突变孔的制作方法

文档序号:15733754发布日期:2018-10-23 21:07阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种突变CsgG单体,其包含SEQ ID NO:2中所示序列的变异体,所述突变CsgG单体包含R192D/Q/F/S/T。

2.根据权利要求1所述的突变CsgG单体,其中所述变异体包含R192D。

3.根据权利要求1或2所述的突变CsgG单体,其中所述变异体包含:

(a)在以下位置处的一或多个突变(即在以下位置中的一或多个处的突变):I41、R93、A98、Q100、G103、T104、A106、I107、N108、L113、S115、T117、Y130、K135、E170、S208、D233、D238和E244;和/或(b)以下中的一或多个:D43S、E44S、F48S/N/Q/Y/W/I/V/H/R/K、Q87N/R/K、N91K/R、K94R/F/Y/W/L/S/N、R97F/Y/W/V/I/K/S/Q/H、E101I/L/A/H、N102K/Q/L/I/V/S/H、R110F/G/N、Q114R/K、R142Q/S、T150Y/A/V/L/S/Q/N和D248S/N/Q/K/R;

(A)以下一或多个位置的缺失:F193、I194、D195、Y196、Q197、R198、L199、L200和E201;和/或(B)以下中的一或多个的缺失:V139/G140/D149/T150/V186/Q187/V204/G205、G137/G138/Q151/Y152/Y184/E185/Y206/T207和A141/R142/G147/A148/A188/G189/G202/E203;和/或

以下中的一或多个:(i)在以下位置处的一或多个突变:N40、D43、E44、S54、S57、Q62、R97、E101、E124、E131、R142和T150;(ii)在以下处的突变:Y51/N55、Y51/F56、N55/F56或Y51/N55/F56;(iii)Q42R或Q42K;(iv)K49R或K49Q;(v)N102R、N102F、N102Y或N102W;(vi)D149N、D149Q或D149R;(vii)E185N、E185Q或E185R;(viii)D195N、D195Q或D195R;(ix)E201N、E201Q或E201R;(x)E203N、E203Q或E203R;(xi)以下位置中的一或多个的缺失:F48、K49、P50、Y51、P52、A53、S54、N55、F56和S57;(xii)在以下位置处的一或多个突变:L90、N91、I95、A99、Q114;和(xiii)R97W、R93W、R93Y和R97Y;F191T;V105、A106和I107的缺失;和/或F193、I194、D195、Y196、Q197、R198和L199的缺失;或D195、Y196、Q197、R198和L199的缺失。

4.根据权利要求1到3中任一项所述的突变单体,其中所述变异体包含在Y51和/或Y56处的突变。

5.根据权利要求4所述的突变单体,其中所述在Y51处的突变是Y51A;和/或所述在Y56处的突变是F56Q。

6.根据前述权利要求中任一项所述的突变单体,其中

(a)所述变异体包含以下取代中的一或多个:N40R、N40K、D43N、D43Q、D43R、D43K、E44N、E44Q、E44R、E44K、S54P、S57P、Q62R、Q62K、R97N、R97G、R97L、E101N、E101Q、E101R、E101K、E101F、E101Y、E101W、E101T、E124N、E124Q、E124R、E124K、E124F、E124Y、E124W、E131D、R142E、R142N和T150I;

