本本发明属于营养补充剂技术领域，具体涉及一种制备尼克酰胺核苷盐的方法。
背景技术
尼克酰胺核苷和尼克酰胺单核苷酸是尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸的代谢物，是潜在的天然营养补充物。
cn201580040316以尼克酰胺和四乙酰基核糖为原料，在三氟甲磺酸三甲基硅酯催化下生成三乙酰基尼克酰胺核苷三氟甲磺酸盐，再用甲醇钠脱去乙酰基得到尼克酰胺核苷三氟甲磺酸盐。为了置换三氟甲磺酸根阴离子为更安全的氯离子或者其它阴离子，采用四氢呋喃萃取含有尼克酰胺核苷、氯化钠和碱金属三氟甲磺酸盐的水溶液。该离子交换方法避免了离子交换树脂法，但是萃取后需要除去水和氯化钠，蒸馏过程中尼克酰胺核苷降解，而且不能完全除去氯化钠，小试总收率34%，放大降低到25%以下，这限制了其工业化生产。
cn201480043268以尼克酰胺和四乙酰基核糖为原料，在三氟甲磺酸三甲基硅酯催化下生成三乙酰基尼克酰胺核苷三氟甲磺酸盐，先将吡啶环还原以除去三氟甲磺酸根阴离子，然后经过脱乙酰基、氧化得到尼克酰胺核苷。该化学法除离子避免了离子交换过程，但是增加了氧化、还原反应，步骤增加，总收率降低到20%以下，同样不适合工业化生产。
技术实现要素：
本发明在于解决现有技术中存在的不足之处，提供一种制备尼克酰胺核苷盐的方法。制备尼克酰胺核苷盐的技术难点在于置换原料三乙酰基尼克酰胺核苷三氟甲磺酸盐中的三氟甲磺酸根离子，目前的研究主要采用离子交换树脂法、萃取法和氧化还原法。本发明采用有机溶剂中酸的阴离子直接与三氟甲磺酸根离子交换，置换后的尼克酰胺核苷盐结晶析出，克服了化学法和萃取法的不足，尼克酰胺核苷盐粗品收率70%以上，总收率提高到50%以上，工艺简单，更适合工业生产。
一种尼克酰胺核苷盐的制备方法，包括以下步骤：1）以三乙酰基尼克酰胺核苷三氟甲磺酸盐为原料，通过碱催化脱乙酰基反应得到尼克酰胺核苷三氟甲磺酸盐溶液；
2）尼克酰胺核苷三氟甲磺酸盐溶液直接用酸中和除盐、置换离子、结晶析出尼克酰胺核苷粗品。
所述尼克酰胺核苷粗品用溶剂和酸的混合物打浆得到相应的尼克酰胺核苷盐成品。
所述尼克酰胺核苷粗品直接跟三氯氧磷反应合成尼克酰胺单核苷酸。
在步骤1）中：将三乙酰基尼克酰胺核苷三氟甲磺酸盐和醇的混合物添加到含有碱的醇溶液中，或者将碱或者碱和醇的混合物添加到三乙酰基尼克酰胺核苷三氟甲磺酸盐和醇的混合物中。
在步骤2）中：向尼克酰胺核苷三氟甲磺酸盐溶液添加酸中和，中和后过滤除去盐；
在步骤2）中：在中和后的滤液中加入酸置换离子，然后加入小极性溶剂结晶析出尼克酰胺核苷盐粗品。
所述碱催化脱乙酰基反应中用的碱是无机碱或者有机碱，其中，所述无机碱为氢氧化钠、氢氧化锂、氢氧化钾、氨水、氨气、甲醇钠、甲醇钾、乙醇钠、乙醇钾、叔丁醇钠、叔丁醇钾、甲醇锂、碳酸钾、碳酸钠、碳酸铯中的一种，所述有机碱是四甲基氢氧化铵、四乙基氢氧化铵、叔丁胺、甲胺、二甲胺、乙胺、二乙胺、正丙胺、异丙胺、正丁胺中的一种。
所述碱与三乙酰基尼克酰胺核苷三氟甲磺酸盐的摩尔比为0.5:1～20:1，其中，用甲醇钠与三乙酰基尼克酰胺核苷三氟甲磺酸盐的摩尔比为1:1～5:1，优选1:1～2:1，用氨气催化与三乙酰基尼克酰胺核苷三氟甲磺酸盐的摩尔比为5:1～20:1，优选5:1～10:1。
所述碱催化脱乙酰基反应中用的醇是甲醇、乙醇、异丙醇、丙醇、正丁醇中的一种，优选甲醇或乙醇。
