一种用于细菌电阻计数的培养基组合物、制备方法及其应用与流程

文档序号:20031056发布日期:2020-02-28 10:23阅读:332来源:国知局
本发明涉及生物医药领域,特别涉及一种培养基,尤其是细菌培养基。
背景技术
:培养基是一种体外增菌培养试剂,为微生物生长繁殖提供适宜的营养成分和生长环境并加速微生物的生长速度。目前国内市场上的培养基有几十种并且种类繁多,均能达到培养临床常见微生物的要求。但是如果作为电阻法细菌计数的培养基,一方面要达到快速培养细菌的功能,还要满足电阻计数所需要的降低本底即减少颗粒性物质的要求,目前市面上的培养基只是达到常见菌培养的要求,未能满足电阻法进行细菌计数时对培养基的要求,因此有待提出一种满足电阻计数所需要的培养基。技术实现要素:本发明实施例,提供了一种用于电阻法细菌计数过程中的细菌培养基,以至少解决现有技术中细菌培养较慢、成本较高的技术问题。本发明实施例,提供了一种用于细菌电阻计数的培养基组合物,上述培养基组合物包括:浓度为0.5克/升至40克/升mh肉汤,浓度为0.5克/升至60克/升脑心浸液以及水。可选的,上述培养基组合物包括:浓度为5克/升至27克/升mh肉汤,浓度为5克/升至40克/升脑心浸液以及水。可选的,上述mh肉汤的浓度为21克/升,上述脑心浸液的浓度为12克/升,上述水的体积为1升。可选的,上述mh肉汤的浓度为5克/升,上述脑心浸液的浓度为40克/升,上述水的体积为1升。可选的,上述mh肉汤的浓度为27克/升,上述脑心浸液的浓度为5克/升,上述水的体积为1升。本发明实施例,提供了一种培养基组合物的制备方法,包括:步骤一、对称量、溶解上述培养基组合物所用器具进行清洗;步骤二、对上述mh肉汤、上述脑心浸液以及上述水称量;步骤三、对上述称量所得的上述mh肉汤、上述脑心浸液以及上述水进行溶解,得到溶解物;步骤四、对上述溶解物进行过滤,得到培养基组合物;步骤五、对上述培养基组合物进行高压湿热灭菌。可选的,对灭菌后的上述培养基进行无菌性检查。可选的,过滤上述溶解物,包括:对上述溶解物进行初次过滤,然后进行再次过滤,其中,上述再次过滤的次数为一次、两次或三次。可选的,上述初次过滤使用的滤膜孔径为0.3米至1微米,上述再次过滤使用的滤膜孔径为0.1微米至0.3微米。可选的,上述初次过滤使用的滤膜孔径为0.4微米,上述再次过滤滤膜孔径为0.22微米。可选的,对灭菌后的上述培养基在35摄氏度的条件下培养48小时,进行无菌性检查。可选的,对无菌检查合格的培养基,接种临床常见细菌,以检验培养基的培养能力。上述培养基在细菌电阻计数中的应用。mh(mueller-hintonbroth,mh)肉汤的中文含义为水解酪蛋白培养基。本发明技术方案具有加速微生物生长、降低本底、减少细菌抱团生长情况的发生的特点,本发明培养基应用于电阻法细菌计数,一方面达到了快速培养细菌的功能,另一方面满足了电阻计数所需要的降低本底即减少颗粒性物质的要求。在细菌的生长过程中,球菌会有抱团聚集生长的现象,这种现象通过本发明技术方案中的脑心浸液,达到了细菌尽可能分散生长的目的。本发明技术方案稳定性好,制备完成后能够在一年的时间内保持颗粒性物质的稳定,并能保证细菌的培养能力;颗粒物质含量少,能够满足电阻计数的要求;工艺成熟,成本较低。{{培养基的描述}}本申请公开了一种培养基,所述培养基可以用于细菌计数的细菌培养。例如,所述培养基可以用于细菌计数的方法和/或设备的计数结果前的细菌培养,以更好实现细菌计数的方法和/或设备。又例如,所述培养基可以用于体外增菌培养试剂,为微生物生长繁殖提供适宜的营养成分和生长环境并加速微生物的生长速度。