本发明涉及化学合成技术领域，尤其是2,2′-联氨-双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二胺盐(abts)的合成方法。
技术背景
2,2′-联氨-双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二胺盐(abts)可以用于生化研究，游离氯的光谱试剂，酶联免疫吸附试验的显色底物，过氧化物酶的底物,用于elisa实验。总抗氧化能力检测试剂盒(abts法)，即totalantioxidantcapacityassaykitwithabtsmethod，简称t-aocassaykit，是一种采用abts作为显色剂，可以对血浆、血清、唾液、尿液等各种体液，细胞或组织等裂解液、植物或中草药抽提液、或各种抗氧化物(antioxidant)溶液的总抗氧化能力进行检测的试剂盒。目前有关合成2,2′-联氨-双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二胺盐(abts)的文献报道很少，只在文献syntheticcommunications,2014,vol.44,#24,p.3630–3636有过完整报道，除此之外，其它报道也只是涉及abts合成过程中的中间体的不同合成方法而已，而没有abts的具体详细报道。目前，abts价格比较昂贵，合成路线有限，寻求abts新的优化的合成方法仍然具有重大意义，这也是化学物质方法学本身应有之意。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐（abts）的合成方法。
本发明提供如下合成技术方案，一种2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐（abts）的合成方法，本发明合成路线如下：
包括以下步骤：
第一步、将2-羟基苯并噻唑和2-溴乙烷溶于有机溶剂，在碱性条件下反应，得到3-乙基苯并噻唑-2-酮。
第二步、将3-乙基苯并噻唑-2-酮和水合肼溶于有机溶剂，在盐酸催化下，加热回流反应，得到2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉)。
第三步、2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉)溶于10%发烟硫酸，在冰水浴条件下反应，得到2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)。
第四步、2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)溶于有机溶剂中，与氨反应得到2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐。
本发明所述的方法，第一步中有机溶剂选自四氢呋喃或乙腈；第二步中和第四步中，有机溶剂选自甲醇或乙醇。
本发明所述的方法，第一步中，2-羟基苯并噻唑，2-溴乙烷，碱的摩尔比为1：1.1-1.5：1-1.5。
本发明所述的方法，第一步中，所用碱为氢氧化钠或氢氧化钾，反应温度为室温至溶剂回流。
本发明所述的方法，第一步反应结束可以不经处理，直接加入水合肼进行第二步反应。
本发明所述的方法，第二步中，3-乙基苯并噻唑-2-酮和水合肼与盐酸摩尔比为1：0.5-0.55：0.1-0.2。
本发明所述的方法，第三步中，2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉)与10%发烟硫酸质量为1：5-10。
本发明所述的方法，第四步中，可以通入氨气或是加入氨水进行反应。
本发明所述的方法，第四步中，2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)与氨的摩尔比为1：2-4。
本发明的有益效果在于：提供了一种新型合成2,2′-联氨-双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二胺盐(abts)的方法，此法具有成本低廉，收率较高，合成路线优异等优点，我们已经进行过中试生产，正在进行较大量试生产。
具体实施方式
下面用具体实施例对本发明进行详细阐述，这些实施例只是用来对本发明进行具体操作描述，而不是对本发明的限制。
实施例1
（1）2-羟基苯并噻唑(1mol,151克)、2-溴乙烷(1.1mol,120克)和氢氧化钾(1mol,56克)溶于四氢呋喃2l中，在0℃下，搅拌反应1小时，然后室温下反应2小时，反应完毕，旋去四氢呋喃溶剂，加入2l乙酸乙酯，用水洗涤两次，无水硫酸钠干燥，然后旋去乙酸乙酯，用甲基叔丁基醚结晶得到3-乙基苯并噻唑-2-酮150克，收率84%。hnmr(dmso-d6,400mhz):7.67-7.60(m,1h),7.41-7.27(m,2h),7.23-7.14(m,1h),3.97(q,2h),1.19(t,3h).