所述碱催化脱乙酰基反应中用的醇与三乙酰基尼克酰胺核苷三氟甲磺酸盐的质量比为1:1～10:1，优选1:1～2:1。
所述中和用的酸是有机酸或无机酸，所述无机酸是氯化氢（或者氯化氢甲醇溶液、氯化氢乙醇溶液）、溴化氢（或者溴化氢甲醇溶液、溴化氢乙醇溶液）、碘化氢（或者碘化氢甲醇溶液、碘化氢乙醇溶液）、硫酸（或者硫酸甲醇溶液、硫酸乙醇溶液）中的一种，所述有机酸是甲酸、乙酸、三氟乙酸、丙酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、柠檬酸、异柠檬酸、乙二胺四乙酸、甲磺酸、对甲苯磺酸中的一种，优选氯化氢（或者氯化氢甲醇溶液、氯化氢乙醇溶液）或硫酸（或者硫酸甲醇溶液、硫酸乙醇溶液），中和后ph=5～7。
置换三氟甲磺酸根离子用的酸是有机酸或无机酸，所述无机酸是氯化氢（或者氯化氢甲醇溶液、氯化氢乙醇溶液）、溴化氢（或者溴化氢甲醇溶液、溴化氢乙醇溶液）、碘化氢（或者碘化氢甲醇溶液、碘化氢乙醇溶液）、硫酸（或者硫酸甲醇溶液、硫酸乙醇溶液）中的一种，所述有机酸是甲酸、乙酸、三氟乙酸、丙酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、柠檬酸、异柠檬酸、乙二胺四乙酸、甲磺酸、对甲苯磺酸中的一种，使用不同的酸可以得到相应的尼克酰胺核苷的盐，优选使用氯化氢（或者氯化氢甲醇溶液、氯化氢乙醇溶液）。
置换离子用的酸与三乙酰基尼克酰胺核苷三氟甲磺酸盐的摩尔比为1:1～10:1，优选1.5:1～3:1。
结晶用的小极性溶剂是乙醇、丙醇、异丙醇、正丁醇、乙酸乙酯、乙酸异丙酯、乙酸丁酯、乙酸甲酯、甲基叔丁基醚、二异丙醚、二氯甲烷、四氢呋喃、乙腈、磷酸三甲酯、磷酸三乙酯、乙二醇二甲醚、甲苯、丙酮、乙醚、叔丁醇、1,2-二氯乙烷、dmf（二甲基甲酰胺）、丁酮中的一种，优选乙酸乙酯或甲基叔丁基醚；结晶溶剂与反应溶剂质量比为1:1～10:1，优选2:1～5:1。
脱乙酰基、中和、结晶过程的温度是-20～10℃，优选-10～-5℃。
结晶所得尼克酰胺核苷盐粗品的精制(即制备成品)用的溶剂是甲醇、乙醇、异丙醇、丙醇、正丁醇中的一种，优选甲醇，溶剂与尼克酰胺核苷盐的质量比为1:1～20:1，优选2:1～5:1；并加入置换离子的酸，酸与尼克酰胺核苷盐的摩尔比为0.1:1～5:1，优选0.1:1～0.5:1；打浆温度是-20～35℃，优选-5～5℃。
尼克酰胺核苷盐粗品与三氯氧磷的反应，反应温度是-20～10℃，优选-5～0℃；三氯氧磷与尼克酰胺核苷盐的摩尔比为1:1～8:1，优选2:1～4:1；反应溶剂是磷酸三甲酯，溶剂与尼克酰胺核苷盐的质量比为2:1～15:1，优选3:1～4:1。
其中
base包括有机碱和无机碱，无机碱可以是氢氧化钠、氢氧化锂、氢氧化钾、氨水、氨气、甲醇钠、甲醇锂、甲醇钾、乙醇钠、乙醇钾、叔丁醇钠、叔丁醇钾、碳酸钾、碳酸钠、碳酸铯，有机碱可以是四甲基氢氧化铵、四乙基氢氧化铵、叔丁胺、甲胺、二甲胺、乙胺、二乙胺、正丙胺、异丙胺、正丁胺中的一种；
acid包括无机酸和有机酸，无机酸可以是氯化氢、溴化氢、碘化氢、硫酸，有机酸可以是甲酸、乙酸、三氟乙酸、丙酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、柠檬酸、异柠檬酸、乙二胺四乙酸、甲磺酸、对甲苯磺酸中的一种；
x=cl、br、i、甲磺酸根、对甲苯磺酸根、so4、hso4、甲酸根、乙酸根、三氟乙酸根、丙酸根、丙二酸根、琥珀酸根、富马酸根、马来酸根、柠檬酸根、异柠檬酸根、乙二胺四乙酸根；
