本发明属于细菌培养基领域,具体涉及一种复合光合细菌的制备方法。
背景技术:
光合细菌(photosyntheticbacteria,简称psb)是自然界最广泛存在的比较古老的、能进行光合作用而不产氧的特殊生理类群的原核微生物的总称,具有原始光能合成体系,能在厌氧条件下进行不放氧的光合作用,是水体兼性厌氧层中主要的初级生产者,并在自然界的碳素、氮素、硫素转化循环中起重要作用。它包括有红螺菌科(phodospirillaceae)、着色菌科(chromati-aceae)、绿杆菌科(chlorobiaceae)、绿色丝状菌科(chlo-roflexaceae)4科。
沼泽红假单胞菌是光合细菌的代表菌株之一,属于红螺菌科、红假单胞菌属,是我国农业部颁布12种允许在饲料中直接添加的活体微生物之一。根据国家农用微生物菌剂标准gb20287-2006,液体光合细菌菌剂的有效活菌数标准为≥2.0亿/ml,保质期≥3个月。培养基的组成和配比对沼泽红假单胞菌的繁殖速度和保藏期长短均有重要的影响。。
技术实现要素:
本发明的目的是提供一种复合光合细菌的制备方法,制得光合菌剂保质期长、效果好。
为实现上述目的,本发明解决其技术问题所采用的技术方案是:
一种复合光合细菌的制备方法,包括以下步骤:
1)将蒸馏水和黄腐酸按质量比为100-150:1混合,制得混合液;
2)向步骤1)中加入培养基原料制成液体培养基,所述培养基中含有下述组分酵母膏0.3-0.5g/ml、甲壳素0.1-0.3g/ml、小苏打0.1-0.3g/ml、牛奶0.3-0.7g/ml、苯甲酸钠0.1-0.3g/ml、黄瓜汁0.1-0.3g/ml、乙酸钠0.5-1.2g/ml,硫酸铵0.3-0.6g/ml;
3)接入球形红假单胞菌菌种,接菌量为液体培养基重量的2-3%;
4)将步骤3)所得分装于细口瓶中,加料体积占所述细口瓶容积的60-65%,用100w的灯泡培养至总菌数不低于20亿个每毫升。
进一步的,所述培养基中含有下述组分酵母膏0.4g/ml、甲壳素0.2g/ml、小苏打0.2g/ml、牛奶0.4g/ml、苯甲酸钠0.2g/ml、黄瓜汁0.1g/ml、乙酸钠1g/ml,硫酸铵0.2g/ml。
进一步的,所述蒸馏水和黄腐酸按质量比为130:1。
本发明有益效果:
本发明所述制备方法简单,大大降低了生产成本,其中培养基的组分搭配合理,采用这种培养基培养光合细菌成活率高。本发明制得的光合菌剂保质期长达5个月,增强植物抵抗力,提高产量及单位重量,并延长采收期。
具体实施方式
下面实施例对本发明作进一步详细的说明:
实施例1
一种复合光合细菌的制备方法,包括以下步骤:
1)将蒸馏水和黄腐酸按质量比为100:1混合,制得混合液;
2)向步骤1)中加入培养基原料制成液体培养基,所述培养基中含有下述组分酵母膏0.3g/ml、甲壳素0.1g/ml、小苏打0.1g/ml、牛奶0.3g/ml、苯甲酸钠0.1g/ml、黄瓜汁0.1g/ml、乙酸钠0.5g/ml,硫酸铵0.3g/ml;
3)接入球形红假单胞菌菌种,接菌量为液体培养基重量的2%;
4)将步骤3)所得分装于细口瓶中,加料体积占所述细口瓶容积的60%,用100w的灯泡培养至总菌数不低于20亿个每毫升。
实施例2
一种复合光合细菌的制备方法,包括以下步骤:
1)将蒸馏水和黄腐酸按质量比为130:1混合,制得混合液;
2)向步骤1)中加入培养基原料制成液体培养基,所述培养基中含有下述组分酵母膏0.4g/ml、甲壳素0.2g/ml、小苏打0.2g/ml、牛奶0.4g/ml、苯甲酸钠0.2g/ml、黄瓜汁0.1g/ml、乙酸钠1g/ml,硫酸铵0.2g/ml;
3)接入球形红假单胞菌菌种,接菌量为液体培养基重量的2.5%;
4)将步骤3)所得分装于细口瓶中,加料体积占所述细口瓶容积的60%,用100w的灯泡培养至总菌数不低于20亿个每毫升。
实施例3
一种复合光合细菌的制备方法,包括以下步骤:
1)将蒸馏水和黄腐酸按质量比为150:1混合,制得混合液;
2)向步骤1)中加入培养基原料制成液体培养基,所述培养基中含有下述组分酵母膏0.5g/ml、甲壳素0.3g/ml、小苏打0.3g/ml、牛奶0.7g/ml、苯甲酸钠0.3g/ml、黄瓜汁0.3g/ml、乙酸钠1.2g/ml,硫酸铵0.6g/ml;
3)接入球形红假单胞菌菌种,接菌量为液体培养基重量的3%;
4)将步骤3)所得分装于细口瓶中,加料体积占所述细口瓶容积的65%,用100w的灯泡培养至总菌数不低于20亿个每毫升。
以上所述,仅为本发明的具体实施方式,但本发明的保护范围并不局限于此,任何熟悉本领域的技术人员在本发明所揭露的技术范围内,可不经过创造性劳动想到的变化或替换,都应涵盖在本发明的保护范围之内。