，以产生残余物。通过硅胶色谱法，用乙酸乙酯：二氯甲烷(0-30%梯度)洗脱纯化残余物，以产生标题化合物(0.1140g，59%)。es/msm/z609(m+h)。制备30an-[3-[(4as,5s,7as)-2-苯甲酰胺基-5-[环丙基(二氟)甲基]-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-(1,2,4-三唑-1-基)吡嗪-2-甲酰胺方案3，步骤a：在二氯甲烷(2.5ml)：二甲基甲酰胺(0.5ml)中一起添加n-[(4as,5s,7as)-7a-(5-氨基-2-氟-苯基)-5-[环丙基(二氟)甲基]-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-基]苯甲酰胺(21mg，0.045mmol)、5-(1h-1,2,4-三唑-1-基)吡嗪-2-甲酸(10mg，0.054mmol)和hobt(10mg，0.059mmol)。将n,n-二异丙基乙胺(0.016ml，0.091mmol)添加至溶液中，之后一次性添加edci(11mg，0.059mmol)。在环境温度下将反应混合物搅拌18小时。用乙酸乙酯、水和1nnaoh(0.5ml)稀释溶液并用乙酸乙酯(3×)进行萃取。合并有机萃取物并经硫酸钠干燥。过滤溶液并在减压下浓缩，以产生残余物。通过硅胶色谱法，用乙酸乙酯：二氯甲烷(0-100%梯度)洗脱纯化残余物，以产生标题化合物(20mg，69%)。es/msm/z635(m+h)。实施例1n-[3-[(4as,5s,7as)-2-氨基-5-(1,1-二氟乙基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-(1,2,4-三唑-1-基)吡嗪-2-甲酰胺方案3，步骤b：在45℃下将n-[3-[(4as,5s,7as)-2-苯甲酰胺基-5-(1,1-二氟乙基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-(1,2,4-三唑-1-基)吡嗪-2-甲酰胺(0.1148g，0.189mmol)、o-甲基盐酸羟胺(0.1575g，1.886mmol)和吡啶(0.15ml，1.886mmol)于thf(2ml)和乙醇(2ml)中的混合物加热5小时。将反应混合物冷却至环境温度并搅拌2天。在减压下浓缩溶液，以产生残余物。通过硅胶色谱法，用甲醇中的7nnh3：二氯甲烷(0-3%梯度)洗脱纯化残余物，以产生标题化合物(0.086g，90%)。es/msm/z505(m+h)。替代制备实施例1方案4，步骤d：在50℃下在氮气气氛下，搅拌乙酸乙酯(1l)中的(4as,5s,7as)-7a-(5-氨基-2-氟苯基)-5-(1,1-二氟乙基)-4a,5,7,7a-四氢-4h-呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-胺(96.5g，291mmol)，并将5-(1h-1,2,4-三唑-1-基)吡嗪-2-甲酸（84g，439.45mmol）缓慢添加至温溶液中。搅拌10分钟并添加t3p®(1.67m，于乙酸乙酯中，350ml，585mmol)，并在50℃下搅拌17小时。冷却至环境温度，用二氯甲烷(1l)稀释并搅拌，同时用碳酸钠的水溶液(128g，1.21mol，于1l水中)淬灭。用二氯甲烷(1l)和水(2l)稀释并剧烈搅拌1小时。经由硅藻土过滤并用二氯甲烷(3×500ml)、甲醇(500ml)、水(500ml)、饱和碳酸氢钠水溶液(500ml)和1：1甲醇：二氯甲烷(6×500ml)洗涤。分离各层并用二氯甲烷(3×1l)萃取水溶液。合并全部有机相并蒸发以产生残余物。在二氯甲烷(1l)中超声处理残余物15分钟并通过过滤收集固体，用二氯甲烷(5×200ml)洗涤。添加饱和碳酸氢钠水溶液直至获得ph8并用二氯甲烷(1l)和甲醇(500ml)剧烈搅拌。通过过滤移除固体并用二氯甲烷(2×500ml)萃取滤液。用二氯甲烷：甲醇(1：1，500ml)溶解固体并合并该溶液与其它有机相。