(b)所述变异体包含F56N/N55Q、F56N/N55R、F56N/N55K、F56N/N55S、F56N/N55G、F56N/N55A、F56N/N55T、F56Q/N55Q、F56Q/N55R、F56Q/N55K、F56Q/N55S、F56Q/N55G、F56Q/N55A、F56Q/N55T、F56R/N55Q、F56R/N55R、F56R/N55K、F56R/N55S、F56R/N55G、F56R/N55A、F56R/N55T、F56S/N55Q、F56S/N55R、F56S/N55K、F56S/N55S、F56S/N55G、F56S/N55A、F56S/N55T、F56G/N55Q、F56G/N55R、F56G/N55K、F56G/N55S、F56G/N55G、F56G/N55A、F56G/N55T、F56A/N55Q、F56A/N55R、F56A/N55K、F56A/N55S、F56A/N55G、F56A/N55A、F56A/N55T、F56K/N55Q、F56K/N55R、F56K/N55K、F56K/N55S、F56K/N55G、F56K/N55A、F56K/N55T、F56N/Y51L、F56N/Y51V、F56N/Y51A、F56N/Y51N、F56N/Y51Q、F56N/Y51S、F56N/Y51G、F56Q/Y51L、F56Q/Y51V、F56Q/Y51A、F56Q/Y51N、F56Q/Y51Q、F56Q/Y51S、F56Q/Y51G、F56R/Y51L、F56R/Y51V、F56R/Y51A、F56R/Y51N、F56R/Y51Q、F56R/Y51S、F56R/Y51G、F56S/Y51L、F56S/Y51V、F56S/Y51A、F56S/Y51N、F56S/Y51Q、F56S/Y51S、F56S/Y51G、F56G/Y51L、F56G/Y51V、F56G/Y51A、F56G/Y51N、F56G/Y51Q、F56G/Y51S、F56G/Y51G、F56A/Y51L、F56A/Y51V、F56A/Y51A、F56A/Y51N、F56A/Y51Q、F56A/Y51S、F56A/Y51G、F56K/Y51L、F56K/Y51V、F56K/Y51A、F56K/Y51N、F56K/Y51Q、F56K/Y51S、F56K/Y51G、N55Q/Y51L、N55Q/Y51V、N55Q/Y51A、N55Q/Y51N、N55Q/Y51Q、N55Q/Y51S、N55Q/Y51G、N55R/Y51L、N55R/Y51V、N55R/Y51A、N55R/Y51N、N55R/Y51Q、N55R/Y51S、N55R/Y51G、N55K/Y51L、N55K/Y51V、N55K/Y51A、N55K/Y51N、N55K/Y51Q、N55K/Y51S、N55K/Y51G、N55S/Y51L、N55S/Y51V、N55S/Y51A、N55S/Y51N、N55S/Y51Q、N55S/Y51S、N55S/Y51G、N55G/Y51L、N55G/Y51V、N55G/Y51A、N55G/Y51N、N55G/Y51Q、N55G/Y51S、N55G/Y51G、N55A/Y51L、N55A/Y51V、N55A/Y51A、N55A/Y51N、N55A/Y51Q、N55A/Y51S、N55A/Y51G、N55T/Y51L、N55T/Y51V、N55T/Y51A、N55T/Y51N、N55T/Y51Q、N55T/Y51S、N55T/Y51G、F56N/N55Q/Y51L、F56N/N55Q/Y51V、F56N/N55Q/Y51A、F56N/N55Q/Y51N、F56N/N55Q/Y51Q、F56N/N55Q/Y51S、F56N/N55Q/Y51G、F56N/N55R/Y51L、F56N/N55R/Y51V、F56N/N55R/Y51A、F56N/N55R/Y51N、F56N/N55R/Y51Q、F56N/N55R/Y51S、F56N/N55R/Y51G、F56N/N55K/Y51L、F56N/N55K/Y51V、F56N/N55K/Y51A、F56N/N55K/Y51N、F56N/N55K/Y51Q、F56N/N55K/Y51S、F56N/N55K/Y51G、F56N/N55S/Y51L、F56N/N55S/Y51V、F56N/N55S/Y51A、F56N/N55S/Y51N、F56N/N55S/Y51Q、F56N/N55S/Y51S、F56N/N55S/Y51G、F56N/N55G/Y51L、F56N/N55G/Y51V、F56N/N55G/Y51A、F56N/N55G/Y51N、F56N/N55G/Y51Q、F56N/N55G/Y51S、F56N/N55G/Y51G、F56N/N55A/Y51L、F56N/N55A/Y51V、F56N/N55A/Y51A、F56N/N55A/Y51N、F56N/N55A/Y51Q、F56N/N55A/Y51S、F56N/N55A/Y51G、F56N/N55T/Y51L、F56N/N55T/Y51V、F56N/N55T/Y51A、F56N/N55T/Y51N、F56N/N55T/Y51Q、F56N/N55T/Y51S、F56N/N55T/Y51G、F56Q/N55Q/Y51L、F56Q/N55