AIMP1蛋白的新片段和包含该片段的用于促进毛发生长的组合物的制作方法

本发明涉及aimp1蛋白的新片段和包含该片段的用于改善脱发和促进毛发生长的组合物，更具体地说，本发明涉及由seqidno：1的氨基酸序列中的4至21个连续氨基酸组成且包含seqidno：1的氨基酸序列的第28位至第31位氨基酸残基(keka)的多肽，或由与所述多肽具有70％或更多序列同源性的氨基酸序列组成的多肽；编码多肽的多核苷酸；以及一种用于改善脱发和促进毛发生长的药物、化妆品和食品组合物，其包含所述多肽。

背景技术：

本申请要求2016年7月28日提交的韩国专利申请no.10-2016-0096256的优先权和权益，其全部内容通过引用如同在此完全阐述一样并入本文。

制药业正在从过去的天然产品或化学合成药物的开发转向蛋白质或肽类药物的开发。蛋白质是生命功能和结构的基本物质，据估计，构成人体的蛋白质超过一百万。它与疾病直接相关，已成为治疗药物开发的重要研究课题。使用它们的蛋白质或肽药物已经被评估为药物的创新所在，因为它们具有较少的副作用并且比合成药物更有效。目前，生物药物在主要制药公司的管道中的重要性正在日益增加，但在某些生物药物如肽的推出之前存在重大的技术问题。具体而言，递送技术的改进、具有增加的稳定性和半衰期的肽的开发以及长链肽合成是商业化的障碍。肽由约50个氨基酸或更少的氨基酸组成。已知作为肽药物是成功的，重要的是找到具有短序列和活性的肽。如果肽长度长，合成成本高并且不易生产，并且已知在人体中存在吸收问题。

同时，在包括人类在内的动物中，毛囊从胎儿发育到整个生命期间经历几次退化和再生过程。在人类毛发生长的情况下，毛囊从新生儿到青春期继续生长，并且毛发变得越来越厚。毛囊由几种类型的细胞组成，例如上皮细胞和间充质细胞。间充质细胞充当胎儿和出生后毛囊的诱导组织者。毛囊胚细胞是球基质细胞(bulbarmatrixcell)，其负责毛囊中的大多数有丝分裂增殖。在生成期间，球基质中的细胞向上迁移并增殖并分化成毛发基质、内部和外部鞘细胞。位于毛囊中心轴上的毛发基质组继续分化成组成髓质、毛发皮层和毛发角质层的细胞。这些细胞继续向上移动并伴随毛发皮质和角质层细胞的角质化，其对于增殖的毛囊中的毛发形成是必需的。

毛发周期分为三个阶段：1)在毛囊周期中处于活跃发育阶段的毛发生长初期(anagen)，2)毛发生长中期(catagen)，和3)毛发生长休止期(telogen)。每个步骤的持续时间取决于个体年龄、激素因素、营养和健康状况以及遗传易感性。促进毛发生长的生长因子尚未阐明。在人类成人的100,000至150,000根头发中，已知约90％处于生长期(初期)，其余10％处于静息期(休止期)。已知，每天损失约500至1000根硬毛。在人类中，毛发生长速度略有不同，取决于身体部位，头发为0.44毫米/天，胡须或体毛为0.27毫米/天。在诸如大鼠的动物中，毛发周期变化是同步的，因此已知所有区域的毛发处于相同的活动状态。在大鼠中，第一个毛发生长周期在出生后很快开始并持续到出生后大约21天。并且，第二个周期在出生后约35天开始。先前，幼年大鼠(8至12日龄)已被用作抗癌诱导的脱发模型。已知在第一个毛发生长周期中用抗癌药物治疗的小鼠在10天内完全脱发。在这种情况下，毛发损失状态保持不变，直到第二次毛发生长周期开始。因此，在大鼠中，从脱发中恢复需要20-30天。

毛发损失或脱发是一种失去毛发的疾病。脱发期间的毛发损失不限于头发，并且可能发生在身体的任何部位。已知各种类型的脱发，包括斑秃、雄激素性脱发、绝经后脱发、女性型脱发、脂溢性脱发、秃头秃、老年性脱发、癌症引起的脱发、放射性脱发、由拔毛癖引起的脱发和产后脱发等。据报道，迄今已知的毛发生长促进疗法具有有限的功效或具有副作用。

虽然脱发本身不会危及生命，但由于它会带来与外观相关的严重心理压力，因此有必要开发一种能够有效促进毛发生长、安全缓解和治疗脱发但副作用较少的新型治疗剂。

技术实现要素：

技术问题

因此，本发明人已经证实，aimp1蛋白的特定片段在促进毛发生长、改善脱发、改善和治疗体内脱发方面表现出优异的效果，从而完成了本发明。

因此，本发明的一个方面是要提供一种由来自seqidno：1的氨基酸序列的4至21个连续氨基酸组成且包含seqidno：1的氨基酸序列的第28位至第31位氨基酸残基(keka)的多肽，或由与该多肽具有70％或更多序列同源性的氨基酸序列组成的多肽。

本发明的另一个方面是要提供一种多肽，所述多肽由选自以下的氨基酸序列组成：seqidno：6、seqidno：7、seqidno：8、seqidno：9、seqidno：13、seqidno：14和seqidno：15，或由与该多肽具有70％或更多序列同源性的氨基酸序列组成的多肽。

本发明的另一个方面是要提供一种编码所述多肽的多核苷酸。

本发明的另一个方面是要提供用于促进毛发生长、促进毛囊干细胞增殖或预防和治疗脱发的药物组合物，其包含作为活性成分的选自由来自seqidno：1的氨基酸序列的4至21个连续氨基酸组成且包含seqidno：1的氨基酸序列的第28位至第31位氨基酸残基(keka)的多肽和由与该多肽具有70％或更多序列同源性的氨基酸序列组成的多肽中的一种或多种多肽。

还要提供用于促进毛发生长、促进毛囊干细胞增殖或预防和治疗脱发的药物组合物，其由作为活性成分的选自由来自seqidno：1的氨基酸序列的4至21个连续氨基酸组成且包含seqidno：1的氨基酸序列的第28位至第31位氨基酸残基(keka)的多肽和由与该多肽具有70％或更多序列同源性的氨基酸序列组成的多肽中的一种或多种多肽组成。

还要提供用于促进毛发生长、促进毛囊干细胞增殖或预防和治疗脱发的药物组合物，其基本上由作为活性成分的选自由来自seqidno：1的氨基酸序列的4至21个连续氨基酸组成且包含seqidno：1的氨基酸序列的第28位至第31位氨基酸残基(keka)的多肽和由与该多肽具有70％或更多序列同源性的氨基酸序列组成的多肽组成的组中的一种或多种多肽组成。

本发明的另一个方面是要提供用于促进毛发生长、促进毛囊干细胞增殖或预防和治疗脱发的药物组合物，其中所述多肽由选自以下的氨基酸序列组成：seqidno：6、seqidno：7、seqidno：8、seqidno：9、seqidno：13、seqidno：14和seqidno：15。

本发明的另一个方面是要提供用于促进毛发生长、促进毛囊干细胞增殖或预防和治疗脱发的药物组合物，其中所述组合物还包含选自以下的化合物或其药学上可接受的盐：米诺地尔，克罗卡林，吡那地尔，naminidil，二苯基环丙烯酮，tricomin，醋酸环丙孕酮，达那唑，氟他胺；选自非那雄胺，妥罗雄脲，ly-191704，mk-306和度他雄胺的5-α还原酶抑制剂；均三氮苯类，苯并吡喃类，吡啶并吡喃类和硫化环戊烷-1-氧化物类。

本发明的另一个方面是要提供用于促进毛发生长或预防和改善脱发的化妆品组合物，其包含作为活性成分的选自由来自seqidno：1的氨基酸序列的4至21个连续氨基酸组成且包含seqidno：1的氨基酸序列的第28位至第31位氨基酸残基(keka)的多肽和由与该多肽具有70％或更多序列同源性的氨基酸序列组成的多肽中的一种或多种多肽。

还要提供用于促进毛发生长或预防和改善脱发的化妆品组合物，其由作为活性成分的选自由来自seqidno：1的氨基酸序列的4至21个连续氨基酸组成且包含seqidno：1的氨基酸序列的第28位至第31位氨基酸残基(keka)的多肽和由与该多肽具有70％或更多序列同源性的氨基酸序列组成的多肽中的一种或多种多肽组成。

还要提供用于促进毛发生长或预防和改善脱发的化妆品组合物，其基本上由作为活性成分的选自由来自seqidno：1的氨基酸序列的4至21个连续氨基酸组成且包含seqidno：1的氨基酸序列的第28位至第31位氨基酸残基(keka)的多肽和由与该多肽具有70％或更多序列同源性的氨基酸序列组成的多肽中的一种或多种多肽组成。

本发明的另一个方面是要提供用于促进毛发生长或预防和改善脱发的食品组合物，其包含作为活性成分的选自由来自seqidno：1的氨基酸序列的4至21个连续氨基酸组成且包含seqidno：1的氨基酸序列的第28位至第31位氨基酸残基(keka)的多肽和由与该多肽具有70％或更多序列同源性的氨基酸序列组成的多肽中的一种或多种多肽。

还要提供用于促进毛发生长或预防和改善脱发的食品组合物，其由作为活性成分的选自由来自seqidno：1的氨基酸序列的4至21个连续氨基酸组成且包含seqidno：1的氨基酸序列的第28位至第31位氨基酸残基(keka)的多肽和由与该多肽具有70％或更多序列同源性的氨基酸序列组成的多肽中的一种或多种多肽组成。

还要提供用于促进毛发生长或预防和改善脱发的食品组合物，其基本上由作为活性成分的选自由来自seqidno：1的氨基酸序列的4至21个连续氨基酸组成且包含seqidno：1的氨基酸序列的第28位至第31位氨基酸残基(keka)的多肽和由与该多肽具有70％或更多序列同源性的氨基酸序列组成的多肽中的一种或多种多肽组成。

本发明的另一个方面是要提供由来自seqidno：1的氨基酸序列的4至21个连续氨基酸组成且包含seqidno：1的氨基酸序列的第28位至第31位氨基酸残基(keka)的多肽和由与所述多肽具有70％或更多序列同源性的氨基酸序列组成的多肽中的一种或多种多肽用于制备药剂的用途，，该药剂用于促进毛发生长、促进毛囊干细胞增殖或预防和治疗脱发。

本发明的另一个方面是要提供用于促进毛发生长、促进毛囊干细胞增殖或预防和治疗脱发的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用有效量的组合物，所述组合物包含作为活性成分的选自由来自seqidno：1的氨基酸序列的4至21个连续氨基酸组成且包含seqidno：1的氨基酸序列的第28位至第31位氨基酸残基(keka)的多肽和由与该多肽具有70％或更多序列同源性的氨基酸序列组成的多肽中的一种或多种多肽。

还要提供用于促进毛发生长、促进毛囊干细胞增殖或预防和治疗脱发的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用有效量的组合物，所述组合物由作为活性成分的选自由来自seqidno：1的氨基酸序列的4至21个连续氨基酸组成且包含seqidno：1的氨基酸序列的第28位至第31位氨基酸残基(keka)的多肽和由与所述多肽具有70％或更多序列同源性的氨基酸序列组成的多肽中的一种或多种多肽组成。