在减压下移除溶剂，添加二氯甲烷以维持溶液，且随后一旦获得约300ml的最终体积，通过硅胶色谱法，用二氯甲烷中的5%的0.3m氨/甲醇洗脱纯化溶液，以产生淡棕色固体。将固体溶解于热乙醇(2.5l)中，在热时过滤，并经1小时冷却至环境温度。通过过滤收集固体并用乙醇(2×250ml)洗涤，并在真空下干燥。蒸发滤液至干燥并通过硅胶色谱法，首先用50：1异己烷/7n氨/甲醇中的65%乙酸乙酯，然后用50：1乙酸乙酯/7n氨/甲醇洗脱进一步纯化。如果需要，可通过sfc，柱：chiralpakad-h(5μ)，50×250mm；洗脱剂：co2中的35%异丙醇(0.2%二乙基甲胺)；流速：在uv220nm下300g/min来完成进一步纯化。蒸发并真空干燥之后，在乙醇(1.5l)中浆化材料并在平缓温热下(36℃与45℃之间)搅拌20分钟。通过过滤收集固体，用乙醇(100ml)洗涤。可从滤液进一步回收材料；蒸发至干燥，在乙醇中回流，通过热过滤移除固体且随后将滤液冷却至环境温度。通过过滤收集固体，用乙醇洗涤并与由以上过滤获得的材料合并。在真空下在40℃下干燥合并的固体，以产生作为白色固体的标题化合物(103.3g，68%，含有2.5重量%乙醇)。es/msm/z505.0(m+h),[α]d20=+149.4°(c=1,氯仿)。实施例1an-[3-[(4as,5s,7as)-2-氨基-5-(1,1-二氟乙基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-(1,2,4-三唑-1-基)吡嗪-2-甲酰胺4-甲基苯磺酸盐将n-[3-[(4as,5s,7as)-2-氨基-5-(1,1-二氟乙基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-(1,2,4-三唑-1-基)吡嗪-2-甲酰胺(600mg，1.189mmol)溶解于丙酮(9ml)和水(1ml)中。将所得悬浮液加热至60℃。添加溶解于丙酮(1ml)中的对甲苯磺酸一水合物(420mg，2.208mmol)。在60℃下搅拌混合物过夜。将混合物冷却至室温，通过真空过滤固体并用丙酮(1ml)洗涤并风干过夜，以产生标题化合物(743mg，73%)。x射线粉末衍射(xrd)结晶固体的xrd图谱在配备有cuka源λ=1.54060å和vantec检测器的在35kv和50ma下操作的brukerd4endeavorx-射线粉末衍射仪上获得。在4和40°(以2θ计)之间，用0.009°的步长(以2θ计)，0.5秒/步的扫描速率，和0.6mm散度（divergence），5.28固定的反散射和9.5mm检测器狭缝扫描该样品。将干燥粉末填装在石英样品架上，且使用载玻片获得光滑的表面。在环境温度和相对湿度下收集晶形衍射图案。在结晶学领域中公知的是，对于任何给定晶形，衍射峰的相对强度可能由于由因素诸如晶体形态和习性（habit）引起的优选取向而不同。当存在优选取向的效应时，峰强度改变，但多晶型物的特征峰位置不变。参见，例如，美国药典#23，国家处方集#18，第1843-1844页，1995。此外，在结晶学领域中也公知的是，对于任何给定晶形，角峰位置可能稍微改变。例如，由于分析样品时的温度或湿度的变化、样品移位或内部标准品的存在或不存在，峰位置可以移动。在本情况下，±0.2(以2θ计)的峰位置变化将考虑这些潜在变化而不妨碍明确鉴定指定的晶形。可以基于特征峰(通常为较显著的峰)的任何独特的组合(以°2θ为单位)确认晶形。在环境温度和相对湿度下收集的晶形衍射图案基于8.853°2θ和26.774°2θ下的nist675标准峰调整。制备的结晶n-[3-[(4as,5s,7as)-2-氨基-5-(1,1-二氟乙基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-(1,2,4-三唑-1-基)吡嗪-2-甲酰胺4-甲基苯磺酸盐的样品通过具有如下表中所述的衍射峰(2θ值)的使用cuka辐射的xrd图谱来表征。具体地，该图谱在17.3°处含有峰，以及选自14.8、12.7和4.9的一个或多个峰；具有0.2度的衍射角容差。