Q/Y51V、F56Q/N55Q/Y51A、F56Q/N55Q/Y51N、F56Q/N55Q/Y51Q、F56Q/N55Q/Y51S、F56Q/N55Q/Y51G、F56Q/N55R/Y51L、F56Q/N55R/Y51V、F56Q/N55R/Y51A、F56Q/N55R/Y51N、F56Q/N55R/Y51Q、F56Q/N55R/Y51S、F56Q/N55R/Y51G、F56Q/N55K/Y51L、F56Q/N55K/Y51V、F56Q/N55K/Y51A、F56Q/N55K/Y51N、F56Q/N55K/Y51Q、F56Q/N55K/Y51S、F56Q/N55K/Y51G、F56Q/N55S/Y51L、F56Q/N55S/Y51V、F56Q/N55S/Y51A、F56Q/N55S/Y51N、F56Q/N55S/Y51Q、F56Q/N55S/Y51S、F56Q/N55S/Y51G、F56Q/N55G/Y51L、F56Q/N55G/Y51V、F56Q/N55G/Y51A、F56Q/N55G/Y51N、F56Q/N55G/Y51Q、F56Q/N55G/Y51S、F56Q/N55G/Y51G、F56Q/N55A/Y51L、F56Q/N55A/Y51V、F56Q/N55A/Y51A、F56Q/N55A/Y51N、F56Q/N55A/Y51Q、F56Q/N55A/Y51S、F56Q/N55A/Y51G、F56Q/N55T/Y51L、F56Q/N55T/Y51V、F56Q/N55T/Y51A、F56Q/N55T/Y51N、F56Q/N55T/Y51Q、F56Q/N55T/Y51S、F56Q/N55T/Y51G、F56R/N55Q/Y51L、F56R/N55Q/Y51V、F56R/N55Q/Y51A、F56R/N55Q/Y51N、F56R/N55Q/Y51Q、F56R/N55Q/Y51S、F56R/N55Q/Y51G、F56R/N55R/Y51L、F56R/N55R/Y51V、F56R/N55R/Y51A、F56R/N55R/Y51N、F56R/N55R/Y51Q、F56R/N55R/Y51S、F56R/N55R/Y51G、F56R/N55K/Y51L、F56R/N55K/Y51V、F56R/N55K/Y51A、F56R/N55K/Y51N、F56R/N55K/Y51Q、F56R/N55K/Y51S、F56R/N55K/Y51G、F56R/N55S/Y51L、F56R/N55S/Y51V、F56R/N55S/Y51A、F56R/N55S/Y51N、F56R/N55S/Y51Q、F56R/N55S/Y51S、F56R/N55S/Y51G、F56R/N55G/Y51L、F56R/N55G/Y51V、F56R/N55G/Y51A、F56R/N55G/Y51N、F56R/N55G/Y51Q、F56R/N55G/Y51S、F56R/N55G/Y51G、F56R/N55A/Y51L、F56R/N55A/Y51V、F56R/N55A/Y51A、F56R/N55A/Y51N、F56R/N55A/Y51Q、F56R/N55A/Y51S、F56R/N55A/Y51G、F56R/N55T/Y51L、F56R/N55T/Y51V、F56R/N55T/Y51A、F56R/N55T/Y51N、F56R/N55T/Y51Q、F56R/N55T/Y51S、F56R/N55T/Y51G、F56S/N55Q/Y51L、F56S/N55Q/Y51V、F56S/N55Q/Y51A、F56S/N55Q/Y51N、F56S/N55Q/Y51Q、F56S/N55Q/Y51S、F56S/N55Q/Y51G、F56S/N55R/Y51L、F56S/N55R/Y51V、F56S/N55R/Y51A、F56S/N55R/Y51N、F56S/N55R/Y51Q、F56S/N55R/Y51S、F56S/N55R/Y51G、F56S/N55K/Y51L、F56S/N55K/Y51V、F56S/N55K/Y51A、F56S/N55K/Y51N、F56S/N55K/Y51Q、F56S/N55K/Y51S、F56S/N55K/Y51G、F56S/N55S/Y51L、F56S/N55S/Y51V、F56S/N55S/Y51A、F56S/N55S/Y51N、F56S/N55S/Y51Q、F56S/N55S/Y51S、F56S/N55S/Y51G、F56S/N55G/Y51L、F56S/N55G/Y51V、F56S/N55G/Y51A、F56S/N55G/Y51N、F56S/N55G/Y51Q、F56S/N55G/Y51S、F56S/N55G/Y51G、F56S/N55A/Y51L、F56S/N55A/Y51V、F56S/N55A/Y51A、F56S/N55A/Y51N、F56S/N55A/Y51Q、F56S/N55A/Y51S、F56S/N55A/Y51G、F56S/N55T/Y51L、F56S/N55T/Y51V、F56S/N55T/Y51A、F56S/N55T/Y51N、F56S/N55T/Y51Q、F56S/N55T/Y51S、F56S/N55T/Y51G、F56G/N55Q/Y51L、F56G/N55Q/Y51V、F56G/N55Q/Y51A、F56G/N55