还要提供用于促进毛发生长、促进毛囊干细胞增殖或预防和治疗脱发的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用有效量的组合物，所述组合物基本上由作为活性成分的选自由来自seqidno：1的氨基酸序列的4至21个连续氨基酸组成且包含seqidno：1的氨基酸序列的第28位至第31位氨基酸残基(keka)的多肽和由与该多肽具有70％或更多序列同源性的氨基酸序列组成的多肽中的一种或多种多肽组成。

本发明的另一个方面是要提供用于促进毛发生长、促进毛囊干细胞增殖或预防和治疗脱发的药物组合物，其包含作为活性成分的由seqidno：1的氨基酸序列组成的多肽。

还要提供用于促进毛发生长、促进毛囊干细胞增殖或预防和治疗脱发的药物组合物，其由作为活性成分的由seqidno：1的氨基酸序列组成的多肽组成。

还要提供用于促进毛发生长、促进毛囊干细胞增殖或预防和治疗脱发的药物组合物，其基本上由作为活性成分的由seqidno：1的氨基酸序列组成的多肽组成。

本发明的另一个方面是要提供用于促进毛发生长或预防和改善脱发的化妆品组合物，其包含作为活性成分的由seqidno：1的氨基酸序列组成的多肽。

还要提供用于促进毛发生长或预防和改善脱发的化妆品组合物，其由作为活性成分的由seqidno：1的氨基酸序列组成的多肽组成。

还要提供用于促进毛发生长或预防和改善脱发的化妆品组合物，其基本上由作为活性成分的由seqidno：1的氨基酸序列组成的多肽组成。

本发明的另一个方面是要提供用于促进毛发生长或预防和改善脱发的食品组合物，其包含作为活性成分的由seqidno：1的氨基酸序列组成的多肽。

还要提供用于促进毛发生长或预防和改善脱发的食品组合物，其由作为活性成分的由seqidno：1的氨基酸序列组成的多肽组成。

还要提供用于促进毛发生长或预防和改善脱发的食品组合物，其基本上由作为活性成分的由seqidno：1的氨基酸序列组成的多肽组成。

本发明的另一个方面是要提供由seqidno：1的氨基酸序列组成的多肽用于制备药剂的用途，该药剂用于促进毛发生长、促进毛囊干细胞增殖或预防和治疗脱发。

本发明的另一个方面是要提供用于促进毛发生长、促进毛囊干细胞增殖或预防和治疗脱发的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用有效量的包含作为活性成分的由seqidno：1的氨基酸序列组成的多肽的组合物。

还要提供用于促进毛发生长、促进毛囊干细胞增殖或预防和治疗脱发的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用有效量的由作为活性成分的由seqidno：1的氨基酸序列组成的多肽组成的组合物。

还要提供用于促进毛发生长、促进毛囊干细胞增殖或预防和治疗脱发的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用有效量的基本上由作为活性成分的由seqidno：1的氨基酸序列组成的多肽组成的组合物。

技术方案

根据本发明的一个方面，提供了一种由来自seqidno：1的氨基酸序列的4至21个连续氨基酸组成且包含seqidno：1的氨基酸序列的第28位至第31位氨基酸残基(keka)的多肽，或一种由与该多肽具有70％或更多序列同源性的氨基酸序列组成的多肽。

根据本发明的另一个方面，提供了一种多肽，所述多肽由选自以下的氨基酸序列组成：seqidno：6、seqidno：7、seqidno：8、seqidno：9、seqidno：13、seqidno：14和seqidno：15，或由与该多肽具有70％或更多序列同源性的氨基酸序列组成的多肽。

根据本发明的另一个方面，提供了一种编码所述多肽的多核苷酸。

根据本发明的另一个方面，提供了用于促进毛发生长、促进毛囊干细胞增殖或预防和治疗脱发的药物组合物，其包含作为活性成分的选自由来自seqidno：1的氨基酸序列的4至21个连续氨基酸组成且包含seqidno：1的氨基酸序列的第28位至第31位氨基酸残基(keka)的多肽和由与该多肽具有70％或更多序列同源性的氨基酸序列组成的多肽中的一种或多种多肽。

还提供了用于促进毛发生长、促进毛囊干细胞增殖或预防和治疗脱发的药物组合物，其由作为活性成分的选自由来自seqidno：1的氨基酸序列的4至21个连续氨基酸组成且包含seqidno：1的氨基酸序列的第28位至第31位氨基酸残基(keka)的多肽和由与该多肽具有70％或更多序列同源性的氨基酸序列组成的多肽中的一种或多种多肽组成。

还提供了用于促进毛发生长、促进毛囊干细胞增殖或预防和治疗脱发的药物组合物，其基本上由作为活性成分的选自由来自seqidno：1的氨基酸序列的4至21个连续氨基酸组成且包含seqidno：1的氨基酸序列的第28位至第31位氨基酸残基(keka)的多肽和由与该多肽具有70％或更多序列同源性的氨基酸序列组成的多肽中的一种或多种多肽组成。

根据本发明的另一个方面，提供了用于促进毛发生长、促进毛囊干细胞增殖或预防和治疗脱发的药物组合物，其中所述组合物还包含选自以下的化合物或其药学上可接受的盐：米诺地尔，克罗卡林，吡那地尔，naminidil，二苯基环丙烯酮，tricomin，醋酸环丙孕酮，达那唑，氟他胺；选自非那雄胺，妥罗雄脲，ly-191704，mk-306和度他雄胺的5-α还原酶抑制剂；均三氮苯类，苯并吡喃类，吡啶并吡喃类和硫化环戊烷-1-氧化物类。

根据本发明的另一个方面，提供了用于促进毛发生长或预防和改善脱发的化妆品组合物，其包含作为活性成分的选自由来自seqidno：1的氨基酸序列的4至21个连续氨基酸组成且包含seqidno：1的氨基酸序列的第28位至第31位氨基酸残基(keka)的多肽和由与该多肽具有70％或更多序列同源性的氨基酸序列组成的多肽中的一种或多种多肽。

还提供了用于促进毛发生长或预防和改善脱发的化妆品组合物，其由作为活性成分的选自由来自seqidno：1的氨基酸序列的4至21个连续氨基酸组成且包含seqidno：1的氨基酸序列的第28位至第31位氨基酸残基(keka)的多肽和由与该多肽具有70％或更多序列同源性的氨基酸序列组成的多肽中的一种或多种多肽组成。

还提供了用于促进毛发生长或预防和改善脱发的化妆品组合物，其基本上由作为活性成分的选自由来自seqidno：1的氨基酸序列的4至21个连续氨基酸组成且包含seqidno：1的氨基酸序列的第28位至第31位氨基酸残基(keka)的多肽和由与该多肽具有70％或更多序列同源性的氨基酸序列组成的多肽中的一种或多种多肽组成。

根据本发明的另一个方面，提供了用于促进毛发生长或预防和改善脱发的食品组合物，其包含作为活性成分的选自由来自seqidno：1的氨基酸序列的4至21个连续氨基酸组成且包含seqidno：1的氨基酸序列的第28位至第31位氨基酸残基(keka)的多肽和由与该多肽具有70％或更多序列同源性的氨基酸序列组成的多肽中的一种或多种多肽。

还提供了用于促进毛发生长或预防和改善脱发的食品组合物，其由作为活性成分的选自由来自seqidno：1的氨基酸序列的4至21个连续氨基酸组成且包含seqidno：1的氨基酸序列的第28位至第31位氨基酸残基(keka)的多肽和由与该多肽具有70％或更多序列同源性的氨基酸序列组成的多肽中的一种或多种多肽组成。

还提供了用于促进毛发生长或预防和改善脱发的食品组合物，其基本上由作为活性成分的选自由来自seqidno：1的氨基酸序列的4至21个连续氨基酸组成且包含seqidno：1的氨基酸序列的第28位至第31位氨基酸残基(keka)的多肽和由与该多肽具有70％或更多序列同源性的氨基酸序列组成的多肽中的一种或多种多肽组成。

根据本发明的另一个方面，提供了由来自seqidno：1的氨基酸序列的4至21个连续氨基酸组成且包含seqidno：1的氨基酸序列的第28位至第31位氨基酸残基(keka)的多肽和由与该多肽具有70％或更多序列同源性的氨基酸序列组成的多肽中的一种或多种多肽用于制备药剂的用途，该药剂用于促进毛发生长、促进毛囊干细胞增殖或预防和治疗脱发。

根据本发明的另一个方面，提供了用于促进毛发生长、促进毛囊干细胞增殖或预防和治疗脱发的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用有效量的组合物，所述组合物包含作为活性成分的选自由来自seqidno：1的氨基酸序列的4至21个连续氨基酸组成且包含seqidno：1的氨基酸序列的第28位至第31位氨基酸残基(keka)的多肽和由与该多肽具有70％或更多序列同源性的氨基酸序列组成的多肽中的一种或多种多肽。

还提供了用于促进毛发生长、促进毛囊干细胞增殖或预防和治疗脱发的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用有效量的组合物，所述组合物由作为活性成分的选自由来自seqidno：1的氨基酸序列的4至21个连续氨基酸组成且包含seqidno：1的氨基酸序列的第28位至第31位氨基酸残基(keka)的多肽和由与该多肽具有70％或更多序列同源性的氨基酸序列组成的多肽中的一种或多种多肽组成。

还提供了用于促进毛发生长、促进毛囊干细胞增殖或预防和治疗脱发的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用有效量的组合物，所述组合物基本上由作为活性成分的选自由来自seqidno：1的氨基酸序列的4至21个连续氨基酸组成且包含seqidno：1的氨基酸序列的第28位至第31位氨基酸残基(keka)的多肽和由与该多肽具有70％或更多序列同源性的氨基酸序列组成的多肽中的一种或多种多肽组成。

根据本发明的另一个方面，提供了用于促进毛发生长、促进毛囊干细胞增殖或预防和治疗脱发的药物组合物，其包含作为活性成分的由seqidno：1的氨基酸序列组成的多肽。

还提供了用于促进毛发生长、促进毛囊干细胞增殖或预防和治疗脱发的药物组合物，其由作为活性成分的由seqidno：1的氨基酸序列组成的多肽组成。

还提供了用于促进毛发生长、促进毛囊干细胞增殖或预防和治疗脱发的药物组合物，其基本上由作为活性成分的由seqidno：1的氨基酸序列组成的多肽组成。

根据本发明的另一个方面，提供了用于促进毛发生长或预防和改善脱发的化妆品组合物，其包含作为活性成分的由seqidno：1的氨基酸序列组成的多肽。

还提供了用于促进毛发生长或预防和改善脱发的化妆品组合物，其由作为活性成分的由seqidno：1的氨基酸序列组成的多肽组成。

还提供了用于促进毛发生长或预防和改善脱发的化妆品组合物，其基本上由作为活性成分的由seqidno：1的氨基酸序列组成的多肽组成。

根据本发明的另一个方面，提供了用于促进毛发生长或预防和改善脱发的食品组合物，其包含作为活性成分的由seqidno：1的氨基酸序列组成的多肽。

还提供了用于促进毛发生长或预防和改善脱发的食品组合物，其由作为活性成分的由seqidno：1的氨基酸序列组成的多肽组成。

还提供了用于促进毛发生长或预防和改善脱发的食品组合物，其基本上由作为活性成分的由seqidno：1的氨基酸序列组成的多肽组成。

根据本发明的另一个方面，提供了由seqidno：1的氨基酸序列组成的多肽用于制备药剂的用途，该药剂用于促进毛发生长、促进毛囊干细胞增殖或预防和治疗脱发。

根据本发明的另一个方面，提供了用于促进毛发生长、促进毛囊干细胞增殖或预防和治疗脱发的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用有效量的包含作为活性成分的由seqidno：1的氨基酸序列组成的多肽的组合物。

