一种增强2-酮基-l-古龙酸发酵菌种活力的方法
【技术领域】
[0001]本发明属于微生物发酵技术领域，更具体地说，涉及一种增强2-酮基-L-古龙酸发酵菌种活力的方法。本发明属于微生物发酵技术领域，更具体地说，涉及一种增强2-酮基-L-古龙酸发酵菌种活力的方法。
[0002]
【背景技术】
[0003]维生素C (VC)是一种水溶性维生素，又名L-抗坏血酸，能参与体内多种羟化反应维生素C (VC)是一种水溶性维生素，又名L-抗坏血酸，能参与体内多种羟化反应
和氧化还原反应，是一类重要的细胞代谢氧化还原化合物，在生物体中起着必不可少的生理作用。维生素C用于预防坏血病，各种急、慢性传染病及紫癜等的辅助治疗，维生素C也广泛用于食品、饲料、化妆品中。20世纪70年代初，尹光琳等筛选出了可以直接将L-山梨糖转化为合成维生素C的重要前体2-酮基-L-古龙酸(2-KLG)的混合菌种一巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)和普通生酮古龙酸菌(Ketogulonigenium sp.)，发明了维生素C二步发酵法。该方法通过两步发酵大大简化了莱氏法生产维生素C的合成路线，具有糖酸转化率高的突出优势，目前国内生产厂家生产维生素C都采用二步发酵法。第二步混菌发酵的发酵水平决定了二步发酵法的发酵水平。在目前维生素C的生产企业中，发酵的工艺路线和反应器的改造研究没有大的突破。在发酵生产2-酮基-L-古龙酸的过程中，改进发酵生产工艺，增强菌种活力，缩短发酵周期，提高发酵技术是必需的。目前通过氮、碳分消增强2-酮基-L-古龙酸发酵菌种活力还没有相关文献报道。和氧化还原反应，是一类重要的细胞代谢氧化还原化合物，在生物体中起着必不可少的生理作用。维生素C用于预防坏血病，各种急、慢性传染病及紫癜等的辅助治疗，维生素C也广泛用于食品、饲料、化妆品中。20世纪70年代初，尹光琳等筛选出了可以直接将L-山梨糖转化为合成维生素C的重要前体2-酮基-L-古龙酸(2-KLG)的混合菌种一巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)和普通生酮古龙酸菌(Ketogulonigenium sp.)，发明了维生素C 二步发酵法。该方法通过两步发酵大大简化了莱氏法生产维生素C的合成路线，具有糖酸转化率高的突出优势，目前国内生产厂家生产维生素C都采用二步发酵法。第二步混菌发酵的发酵水平决定了二步发酵法的发酵水平。在目前维生素C的生产企业中，发酵的工艺路线和反应器的改造研究没有大的突破。在发酵生产2-酮基-L-古龙酸的过程中，改进发酵生产工艺，增强菌种活力，缩短发酵周期，提高发酵技术是必需的。目前通过氮、碳分消增强2-酮基-L-古龙酸发酵菌种活力还没有相关文献报道。
[0004]
【发明内容】
[0005]针对现有技术中存在的上述问题，本发明提供一种增强2-酮基-L-古龙酸发酵菌种活力的方法。针对现有技术中存在的上述问题，本发明提供一种增强2-酮基-L-古龙酸发酵菌种活力的方法。
[0006]
为了解决上述问题，本发明所采用的技术方案如下:为了解决上述问题，本发明所采用的技术方案如下:
一种增强2-酮基-L-古龙酸发酵菌种活力的方法，将2-酮基-L-古龙酸种子罐培养基中的氮源和碳源进行分开消毒，待冷却至28°C -30°C时混合。一种增强2-酮基-L-古龙酸发酵菌种活力的方法，将2-酮基-L-古龙酸种子罐培养基中的氮源和碳源进行分开消毒，待冷却至28 V -30 V时混合。