Q/Y51N、F56G/N55Q/Y51Q、F56G/N55Q/Y51S、F56G/N55Q/Y51G、F56G/N55R/Y51L、F56G/N55R/Y51V、F56G/N55R/Y51A、F56G/N55R/Y51N、F56G/N55R/Y51Q、F56G/N55R/Y51S、F56G/N55R/Y51G、F56G/N55K/Y51L、F56G/N55K/Y51V、F56G/N55K/Y51A、F56G/N55K/Y51N、F56G/N55K/Y51Q、F56G/N55K/Y51S、F56G/N55K/Y51G、F56G/N55S/Y51L、F56G/N55S/Y51V、F56G/N55S/Y51A、F56G/N55S/Y51N、F56G/N55S/Y51Q、F56G/N55S/Y51S、F56G/N55S/Y51G、F56G/N55G/Y51L、F56G/N55G/Y51V、F56G/N55G/Y51A、F56G/N55G/Y51N、F56G/N55G/Y51Q、F56G/N55G/Y51S、F56G/N55G/Y51G、F56G/N55A/Y51L、F56G/N55A/Y51V、F56G/N55A/Y51A、F56G/N55A/Y51N、F56G/N55A/Y51Q、F56G/N55A/Y51S、F56G/N55A/Y51G、F56G/N55T/Y51L、F56G/N55T/Y51V、F56G/N55T/Y51A、F56G/N55T/Y51N、F56G/N55T/Y51Q、F56G/N55T/Y51S、F56G/N55T/Y51G、F56A/N55Q/Y51L、F56A/N55Q/Y51V、F56A/N55Q/Y51A、F56A/N55Q/Y51N、F56A/N55Q/Y51Q、F56A/N55Q/Y51S、F56A/N55Q/Y51G、F56A/N55R/Y51L、F56A/N55R/Y51V、F56A/N55R/Y51A、F56A/N55R/Y51N、F56A/N55R/Y51Q、F56A/N55R/Y51S、F56A/N55R/Y51G、F56A/N55K/Y51L、F56A/N55K/Y51V、F56A/N55K/Y51A、F56A/N55K/Y51N、F56A/N55K/Y51Q、F56A/N55K/Y51S、F56A/N55K/Y51G、F56A/N55S/Y51L、F56A/N55S/Y51V、F56A/N55S/Y51A、F56A/N55S/Y51N、F56A/N55S/Y51Q、F56A/N55S/Y51S、F56A/N55S/Y51G、F56A/N55G/Y51L、F56A/N55G/Y51V、F56A/N55G/Y51A、F56A/N55G/Y51N、F56A/N55G/Y51Q、F56A/N55G/Y51S、F56A/N55G/Y51G、F56A/N55A/Y51L、F56A/N55A/Y51V、F56A/N55A/Y51A、F56A/N55A/Y51N、F56A/N55A/Y51Q、F56A/N55A/Y51S、F56A/N55A/Y51G、F56A/N55T/Y51L、F56A/N55T/Y51V、F56A/N55T/Y51A、F56A/N55T/Y51N、F56A/N55T/Y51Q、F56A/N55T/Y51S、F56A/N55T/Y51G、F56K/N55Q/Y51L、F56K/N55Q/Y51V、F56K/N55Q/Y51A、F56K/N55Q/Y51N、F56K/N55Q/Y51Q、F56K/N55Q/Y51S、F56K/N55Q/Y51G、F56K/N55R/Y51L、F56K/N55R/Y51V、F56K/N55R/Y51A、F56K/N55R/Y51N、F56K/N55R/Y51Q、F56K/N55R/Y51S、F56K/N55R/Y51G、F56K/N55K/Y51L、F56K/N55K/Y51V、F56K/N55K/Y51A、F56K/N55K/Y51N、F56K/N55K/Y51Q、F56K/N55K/Y51S、F56K/N55K/Y51G、F56K/N55S/Y51L、F56K/N55S/Y51V、F56K/N55S/Y51A、F56K/N55S/Y51N、F56K/N55S/Y51Q、F56K/N55S/Y51S、F56K/N55S/Y51G、F56K/N55G/Y51L、F56K/N55G/Y51V、F56K/N55G/Y51A、F56K/N55G/Y51N、F56K/N55G/Y51Q、F56K/N55G/Y51S、F56K/N55G/Y51G、F56K/N55A/Y51L、F56K/N55A/Y51V、F56K/N55A/Y51A、F56K/N55A/Y51N、F56K/N55A/Y51Q、F56K/N55A/Y51S、F56K/N55A/Y51G、F56K/N55T/Y51L、F56K/N55T/Y51V、F56K/N55T/Y51A、F56K/N55T/Y51N、F56K/N55T/Y51Q,F56K/N55T/Y51S、F56K/N55T/Y51G、F56E/N55R、F56E/N55K、F56D/N55R、F56D/N55K、F56R/N55E、F56R/N55D、F56K/N55E或F56K/N55D;和/或