还提供了用于促进毛发生长、促进毛囊干细胞增殖或预防和治疗脱发的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用有效量的由作为活性成分的由seqidno：1的氨基酸序列组成的多肽组成的组合物。

还提供了用于促进毛发生长、促进毛囊干细胞增殖或预防和治疗脱发的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用有效量的基本上由作为活性成分的由seqidno：1的氨基酸序列组成的多肽组成的组合物。

在下文中，将详细描述本发明。

本发明中的术语“keka残基”、“keka序列”或“keka区域”能够互换使用并且是指由seqidno：16、seqidno：33、seqidno：34或seqidno：35表示的aimp1蛋白的全长氨基酸序列中的第33位至第36位氨基酸区域。并且该区域对应于seqidno：1的多肽中的第28位至第31位氨基酸残基(或称为“neo-pep”)，其是由本发明提供的促进毛发生长的活性片段的实例。

下文中，本发明提供的多肽是衍生自aimp1蛋白的片段，其包含seqidno：1的氨基酸序列中的第28位至第31位氨基酸(keka)区域，并且对促进毛发生长和毛囊干细胞增殖具有非常优异的效果。本发明首次公开了aimp1的keka区域对于促进毛发生长，促进毛囊干细胞增殖，预防、改善或治疗脱发是必需的。

因此，本发明提供一种由来自seqidno：1的氨基酸序列的4至21个连续氨基酸、优选10至21个连续氨基酸、更优选15至20个连续氨基酸组成且包含seqidno：1的氨基酸序列的第28位至第31位氨基酸残基(keka)的多肽，或由与该多肽具有70％或更多序列同源性的氨基酸序列组成的多肽。

优选地，本发明的多肽由选自以下的氨基酸序列组成：seqidno：6、seqidno：7、seqidno：8、seqidno：9、seqidno：13、seqidno：14和seqidno：15。

如本文所用，术语“多肽”、“肽”和“蛋白质”可互换使用，是指天然状态蛋白质中常见的氨基酸残基聚合物。

本文使用的单字母(三联体)氨基酸是指根据生物化学中的标准缩写的下列氨基酸：a(ala)：丙氨酸；c(cys)：半胱氨酸；d(asp)：天冬氨酸；e(glu)：谷氨酸；f(phe)：苯丙氨酸；g(gly)：甘氨酸；h(他的)：组氨酸；i(iie)：异亮氨酸；k(lys)：赖氨酸；l(leu)：亮氨酸；m(met)：甲硫氨酸；n(asn)：天冬酰胺；o(ply)：吡咯赖氨酸；p(pro)：脯氨酸；q(gln)：谷氨酰胺；r(精氨酸)：精氨酸；s(ser)：丝氨酸；t(thr)：苏氨酸；u(sec)：硒代半胱氨酸，v(val)：缬氨酸；w(trp)：色氨酸；y(tyr)：酪氨酸。

在本发明中，“aimp1(ars-相互作用的多功能蛋白1)蛋白质”开始被称为p43蛋白并且更名为aimp1(kimsh等，trendsinbiochemicalsciences，30：569-574，2005)。aimp1与多trna合成酶复合物结合以增强多trna合成酶的催化活性。本发明的aimp1蛋白的具体序列没有特别限制，只要它是本领域已知的即可，并且可以优选是人aimp1。已知aimp1蛋白的三个snp(参见ncbisnp数据库)：全长aimp1(本说明书中的seqidno：33)的氨基酸序列中的第79位丙氨酸(ala)被脯氨酸(pro)取代(snp登录号rs3133166，seqidno：16)；第104苏氨酸(thr)被丙氨酸(ala)取代(snp登录号rs17036670，seqidno：34)；第117苏氨酸(thr)被丙氨酸(ala)取代(snp登录号rs2230255，seqidno：35)。

本发明的多肽，即由seqidno：1的氨基酸序列的4至21个连续氨基酸组成且包含seqidno：1的氨基酸序列的第28位至第31位氨基酸残基(keka)的多肽，包括其功能等同物。功能等同物是指与本发明的多肽具有至少70％或更多(70.0％至99.9％)、优选80％或更多(80.0％至99.9％)、更优选90％或更多(90％至99.9％)序列同源性(或同一性)的多肽。更优选地，功能等同物是指与本发明多肽具有至少70％或更多、优选80％或更多、更优选90％或更多序列同源性(或同一性)且具有恒定(未改变)的keka区域(序列)的多肽。例如，这些包括具有70％、71％、72％、73％、74％、75％、76％、77％、78％、79％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同源性并表现出与本发明多肽基本上相同的生理活性的多肽。这里，术语“基本上”是指表示某种性质的性质为整体或几乎相同程度的状态。因此，在本发明中，“基本上相同的生理活性”是指促进毛发生长的活性，例如，促进毛囊的形成、增加毛囊的数量；促进毛囊干细胞增殖；或预防、改善或治疗脱发。

最优选地，功能等同物可以是与本发明的多肽具有至少70％、优选至少80％、更优选至少90％的序列同源性(或同一性)且具有keka区域的恒定序列(序列)和等电点(pi)为9至11的多肽。

在本发明中，“同源性或同一性”是指聚合物分子(例如多肽分子)之间的总体相关性。例如，可以通过对准两个序列用于最佳比较来进行两个多肽序列之间的同源性/同一性(％)的计算。优选地，为比较目的而排列的序列的长度为参考序列的至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％或基本上100％。然后，将相应氨基酸位点的氨基酸相互比较。如果位于第一序列的氨基酸与第二序列的相应位点处的氨基酸相同，则两个序列在该位点是相同的。两个序列的同一性(％)是考虑了为了两个序列之间的最佳对准而引入的缺口的数量和长度而具有两个序列共有的氨基酸的位点数的函数。能够通过数学算法进行两个序列之间的比较和同一性的确定(％)。例如，clustalw(thompson等，1994)可用于使用以下参数测量序列同一性值：配对阵列参数-方法：准确，矩阵：pam，缺口开放罚分：10.00，缺口延伸罚分：0.10；多个阵列参数-矩阵：pam，缺口开放罚分：10.00，延迟同一性：30，惩罚末端缺口：开，缺口分离距离：0，负矩阵：否，缺口延伸罚分：0.20，残基特定缺口罚分：开，亲水缺口罚分：开，亲水残基：gpsndqekr。特定残基中的序列同一性包括简单衍生化的相同残基。

在本发明中，术语“基本上”是指表示某种性质的性质为整体或几乎相同程度的状态。本发明中的术语“基本上相同”用于与氨基酸或核酸序列之间的比较有关。对于本发明所属领域的普通技术人员而言，如果两个序列在相应位点具有相同的残基，则它们将被理解为“基本上相同”。如本领域众所周知的，能够使用多种算法比较氨基酸或核酸序列，例如，能够使用计算机程序如用于核酸序列比较的blastn、用于氨基酸序列比较的blastp、缺口blast或psi-blast。在以下参考文献中描述了这种计算机程序的实例：altschul等，basiclocalalignmentsearchtool，j.mol.biol.，215(3)：403-410，1990；altschul等，methodsinenzymology；altschul等，nucleicacidsres.25：3389-3402，1997；baxevanis，bioinformatics：apracticalguidetotheanalysisofgenesandproteins，wiley，1998；以及misener等，(eds.)，bioinformaticsmethodsandprotocols(methodsinmolecularbiology，vol.132)，humanapress，1999。除了搜索相同的序列之外，上述计算机程序通常提供同一性的程度。在两个序列中，如果在一定长度的残基上相应位点的残基的至少70％、优选至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或更多是相同的，则认为是“基本上相同”的序列。优选地，“一定长度的残基”可以是至少1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、105、110、115、120、125、130、135、140、145、150、155、160、165、160、165、170、175、180、185、190、195、200、205、210、215、220、225、230、235、240、245、250、255、260、265、270、275、280、285、290、295、300个或更多的残基。

在本发明中，术语“对应”通常用于确定给定多肽的氨基酸残基的位置/身份。如常规的，多肽中的残基通常使用基于参考相关多肽的规范编号系统来指定。因此，例如，第190位残基中的“对应”氨基酸不必总是在特定氨基酸链中的第190位，并且本领域普通技术人员将容易理解如何鉴定对应氨基酸。

“功能等同物”可以是由于添加、取代或缺失本发明多肽的一些氨基酸序列而产生的多肽。氨基酸的取代优选为保守取代。自然界中存在的氨基酸的保守取代的实例如下：脂肪族氨基酸(gly，ala，pro)，疏水性氨基酸(ile，leu，val)，芳香族氨基酸(phe，tyr，trp)，酸性氨基酸(asp，glu)，碱性氨基酸(his，lys，arg，gln，asn)和含硫氨基酸(cys，met)。功能等同物中还包括其中一部分氨基酸在本发明多肽的氨基酸序列中被缺失的变体。氨基酸的缺失或取代优选位于与本发明多肽的生理活性不直接相关的区域。在本发明中，与生理活性直接相关的区域是keka区域，并且缺失或取代能够位于除上述区域之外的区域。还包括其中一些氨基酸在本发明多肽的氨基酸的两端或序列中添加的变体。还包括在本发明的功能等同物中的是蛋白质或多肽衍生物，其中蛋白质的一些化学结构被修饰，同时保持根据本发明的蛋白质的基本骨架和生理活性。这包括，例如，改变本发明蛋白质的稳定性、贮存稳定性、挥发性或溶解性的结构修饰。

在本发明中，序列同源性和同一性定义为在将候选序列与多肽的氨基酸序列比对并引入缺口后候选序列的氨基酸残基相对于本发明多肽的氨基酸序列的百分比。如果需要，作为序列同源性的一部分的保守取代不被认为获得最大百分比序列同源性。而且，本发明多肽的氨基酸序列的n-末端、c-末端或内部延伸(stretch)、缺失或插入不被解释为影响序列同源性或同一性的序列。另外，序列同源性可以通过用于比较两种蛋白质或多肽的相似区域的氨基酸序列的标准方法来确定。blast或这样的计算机程序比对两种蛋白质或多肽，使得每个氨基酸得到最佳匹配(沿着一个或两个序列的全长序列或沿着一个或两个序列的预测区域)。该程序提供默认开放罚分和默认缺口罚分，并提供评分矩阵，例如pam250(standardscoringmatrix；dayhoff等，inatlasofproteinsequence&lt；rtiid＝0.0&gt；structure，vol5，supp3，1978)。例如，百分比同源性能够如下计算：将相同匹配的总数乘以100并除以匹配范围中较长序列的长度和引入较长序列以比对两个序列的缺口数之和。

能够通过遗传工程方法构建本发明的多肽。首先，根据常规方法构建编码本发明多肽的多核苷酸序列。例如，能够使用合适的引物通过pcr扩增作为模板的编码人aimp1基因的多核苷酸来构建多核苷酸序列。或者，dna序列可以通过本领域已知的标准方法合成，例如，使用自动dna合成仪(可从biosearch或appliedbiosystemsinc商购)。然后将构建的多核苷酸插入包含一个或多个表达控制序列(例如，启动子、增强子等)的载体中，所述表达控制序列与多核苷酸可操作地连接，从而控制多核苷酸碱基序列的表达，然后用重组表达载体转化宿主细胞。得到的转基因细胞在适于表达dna序列的培养基和条件下培养，并从培养物中收集由dna序列编码的基本上纯的蛋白质。收集意指使用本领域已知的方法(例如色谱法)分离(分离)和/或纯化目标肽。