在一些实施例中,应用于细菌计数的培养基可以应用于多种细菌计数方法中,例如,计数器测定法(又可以被称为镜检计数法)、电子计数器计数法(又可以被称为电阻计数法)、活细胞计数法、重量测定法等。在一些实施例中,溶剂可以指用于溶解和/或稀释所述组合物中的其他组分(例如,细菌、固定剂、添加剂等)的液体。示例性的溶剂可以包括但不限于水、二甲亚砜、三氟乙酸、甲醇、乙醇、二甲基甲酰胺、乙腈、乙酸、丙酮、吡啶、二氧六环、氯仿、异丙醇、四甲基乙二胺、三乙胺、甲酸甲酯、三丁胺、甲基乙基酮、乙酸乙酯、三辛胺、碳酸二甲酯、四氢呋喃、丙醇、正丁醇、二氯甲烷、苯、乙醚、异丙醚、正丁醚、三氯乙烯、二苯醚、二氯甲烷、甲苯、四氯化碳、二硫化碳、环己烷、己烷、石油醚等或其任意组合。优选地,所述溶剂可以为纯水。在一些实施例中,所述溶剂可以占所述组合物总体积的40%-75%。较为优选地,所述溶剂可以占所述组合物总体积的41%-70%。更为优选地,所述溶剂可以占所述组合物总体积的42%-65%。更为优选地,所述溶剂可以占所述组合物总体积的43%-60%。更为优选地,所述溶剂可以占所述组合物总体积的44%-59%。更为优选地,所述溶剂可以占所述组合物总体积的45%-58%。更为优选地,所述溶剂可以占所述组合物总体积的46%-57%。更为优选地,所述溶剂可以占所述组合物总体积的47%-56%。更为优选地,溶剂可以占所述组合物总体积的48%-54%。更为优选地,溶剂可以占所述组合物总体积的54%。更为优选地,所述溶剂可以占所述组合物总体积的53%。更优选地,所述溶剂可以占所述组合物总体积的52%。更为优选地,所述溶剂可以占所述组合物总体积的51%。更为优选地,所述溶剂可以占所述组合物总体积的50%。更为优选地,所述溶剂可以占所述组合物总体积的49%。特别优选地,所述溶剂可以占所述组合物总体积的48%。细菌可以是所述组合物中最终被计数的组分。在使用所述组合物对细菌计数设备或方法进行验证时,所检测到的数值即为所述组合物中所包含的细菌的数量。在一些实施例中,所述细菌可以选自杆菌、球菌、螺旋菌等中的一种或其任意组合。优选地,所述细菌可以选自杆菌或球菌中的一种或其任意组合。示例性的杆菌可以包括但不限于产气肠杆菌、阴沟肠杆菌、聚团肠杆菌、大肠埃希菌、弗格森埃希菌、赫尔曼埃希菌、粘质沙雷菌、深红沙雷菌、肺炎克雷伯菌、变形杆菌、产碱普罗维登菌、拉式普罗维登菌、沙门氏菌、枸缘酸杆菌、美洲爱文菌、水生布特维西菌、西地西菌、志贺氏菌、不动杆菌、双歧杆菌、黄杆菌、芽孢杆菌等或其任意组合。示例性的球菌可以包括但不限于金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌、中间葡萄球菌、头葡萄球菌、解糖葡萄球菌、微球菌、铬黄肠球菌、牛链球菌、血液链球菌、中间链球菌、化脓性链球菌、β溶血链球菌、咽峡炎链球菌、溶血孪生球菌、肺炎链球菌、草绿色链球菌、奈瑟菌等或其任意组合。优选地,细菌可以选自大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌中的一种或其组合。市售的标准菌株可以用于本申请所披露的组合物。仅作为示例,所述细菌可以选自的大肠埃希菌的atcc25922标准菌株、和/或金黄色葡萄球菌的atcc29213标准菌株。在一些实施例中,所述细菌的总浓度可以为105-109个/ml。较为优选地,所述细菌的总浓度可以为106-108个/ml。更为优选地,所述细菌的总浓度可以为106个/ml。更为优选地,所述细菌的总浓度可以为107个/ml。特别优选地,所述细菌的总浓度可以为108个/ml。