(c)所述变异体包含Y51/P52、Y51/P52/A53、P50到P52、P50到A53、K49到Y51、K49到A53的缺失,和K49到S54用单一脯氨酸(P)的置换;和Y51到A53、Y51到S54、N55/F56、N55到S57、N55/F56用单一P的置换;和N55/F56用单一P的置换;和N55/F56用单一甘氨酸(公克)的置换;和N55/F56用单一丙氨酸(A)的置换;和用单一P的置换,和Y51N、N55/F56;和用单一P的置换,和Y51Q、N55/F56;和用单一P的置换,Y51S、N55/F56;和用单一G的置换,和Y51N、N55/F56;和用单一G的置换,和Y51Q、N55/F56;和用单一G的置换,和Y51S、N55/F56;和用单一A的置换,和Y51N、N55/F56;和用单一A/Y51Q或N55/F56的置换;和用单一A的置换,和Y51S。

7.根据前述权利要求中任一项所述的突变,其中所述变异体包含D195N/E203N、D195Q/E203N、D195N/E203Q、D195Q/E203Q、E201N/E203N、E201Q/E203N、E201N/E203Q、E201Q/E203Q、E185N/E203Q、E185Q/E203Q、E185N/E203N、E185Q/E203N、D195N/E201N/E203N、D195Q/E201N/E203N、D195N/E201Q/E203N、D195N/E201N/E203Q、D195Q/E201Q/E203N、D195Q/E201N/E203Q、D195N/E201Q/E203Q、D195Q/E201Q/E203Q、D149N/E201N、D149Q/E201N、D149N/E201Q、D149Q/E201Q、D149N/E201N/D195N、D149Q/E201N/D195N、D149N/E201Q/D195N、D149N/E201N/D195Q、D149Q/E201Q/D195N、D149Q/E201N/D195Q、D149N/E201Q/D195Q、D149Q/E201Q/D195Q、D149N/E203N、D149Q/E203N、D149N/E203Q、D149Q/E203Q、D149N/E185N/E201N、D149Q/E185N/E201N、D149N/E185Q/E201N、D149N/E185N/E201Q、D149Q/E185Q/E201N、D149Q/E185N/E201Q、D149N/E185Q/E201Q、D149Q/E185Q/E201Q、D149N/E185N/E203N、D149Q/E185N/E203N、D149N/E185Q/E203N、D149N/E185N/E203Q、D149Q/E185Q/E203N、D149Q/E185N/E203Q、D149N/E185Q/E203Q、D149Q/E185Q/E203Q、D149N/E185N/E201N/E203N、D149Q/E185N/E201N/E203N、D149N/E185Q/E201N/E203N、D149N/E185N/E201Q/E203N、D149N/E185N/E201N/E203Q、D149Q/E185Q/E201N/E203N、D149Q/E185N/E201Q/E203N、D149Q/E185N/E201N/E203Q、D149N/E185Q/E201Q/E203N、D149N/E185Q/E201N/E203Q、D149N/E185N/E201Q/E203Q、D149Q/E185Q/E201Q/E203Q、D149Q/E185Q/E201N/E203Q、D149Q/E185N/E201Q/E203Q、D149N/E185Q/E201Q/E203Q、D149Q/E185Q/E201Q/E203N、D149N/E185N/D195N/E201N/E203N、D149Q/E185N/D195N/E201N/E203N、D149N/E185Q/D195N/E201N/E203N、D149N/E185N/D195Q/E201N/E203N、D149N/E185N/D195N/E201Q/E203N、D149N/E185N/D195N/E201N/E203Q、D149Q/E185Q/D195N/E201N/E203N、D149Q/E185N/D195Q/E201N/E203N、D149Q/E185N/D195N/E201Q/E203N、D149Q/E185N/D195N/E201N/E203Q、D149N/E185Q/D195Q/E201N/E203N、D149N/E185Q/D195N/E201Q/E203N、D149N/E185Q/D195N/E201N/E203Q、D149N/E185N/D195Q/E201Q/E203N、D149N/E185N/D195Q/E201N/E203Q、D149N/E185N/D195N/E201Q/E203Q、D149Q/E185Q/D195Q/E201N/E203N、D149Q/E185Q/D195N/E201Q/E203N、D149Q/E185Q/D195N/E201N/E