术语“基本上纯的蛋白质”意指基本上不含源自宿主细胞的任何其他蛋白质。用于本发明蛋白质合成的基因工程方法可以在以下参考文献中找到：maniatis等，molecularcloning；alaboratorymanual，coldspringharborlaboratory，1982；sambrook等，supra；geneexpressiontechnology，methodinenzymology，geneticsandmolecularbiology，methodinenzymology，guthrie&fink(eds.)，academicpress，sandiego，calif，1991；和hitzeman等，j.biol.chem.，255：12073-12080，1990。

本发明的多肽还能够通过本领域已知的技术化学合成(creighton，proteins：structuresandmolecularprinciples，whfreemanandco.，ny(1983))。也就是说，能够使用常规的逐步液相或固相合成、分级缩合、f-moc或t-boc化学制备本发明的多肽(chemicalapproachestothesynthesisofpeptidesandproteins，williams等，eds.，crcpress，bocaratonflorida，(1997)；apracticalapproach，atherton&sheppard，eds.，irlpress，oxford，england，(1989))。优选的制备方法是固相合成。能够通过常规固相方法中受保护的氨基酸之间的缩合反应合成本发明的多肽，根据从c-末端开始鉴定的氨基酸序列顺序进行。缩合反应后，能够通过酸分解或氨解等公知的方法除去保护基和与c末端氨基酸连接的载体。上述肽合成方法在相关书中有详细描述(grossandmeienhofer′s，thepeptides，vol2，academicpress，1980)。

通过基因工程方法产生的蛋白质或化学合成的蛋白质能够通过本领域已知的各种方法分离和纯化，例如提取、重结晶、各种色谱(凝胶过滤、离子交换、沉淀、吸附、反相)、电泳、逆流分配方法等。

此外，本发明提供了编码本发明多肽的多核苷酸，所述多肽由来自seqidno：1的氨基酸序列的4至21个连续氨基酸组成，并且其中所述多肽包含seqidno：1的氨基酸序列的第28位至第31位氨基酸残基(keka)。多核苷酸的基本构成没有特别限制，只要其编码上述本发明的多肽即可。优选地，编码本发明多肽的多核苷酸由选自以下的核苷酸组成：seqidno：22(编码seqidno：6的n5多肽)、seqidno：23(编码seqidno：7的n6多肽)、seqidno：24(编码seqidno：8的n7多肽)、seqidno：25(编码seqidno：9的n8多肽)、seqidno：29(编码seqidno：13的n12多肽)、seqidno：30(编码seqidno：14的n13多肽)和seqidno：31(编码seqidno：15的n14多肽)。

在本发明中，“多核苷酸”、“核酸”是指单链或双链核酸形式的脱氧核糖核苷酸(dna)或核糖核苷酸(rna)。除非另有限制，否则它还包括天然核苷酸的已知类似物，其以与天然存在的核苷酸类似的方式与核酸杂交。

此外，本发明提供了用于促进毛发生长、促进毛囊干细胞增殖或预防和治疗脱发的药物组合物，其包含作为活性成分的选自由来自seqidno：1的氨基酸序列的4至21个连续氨基酸组成且包含seqidno：1的氨基酸序列的第28位至第31位氨基酸残基(keka)的多肽和由与该多肽具有70％或更多序列同源性的氨基酸序列组成的多肽中的一种或多种多肽。

本发明还提供了用于促进毛发生长、促进毛囊干细胞增殖或预防和治疗脱发的药物组合物，其由作为活性成分的选自由来自seqidno：1的氨基酸序列的4至21个连续氨基酸组成且包含seqidno：1的氨基酸序列的第28位至第31位氨基酸残基(keka)的多肽和由与该多肽具有70％或更多序列同源性的氨基酸序列组成的多肽中的一种或多种多肽组成。

本发明还提供了用于促进毛发生长、促进毛囊干细胞增殖或预防和治疗脱发的药物组合物，其基本上由作为活性成分的选自由来自seqidno：1的氨基酸序列的4至21个连续氨基酸组成且包含seqidno：1的氨基酸序列的第28位至第31位氨基酸残基(keka)的多肽和由与该多肽具有70％或更多序列同源性的氨基酸序列组成的多肽中的一种或多种多肽组成。

优选地，在本发明的药物组合物中，所述多肽能够是由选自以下的氨基酸序列组成的多肽：seqidno：6、seqidno：7、seqidno：8、seqidno：9、seqidno：13、seqidno：14和seqidno：15。

此外，本发明的另一个方面提供了用于促进毛发生长、促进毛囊干细胞增殖或预防和治疗脱发的药物组合物，其包含作为活性成分的由seqidno：1的氨基酸序列组成的多肽。

本发明还提供了用于促进毛发生长、促进毛囊干细胞增殖或预防和治疗脱发的药物组合物，其由作为活性成分的由seqidno：1的氨基酸序列组成的多肽组成。

本发明还提供了用于促进毛发生长、促进毛囊干细胞增殖或预防和治疗脱发的药物组合物，其基本上由作为活性成分的由seqidno：1的氨基酸序列组成的多肽组成。

在本发明中，术语“毛发”是指头发、毛发、面部毛发和/或体毛，其广泛地包括头发、睫毛、眉毛、小胡子、大胡子、耳毛、鼻毛、胸毛、阴毛、辅助头发(assistanthair)等，但不限于此。

在本发明中，术语“促进毛发生长”包括促进毛囊中的毛发产生和生长以及促进现有毛发的生长，并且包括促进毛囊形成，毛囊的结构稳定和促进营养和氧气供应，更快地诱导毛发生长期和/或毛发周期的主要毛发生长初期(生长期)的延长和/或毛发生长速率的增加和/或毛发宽度的增加，这包括但不限于诱导或改善头发生长并使其更容易被眼睛看到。

在本发明中，“毛发损失或脱发”用于表示毛发损失的所有症状，而不管毛发损失的具体生物学机制如何。如本文所用，“预防和治疗脱发”广泛用于指脱发的预防、改善和治疗。

根据本发明的多肽能够单独使用或以盐的形式使用，优选药学上可接受的盐。本文所用的术语“药学上可接受的”是指生理学上可接受的，当施用于人时不抑制活性成分的作用，并且通常不引起过敏反应，例如胃肠病症、头晕或类似的副作用。作为盐，优选由药学上可接受的游离酸形成的酸加成盐，并且作为游离酸，能够使用有机酸和无机酸。有机酸包括但不限于柠檬酸、乙酸、乳酸、酒石酸、马来酸、富马酸、甲酸、丙酸、草酸、三氟乙酸、苯甲酸、葡糖酸、甲磺酸、乙醇酸、琥珀酸、4-甲苯磺酸、谷氨酸和天冬氨酸。无机酸包括但不限于盐酸、溴酸、硫酸和磷酸。

本发明的药物组合物可以根据给药途径通过本领域已知的方法与药学上可接受的载体一起配制，以促进毛发生长促进和/或预防和治疗脱发。载体包括所有类型的溶剂、分散介质、水包油或油包水乳液、含水组合物、脂质体、微珠和微粒体。

施用途径可以为口服或肠胃外施用。肠胃外施用方法包括但不限于静脉内、肌肉内、动脉内、髓内、鞘内、心内、透皮、皮下、腹膜内、鼻内、肠内、局部、舌下或直肠施用。

当口服施用本发明的药物组合物时，本发明的药物组合物能够配制成各种类型，例如粉末、颗粒、片剂、丸剂、糖、胶囊、液体、凝胶、糖浆、悬浮液、薄片(wafer)等。合适的载体的实例包括包括乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露醇、木糖醇、赤藓糖醇和麦芽糖醇的糖类，和包括玉米淀粉、小麦淀粉、大米淀粉和马铃薯淀粉的淀粉，和例如纤维素、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和羟丙基甲基纤维素的纤维素以及例如明胶、聚乙烯吡咯烷酮等的填料。此外，可任选地加入交联的聚乙烯吡咯烷酮、琼脂、海藻酸或海藻酸钠作为崩解剂。此外，药物组合物能够进一步包含抗凝血剂、润滑剂、润湿剂、调味剂、乳化剂和防腐剂。

此外，当肠胃外施用时，本发明的药物组合物能够按照本领域已知的方法以注射剂、透皮药物和鼻吸入剂的形式与合适的非口服载体一起配制。在注射的情况下，它们必须进行灭菌并防止微生物如细菌和真菌的污染。用于注射的合适载体的实例包括但不限于含有水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇和液体聚乙二醇等)，其混合物和/或植物油的溶剂或分散介质。更优选地，合适的载体包括但不限于hank溶液、ringer溶液、含有三乙醇胺的磷酸盐缓冲盐水(pbs)或等渗溶液如无菌注射用水、10％乙醇、40％丙二醇和5％右旋糖。可进一步包括各种抗菌剂和抗真菌剂，例如对羟基苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚、山梨酸、硫柳汞等。此外，在大多数情况下，注射剂还可包含等渗剂，例如糖或氯化钠。

透皮施用形式的实例包括软膏、乳膏、洗剂、凝胶、外用溶液、糊剂、搽剂和空气卷(airroll)。在上文中，透皮施用是指将药物组合物局部施用于皮肤，由此将药物组合物中含有的有效量的活性成分递送到皮肤中。例如，可以将本发明的药物组合物制备成可注射制剂，其可以通过用30号细注射针轻轻刺破皮肤或通过将其直接施用于皮肤来施用。这些制剂描述于药物化学中公知的处方文章(remington′spharmaceuticalscience，15thedition，1975，mackpublishingcompany，easton，pennsylvania)。

在吸入施用形式的情况下，根据本发明使用的多肽能够使用合适的推进剂，例如二氯氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其他合适的气体，以加压包装或雾化器的气溶胶喷雾的形式方便地递送。在加压气溶胶的情况下，剂量单位可以通过提供递送计量的阀来确定。例如，用于吸入器或吹入器的明胶胶囊和药筒能够配制成含有化合物和合适的粉末基质(如乳糖或淀粉的粉末)的混合物。

作为其他药学上可接受的载体，可以参考以下参考文献中描述的那些(remington′spharmaceuticalsciences，19thed.，mackpublishingcompany，easton，pa，1995)。

根据本发明的药物组合物，还可以含有一种或多种缓冲剂(例如盐水或pbs)、碳水化合物(例如葡萄糖、甘露糖、蔗糖或葡聚糖)、抗氧化剂、抑菌剂(例如edta或谷胱甘肽)、佐剂(例如氢氧化铝)、悬浮剂、增稠剂和/或防腐剂。

此外，本发明的药物组合物可以使用本领域已知的方法配制，以便在施用于哺乳动物后提供活性成分的快速、持续或延迟释放。

此外，本发明的药物组合物可以单独施用或与已知的具有防止脱发或促进毛发生长的化合物组合施用。此类组合疗法包括包含在相同组合物中或同时施用的方法，并且包括在使用一种或多种其他脱发治疗/毛发生长促进剂的治疗过程中施用本发明的多肽至少一次，但不限于此。

本文的“施用形式”或“单次施用形式”是指待治疗患者的治疗性蛋白质的物理上离散的单位。每个治疗单位含有预定量的活性物质以提供所需的治疗效果。然而，治疗组合物的总剂量由主治医师在充分的医学判断中确定。

