本发明涉及医药化学技术领域，尤其涉及一种orexin多肽的化学制备方法及用途。
背景技术：
多肽化学已经走过了一百多年的光辉历程，1902年，emilfischer首先开始关注多肽合成，由于当时在多肽合成方面的知识太少，进展也相当缓慢当时合成采用了苯甲酰，乙酰保护，脱去相当困难，而且容易导致肽链断裂。直到1932年，maxbergmann等人开始使用苄氧羰基(z)来保护α-氨基，该保护基可以在催化氢化或氢溴酸的条件下定量脱除，多肽合成才开始有了一定的发展。到了20世纪50年代，随着越来越多的生物活性多肽的发现，大大推动了有机化学家们对多肽合成方法以及保护基的研究，因此这一阶段的研究成果也非常丰富，人们合成了大量的生物活性多肽，包括催产素(oxytocin)，胰岛素等，同时在多肽合成方法以及氨基酸保护基上面也取得了不少成绩，这为后来的固相合成方法的出现也提供了实验和理论基础。
临床证据显示老年患者的麻醉后苏醒延迟，是增加围术期死亡率威胁患者生命的最重要因素。针对全麻苏醒期，尽管已有镇痛以及肌松的拮抗药物，但还没有任何一种针对全身麻醉药的拮抗剂问世。出现这一现象的主要原因是以往人们对于全麻觉醒的机制研究尚不深入，对于何种机制调控觉醒尚不明确，传统观念认为觉醒过程仅仅是全麻药物撤退后脑功能的被动复苏。基于这一理论，研发了针对苯二氮类受体的竞争性抑制剂，如氟马希尼等。然而临床应用中，对于全身麻醉药物如七氟醚、异氟醚、丙泊酚等，苯二氮类受体竞争性抑制剂毫无作用，并不能作为促醒药物应用。orexin-a是存在于下丘脑的一种神经多肽，参与调节摄食、睡眠-觉醒周期、生殖、体温、血压、激素分泌和感觉等生理功能。1998年yanagisawa等在大鼠下丘脑腹外侧发现了两种与食欲有关的神经肽，命名为orexin-a(食欲素-a)和orexin-b(食欲素-b)。一系列研究发现：orexin能在神经系统麻醉—觉醒调控中起到重要作用，orexin的激活可以逆转多种全麻药物的作用。然后现有的orexin-a的合成技术，无法获得大量、大分子量、高纯度的orexin多肽，且制备方法复杂，制备成本较高。orexin多肽的化学合成存在的以下问题。基于上述问题，本发明提出了一种orexin多肽的化学制备方法及用途。
技术实现要素：
本发明的目的是为了解决现有技术中存在的缺点，而提出的一种orexin多肽的化学制备方法及用途。
一种orexin多肽的化学制备方法，包括以下步骤：
s1、制备所需的氨基酸，将制备的氨基酸利用氢氧化铵活化成活性中间体，从而形成肽键；
s2、制备聚酰胺树脂，选择性保护侧链官能团，然后开始进入aa循环，开始合成含有33个氨基酸的线性粗肽多肽；
s3、利用过硫酸盐将步骤s2中制备的线性粗肽多肽氧化形成6和12位间的第一对二硫键，利用0.01mol/l的碘化钾形成7和14位间的第二对二硫键，得到环化的orexin多肽溶液；
s4、将步骤s3中制备的环化的orexin多肽溶液经盐析与有机溶剂沉淀后进行分离，将分离出的盐经冷冻干燥后得到orexin多肽，最后对制得的orexin多肽进行分析测定。
优选的，所述步骤s1中制备的氨基酸为不具备两性离子结构的氨基酸。
优选的，所述步骤s1中形成肽键的过程为两个氨基酸在脱水之后，通过酰胺键连接。
优选的，所述步骤s2中的选择性保护侧链官能团指的是暂不形成酰胺键的氨基和羧基。
优选的，所述orexin多肽的化学制备方法可利用多肽合成仪完成。
优选的，所述orexin多肽的化学制备方法为固相多肽合成法或液相多肽合成法。
优选的，所述步骤s4中orexin多肽的分析测定方法为高效液相色谱法、亲和层析法和毛细管电泳法。
本发明提出的一种orexin多肽的化学制备方法，制备的orexin多肽在制备促进全身麻醉觉醒药物或促进全身麻醉觉醒药物的前体化合物中的应用。
本发明提出的一种orexin多肽的化学制备方法，通过制备氨基酸，利用氢氧化铵将其活化成活性中间体；制备聚酰胺树脂，选择性保护侧链官能团，然后开始进入aa循环，开始合成含有33个氨基酸的线性粗肽多肽；利用过硫酸盐将线性粗肽多肽氧化形成第一对二硫键，利用碘化钾形成第二对二硫键，得到环化的orexin多肽溶液；将环化的orexin多肽溶液经盐析与有机溶剂沉淀后进行分离，将分离出的盐经冷冻干燥后得到orexin多肽，本发明提出的一种orexin多肽的化学制备方法，制备周期短，操作简单，产物分子量高，毒副作用小，可应用于制备促进全身麻醉觉醒药物或促进全身麻醉觉醒药物的前体化合物，成本低，值得推广。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步解说。
实施例
本发明提出的一种orexin多肽的化学制备方法，包括以下步骤：
s1、制备所需的不具备两性离子结构的氨基酸，将制备的不具备两性离子结构的氨基酸利用氢氧化铵活化成活性中间体，使两个氨基酸在脱水之后，通过酰胺键连接，从而形成肽键；
s2、制备聚酰胺树脂，选择性保护侧链官能团，将暂不形成酰胺键的氨基和羧基选择性保护起来，然后开始进入aa循环，开始合成含有33个氨基酸的线性粗肽多肽；
s3、利用过硫酸盐将步骤s2中制备的线性粗肽多肽氧化形成6和12位间的第一对二硫键，利用0.01mol/l的碘化钾形成7和14位间的第二对二硫键，得到环化的orexin多肽溶液；
s4、将步骤s3中制备的环化的orexin多肽溶液经盐析与有机溶剂沉淀后进行分离，将分离出的盐经冷冻干燥后得到orexin多肽，最后利用高效液相色谱法、亲和层析法和毛细管电泳法对制得的orexin多肽进行分析测定。
本发明提出的一种orexin多肽的化学制备方法，采用固相多肽合成法或液相多肽合成法，利用多肽合成仪制备出orexin多肽，其制备出的orexin多肽在制备促进全身麻醉觉醒药物或促进全身麻醉觉醒药物的前体化合物中的应用。
本发明提出的一种orexin多肽的化学制备方法，通过制备氨基酸，利用氢氧化铵将其活化成活性中间体；制备聚酰胺树脂，选择性保护侧链官能团，然后开始进入aa循环，开始合成含有33个氨基酸的线性粗肽多肽；利用过硫酸盐将线性粗肽多肽氧化形成第一对二硫键，利用碘化钾形成第二对二硫键，得到环化的orexin多肽溶液；将环化的orexin多肽溶液经盐析与有机溶剂沉淀后进行分离，将分离出的盐经冷冻干燥后得到orexin多肽，本发明提出的一种orexin多肽的化学制备方法，制备周期短，操作简单，产物分子量高，毒副作用小，可应用于制备促进全身麻醉觉醒药物或促进全身麻醉觉醒药物的前体化合物，成本低，值得推广。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。