本发明所提出的生产工艺，采用在有机溶剂中置换三氟甲磺酸根阴离子，操作简单，不使用氯化钠和水，避免了蒸馏过程中尼克酰胺核苷的降解，非常适合大规模生产。
三乙酰基尼克酰胺核苷三氟甲磺酸盐在有机碱或者无机碱催化下与醇反应脱去乙酰基，用无机酸或者有机酸中和，中和时无机酸是气体的话可以直接通入，也可以将无机酸溶于甲醇或者乙醇中再添加到溶液中，过滤除盐后的溶液加入无机酸或者有机酸置换离子，置换离子时无机酸是气体的话可以直接通入，也可以将无机酸溶于甲醇或者乙醇中再添加到溶液中，再加入小极性溶剂结晶，过滤后得到尼克酰胺核苷盐的粗品，用甲醇打浆2～3次得到尼克酰胺核苷盐纯品。打浆温度是-20～35℃，优选-5～5℃时，同时按照本发明的添加配比，本发明的收率能够得到显著提高，本发明经过长期的研究并结合实验等，在添加的摩尔配比不在本发明公开的范围内，或打浆温度及反应温度不在本发明的范围内，制备效果差，尼克酰胺核苷盐粗品可以直接拿来跟三氯氧磷反应合成尼克酰胺单核苷酸。
公知的尼克酰胺和四乙酰基核糖的糖苷化反应必须用到高效催化剂三氟甲磺酸三甲硅酯，产物中势必引入三氟甲磺酸根阴离子，现有的化学法、萃取法和离子交换树脂法都能很好的除去三氟甲磺酸根阴离子，但是在放大生产过程中，也都遇到了不能克服的问题。化学法步骤的增加，总收率20%以下，氧化、还原反应存在安全风险；萃取法得到的产品含有水和氯化钠，蒸馏过程产品降解严重，而且氯化钠不能完全除去；离子交换树脂法要用大量的水溶解产品，冻干操作有局限性。
具体实施方式
实施例1-a：尼克酰胺核苷氯化物的制备
三乙酰基尼克酰胺核苷三氟甲磺酸盐(53g,0.1mol)和甲醇(50ml)的混合物在-10℃滴加到7n的氨甲醇溶液(100ml)中，保持-10℃搅拌反应24h，取样检测反应结束后，控制-10℃滴加28%的氯化氢甲醇溶液(100ml)中和，过滤除去氯化铵，滤液控制-10℃滴加28%的氯化氢甲醇溶液(40ml)置换离子，滴加乙酸乙酯(1000ml)结晶，保持-10℃搅拌1h，过滤得到粗品。
粗品加入甲醇(100ml)降温到-10℃，滴加28%的氯化氢甲醇溶液(6ml)，打浆4h，过滤得到一次打浆固体；一次打浆固体加入甲醇(100ml)降温到-10℃，滴加28%的氯化氢甲醇溶液(3ml)，打浆4h，打浆温度是-5℃，过滤得到湿品，室温真空干燥24h，得到尼克酰胺核苷氯化物(15g,52%)。
实施例1-b：尼克酰胺核苷氯化物的制备
三乙酰基尼克酰胺核苷三氟甲磺酸盐(53g,0.1mol)和甲醇(50ml)的混合物在-7℃滴加30%的甲醇钠甲醇溶液(27g,0.15mol)中，保持-7℃搅拌反应1h，取样检测反应结束后，控制-4℃滴加28%的氯化氢甲醇溶液(25ml)中和，过滤除去氯化钠，滤液控制-4℃滴加28%的氯化氢甲醇溶液(25ml)置换离子，滴加乙酸乙酯(500ml)结晶，保持-7℃搅拌1h，过滤得到粗品。
粗品加入甲醇(100ml)降温到-7℃，滴加28%的氯化氢甲醇溶液(6ml)，打浆4h，过滤得到一次打浆固体；一次打浆固体加入甲醇(100ml)降温到-7℃，滴加28%的氯化氢甲醇溶液(3ml)，打浆4h，打浆温度是-5℃，过滤得到湿品，室温真空干燥24h，得到尼克酰胺核苷氯化物(15g,52%)。
实施例1-c：尼克酰胺核苷氯化物的制备