表1：实施例1a的x射线粉末衍射峰。峰角度(°2θ+/-0.2°)相对强度(最强峰的%)14.94829.414312.752414.860517.3100619.844724.935825.337926.8191028.214实施例1bn-[3-[(4as,5s,7as)-2-氨基-5-(1,1-二氟乙基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-(1,2,4-三唑-1-基)吡嗪-2-甲酰胺丙二酸盐在95%乙醇-水(15ml)中一起添加n-[3-[(4as,5s,7as)-2-氨基-5-(1,1-二氟乙基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-(1,2,4-三唑-1-基)吡嗪-2-甲酰胺(201mg，0.398mmol)和丙二酸(104mg，0.999mmol)。在65℃下搅拌混合物直至获得澄清溶液。数分钟之后沉淀稠白色固体。在55℃下搅拌悬浮液1小时且随后在搅拌下冷却至室温。在真空下过滤固体并风干2天，以产生标题化合物(477mg，80%)。制备的结晶n-[3-[(4as,5s,7as)-2-氨基-5-(1,1-二氟乙基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-(1,2,4-三唑-1-基)吡嗪-2-甲酰胺丙二酸盐的样品通过具有如下表2中所述的衍射峰(2θ值)的使用cuka辐射的xrd图谱来表征。具体地，该图谱在22.7处含有峰，以及选自16.8、17.2和24.0的一个或多个峰；具有0.2度的衍射角容差。表2：实施例1b的x射线粉末衍射峰。峰角度(°2θ+/-0.2°)相对强度(最强峰的%)15.539210.344311.855415.339516.862617.257718.341822.460922.71001024.053实施例1cn-[3-[(4as,5s,7as)-2-氨基-5-(1,1-二氟乙基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-(1,2,4-三唑-1-基)吡嗪-2-甲酰胺水合物在70℃下将n-[3-[(4as,5s,7as)-2-氨基-5-(1,1-二氟乙基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-(1,2,4-三唑-1-基)吡嗪-2-甲酰胺(116mg，0.23mmol)悬浮于1:1thf:水(2ml)中。将溶液搅拌至少2天，过滤固体，并在氮气物流下干燥以产生标题化合物。制备的n-[3-[(4as,5s,7as)-2-氨基-5-(1,1-二氟乙基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-(1,2,4-三唑-1-基)吡嗪-2-甲酰胺水合物的样品通过具有如下表3中所述的衍射峰(2θ值)的使用cuka辐射的xrd图谱来表征。具体地，该图谱在13.0处含有峰，以及选自7.8、10.5、11.0、14.9、19.7、21.3和26.9的一个或多个峰；具有0.2度的衍射角容差。表3.实施例1c的x射线粉末衍射峰。峰角度(°2θ+/-0.2°)相对强度(最强峰的%)17.882210.568311.038413.0100513.248614.944716.630819.132919.7931021.1291121.3731222.0261322.3521426.965实施例2n-[3-[(4as,5s,7as)-2-氨基-5-(1,1-二氟丙基)-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-(1,2,4-三唑-1-基)吡嗪-2-甲酰胺方案3，步骤a和步骤b：一起添加5-(1h-1,2,4-三唑-1-基)吡嗪-2-甲酸(0.116g，0.608mmol)、乙腈(4.05ml)、二甲基甲酰胺(0.00314ml)，且随后在氮气下逐滴添加草酰氯(0.154g，0.105ml，1.22mmol)。