能够与本发明的多肽或包含本发明的多肽的药物组合物组合进一步使用的具有脱发预防或毛发生长促进作用的已知化合物的实例包括选自以下的化合物或其药学上可接受的盐：米诺地尔，克罗卡林，吡那地尔，naminidil，二苯基环丙烯酮，tricomin，醋酸环丙孕酮，达那唑，氟他胺；选自非那雄胺，妥罗雄脲，ly-191704，mk-306和度他雄胺的5-α还原酶抑制剂；均三氮苯类，苯并吡喃类，吡啶并吡喃类和硫化环戊烷-1-氧化物类，但不限于此。

此外，本发明提供了用于促进毛发生长或预防和改善脱发的化妆品组合物，其包含作为活性成分的选自由来自seqidno：1的氨基酸序列的4至21个连续氨基酸组成且包含seqidno：1的氨基酸序列的第28位至第31位氨基酸残基(keka)的多肽和由与该多肽具有70％或更多序列同源性的氨基酸序列组成的多肽中的一种或多种多肽。

本发明还提供了用于促进毛发生长或预防和改善脱发的化妆品组合物，其由作为活性成分的选自由来自seqidno：1的氨基酸序列的4至21个连续氨基酸组成且包含seqidno：1的氨基酸序列的第28位至第31位氨基酸残基(keka)的多肽和由与该多肽具有70％或更多序列同源性的氨基酸序列组成的多肽中的一种或多种多肽组成。

本发明还提供了用于促进毛发生长或预防和改善脱发的化妆品组合物，其基本上由作为活性成分的选自由来自seqidno：1的氨基酸序列的4至21个连续氨基酸组成且包含seqidno：1的氨基酸序列的第28位至第31位氨基酸残基(keka)的多肽和由与该多肽具有70％或更多序列同源性的氨基酸序列组成的多肽中的一种或多种多肽组成。

优选地，在本发明的化妆品组合物中，所述多肽能够是由选自以下的氨基酸序列组成的多肽：seqidno：6、seqidno：7、seqidno：8、seqidno：9、seqidno：13、seqidno：14和seqidno：15。

此外，本发明提供了用于促进毛发生长或预防和改善脱发的化妆品组合物，其包含作为活性成分的由seqidno：1的氨基酸序列组成的多肽。

本发明还提供了用于促进毛发生长或预防和改善脱发的化妆品组合物，其由作为活性成分的由seqidno：1的氨基酸序列组成的多肽组成。

本发明还提供了用于促进毛发生长或预防和改善脱发的化妆品组合物，其基本上由作为活性成分的由seqidno：1的氨基酸序列组成的多肽组成。

本发明的化妆品组合物能够用本领域常规制备的任何制剂制备，并且除了本发明的多肽外，还可以使用皮肤病学上可接受的介质或碱，以便能够以通常用于皮肤病学领域的局部或全身佐剂的形式制备。

除了根据本发明的多肽之外，本发明的化妆品组合物还可以包含通常用于化妆品或皮肤病学领域的佐剂，例如脂质、有机溶剂、增溶剂、增稠剂和胶凝剂、软化剂、抗氧化剂、悬浮剂、稳定剂、发泡剂、芳香剂、表面活性剂、水、离子或非离子乳化剂、填充剂、隐蔽剂和螯合剂、防腐剂、维生素、阻断剂、润湿剂、精油、染料、颜料、亲水性或亲脂性活性剂、脂质囊泡或化妆品或皮肤病学中使用的任何其他成分。并且上述成分能够以皮肤病学领域常用的量加入。

合适的化妆品组合物的配方包括，例如，溶液、凝胶、固体或捏合的无水产品、通过将油相分散在水中获得的乳液、悬浮液、微乳液、微胶囊、微粒或离子(脂质体)、囊泡分散体形式、乳膏、皮肤(skin)、乳液、粉末、软膏、喷雾或隐藏棒(concealstick)。它还能够以泡沫或气溶胶组合物的形式制备，其还含有压缩的推进剂。能够加入本发明化妆品组合物的化妆品制剂的实例包括但不限于润肤露、皮肤柔软剂、皮肤调色剂、会聚洗剂、软化洗剂、营养洗剂、收敛剂、洗剂、乳液、保湿乳液、滋养乳液、身体霜、按摩霜、滋养霜、保湿霜、护手霜、精华、滋养精华、包(pack)、香皂、洗发水、洁面泡沫、洁面乳、洁面霜、身体乳、沐浴露、护理、精华素、牛奶(milk)、压粉、散粉、眼影等。

基于化妆品组合物的总重量，本发明化妆品组合物中包含的本发明多肽的含量能够为0.0001至50重量％，优选0.01至10重量％。

此外，本发明提供了用于促进毛发生长或预防和改善脱发的食品组合物，其包含作为活性成分的选自由来自seqidno：1的氨基酸序列的4至21个连续氨基酸组成且包含seqidno：1的氨基酸序列的第28位至第31位氨基酸残基(keka)的多肽和由与该多肽具有70％或更多序列同源性的氨基酸序列组成的多肽中的一种或多种多肽。

本发明还提供了用于促进毛发生长或预防和改善脱发的食品组合物，其由作为活性成分的选自由来自seqidno：1的氨基酸序列的4至21个连续氨基酸组成且包含seqidno：1的氨基酸序列的第28位至第31位氨基酸残基(keka)的多肽和由与该多肽具有70％或更多序列同源性的氨基酸序列组成的多肽中的一种或多种多肽组成。

本发明还提供了用于促进毛发生长或预防和改善脱发的食品组合物，其基本上由作为活性成分的选自由来自seqidno：1的氨基酸序列的4至21个连续氨基酸组成且包含seqidno：1的氨基酸序列的第28位至第31位氨基酸残基(keka)的多肽和由与该多肽具有70％或更多序列同源性的氨基酸序列组成的多肽中的一种或多种多肽组成。

优选地，在本发明的食品组合物中，所述多肽能够是由选自以下的氨基酸序列组成的多肽：seqidno：6、seqidno：7、seqidno：8、seqidno：9、seqidno：13、seqidno：14和seqidno：15。

此外，本发明提供了用于促进毛发生长或预防和改善脱发的食品组合物，其包含作为活性成分的由seqidno：1的氨基酸序列组成的多肽。

本发明还提供了用于促进毛发生长或预防和改善脱发的食品组合物，其由作为活性成分的由seqidno：1的氨基酸序列组成的多肽组成。

本发明还提供了用于促进毛发生长或预防和改善脱发的食品组合物，其基本上由作为活性成分的由seqidno：1的氨基酸序列组成的多肽组成。

本发明的食品组合物包括所有形式，例如功能性食物、营养补充剂、保健食品和食品添加剂。能够根据本领域已知的常规方法以各种形式制备这些类型。例如，作为保健食品，本发明的食品组合物本身能够以茶、果汁和饮料的形式制备，并且能够以颗粒状、胶囊状和粉末状形式摄取。此外，能够通过与已知具有促进毛发生长或预防或改善脱发的作用的已知物质或活性成分混合而以组合物的形式制备本发明的食品组合物。此外，功能性食品还包括饮料(beverage)(包括酒精饮料)、水果及其加工食品(例如罐装水果、瓶装、果酱、柑橘酱等)、鱼类、肉类和加工食品(例如火腿等)、面包和面条(如乌冬面、荞麦面、拉面、意大利面、通心粉等)、果汁、各种饮料(drink)、饼干、锞子、乳制品(如黄油、奶酪等)、食用植物油、人造黄油、植物蛋白、蒸煮食品、冷冻食品、各种调味料(如豆瓣酱、酱、酱油等)。

本发明多肽的食物组合物的优选含量没有特别限制，但在最终制备的食物中优选为0.01-50％重量。为了以食品添加剂的形式使用本发明的食品组合物，能够以粉末或浓缩物的形式制备它。

此外，本发明提供了由来自seqidno：1的氨基酸序列的4至21个连续氨基酸组成且包含seqidno：1的氨基酸序列的第28位至第31位氨基酸残基(keka)的多肽和由与该多肽具有70％或更多序列同源性的氨基酸序列组成的多肽中的一种或多种多肽用于制备药剂的用途，所述药剂用于促进毛发生长、促进毛囊干细胞增殖或预防和治疗脱发。

此外，本发明提供了用于促进毛发生长、促进毛囊干细胞增殖或预防和治疗脱发的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用有效量的组合物，所述组合物包含作为活性成分的选自由来自seqidno：1的氨基酸序列的4至21个连续氨基酸组成且包含seqidno：1的氨基酸序列的第28位至第31位氨基酸残基(keka)的多肽和由与该多肽具有70％或更多序列同源性的氨基酸序列组成的多肽中的一种或多种多肽。

本发明还提供了用于促进毛发生长、促进毛囊干细胞增殖或预防和治疗脱发的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用有效量的组合物，所述组合物由作为活性成分的选自由来自seqidno：1的氨基酸序列的4至21个连续氨基酸组成且包含seqidno：1的氨基酸序列的第28位至第31位氨基酸残基(keka)的多肽和由与该多肽具有70％或更多序列同源性的氨基酸序列组成的多肽中的一种或多种多肽组成。

本发明还提供了用于促进毛发生长、促进毛囊干细胞增殖或预防和治疗脱发的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用有效量的组合物，所述组合物基本上由作为活性成分的选自由来自seqidno：1的氨基酸序列的4至21个连续氨基酸组成且包含seqidno：1的氨基酸序列的第28位至第31位氨基酸残基(keka)的多肽和由与该多肽具有70％或更多序列同源性的氨基酸序列组成的多肽中的一种或多种多肽组成。

此外，本发明提供了由seqidno：1的氨基酸序列组成的多肽用于制备药剂的用途，所述药剂用于促进毛发生长、促进毛囊干细胞增殖或预防和治疗脱发。

此外，本发明提供了用于促进毛发生长、促进毛囊干细胞增殖或预防和治疗脱发的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用有效量的包含作为活性成分的由seqidno：1的氨基酸序列组成的多肽的组合物。

本发明提供了用于促进毛发生长、促进毛囊干细胞增殖或预防和治疗脱发的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用有效量的由作为活性成分的由seqidno：1的氨基酸序列组成的多肽组成的组合物。

本发明提供了用于促进毛发生长、促进毛囊干细胞增殖或预防和治疗脱发的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用有效量的基本上由作为活性成分的由seqidno：1的氨基酸序列组成的多肽组成的组合物。

本发明的“有效量”是指当给个体施用时代表脱发的改善、治疗或预防效果和促进毛发生长的效果的量，并且“个体”包括动物，优选为哺乳动物，特别是可以是包含人的动物、动物来源的细胞、组织、器官等。受试者能够为需要该效果的患者。

如上所述，本发明的“制剂或组合物”能够是食品组合物、化妆品组合物、药物组合物等的形式。

本发明的术语“包含”与“含有”或“其特征在于”同义使用，并且不排除组合物或方法中未提及的其他组分元件或方法步骤。术语“由...组成”是指排除未另外提及的其他元件\步骤或组件。术语“基本上由......组成”旨在包括组成元件或步骤等，除了所描述的组成元件或步骤之外，其基本上不影响它们的基本特性。

有益效果

因此，本发明提供了aimp1蛋白的新片段和包含其作为活性成分的组合物，用于促进毛发生长，或预防、改善和治疗脱发。根据本发明的新多肽和包含其作为活性成分的组合物可用于改善和预防脱发，促进毛发生长，因为它增强了毛发生长。