203Q、D149Q/E185N/D195Q/E201Q/E203N、D149Q/E185N/D195Q/E201N/E203Q、D149Q/E185N/D195N/E201Q/E203Q、D149N/E185Q/D195Q/E201Q/E203N、D149N/E185Q/D195Q/E201N/E203Q、D149N/E185Q/D195N/E201Q/E203Q、D149N/E185N/D195Q/E201Q/E203Q、D149Q/E185Q/D195Q/E201Q/E203N、D149Q/E185Q/D195Q/E201N/E203Q、D149Q/E185Q/D195N/E201Q/E203Q、D149Q/E185N/D195Q/E201Q/E203Q、D149N/E185Q/D195Q/E201Q/E203Q、D149Q/E185Q/D195Q/E201Q/E203Q、D149N/E185R/E201N/E203N、D149Q/E185R/E201N/E203N、D149N/E185R/E201Q/E203N、D149N/E185R/E201N/E203Q、D149Q/E185R/E201Q/E203N、D149Q/E185R/E201N/E203Q、D149N/E185R/E201Q/E203Q、D149Q/E185R/E201Q/E203Q、D149R/E185N/E201N/E203N、D149R/E185Q/E201N/E203N、D149R/E185N/E201Q/E203N、D149R/E185N/E201N/E203Q、D149R/E185Q/E201Q/E203N、D149R/E185Q/E201N/E203Q、D149R/E185N/E201Q/E203Q、D149R/E185Q/E201Q/E203Q、D149R/E185N/D195N/E201N/E203N、D149R/E185Q/D195N/E201N/E203N、D149R/E185N/D195Q/E201N/E203N、D149R/E185N/D195N/E201Q/E203N、D149R/E185Q/D195N/E201N/E203Q、D149R/E185Q/D195Q/E201N/E203N、D149R/E185Q/D195N/E201Q/E203N、D149R/E185Q/D195N/E201N/E203Q、D149R/E185N/D195Q/E201Q/E203N、D149R/E185N/D195Q/E201N/E203Q、D149R/E185N/D195N/E201Q/E203Q、D149R/E185Q/D195Q/E201Q/E203N、D149R/E185Q/D195Q/E201N/E203Q、D149R/E185Q/D195N/E201Q/E203Q、D149R/E185N/D195Q/E201Q/E203Q、D149R/E185Q/D195Q/E201Q/E203Q、D149N/E185R/D195N/E201N/E203N、D149Q/E185R/D195N/E201N/E203N、D149N/E185R/D195Q/E201N/E203N、D149N/E185R/D195N/E201Q/E203N、D149N/E185R/D195N/E201N/E203Q、D149Q/E185R/D195Q/E201N/E203N、D149Q/E185R/D195N/E201Q/E203N、D149Q/E185R/D195N/E201N/E203Q、D149N/E185R/D195Q/E201Q/E203N、D149N/E185R/D195Q/E201N/E203Q、D149N/E185R/D195N/E201Q/E203Q、D149Q/E185R/D195Q/E201Q/E203N、D149Q/E185R/D195Q/E201N/E203Q、D149Q/E185R/D195N/E201Q/E203Q、D149N/E185R/D195Q/E201Q/E203Q、D149Q/E185R/D195Q/E201Q/E203Q、D149N/E185R/D195N/E201R/E203N、D149Q/E185R/D195N/E201R/E203N、D149N/E185R/D195Q/E201R/E203N、D149N/E185R/D195N/E201R/E203Q、D149Q/E185R/D195Q/E201R/E203N、D149Q/E185R/D195N/E201R/E203Q、D149N/E185R/D195Q/E201R/E203Q、D149Q/E185R/D195Q/E201R/E203Q、E131D/K49R、E101N/N102F、E101N/N102Y、E101N/N102W、E101F/N102F、E101F/N102Y、E101F/N102W、E101Y/N102F、E101Y/N102Y、E101Y/N102W、E101W/N102F、E101W/N102Y、E101W/N102W、E101N/N102R、E101F/N102R、E101Y/N102R or E101W/N102F。