将反应物搅拌30分钟且随后在真空中浓缩。将残余物溶解于乙腈(4.05ml)中，并在搅拌下将其逐滴添加至(4as,5s,7as)-7a-(5-氨基-2-氟苯基)-5-(1,1-二氟丙基)-4a,5,7,7a-四氢-4h-呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-胺(0.140g,0.405mmol)于乙醇(4.05ml)和水(1.35ml)中的混合物中。完成添加时，用氯仿稀释反应物并用饱和碳酸氢钠溶液洗涤。用甲醇稀释有机物并添加至scx-2滤筒中。用一个柱体积的甲醇冲洗scx-2滤筒并将其丢弃，且随后用一个柱体积的7m甲醇中的氨冲洗scx-2滤筒。在真空中浓缩甲醇中的氨冲洗液并通过硅胶色谱法，用二氯甲烷/甲醇(100%-85%梯度)洗脱纯化，以产生残余物。通过非手性sfc(超临界流体色谱法)(柱：苯磺酰胺(bzs)(5μ)，princeton色谱法，21.2×250mm；洗脱剂：co2中的22%甲醇(甲醇中的1%2m氨)；流速：在uv250nm下70ml/min；背压：100巴；温度：40℃)来进一步纯化。将残余物溶解于氯仿中并用盐水洗涤。使有机物通过疏水玻璃料并在真空中浓缩，以产生标题化合物(0.0658g，0.127mmol，31%)。es/msm/z519(m+h)。实施例3n-[3-[(4as,5s,7as)-2-氨基-5-[环丙基(二氟)甲基]-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-(1,2,4-三唑-1-基)吡嗪-2-甲酰胺方案3，步骤b：在55℃下将n-[3-[(4as,5s,7as)-2-苯甲酰胺基-5-[环丙基(二氟)甲基]-4,4a,5,7-四氢呋喃并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-(1,2,4-三唑-1-基)吡嗪-2-甲酰胺(20mg，0.0315mmol)、o-甲基盐酸羟胺(26mg,0.315mmol)和吡啶(0.026ml，0.315mmol)于乙醇(3ml)中的混合物加热18小时。将反应混合物冷却至环境温度并在减压下浓缩溶液，以产生残余物。通过硅胶色谱法，用甲醇中的7nnh3：二氯甲烷(0.5%-10%梯度)洗脱纯化残余物，以产生标题化合物(15mg，90%)。es/msm/z531(m+h)。体外测定程序：为了评价相比于bace2，对bace1的选择性，在基于fret的酶促测定中使用如下所述的针对bace1和bace2的特定底物来评估测试化合物。对于体外酶促测定和细胞测定，在dmso中制备测试化合物，以构成10mm储备溶液。在进行体外酶促和全细胞测定前，在dmso中连续稀释储备溶液，以获得十点稀释曲线，其中在96孔圆底板中最终化合物浓度范围为10μm至0.05nm。体外蛋白酶抑制测定：hubace1:fc和hubace2:fc的表达人类bace1(登录号：af190725)和人类bace2(登录号：af204944)通过rt-pcr从全脑cdna克隆。将对应于氨基酸序列#1至460的核苷酸序列插入编码人类igg1(fc)多肽的cdna中(vassar等人,science,286,735-742(1999))。将bace1(1-460)或bace2(1-460)和人类fc的该融合蛋白(分别称为hubace1:fc和hubace2:fc)建构至pjb02载体中。在hek293细胞中瞬时表达人类bace1(1-460):fc(hubace1:fc)和人类bace2(1-460):fc(hubace2:fc)。将250μg各构建体的cdna与fugene6混合并添加至1升hek293细胞中。转染四天后，收获条件培养基（conditionedmedium）用于纯化。通过如下所述的蛋白a色谱法纯化hubace1:fc和hubace2:fc。在-80℃下以小等分试样储存酶。(参见yang等人,j.neurochemistry,91(6)1249-59(2004))。