附图说明

在图1中，该图的上部示出了用于确认本发明的多肽的体内毛发生长促进效果的小鼠实验的概要，并且该图的下部示出了其中毛发的状态：在实验开始前小鼠的背部皮肤的毛发被移除(第0天，左图)，大约两周后，小鼠背部皮肤的毛发生长(第13天，右图)[对照(con)：20％甘油/pbs；3％米诺地尔(mnx，140mm)；neo-pep多肽(seqidno：1的多肽，100nm)；fgf7(100nm)]。

在图2的左侧部分中，显示了通过相差显微镜观察到的皮肤组织和毛囊区域的横截面和纵向截面图像，以比较对照组和neo-pep多肽(seqidno：1的多肽)在脱毛后第13天处理组中的毛发生长，图的右侧部分显示比较毛发生长初期毛囊细胞数和真皮厚度的图。

图3显示通过相差显微镜观察的皮肤组织和毛囊区域的横截面图像，以比较脱毛后第6天对照组和neo-pep多肽(seqidno：1的多肽)处理组中的毛发生长。从brdu(细胞增殖标记物)、β-连环蛋白(毛囊细胞的信号传导标记物)和细胞角蛋白15(毛囊干细胞标记物)的增殖结果可以看出，证实了毛发生长初期在neo-pep多肽(seqidno：1的多肽)处理组中比对照组开始得更早[对照(con)：20％甘油/pbs；neo-pep多肽(seqidno：1的多肽，100nm)]。

图4显示体外测定结果，显示neo-pep多肽(seqidno：1的多肽)以浓度依赖性方式(1nm、10nm、100nm、1000nm)诱导cd34+毛囊干细胞的增殖。

图5是显示neo-pep多肽(seqidno：1，100nm的多肽)通过β-连环蛋白途径诱导cd34+毛囊干细胞增殖的体外测定结果的图，并且证实了mrna通过本发明的多肽的处理，增加了作为β-连环蛋白靶基因的axin、cd44和tcf的表达[对照(con)：20％甘油/pbs；neo-pep多肽(seqidno：1的多肽，100nm)]。

图6是显示使用具有皮肤移植细胞诱导的脱发的c3h/hej小鼠促进毛发生长的效果的图像[(对照处理小鼠：100μl的20％甘油/pbs)；neo-pep多肽处理组(肽处理的小鼠，100μl的在20％甘油/pbs中的100nmneo-pep多肽(seqidno：1))。

图7是显示具有皮肤移植细胞诱导的脱发的c3h/hej小鼠的皮肤组织切片中毛囊状态和炎症存在或不存在的图像[(对照处理小鼠：100μl的20％甘油/pbs)；neo-pep多肽处理组(肽处理的小鼠，100μl的100nm的在20％甘油/pbs中的neo-pep多肽(seqidno：1))。

图8是显示体外测定结果的图，证实了用本发明的neo-pep多肽(seqidno：1)及其具有19或20个氨基酸的片段(n1：seqidno：2、n2：seqidno：3、n3：seqidno：4、n4：seqidno：5、n5：seqidno：6、n6：seqidno：7、n7：seqidno：8和n8：seqidno：9)(每种肽以100nm的浓度处理)促进cd34+毛囊干细胞增殖的效果。

图9是证实本发明的neo-pep多肽片段(seqidno：1)的体内毛发生长促进作用的图像，其中片段由15个氨基酸组成(n9：seqidno：10、n10：seqidno：11、n11：seqidno：12、n12：seqidno：13、n13：seqidno：14和n14：seqidno：15)[对照(con)：20％甘油/pbs；3％米诺地尔(mnx，140mm)；n9至n14多肽片段(seqidno：10至15，100nm)]

具体实施方式

在下文中，将详细描述本发明。

然而，以下实施例仅用于说明本发明，而不是用于限制本发明的范围。

[方法]

体内研究

用剪毛器切下小鼠背部皮肤的毛发(7周龄雄性c57bl6，购自orientbioinc.)，并施用脱毛膏(niclean，ildongpharmaceutical)。脱毛区域约为2x2.5cm。用20％甘油/pbs(对照组)、3％米诺地尔(mnx，140mm)、fgf7(100nm)或本发明的neo-pep(seqidno：1的多肽，100nm)处理小鼠，分别用刷子以80μl一天刷一次，连续13天(每组n＝6)。

苏本精-伊红(h&e)染色

收集7周龄雄性c57bl6小鼠(购自orientbioinc.)的皮肤样品，并使用oct化合物(tissue-tek)置于低温模具中，并在-80℃在冰箱中储存。用micromhm525(thermoscientific)制备组织切片后，用载玻片制备的组织切片用4％多聚甲醛固定10分钟，用pbs洗涤两次5分钟，然后用50μl苏木精溶液(sigmaaldrich)染色6分钟，用水和pbs洗涤5分钟。然后，用伊红(sigmaaldrich)染色，用水短暂洗涤并用pbs洗涤5分钟，然后分别用95％乙醇和100％乙醇短暂洗涤两次。用二甲苯(duksan)处理两次2分钟后，用盖玻片盖住染色的组织切片并固定。

分离cd34+细胞进行增殖测定

用剪毛器切割7周龄雄性c57bl6小鼠(购自orientbioinc.)的背部皮肤的毛发，并收集小鼠脱毛背部区域的皮肤组织样品。使用胶原酶、dnasei和透明质酸酶将收集的皮肤组织样品浸入培养基中，并使用gentlemacstmdissociator(miltenyibiotec)分离细胞。分离细胞后，将分离的细胞与小鼠cd34-生物素抗体(miltenyibiotec)一起孵育。将细胞和抗体溶液与链霉抗生物素蛋白微珠(miltenyibiotec)一起孵育，然后使用ls柱(miltenyibiotec)分离。将分离的细胞在含有10％fbs、1％青霉素/链霉素溶液的dmem培养基中于37℃在95％o2和5％co2的潮湿空气中培养。

brdu增殖测定

能够使用brdu细胞增殖测定试剂盒(cellsignaling)确认细胞增殖。使用miltenyibiotec提供的方案进行增殖测定。简而言之，将细胞与brdu一起孵育2小时。将brdu检测一抗孵育1小时，将抗小鼠igg、hrp-缀合物二抗孵育30分钟。

体外毛发生长测定和mrna表达水平的观察

使用cyquantassay(thermofisher)进行毛发生长体外测定。测定条件如下：细胞为cd34+毛囊干细胞；培养板为96孔板；细胞数为3×10³个细胞/孔；最终多肽的浓度为100nm；孵育时间24小时。

为了证实通过β-连环蛋白途径诱导cd34+毛囊干细胞增殖，通过以下方法证实了β-连环蛋白靶基因axin、cd44和tcf7的mrna表达水平。具体地，处理每种测试物质并培养cd34+细胞8小时。然后，收集培养的细胞，使用genejetrna纯化试剂盒(thermofisher，k0731)分离rna，并用maxima第一链cdna合成试剂盒(thermofisher，k1642)合成cdna。使用每种基因特异性引物(tcf7：5′-atccttgatgctgggattctg-3′和5′-cttctcttgccttgggttctg-3′，axin2：5′-ctccttggaggcaagagc-3′和5′-ggccacgcagcaccgctg-3′，cd44：5′-ccacagcctcctttcaataacc-3′和5′-ggagtcttcgcttggggta-3′)、maximasybrgreen/roxqpcrmastermix(thermofisher，k0222)和7500实时pcr系统(appliedbiosystems，2720；条件：40个循环，2步(95℃15秒，54℃60秒)进行qrt-pcr。通过δδct方法计算每个基因的表达水平。

组织学分析

收集7周龄雄性c57bl6小鼠(购自orientbioinc.)的皮肤样品并置于石蜡块中。使用cytokeratin15抗体(abcam)、brdu抗体(novusbio)和β-连环蛋白抗体进行ihc(免疫组织化学)。

作为参考，β-连环蛋白是毛囊信号传导标记物，细胞角蛋白15是毛囊干细胞标记物，brdu是细胞增殖标记物。

实施例1：本发明多肽的毛发生长促进作用

使用小鼠证实了根据本发明的多肽在促进毛发生长和预防或治疗体内脱发方面的作用。从小鼠的背部皮肤除去毛发，并将用根据本发明的多肽处理后的毛发再生模式与对照组进行比较(参见图1)。

具体地，用剪毛器切下小鼠背部皮肤的毛发(7周龄雄性c57bl6，购自orientbioinc.)，并施用脱毛膏(niclean，ildongpharmaceutical)。脱毛区域约为2x2.5cm。用20％甘油/pbs(对照组)、3％米诺地尔(mnx，140mm)、fgf7(100nm)或本发明的neo-pep(seqidno：1的多肽，100nm)处理小鼠，分别用刷以80μl一天刷一次，连续13天(每组n＝6)。为了比较观察，在测试开始之前和之后拍摄小鼠的背部皮肤。

从图1底部的小鼠皮肤的图像可以看出。在剥离背部皮肤后第13天，用本发明的多肽neo-pep(seqidno：1的多肽)处理的小鼠的背毛生长远远超过对照和其他实验组(即，mnx和fgf7)。

此外，收集小鼠背部皮肤样品，并使用oct化合物(tissue-tek)置于低温模具中，并在-80℃在冰箱中储存。用micromhm525(thermoscientific)制备组织切片后，用载玻片制备的组织切片用4％多聚甲醛固定10分钟，用pbs洗涤两次5分钟，然后用50μl苏木精溶液(sigmaaldrich)染色6分钟，用水和pbs洗涤5分钟。然后，用伊红(sigmaaldrich)染色，用水短暂洗涤并用pbs洗涤5分钟，然后分别用95％乙醇和100％乙醇短暂洗涤两次。用二甲苯(duksan)处理两次2分钟后，用盖玻片盖住染色的组织切片并固定。计数毛发生长初期(生长期)毛囊的数量，并在用苏木精和伊红(h&e)染色的每组的背部皮肤切片中定量比较。

如图2所示，作为比较用h&e染色的小鼠皮肤切片中毛发生长初期的毛囊数量的结果，在用本发明的多肽neo-pep(seqidno：1的多肽)处理的小鼠的背部皮肤，与对照(con)相比，观察到毛发生长初期阶段的毛囊的两倍以上，并且真皮厚度也厚得多。

通过测试结果，证实本发明的多肽neo-pep(seqidno：1的多肽)在活体中具有促进毛发生长和改善和治疗脱发的作用。

实施例2：本发明的多肽通过β-连环蛋白信号传导诱导毛囊干细胞增殖的作用。

β-连环蛋白是毛发生长中非常重要的蛋白质，是毛囊干细胞增殖中非常重要的因子，可作为毛囊细胞的信号传导标记物。此外，细胞角蛋白15作为毛囊干细胞的生物标记物，并且已知brdu是作为细胞生长标记物发挥作用的因子。图3显示通过相差显微镜观察的皮肤组织和毛囊区域的横截面图像，以比较脱毛后第6天对照组和neo-pep多肽(seqidno：1的多肽)处理组中的毛发生长。从brdu(细胞增殖标记物)、β-连环蛋白(毛囊细胞的信号传导标记物)和细胞角蛋白15(毛囊干细胞标记物)的结果可以看出，证实了毛发生长初期在neo-pep多肽(seqidno：1的多肽)处理组中比对照组开始得更早。