（2）把步骤（1）所得3-乙基苯并噻唑-2-酮(1mol,179克)溶于乙醇1000ml中，加入80%水合肼(0.625mol,31克)，加热回流反应4小时，tlc检测，没有反应。然后再加入浓盐酸(0.12mol,10ml)，继续搅拌，逐渐有沉淀产生，再继续反应3小时，冷却，抽滤并用冷乙醇洗涤得到2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉)153克，收率86%。hnmr(dmso-d6,400mhz):7.53(d,1h),7.26(t,1h),7.18(d,1h),6.99(t,1h),4.05(q,2h),1.27(t,3h).
第一步反应后不经分离直接加入水合肼进行第二步反应：将2-羟基苯并噻唑(1mol,151克)、2-溴乙烷(1.1mol,120克）和氢氧化钾(1mol,56克）溶于四氢呋喃2l中，在0℃下，搅拌反应1小时，接着室温下反应2小时，然后加入盐酸调节使呈酸性，加入80%水合肼(0.625mol,31克)，加热回流，有固体生成，待4小时后，冷却，抽滤得到2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉)140克，收率79%。
（3）把步骤（2）所得2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉)(1mol,354.5克)于冰水浴下缓慢加入10%的发烟硫酸1.8l中，搅拌至室温，再反应4小时，把反应液缓慢倒于碎冰上，并不断搅拌，抽滤得到深蓝绿色固体，用少量水分两次洗涤该固体，洗去固体中包含的硫酸，抽滤至干，得到2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)粗产品510克，收率99%。hnmr(dmso-d6,400mhz):7.73(s,2h),7.52-7.50(m,2h),7.12-7.14(m,4h),4.09(q,2h),1.27(t,6h).
（4）把步骤（3）所得2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)(1mol,515克)溶于甲醇5l中，得到澄清深绿色溶液，室温搅拌下通入氨气，有固体产生，待不再有更多固体产生时，反应完毕，抽滤得到2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐abts450克，旋蒸除去部分滤液甲醇，得到abts50克，合并二者共计500克，用水重结晶，得到460克，收率84%。hnmr(dmso-d6,400mhz):7.72(d,2h),7.52-7.50(m,2h),7.12(d,10h),4.06(q,4h),1.27(t,6h).
实施例2
（1）将2-羟基苯并噻唑(1mol,151克)、2-溴乙烷(1.2mol,131克)和氢氧化钠(1.1mol,44克)溶于乙腈2l中，在0℃下，搅拌反应1小时，接着室温下反应2小时，反应完毕，旋去乙腈溶剂，加入2l二氯甲烷，用水洗涤两次，无水硫酸钠干燥，然后旋去二氯甲烷，用甲基叔丁基醚结晶得到3-乙基苯并噻唑-2-酮153克，收率85%。
（2）把步骤（1）所得3-乙基苯并噻唑-2-酮(1mol,179克)溶于甲醇1000ml中，加入80%水合肼(0.625mol,31克），然后再加入浓盐酸(0.14mol,12ml)，加热回流反应4小时，反应完毕，冷却，抽滤并用冷的甲醇洗涤得到2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉)151克，收率85%。
（3）把步骤（2）所得2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉)(1mol,354.5克)于冰水浴下缓慢加入10%发烟硫酸1.5l中，搅拌至室温反应6小时，把反应液缓慢倒于碎冰上，并不断搅拌，抽滤得到深蓝绿色固体，用少量水分两次洗涤该固体，洗去固体中包含硫酸，抽滤至干，得到2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)粗产品约511克，收率99%。
（4）把步骤（3）所得2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)(1mol,515克)溶于甲醇5l中，得到澄清深绿色溶液，室温搅拌下加入25%氨水200克，有固体产生，搅拌1-2小时，反应完毕，旋去部分甲醇，抽滤得到2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐abts490克，用水重结晶，得到450克纯品，收率82%。