hubace1:fc和hubace2:fc的纯化收集用hubace1:fc或hubace2:fccdna瞬时转染的hek293细胞的条件培养基。通过经由0.22μm无菌过滤器过滤条件培养基来去除细胞碎片。将5ml蛋白a-琼脂糖(柱床体积)添加至4升条件培养基。在4℃下将此混合物轻轻搅拌过夜。收集蛋白a-琼脂糖树脂并装填于低压色谱柱中。用20×柱床体积的pbs以20ml/小时的流速将柱进行洗涤。用50mm乙酸(ph3.6)以20ml/小时的流速洗脱结合的hubace1:fc或hubace2:fc蛋白。立即用0.5ml200mm乙酸铵(ph6.5)中和1ml的洗脱剂部分。通过在4%-20%tris-甘氨酸sds-page中的电泳评价最终产物的纯度。在-80℃下以小等分试样储存酶。bace1fret测定如上所述制备测试化合物的连续稀释液。在kh2po4缓冲液中将化合物进一步稀释20×。将10μl各稀释液添加至对应低蛋白结合黑色板（blackplate）的列a至h上的各孔中，该黑色板含有反应混合物(25μl的50mmkh2po4(ph4.6)、1mmtriton®x-100、1mg/mlbsa和基于app序列的15μmfret底物)(参见yang等人，j.neurochemistry,91(6)1249-59(2004))。在板震荡器上充分混合内含物10分钟。将15μl的kh2po4缓冲液中的200pm人类bace1(1-460):fc(参见vasser等人，science,286,735-741(1999))添加至板中以引发反应，该板含有底物和测试化合物。在板震荡器上短暂混合之后，在激发波长355nm和发射波长460nm下记录时间0时的混合物的rfu。用铝箔覆盖反应板并在室温下在黑暗潮湿烘箱中保存16至24小时。以与时间0时使用的相同的激发和发射设置记录培育结束时的rfu。rfu在时间0和培育结束时的差值表示bace1在化合物处理下的活性。相对于抑制剂浓度绘制rfu差值并用四参数逻辑方程拟合曲线，以获得ic50值(may等人，journalofneuroscience,31,16507-16516(2011))。本文中的实施例1的化合物基本上如上所述测试且展现1.19nm±0.48(n=4)(平均值±sem；sem=平均值的标准误差)的bace1的ic50。此数据表明实施例1的化合物在体外抑制纯化重组bace1酶活性。bace2tmem27fret测定跨膜蛋白27(tmem27)(登录号nm_020665，也称为collectrin)是近来描述的bace2的底物，而不是bace1的底物(esterhazy等人，cellmetabolism,14,365-377(2011))。为了评估用于抑制bace2酶促活性的测试化合物，使用基于人类tmem27的氨基酸序列的fret肽(dabcyl-qtleflkips-lucy)作为底物(esterhazy等人，cellmetabolism,14,365-377(2011))。如上所述制备测试化合物的连续稀释液。在kh2po4缓冲液中将化合物进一步稀释20×。将10μl各稀释液添加至对应低蛋白结合黑色板的列a至h上的各孔中，该黑色板含有反应混合物(25μl的50mmkh2po4(ph4.6)、1mmtriton®x-100、1mg/mlbsa和5μmtmemfret底物)。随后将15μl的kh2po4缓冲液中的20μm人类bace2(1-460)：fc(参见vasser等人，science,286,735-741(1999))添加至板中以引发反应，该板含有底物和测试化合物。在板震荡器上充分混合内含物10分钟。在激发波长430nm和发射波长535nm下记录时间0时的混合物的rfu。用铝箔覆盖反应板并在室温下在黑暗潮湿烘箱中保存16至24小时。以与时间0时所使用的相同的激发和发射设置记录培育结束时的rfu。rfu在时间0和培育结束时的差值表示bace2在化合物处理下的活性。相对于抑制剂浓度绘制rfu差值并用四参数逻辑方程拟合曲线，以获得ic50值。(may等人，journalofneuroscience,31,16507-16516(2011))。