三乙酰基尼克酰胺核苷三氟甲磺酸盐(53g,0.1mol)和甲醇(50ml)的混合物在-8℃滴加到7n的氨甲醇溶液(100ml)中，保持混合溶液在-9℃，搅拌反应24h，取样检测原料剩余1%以下，反应结束，溶液的温度控制在-7℃滴加浓硫酸(29g,0.3mol)中和，过滤除去硫酸铵，滤液控制-8℃滴加28%的氯化氢甲醇溶液(40ml)置换离子，滴加乙酸乙酯(600ml)结晶，保持-9℃搅拌1h，过滤得到粗品。
粗品加入甲醇(100ml)溶液温度降温到-8℃，滴加28%的氯化氢甲醇溶液(6ml)，打浆4h，过滤得到一次打浆固体；一次打浆固体加入甲醇(100ml)降温到-8℃，滴加28%的氯化氢甲醇溶液(3ml)，打浆4h，过滤得到湿品，室温真空干燥24h，打浆温度是0℃（第一次打浆温度和第二次打浆温度相同），得到尼克酰胺核苷氯化物(16g,55%)。
实施例1-d：尼克酰胺核苷氯化物的制备
三乙酰基尼克酰胺核苷三氟甲磺酸盐(53g,0.1mol)和甲醇(50ml)的混合物在-10～-7℃时滴加到7n的氨甲醇溶液(100ml)中，保持-10～-7℃搅拌反应24h，取样检测反应结束后，控制-10～-4℃滴加醋酸(36g,0.6mol)中和，过滤除去醋酸铵，滤液控制-10～-4℃滴加28%的氯化氢甲醇溶液(40ml)置换离子，滴加乙酸乙酯(600ml)结晶，保持-10～-7℃搅拌1h，过滤得到粗品。
粗品加入甲醇(100ml)降温到-10～-7℃，滴加28%的氯化氢甲醇溶液(6ml)，打浆4h，过滤得到一次打浆固体；一次打浆固体加入甲醇(100ml)降温到-10～-7℃，滴加28%的氯化氢甲醇溶液(3ml)，打浆4h，打浆温度是-20℃，过滤得到湿品，室温真空干燥24h，得到尼克酰胺核苷氯化物(14.5g,52%)。
实施例1-e：尼克酰胺核苷氯化物的制备
三乙酰基尼克酰胺核苷三氟甲磺酸盐(53g,0.1mol)和甲醇(50ml)的混合物在-10～-7℃时滴加到7n的氨甲醇溶液(100ml)中，保持-10～-7℃范围内时搅拌反应24h，取样检测反应结束后，控制-2～0℃范围内时减压蒸出氨气，然后控制-10～-4℃范围内时滴加28%的氯化氢甲醇溶液(40ml)置换离子，滴加乙酸乙酯(600ml)结晶，保持-10～-7℃范围内时搅拌1h，过滤得到粗品。
粗品加入甲醇(100ml)降温到-10～-7℃范围内时，滴加28%的氯化氢甲醇溶液(6ml)，打浆4h，过滤得到一次打浆固体；一次打浆固体加入甲醇(100ml)降温到-10～-7℃范围内时，滴加28%的氯化氢甲醇溶液(3ml)，打浆4h，打浆温度是35℃，过滤得到湿品，室温真空干燥24h，得到尼克酰胺核苷氯化物(14.5g,50%)。
实施例2：尼克酰胺核苷硫酸盐的制备：
三乙酰基尼克酰胺核苷三氟甲磺酸盐(53g,0.1mol)和甲醇(50ml)的混合物在-10～-7℃滴加到7n的氨甲醇溶液(100ml)中，保持-10～-7℃搅拌反应24h，取样检测反应结束后，控制-2～0℃减压蒸出氨气，然后控制-10～-4℃滴加浓硫酸(20g,0.4mol)置换离子，滴加乙酸乙酯(600ml)结晶，保持-10～-7℃搅拌1h，过滤得到粗品。
粗品加入甲醇(100ml)降温到-10～-7℃，滴加浓硫酸(2g,0.02mol)，打浆4h，过滤得到一次打浆固体；一次打浆固体加入甲醇(100ml)降温到-10～-7℃，滴加浓硫酸(2g,0.02mol)，打浆4h，打浆温度是-20℃，过滤得到湿品，室温真空干燥24h，得到尼克酰胺核苷硫酸盐(15g,50%)。