此外，如图4中毛发生长的体外测定图能够看到的，neo-pep多肽(seqidno：1的多肽)以剂量依赖性方式(1nm、10nm、100nm和1000nm)诱导了cd34+毛囊干细胞的增殖。如图5的体外测定结果图所示，证实neo-pep多肽(seqidno：1的多肽，100nm)通过β-连环蛋白途径诱导cd34+毛囊干细胞的增殖。具体地，当使用根据本发明的neo-pep多肽(seqidno：1的多肽，100nm)时，作为β-连环蛋白的靶基因的axin、cd44和tcf7的mrna表达水平与对照组相比增加5倍。

实施例3：在斑秃小鼠模型中促进毛发生长的效果

已知斑秃是一种细胞介导的自身免疫疾病，其靶向各种哺乳动物物种中毛发生长初期的毛囊。在人类中，斑秃分为三类：斑秃(斑片状脱发)、秃头症(头上的毛发损失)和全身脱发(全身毛发损失)。

为了证实本发明的多肽对人毛发生长周期的效果，使用c3h/hej小鼠(jacksonlaboratory，usa)作为反映人斑秃的病理状态的动物模型。使用c3h/hej小鼠的优势在于，当全年皮肤移植物应用于年轻时患有斑秃的老年小鼠时，斑片状脱发在8到10周内发展，并且在20周后，脱发延伸到全身皮肤并导致全身脱发慢性症状。

在该测试中，使用如上所述在皮肤移植后25周诱导的具有全身脱发的c3h/hej雌性小鼠。没有任何预处理如剃毛或脱毛，对照组(对照处理小鼠，100μl20％甘油/pbs)和neo-pep多肽处理组(肽处理小鼠，100μl的100nm在20％甘油/pbs中的neo-pep多肽(seqidno：1))用每种测试材料用刷子局部地围绕脱发区域处理，每天一次，持续14周。对照组和neo-pep治疗组分别由4只小鼠组成。

从实验开始每2周拍摄一次照片。图6显示了在实验开始后1周和14周时小鼠的毛发生长状态。在neo-pep多肽处理组(肽处理的小鼠，100nm的20％甘油/pbs中的neo-pep多肽(seqidno：1))的情况下，在给药11周后毛发再次开始生长，并且在4只小鼠(#11、#13和#14小鼠)中的3只中观察到轻度至中度的毛发生长，显示出一致的毛发生长效果。相比之下，对照组在4只小鼠中仅1只小鼠(#18小鼠)显示出轻微的毛发生长效果，2只小鼠(#15和#17小鼠)的脱发变得更加严重，1只(#16小鼠)实验结束之前死亡，因此显示没有一致的毛发生长效果。

同时，在图7中的小鼠皮肤组织的图像中，收集脱发区域和周围没有脱毛的区域的皮肤组织，在fekete酸性乙醇福尔马林中固定并分析h&e染色。图7显示了证实存在或不存在变形或炎症以及毛囊状态的结果。

从图7中可以看出，特别是在对照组的皮肤组织中，观察到毛囊和毛囊周围的炎性细胞的复杂浸润，特别是经常发现淋巴细胞浸润。这些是用于诊断斑秃的主要特征。并且毛囊营养不良是斑秃中经常发生的现象，这意味着毛囊扭曲变形或毛干弱或破坏。

从图7中可以看出，对照组皮肤出现炎症和变形的毛干。另一方面，与对照组相比，neo-pep多肽处理组中炎症和变形毛干的发展显著降低。整个脱发状态根据皮肤表面或皮肤表面附近的毛干断裂而变化。并且在对照组中更清楚地观察到脱发状态，其中毛干断裂的畸形毛干相对更多。

实施例4.本发明多肽对毛囊干细胞增殖的效果

本发明人制备了n1(seqidno：2)、n2(seqidno：3)、n3(seqidno：4)、n4(seqidno：5)、n5(seqidno：6)、n6(seqidno：7)、n7(seqidno：8)和n8(seqidno：9)，以鉴定具有促进头发生长和改善neo-pep多肽中的脱发的作用的肽片段(seqidno：1)，其中在上述实施例中证实了毛发生长促进作用。

下表1显示了neo-pep(seqidno：1)及其片段n1(seqidno：2)、n2(seqidno：3)、n3(seqidno：4)、n4(seqidno：5)、n5(seqidno：6)、n6(seqidno：7)、n7(seqidno：8)和n8(seqidno：9)的氨基酸序列、pi和tm。

表1

作为参考，本发明的多肽neo-pep(seqidno：1)对应于aimp1蛋白中的第6至第46个氨基酸残基(seqidno：16)。

使用cd34+毛囊干细胞体外测定和上述brdu增殖测定方法。如在图8中可以看到的那样，其中比较了cd34+毛囊干细胞的相对数目，包含neo-pep多肽的第28至31个氨基酸残基(keka)并且由19或20个连续氨基酸组成的neo-pep(seqidno：1)及其片段(n5(seqidno：6)、n6(seqidno：7)、n7(seqidno：8)和n8(seqidno：9))诱导了cd34+毛囊干细胞的增殖。

在另一方面，由没有第28位至第31位氨基酸残基(keka)的neo-pep多肽的20个连续氨基酸组成的neo-pep(seqidno：1)的片段(n1(seqidno：2)、n2(seqidno：3)、n3(seqidno：4)和n4(seqidno：5))对诱导cd34+毛囊干细胞的增殖没有任何效果。

通过上述结果，证实不仅neo-pep多肽(seqidno：1)而且包含neo-pep多肽的第28至31个氨基酸残基的作为活性氨基酸残基并由连续氨基酸组成的多肽片段对促进毛发生长和改善脱发有效果。

实施例5：本发明的多肽对促进体内毛发生长的作用

本发明人制备了n9(seqidno：10)、n10(seqidno：11)、n11(seqidno：12)、n12(seqidno：13)、n13(seqidno：14)和n14(seqidno：15)(它们是由15个氨基酸组成的多肽片段)，以进一步鉴定具有促进毛发生长和改善neo-pep多肽中的脱发的作用的肽片段(seqidno：1)，其中在上述实施例中证实了毛发生长促进作用。

下表2显示了neo-pep(seqidno：1)及其片段n9(seqidno：10)、n10(seqidno：11)、n11(seqidno：12)、n12(seqidno：13)、n13(seqidno：14)和n14(seqidno：15)的氨基酸序列、pi和tm。

表2

如在图9中可以看到的那样，(使用与实施例1中相同的方法在脱毛后13天的小鼠的背部皮肤图像)，用包含第28位至第31位氨基酸残基(keka)的neo-pep多肽并由15个连续氨基酸组成的本发明的多肽片段(n12(seqidno：13)、n13(seqidno：14)和n14(seqidno：15))处理的小鼠组的背毛，比对照组(con，20％甘油/pbs处理组)生长得多得多，并且生长甚至与阳性对照组(mnx，3％米诺地尔处理组)相似或更多。

在另一方面，由没有第28位至第31位氨基酸残基(keka)的neo-pep多肽的15个连续氨基酸组成的neo-pep(seqidno：1)的片段(n9(seqidno：10)、n10(seqidno：11)和n11(seqidno：12))没有显示这样的效果。

通过上述结果，进一步证实包含neo-pep多肽(seqidno：1)的第28至31个氨基酸残基的作为活性氨基酸残基并由连续氨基酸组成的多肽片段例如n12(seqidno：13)、n13(seqidno：14)和n14(seqidno：15)对促进毛发生长和改善脱发有效果。因此，证实包含neo-pep多肽(seqidno：1)的第28位至第31位氨基酸残基(keka)作为活性位点对于促进毛发生长和改善脱发是必不可少的。

<110>curebio株式会社

<120>aimp1蛋白的新片段和包含该片段的用于促进毛发生长的组合物

<130>op19-0011

<150>kr10-2016-0096256

<151>2016-07-28

<150>pct/kr2017/008078

<151>2017-07-27

<160>41

<170>kopatentin2.0

<210>1

<211>41

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>智人neo-pep多肽;aimp1-(6-46)

<400>1

alavalleulysargleugluglnlysglyalaglualaaspglnile

151015

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<213>人工序列

<220>

<223>智人n1多肽;neo-pep-(1-20)

<400>2

alavalleulysargleugluglnlysglyalaglualaaspglnile

151015

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20

<210>3

<211>20

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>智人n2多肽;neo-pep-(3-22)

<400>3

leulysargleugluglnlysglyalaglualaaspglnileileglu

151015

tyrleulysgln

20

<210>4

<211>20

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<213>人工序列

<220>

<223>智人n3多肽;neo-pep-(9-28)

<400>4

lysglyalaglualaaspglnileileglutyrleulysglnglnval

151015

serleuleulys

20

<210>5

<211>20

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>智人n4多肽;neo-pep-(11-30)

<400>5

alaglualaaspglnileileglutyrleulysglnglnvalserleu

151015

leulysglulys

20

<210>6

<211>20

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>智人n5多肽;neo-pep-(17-36)

<400>6

ileglutyrleulysglnglnvalserleuleulysglulysalaile

151015

leuglnalathr

20

<210>7

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<213>人工序列

<220>

<223>智人n6多肽;neo-pep-(19-38)

<400>7

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151015

alathrleuarg

20

<210>8

<211>20

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>智人n7多肽;neo-pep-(21-40)

<400>8

lysglnglnvalserleuleulysglulysalaileleuglnalathr

151015

leuarggluglu

20

<210>9

<211>19

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>智人n8多肽;neo-pep-(23-41)

<400>9

glnvalserleuleulysglulysalaileleuglnalathrleuarg

151015

gluglulys

<210>10

<211>15

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>智人n9多肽;neo-pep-(1-15)

<400>10

alavalleulysargleugluglnlysglyalaglualaaspgln

151015

<210>11

<211>15

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>智人n10多肽;neo-pep-(12-26)

<400>11

glualaaspglnileileglutyrleulysglnglnvalserleu

151015

<210>12

<211>15

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>智人n11多肽;neo-pep-(13-27)

<400>12

alaaspglnileileglutyrleulysglnglnvalserleuleu

151015

<210>13

<211>15

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>智人n12多肽;neo-pep-(17-31)

<400>13

ileglutyrleulysglnglnvalserleuleulysglulysala

151015

<210>14

<211>15

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>智人n13多肽;neo-pep-(21-35)

<400>14

lysglnglnvalserleuleulysglulysalaileleuglnala

151015

<210>15

<211>15

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>智人n14多肽;neo-pep-(27-41)