本文中的实施例1的化合物基本上如上所述测试且展现479nm±202(n=4)(平均值±sem；sem=平均值的标准误差)的bace2ic50。bace1(fretic50酶测定)与bace2(tmem27fretic50测定)的比率为约400倍，其表明抑制bace1酶的功能选择性。上述数据表明，实施例1的化合物相比于bace2对于bace1有选择性。sh-sy5yapp695wt全细胞测定针对抑制bace1活性的测量的常规全细胞测定利用人类神经母细胞瘤细胞系sh-sy5y(atcc登录号crl2266)，其稳定表达人类app695wtcdna。通常使用传代数高达6的细胞且随后将其丢弃。将sh-sy5yapp695wt细胞以5.0×104个细胞/孔放置于96孔组织培养板中的200μl培养基(50%mem/ebss和ham氏f12，1×含有每种丙酮酸钠、非必需氨基酸和碳酸氢钠的10%fbs)中。第二天，将培养基从细胞去除，添加新鲜培养基，随后在存在/不存在所需浓度范围的测试化合物的情况下在37℃下培育24小时。在培育结束时，分析条件培养基用于通过特定夹心elisa分析aβ肽1-40和1-42来证明β-分泌酶活性。为了测量这些aβ的特定同种型，使用单克隆2g3作为aβ1-40的捕获抗体并使用单克隆21f12作为aβ1-42的捕获抗体。aβ1-40和aβ1-42elisa使用生物素化的3d6作为报告抗体(对于抗体的描述，参见johnson-wood,等人,proc.natl.acad.sci.usa94,1550-1555(1997))。化合物处理后条件培养基中释放的aβ的浓度对应于此类条件下bace1的活性。绘制10点抑制曲线并用四参数逻辑方程拟合，以获得降低aβ作用的ic50值。实施例1的化合物基本上如上所述测试且展现以下如表4中所示的降低aβ的活性。表4(平均值±sem；sem=平均值的标准误差)。β-分泌酶的体内抑制可使用几种动物模型(包括小鼠、豚鼠、狗和猴)筛选化合物治疗后体内β-分泌酶活性的抑制。本发明中所用的动物可以是野生型、转基因或基因敲除动物。例如，如games等人，nature373,523-527(1995)中所述制备的pdapp小鼠模型和其它非转基因或基因敲除动物可用于分析在抑制性化合物存在的情况下对aβ和sappβ产生的体内抑制。一般而言，经由口服、皮下、静脉内、喂食或其它给药途径向2个月龄pdapp小鼠、基因敲除小鼠或非转基因动物给药在媒介物诸如玉米油、β-环葡聚糖、磷酸盐缓冲剂、pharmasolve®或其它合适的媒介物中配制的化合物。给药化合物1至24小时后，将动物处死，并移除大脑用于分析aβ1-x。如本文所用，“aβ1-x”是指以残余物1开始而以比残余物28大的c端结束的aβ种类的总和。这检测大部分aβ种类且通常称为“总aβ”。通过夹心elisa使用单克隆266作为捕获抗体并使用生物素化的3d6作为报告抗体测量总aβ肽(aβ1-x)水平。(参见may等人，journalofneuroscience,31,16507-16516(2011))。对于急性研究（acutestudies），给药化合物或合适的媒介物并在给药后约3小时处死动物。由选择的动物获得脑组织并针对aβ1-x的存在进行分析。慢性给药之后，也可针对化合物治疗后β-淀粉样斑块的量分析大龄app转基因动物的脑组织。与媒介物治疗的对照或时间0对照相比，给药抑制性化合物的动物(pdapp或其它app转基因或非转基因小鼠)可在脑组织中显示aβ降低。例如，3mg/kg、10mg/kg和30mg/kg口服剂量的实施例1在雌性pdapp幼鼠的脑海马体中使aβ1-x肽水平分别降低23%(不显著)、43%(p<0.05)和58%(p<0.01)。在脑皮质组织中，与给药后3小时的媒介物治疗的小鼠相比，3mg/kg、10mg/kg和30mg/kg剂量的实施例1使aβ1-x水平降低43%、59%和73%(全部值p<0.01)。鉴于实施例1在体外针对bace1酶的活性，这些降低aβ的作用与体内bace抑制一致，且进一步表明实施例1的cns渗透作用。这些研究显示本发明的化合物抑制bace1且因此可用于降低aβ水平。当前第1页12