[0007]
进一步的，所述氮源包括玉米浆、酵母膏和尿素。进一步的，所述氮源包括玉米浆、酵母霄和尿素。
[0008]
更进一步的，所述碳源为L-山梨糖。更进一步的，所述碳源为L-山梨糖。
[0009]
种子罐培养基配方(重量百分比):山梨糖1.7%，玉米浆0.5%，酵母膏0.3%，尿素0.2%，硫酸镁0.02%，磷酸二氢钾0.1%，碳酸钙0.5%，PH6.7-7.2。种子罐培养基配方(重量百分比):山梨糖1.7%，玉米浆0.5%，酵母膏0.3%，尿素0.2%，硫酸镁0.02%，磷酸二氢钾0.1%，碳酸钙 0.5%，PH6.7-7.2。
[0010]
种子罐培养条件:培养温度28-30°C，培养过程控制溶解氧30-50%，接种量10%。种子罐培养条件:培养温度28-30 °C，培养过程控制溶解氧30-50%，接种量10%。
[0011]
种子罐培养基消毒方式:种子罐培养基主要碳源L-山梨糖与其它原料分消，待冷却至30°C左右混合。种子罐培养基消毒方式:种子罐培养基主要碳源L-山梨糖与其它原料分消，待冷却至30°C左右混合。
[0012]
种子罐培养至对数期，种液中2-酮基-L-古龙酸的测定为碘量法；种液中菌密度测定为显微计数法，采用血球计数板进行计数。种子罐培养至对数期，种液中2-酮基-L-古龙酸的测定为碘量法；种液中菌密度测定为显微计数法，采用血球计数板进行计数。
[0013]
发酵罐培养基配方:山梨糖8.0%，玉米浆0.5%，尿素0.1%，硫酸镁0.01%，磷酸二氢钾
0.1%，碳酸钙0.3%，其中山梨糖在培养过程中以液体形式流加。培养温度29-31°C，培养过程控制溶解氧30-50%，用25%的碳酸钠溶液控制PH6.7-7.2。发酵罐培养基配方:山梨糖8.0%，玉米浆0.5%，尿素0.1%，硫酸镁0.01%，磷酸二氢钾0.1%，碳酸钙0.3%，其中山梨糖在培养过程中以液体形式流加。培养温度29-31°C，培养过程控制溶解氧30-50%，用25%的碳酸钠溶液控制PH6.7-7.2。
[0014]
有益效果:采用本发明的工艺，氮、碳分消减少有害物质产生，培养基营养成分破坏少，利于生产菌生产繁殖，能有效增强菌种活力，缩短2-酮基-L-古龙酸发酵周期。有益效果:采用本发明的工艺，氮、碳分消减少有害物质产生，培养基营养成分破坏少，利于生产菌生产繁殖，能有效增强菌种活力，缩短2-酮基-L-古龙酸发酵周期。
[0015]
【具体实施方式】
[0016]下面结合具体实施例对本发明进一步进行描述。下面结合具体实施例对本发明进一步进行描述。
[0017]
1、种子罐培养基配方:山梨糖1.7%，玉米浆0.5%，酵母膏0.3%，尿素0.2%，硫酸镁0.02%，磷酸二氢钾0.1%，碳酸钙0.5%，PH6.7-7.2。1、种子罐培养基配方:山梨糖1.7%，玉米浆0.5%，酵母膏0.3%，尿素0.2%，硫酸镁0.02%，磷酸二氢钾0.1%，碳酸钙0.5%，PH6.7-7.2。
[0018]
2、种子罐培养条件:培养温度28-30°C，培养过程控制溶解氧30-50%，接种量10%。2、种子罐培养条件:培养温度28-30 °C，培养过程控制溶解氧30-50%，接种量10%。
[0019]
3、种子罐培养基消毒方式:种子罐培养基主要碳源L-山梨糖与其它原料分消，待冷却至30°C左右混合。3、种子罐培养基消毒方式:种子罐