实施例3：尼克酰胺核苷溴化物的制备：
三乙酰基尼克酰胺核苷三氟甲磺酸盐(53g,0.1mol)和甲醇(50ml)的混合物在-10～-7℃时滴加到7n的氨甲醇溶液(100ml)中，保持-10～-7℃搅拌反应24h，取样检测反应结束后，控制-10～-4℃滴加8n的溴化氢甲醇溶液(100ml)中和，过滤除去溴化铵，滤液控制-10～-4℃滴加8n的溴化氢甲醇溶液(40ml)置换离子，滴加乙酸乙酯(1000ml)结晶，保持-10～-7℃搅拌1h，过滤得到粗品。
粗品加入甲醇(100ml)降温到-10～-7℃，滴加8n的溴化氢甲醇溶液(6ml)，打浆4h，过滤得到一次打浆固体；一次打浆固体加入甲醇(100ml)降温到-10～-7℃，滴加8n的溴化氢甲醇溶液(3ml)，打浆4h，过滤得到湿品，室温真空干燥24h，得到尼克酰胺核苷溴化物(17g,52%)。
实施例4：尼克酰胺单核苷酸的制备：三乙酰基尼克酰胺核苷三氟甲磺酸盐(53g,0.1mol)和甲醇(50ml)的混合物在-10～-7℃时滴加30%的甲醇钠甲醇溶液(27g,0.15mol)中，保持-10～-7℃搅拌反应1h，取样检测反应结束后，控制-10～-4℃滴加28%的氯化氢甲醇溶液(25ml)中和，过滤除去氯化钠，滤液控制-10～-4℃滴加28%的氯化氢甲醇溶液(25ml)置换离子，滴加乙酸乙酯(500ml)结晶，保持-10～-7℃搅拌1h，过滤、减压干燥得到粗品。
尼克酰胺核苷粗品(40g,0.065mol)和磷酸三甲酯(150ml)的混合物在-10～-7℃时滴加三氯氧磷(40g,0.26mol)，保持-10～-7℃搅拌反应24h，取样检测反应结束后，将反应液倒入冰水(150ml)中，用二氯甲烷(300ml)萃取，水层在-10～-0℃用30%液碱中和，得到尼克酰胺单核苷酸的水溶液，用d301树脂除盐，冻干后得到固体尼克酰胺单核苷酸(10g,32%)。
实施例5：尼克酰胺单核苷酸的制备：三乙酰基尼克酰胺核苷三氟甲磺酸盐(53g,0.1mol)和甲醇(38g)的混合物在-10℃时滴加30%的甲醇钠甲醇溶液(21.6g,0.12mol)中，保持-10℃搅拌反应1h，取样检测反应结束后，控制-20℃滴加28%的氯化氢甲醇溶液中和，中和后ph=5；过滤除去氯化钠，滤液控制-10℃滴加28%的氯化氢甲醇溶液(13g,0.1mol)置换离子，滴加乙酸乙酯(71g)结晶，保持-10℃搅拌1h，过滤、减压干燥得到粗品（40g）。
粗品（40g）加入甲醇(40g)降温到-10℃，滴加28%的氯化氢甲醇溶液(1.8g,0.014mol)，打浆4h，过滤得到一次打浆固体；一次打浆固体加入甲醇(40g)降温到-10℃，滴加28%的氯化氢甲醇溶液(0.9g,0.007mol)，打浆4h，打浆温度是-5℃，过滤得到湿品，室温真空干燥24h，得到尼克酰胺核苷氯化物(15g,50%)。
尼克酰胺核苷氯化物粗品(40g,0.065mol)和磷酸三甲酯(80g）的混合物在-10℃时滴加三氯氧磷(10g,0.065mol)，保持-10℃搅拌反应24h，取样检测反应结束后，将反应液倒入冰水(80g）中，用二氯甲烷(160g）萃取，水层在-10℃用30%液碱中和，中和到ph=3，得到尼克酰胺单核苷酸的水溶液，用d301树脂除盐，冻干后得到固体尼克酰胺单核苷酸(10g,32%)。