8.根据前述权利要求中任一项所述的突变单体,其中所述变异体包含在T150处的突变。

9.一种构筑体,其包含两个或更多个共价连接的CsgG单体,其中所述单体中的至少一个是根据前述权利要求中任一项所述的突变单体。

10.根据权利要求9所述的构筑体,其中所述两个或更多个突变单体是相同或不同的。

11.根据权利要求9或10所述的构筑体,其中所述两个或更多个突变单体是基因融合的。

12.根据权利要求9到11中任一项所述的构筑体,其中所述两个或更多个突变单体通过一或多个连接子连接。

13.根据权利要求9到12中任一项所述的构筑体,其中所述构筑体包含两个根据权利要求1到8中任一项所述的突变单体。

14.一种聚核苷酸,其编码根据权利要求1到8中任一项所述的突变单体或根据权利要求11所述的构筑体。

15.一种同源寡聚孔,其衍生自CsgG,所述孔包含根据权利要求1到8中任一项所述的相同突变单体或根据权利要求9到13中任一项所述的相同构筑体。

16.根据权利要求15所述的同源寡聚孔,其中所述孔包含九个根据权利要求1到8中任一项所述的相同突变单体。

17.一种异源寡聚孔,其衍生自CsgG,所述孔包含至少一个根据权利要求1到8中任一项所述的突变单体或至少一个根据权利要求9到13中任一项所述的构筑体。

18.根据权利要求17所述异源寡聚孔,其中所述孔包含(a)九个根据权利要求1到8中任一项所述的突变单体,且其中所述突变单体中的至少一个不同于其它的突变单体;或(b)一或多个根据权利要求1到8中任一项所述的突变单体和足够的包含SEQ ID NO:2的其它单体。

19.一种用于测定靶分析物是否存在或其一或多个特征的方法,其包含:

(a)使所述靶分析物与根据权利要求15到18中任一项所述的孔接触,使得所述靶分析物相对于所述孔移动;和

(b)在所述分析物相对于所述孔移动时,进行一或多个测量,且从而测定所述分析物是否存在或其一或多个特征。

20.根据权利要求19所述的方法,其中所述靶分析物是金属离子、无机盐、聚合物、氨基酸、肽、多肽、蛋白质、核苷酸、寡核苷酸、聚核苷酸、染料、漂白剂、药物、诊断剂、娱乐性药物、爆炸性或环境污染物。

21.根据权利要求20所述的方法,其中所述靶分析物是靶聚核苷酸。

22.根据权利要求21所述的方法,其中所述方法是用于表征靶聚核苷酸,且所述方法包含:

a)使所述聚核苷酸与所述孔接触,使得所述聚核苷酸相对于所述孔移动;和

b)在所述聚核苷酸相对于所述孔移动时,进行一或多个测量,其中所述测量指示所述聚核苷酸的一或多个特征,且从而表征所述靶聚核苷酸。

23.根据权利要求22所述的方法,其中所述一或多个特征是选自(i)所述聚核苷酸的长度、(ii)所述聚核苷酸的一致性、(iii)所述聚核苷酸的序列、(iv)所述聚核苷酸的二级结构和(v)所述聚核苷酸是否经修饰。