添加剂可以是一种用于调节ph,使所述组合物中的组分在保存过程中能够保持其完整的特性的物质。在一些实施例中,所述添加剂可以选自无机盐类,其包括但不限于磷酸钠、磷酸钾、磷酸钙、磷酸氢二钠、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、磷酸二氢钠、氯化钠、氯化钙、氯化钾、硫酸铜、硫酸铁、氯化镁、硫酸镁、碳酸氢钠、硫酸锌等或其任意组合。优选地,所述添加剂可以包括磷酸二氢钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钾、磷酸氢二钠、氯化钠中的一种或其任意组合。更为优选地,所述添加剂可以包括磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、和氯化钠。在一些实施例中,所述添加剂中包括的磷酸二氢钾的质量占所述组合物总质量的0.02%-0.03%。较为优选地,所述添加剂中包括的磷酸二氢钾的质量占所述组合物总质量的0.02%-0.027%。更为优选地,所述添加剂中包括的磷酸二氢钾的质量占所述组合物总质量的0.02%。更为优选地,所述添加剂中包括的磷酸二氢钾的质量占所述组合物总质量的0.023%。更为优选地,所述添加剂中包括的磷酸二氢钾的质量占所述组合物总质量的0.025%。特别优选地,所述添加剂中包括的磷酸二氢钾的质量占所述组合物总质量的0.027%。所述添加剂中包括的磷酸氢二钠的质量占所述组合物总质量的0.1%-0.2%。较为优选地,所述添加剂中包括的磷酸氢二钠的质量占所述组合物总质量的0.11%-0.18%。更为优选的,所述添加剂中包括的磷酸氢二钠的质量占所述组合物总质量的0.12%-0.16%。更为优选的,所述添加剂中包括的磷酸氢二钠的质量占所述组合物总质量的0.13%-0.15%。更为优选的,所述添加剂中包括的磷酸氢二钠的质量占所述组合物总质量的0.13%。更为优选的,所述添加剂中包括的磷酸氢二钠的质量占所述组合物总质量的0.14%。更为优选的,所述添加剂中包括的磷酸氢二钠的质量占所述组合物总质量的0.142%。所述添加剂中包括的氯化钠的质量占所述组合物总质量的0.07%-0.1%。较为优选地,所述添加剂中包括的氯化钠的质量占所述组合物总质量的0.08%-0.09%。更为优选地,所述添加剂中包括的氯化钠的质量占所述组合物总质量的0.08%。特别优选地,所述添加剂中包括的氯化钠的质量占所述组合物总质量的0.09%。需要注意的是,以上对于组合物、溶剂、细菌、固定剂、添加剂的描述,仅为描述方便,并不能把本申请限制在所举实施例范围之内。可以理解,对于本领域的技术人员来说,在了解本申请的原理后,可能在不背离这一原理的情况下,对各个部分进行任意修改和改变。例如,所述固定剂可以通过物理的固定方法替代。示例性物理固定方法可以包括石蜡渗入法、低温冷冻法。诸如此类的变形,均在本申请的保护范围之内。{{制备方法}}制备所述培养基组合物的一种通用方法可以包括,例如,对容器进行清洗准备,按照配方的要求进行对原材料进行称量,溶解,过滤,高压湿热灭菌,灭菌后的培养。以下进一步详细说明组合物的制备过程。第一步,清洗准备:对容器进行超声清洗及纯水冲洗,降低容器中颗粒物质的含量。在一些实施例中,根据实际情况,清洗的方式可以包括但不限于超声清洗及纯水冲洗,示例性的清洗方式即达到降低容器中颗粒物质的含量即可。第二步,称量:按照配方的要求进行对原材料进行称量。第三步,溶解:对称量完的原材料进行充分溶解。在一些实施例中,根据实际情况,溶解的方式可以包括但不限于纯水溶解,采用的溶剂如上文所述,在此不再赘述。