实施例6：尼克酰胺单核苷酸的制备：三乙酰基尼克酰胺核苷三氟甲磺酸盐(53g,0.1mol)和甲醇(467g)的混合物在-7℃时滴加30%的甲醇钠甲醇溶液(90g,0.5mol)中，保持-7℃搅拌反应1h，取样检测反应结束后，控制10℃滴加28%的氯化氢甲醇溶液中和，中和后ph=6；过滤除去氯化钠，滤液控制-4℃滴加28%的氯化氢甲醇溶液(130g,1mol)置换离子，滴加乙酸乙酯(5300g)结晶，保持-7℃搅拌1h，过滤、减压干燥得到粗品（40g）。
粗品(40g)加入甲醇(800g)降温到-7℃，滴加28%的氯化氢甲醇溶液(42g,0.325mol)，打浆4h，过滤得到一次打浆固体；一次打浆固体加入甲醇(800g)降温到-7℃，滴加28%的氯化氢甲醇溶液(42g,0.325mol)，打浆4h，打浆温度是5℃，过滤得到湿品，室温真空干燥24h，得到尼克酰胺核苷氯化物(15g,50%)。
尼克酰胺核苷氯化物粗品(40g,0.065mol)和磷酸三甲酯(600g）的混合物在-7℃时滴加三氯氧磷(80g,0.52mol)，保持-7℃搅拌反应24h，取样检测反应结束后，将反应液倒入冰水(600g）中，用二氯甲烷(2400g）萃取，水层在-0℃用30%液碱中和到ph=4，得到尼克酰胺单核苷酸的水溶液，用d301树脂除盐，冻干后得到固体尼克酰胺单核苷酸(10g,32%)。
实施例7：尼克酰胺核苷溴化物的制备：
三乙酰基尼克酰胺核苷三氟甲磺酸盐(53g,0.1mol)和甲醇(26g)的混合物在-10～-7℃时滴加到7n的氨甲醇溶液(100ml,0.7mol)中，保持-10～-7℃搅拌反应24h，取样检测反应结束后，控制-10～-4℃滴加8n的溴化氢甲醇溶液中和使溶液ph=5～6，过滤除去溴化铵，滤液控制-10～-4℃滴加8n的溴化氢甲醇溶液(12.5ml,0.1mol)置换离子，滴加乙酸乙酯(71g)结晶，保持-10～-7℃搅拌1h，过滤得到粗品(45g)。
粗品(45g,0.065mol)加入甲醇(45g)降温到-10～-7℃，滴加8n的溴化氢甲醇溶液(1.8ml,0.014mol)，打浆4h，过滤得到一次打浆固体；一次打浆固体加入甲醇(45g)降温到-10～-7℃，滴加8n的溴化氢甲醇溶液(0.9ml,0.007mol)，打浆4h，打浆温度是-5℃，过滤得到湿品，室温真空干燥24h，得到尼克酰胺核苷溴化物(20g,52%)。
实施例8：尼克酰胺核苷溴化物的制备：
三乙酰基尼克酰胺核苷三氟甲磺酸盐(53g,0.1mol)和甲醇(430g)的混合物在-10～-7℃时滴加到7n的氨甲醇溶液(286ml,2mol)中，保持-10～-7℃搅拌反应24h，取样检测反应结束后，控制-10～-4℃滴加8n的溴化氢甲醇溶液中和使溶液ph=5～6，过滤除去溴化铵，滤液控制-10～-4℃滴加8n的溴化氢甲醇溶液(125ml,1mol)置换离子，滴加乙酸乙酯(5300g)结晶，保持-10～-7℃搅拌1h，过滤得到粗品(45g)。
粗品(45g,0.065mol)加入甲醇(900g)降温到-10～-7℃，滴加8n的溴化氢甲醇溶液(41ml,0.325mol)，打浆4h，过滤得到一次打浆固体；一次打浆固体加入甲醇(900g)降温到-10～-7℃，滴加8n的溴化氢甲醇溶液(41ml,0.325mol)，打浆4h，打浆温度是5℃，过滤得到湿品，室温真空干燥24h，得到尼克酰胺核苷溴化物(20g,52%)。