24.根据权利要求22或23所述的方法,其中所述聚核苷酸的所述一或多个特征通过电测量和/或光学测量来测量。

25.根据权利要求24所述的方法,其中所述电测量是电流测量、阻抗测量、隧道测量或场效应晶体管(FET)测量。

26.根据权利要求22到25中任一项所述的方法,其中步骤a)进一步包含使所述聚核苷酸与聚核苷酸结合蛋白接触,使得所述蛋白质控制所述聚核苷酸通过所述孔的移动。

27.根据权利要求26所述的方法,其中所述方法包含:

a)使所述聚核苷酸与孔和所述所述聚核苷酸接触,使得所述蛋白质控制所述聚核苷酸相对于所述孔的移动;和

b)在所述聚核苷酸相对于所述孔移动时,测量穿过所述孔的电流,其中所述电流指示所述聚核苷酸的一或多个特征,且从而表征所述靶聚核苷酸。

28.根据权利要求26或27所述的方法,其中所述聚核苷酸结合蛋白是解螺旋酶或衍生自解螺旋酶。

29.根据权利要求21所述的方法,其中所述方法是用于表征靶聚核苷酸,且所述方法包含:

a)使所述聚核苷酸与根据权利要求15到18中任一项所述的孔和核酸外切酶接触,使得所述核酸外切酶消化来自所述靶聚核苷酸一端的个别核苷酸,且所述个别核苷酸相对于所述孔移动;和

b)在所述个别核苷酸相对于所述孔移动时,进行一或多个测量,其中所述测量指示所述个别核苷酸的一或多个特征,且从而表征所述靶聚核苷酸。

30.根据权利要求16到29中任一项所述的方法,其中所述孔在膜中。

31.根据权利要求30所述的方法,其中膜是两亲层或包含固态层。

32.根据权利要求20或31所述的方法,其中在使所述靶分析物与所述孔接触之前,将其与所述膜偶联。

33.根据权利要求30到32中任一项所述的方法,其中所述靶分析物连接于微粒,所述微粒向所述膜递送所述分析物。

34.一种形成用于表征靶聚核苷酸的传感器的方法,其包含在根据权利要求15到18中任一项所述的孔与聚核苷酸结合蛋白之间形成复合体,且从而形成用于表征所述靶聚核苷酸的传感器。

35.根据权利要求34所述的方法,其中所述复合体通过以下来形成:(a)在所述靶聚核苷酸存在下,使所述孔与所述聚核苷酸结合蛋白接触,和(a)在所述孔两端施加电势。

36.根据权利要求35所述的方法,其中所述电势是电压电势或化学势。

37.根据权利要求34所述的方法,其中所述复合体通过将所述孔与所述蛋白质共价连接来形成。

38.一种用于表征靶聚核苷酸的传感器,其包含根据权利要求15到18中任一项所述的孔与聚核苷酸结合蛋白之间的复合体。

39.一种根据权利要求15到18中任一项所述的孔的用途,其用于测定靶分析物是否存在或其的一或多个特征。

40.一种用于表征靶分析物的试剂盒,其包含(a)根据权利要求15到18中任一项所述的孔和(b)膜组分。

41.一种用于表征样本中的靶分析物的设备,其包含(a)多个根据权利要求15到18中任一项所述的孔和(b)多个膜。

42.根据权利要求41所述的设备,其中所述设备包含:

传感器装置,其能够支撑所述多个孔和膜,所述传感器装置能够操作以使用所述孔和所述膜来执行分析物表征;和

至少一个通口,其用于递送执行所述表征用材料。

43.根据权利要求42所述的设备,其中所述设备包含:

传感器装置,其能够支撑所述多个孔和膜,所述传感器装置能够操作以使用所述孔和膜来执行分析物表征;和

至少一个储槽,其用于盛放执行所述表征用材料。

44.根据权利要求42或43所述的设备,其中所述设备进一步包含:

流控系统,其配置成可控地从所述至少一个储槽供应材料到所述传感器装置;和

多个容器,其用于容纳相应样本,所述流控系统配置成选择性地从所述容器供应所述样本到所述传感器装置。

45.一种表征靶聚核苷酸的方法,其包含:

a)使所述聚核苷酸与根据权利要求15到18中任一项所述的孔、聚合酶和标记核苷酸接触,使得磷酸标记物种通过所述聚合酶依序添加到所述靶聚核苷酸中,其中所述磷酸物种含有对各核苷酸具有特异性的标记;和

b)使用所述孔检测所述磷酸标记物种,且从而表征所述聚核苷酸。

46.一种生产根据权利要求1到8中任一项所述的突变单体或根据权利要求11所述的构筑体的方法,其包含在合适宿主细胞中表达根据权利要求14所述的聚核苷酸,且从而生产根据权利要求1到8中任一项所述的突变单体或根据权利要求11所述的构筑体。

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