<400>15

leulysglulysalaileleuglnalathrleuarggluglulys

151015

<210>16

<211>312

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>智人aimp1蛋白

<400>16

metalaasnasnaspalavalleulysargleugluglnlysglyala

151015

glualaaspglnileileglutyrleulysglnglnvalserleuleu

202530

lysglulysalaileleuglnalathrleuarggluglulyslysleu

354045

argvalgluasnalalysleulyslysgluileglugluleulysgln

505560

gluleuileglnalagluileglnasnglyvallysglnileprophe

65707580

proserglythrproleuhisalaasnsermetvalsergluasnval

859095

ileglnserthralavalthrthrvalserserglythrlysglugln

100105110

ilelysglyglythrglyaspglulyslysalalysglulysileglu

115120125

lyslysglyglulyslysglulyslysglnglnserilealaglyser

130135140

alaaspserlysproileaspvalserargleuaspleuargilegly

145150155160

cysileilethralaarglyshisproaspalaaspserleutyrval

165170175

glugluvalaspvalglygluilealaproargthrvalvalsergly

180185190

leuvalasnhisvalproleugluglnmetglnasnargmetvalile

195200205

leuleucysasnleulysproalalysmetargglyvalleusergln

210215220

alametvalmetcysalaserserproglulysilegluileleuala

225230235240

proproasnglyservalproglyaspargilethrpheaspalaphe

245250255

proglygluproasplysgluleuasnprolyslyslysiletrpglu

260265270

glnileglnproaspleuhisthrasnaspglucysvalalathrtyr

275280285

lysglyvalprophegluvallysglylysglyvalcysargalagln

290295300

thrmetserasnserglyilelys

305310

<210>17

<211>123

<212>dna

<213>人工序列

<220>

<223>智人neo-pepaimp1-(6-46)多核苷酸

<400>17

gctgttctgaagagactggagcagaagggtgcagaggcagatcaaatcattgaatatctt60

aagcagcaagtttctctacttaaggagaaagcaattttgcaggcaactttgagggaagag120

aag123

<210>18

<211>60

<212>dna

<213>人工序列

<220>

<223>智人n1neo-pep-(1-20)多核苷酸

<400>18

gctgttctgaagagactggagcagaagggtgcagaggcagatcaaatcattgaatatctt60

60

<210>19

<211>60

<212>dna

<213>人工序列

<220>

<223>智人n2neo-pep-(3-22)多核苷酸

<400>19

ctgaagagactggagcagaagggtgcagaggcagatcaaatcattgaatatcttaagcag60

60

<210>20

<211>60

<212>dna

<213>人工序列

<220>

<223>智人n3neo-pep-(9-28)多核苷酸

<400>20

aagggtgcagaggcagatcaaatcattgaatatcttaagcagcaagtttctctacttaag60

60

<210>21

<211>60

<212>dna

<213>人工序列

<220>

<223>智人n4neo-pep-(11-30)多核苷酸

<400>21

gcagaggcagatcaaatcattgaatatcttaagcagcaagtttctctacttaaggagaaa60

60

<210>22

<211>60

<212>dna

<213>人工序列

<220>

<223>智人n5neo-pep-(17-36)多核苷酸

<400>22

attgaatatcttaagcagcaagtttctctacttaaggagaaagcaattttgcaggcaact60

60

<210>23

<211>60

<212>dna

<213>人工序列

<220>

<223>智人n6neo-pep-(19-38)多核苷酸

<400>23

tatcttaagcagcaagtttctctacttaaggagaaagcaattttgcaggcaactttgagg60

60

<210>24

<211>60

<212>dna

<213>人工序列

<220>

<223>智人n7neo-pep-(21-40)多核苷酸

<400>24

aagcagcaagtttctctacttaaggagaaagcaattttgcaggcaactttgagggaagag60

60

<210>25

<211>57

<212>dna

<213>人工序列

<220>

<223>智人n8neo-pep-(23-41)多核苷酸

<400>25

caagtttctctacttaaggagaaagcaattttgcaggcaactttgagggaagagaag57

<210>26

<211>45

<212>dna

<213>人工序列

<220>

<223>智人n9neo-pep-(1-15)多核苷酸

<400>26

gctgttctgaagagactggagcagaagggtgcagaggcagatcaa45

<210>27

<211>45

<212>dna

<213>人工序列

<220>

<223>智人n10neo-pep-(12-26)多核苷酸

<400>27

gaggcagatcaaatcattgaatatcttaagcagcaagtttctcta45

<210>28

<211>45

<212>dna

<213>人工序列

<220>

<223>智人n11neo-pep-(13-27)多核苷酸

<400>28

gcagatcaaatcattgaatatcttaagcagcaagtttctctactt45

<210>29

<211>45

<212>dna

<213>人工序列

<220>

<223>智人n12neo-pep-(17-31)多核苷酸

<400>29

attgaatatcttaagcagcaagtttctctacttaaggagaaagca45

<210>30

<211>45

<212>dna

<213>人工序列

<220>

<223>智人n13neo-pep-(21-35)多核苷酸

<400>30

aagcagcaagtttctctacttaaggagaaagcaattttgcaggca45

<210>31

<211>45

<212>dna

<213>人工序列

<220>

<223>智人n14neo-pep-(27-41)多核苷酸

<400>31

cttaaggagaaagcaattttgcaggcaactttgagggaagagaag45

<210>32

<211>936

<212>dna

<213>人工序列

<220>

<223>智人aimp1多核苷酸

<400>32

atggcaaataatgatgctgttctgaagagactggagcagaagggtgcagaggcagatcaa60

atcattgaatatcttaagcagcaagtttctctacttaaggagaaagcaattttgcaggca120

actttgagggaagagaagaaacttcgagttgaaaatgctaaactgaagaaagaaattgaa180

gaactgaaacaagagctaattcaggcagaaattcaaaatggagtgaagcaaataccattt240

ccatctggtactccactgcacgctaattctatggtttctgaaaatgtgatacagtctaca300

gcagtaacaaccgtatcttctggtaccaaagaacagataaaaggaggaacaggagacgaa360

aagaaagcgaaagagaaaattgaaaagaaaggagagaagaaggagaaaaaacagcaatca420

atagctggaagtgccgactctaagccaatagatgtttcccgtctggatcttcgaattggt480

tgcatcataactgctagaaaacaccctgatgcagattctttgtatgtggaagaagtagat540

gtcggagaaatagccccaaggacagttgtcagtggcctggtgaatcatgttcctcttgaa600

cagatgcaaaatcggatggtgattttactttgtaacctgaaacctgcaaagatgagggga660

gtattatctcaagcaatggtcatgtgtgctagttcaccagagaaaattgaaatcttggct720

cctccaaatgggtctgttcctggagacagaattacttttgatgctttcccaggagagcct780

gacaaggagctgaatcctaagaagaagatttgggagcagatccagcctgatcttcacact840

aatgatgagtgtgtggctacatacaaaggagttccctttgaggtgaaagggaagggagta900

tgtagggctcaaaccatgagcaacagtggaatcaaa936

<210>33

<211>312

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>智人aimp1蛋白

<400>33

metalaasnasnaspalavalleulysargleugluglnlysglyala

151015

glualaaspglnileileglutyrleulysglnglnvalserleuleu

202530

lysglulysalaileleuglnalathrleuarggluglulyslysleu

354045

argvalgluasnalalysleulyslysgluileglugluleulysgln

505560

gluleuileglnalagluileglnasnglyvallysglnilealaphe

65707580

proserglythrproleuhisalaasnsermetvalsergluasnval

859095

ileglnserthralavalthrthrvalserserglythrlysglugln

100105110

ilelysglyglythrglyaspglulyslysalalysglulysileglu

115120125

lyslysglyglulyslysglulyslysglnglnserilealaglyser

130135140

alaaspserlysproileaspvalserargleuaspleuargilegly

145150155160

cysileilethralaarglyshisproaspalaaspserleutyrval

165170175

glugluvalaspvalglygluilealaproargthrvalvalsergly

180185190

leuvalasnhisvalproleugluglnmetglnasnargmetvalile

195200205

leuleucysasnleulysproalalysmetargglyvalleusergln

210215220

alametvalmetcysalaserserproglulysilegluileleuala

225230235240

proproasnglyservalproglyaspargilethrpheaspalaphe

245250255

proglygluproasplysgluleuasnprolyslyslysiletrpglu

260265270

glnileglnproaspleuhisthrasnaspglucysvalalathrtyr

275280285

lysglyvalprophegluvallysglylysglyvalcysargalagln

290295300

thrmetserasnserglyilelys

305310

<210>34

<211>312

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>智人aimp1蛋白

<400>34

metalaasnasnaspalavalleulysargleugluglnlysglyala

151015

glualaaspglnileileglutyrleulysglnglnvalserleuleu

202530

lysglulysalaileleuglnalathrleuarggluglulyslysleu

354045

argvalgluasnalalysleulyslysgluileglugluleulysgln

505560

gluleuileglnalagluileglnasnglyvallysglnilealaphe

65707580

proserglythrproleuhisalaasnsermetvalsergluasnval

859095

ileglnserthralavalthralavalserserglythrlysglugln

100105110

ilelysglyglythrglyaspglulyslysalalysglulysileglu

115120125

lyslysglyglulyslysglulyslysglnglnserilealaglyser

130135140

alaaspserlysproileaspvalserargleuaspleuargilegly

145150155160

cysileilethralaarglyshisproaspalaaspserleutyrval

165170175

glugluvalaspvalglygluilealaproargthrvalvalsergly

180185190

leuvalasnhisvalproleugluglnmetglnasnargmetvalile

195200205

leuleucysasnleulysproalalysmetargglyvalleusergln

210215220

alametvalmetcysalaserserproglulysilegluileleuala

225230235240

proproasnglyservalproglyaspargilethrpheaspalaphe

245250255

proglygluproasplysgluleuasnprolyslyslysiletrpglu

260265270

glnileglnproaspleuhisthrasnaspglucysvalalathrtyr

275280285

lysglyvalprophegluvallysglylysglyvalcysargalagln

290295300

thrmetserasnserglyilelys

305310

<210>35

<211>312

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>智人aimp1蛋白

<400>35

metalaasnasnaspalavalleulysargleugluglnlysglyala

151015

glualaaspglnileileglutyrleulysglnglnvalserleuleu

202530

lysglulysalaileleuglnalathrleuarggluglulyslysleu

354045

argvalgluasnalalysleulyslysgluileglugluleulysgln

505560

gluleuileglnalagluileglnasnglyvallysglnilealaphe

65707580

proserglythrproleuhisalaasnsermetvalsergluasnval

859095

ileglnserthralavalthrthrvalserserglythrlysglugln

100105110

ilelysglyglyalaglyaspglulyslysalalysglulysileglu

115120125

lyslysglyglulyslysglulyslysglnglnserilealaglyser

130135140

alaaspserlysproileaspvalserargleuaspleuargilegly

145150155160

cysileilethralaarglyshisproaspalaaspserleutyrval

165170175

glugluvalaspvalglygluilealaproargthrvalvalsergly

180185190

leuvalasnhisvalproleugluglnmetglnasnargmetvalile

195200205

leuleucysasnleulysproalalysmetargglyvalleusergln

210215220

alametvalmetcysalaserserproglulysilegluileleuala

225230235240

proproasnglyservalproglyaspargilethrpheaspalaphe

245250255

proglygluproasplysgluleuasnprolyslyslysiletrpglu

260265270

glnileglnproaspleuhisthrasnaspglucysvalalathrtyr

275280285

lysglyvalprophegluvallysglylysglyvalcysargalagln

290295300

thrmetserasnserglyilelys

305310

<210>36

<211>21

<212>dna

<213>人工序列

<220>

<223>tcf7的正向引物

<400>36

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<210>37

<211>21

<212>dna

<213>人工序列

<220>

<223>tcf7的反向引物

<400>37

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<210>38

<211>18

<212>dna

<213>人工序列

<220>

<223>axin2的正向引物

<400>38

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<210>39

<211>18

<212>dna

<213>人工序列

<220>

<223>axin2的反向引物

<400>39

ggccacgcagcaccgctg18

<210>40

<211>22

<212>dna

<213>人工序列

<220>

<223>cd44的正向引物

<400>40

ccacagcctcctttcaataacc22

<210>41

<211>19

<212>dna

<213>人工序列

<220>

<223>cd44的的反向引物

<400>41

ggagtcttcgcttggggta19