第四步,过滤:首先通过0.4μm滤膜进行初次过滤,然后通过0.22μm滤膜进行一次、二次或三次过滤降低颗粒性物质的存在。在一些实施例中,根据实际情况,过滤的方式可以包括但不限于直接过滤、膜过滤等方式。示例性的直接过滤方式可以包括但不限于滤芯式过滤、细网式过滤等中的一种或其组合。示例性的膜过滤方式可以包括但不限于微孔过滤、超过滤、反渗透等中的一种或其任意组合的过滤方式。优选地,可以选用微孔滤膜对所述稀释液进行过滤。在一些实施例中,所述微孔滤膜可以包括醋酸纤维素膜、硝酸纤维素膜、聚酰胺膜、聚四氟乙烯膜、聚偏氟乙烯膜、无表面活性剂的纤维素乙酸膜、非对称聚醚砜、玻璃纤维膜等中的一种或其任意组合。在一些实施例中,所使用的微孔滤膜的直径可以小于或等于12μm(微米)。较为优选地,所使用的微孔滤膜的直径可以小于或等于5μm。较为优选地,所使用的微孔滤膜的直径可以小于或等于1μm。更为优选地,所使用的微孔滤膜的直径可以为小于或等于0.8μm。更为优选地,所使用的微孔滤膜的直径可以小于或等于0.6μm。更为优选地,所使用的微孔滤膜的直径可以小于或等于0.4μm。更优选地,微孔滤膜的直径可以小于或等于0.3μm。更优选地,微孔滤膜的直径可以小于或等于0.22μm。更优选地,微孔滤膜的直径可以小于或等于0.12μm。第五步,对过滤后的培养基进行高压湿热灭菌(灭活)。在一些实施例中,所述灭活可以是指破坏微生物(例如,细菌)的生物学活性、繁殖能力和致病性,尽可能保持其免疫原性的操作。灭活的方式可以包括物理灭活方法和化学灭活方法。示例性的物理灭活可以包括高压湿热灭活、干热灭活、超声波灭活、紫外线灭活、射线照射灭活等中的一种或其任意组合。示例性的化学灭活可以包括甲醛溶液、烷化剂、苯酚、结晶紫等中的一种或其任意组合的灭活剂。可以理解,灭活的效果可以与灭活方法、灭活剂的选择、灭活温度、灭活时间、ph、微生物种类等中一种或其任意组合有关。优选地,可以采用高压湿热细菌灭活的方法对所述菌悬液进行灭活处理。高压湿热灭菌过程中所采用的参数可以根据实际情况进行调整。例如,高压湿热细菌灭活的参数可以为121℃、0.12mpa、30min。第六步,灭菌后的培养基在35℃下培养48h。在一些实施例中,培养的时间可以根据具体情况而调整,上述“灭菌后的培养基在35℃下培养48h”只是一个优选的示例,可以根据具体情况调整培养温度及时间。第七步,对灭菌培养后的细菌进行无菌性检查,并接种临床常见细菌检验培养基的培养能力。在一些实施例中,所述细菌可以是所述组合物中最终被计数的组分。应当注意的是,向过滤后的稀释液中加入的细菌为活细菌。所加入的细菌可以选自杆菌、球菌、螺旋菌等中的一种或其任意组合。优选地,所述细菌可以选自大肠埃希菌或金黄色葡萄球菌。在一些实施例中,制备菌悬液的方法可以包括但不限于麦氏比浊法或麦氏比浊仪。麦氏比浊法可以是用于粗略判断菌悬液中的细菌浓度或细菌数量的方法,其通过调节待测菌悬液之间的浊度,使待测菌悬液的浊度与麦氏标准管的浊度相同或基本相同,得到待测菌悬液的浓度。仅作为示例,麦氏比浊法可以利用硫酸和氯化钡配制麦氏标准管号(例如,0.5麦氏标准管号、1麦氏标准管号、2麦氏标准管号、3麦氏标准管号、4麦氏标准管号),生成硫酸钡沉淀的浊度可以对应于细菌浓度(例如,0.5麦氏对应的细菌浓度为1.5×108个/ml、1麦氏对应的细菌浓度为3×108个/ml、2麦氏对应的细菌浓度为6×108个/ml、3麦氏对应的细菌浓度为9×108个/ml、4麦氏对应的细菌浓度为12×108个/ml)。通过比较待测菌悬液与麦氏标准管浊度判断出菌悬液的浓度。作为另一示例,麦氏比浊仪可以通过测量待测菌悬液直接显示麦氏单位的浊度值,根据国际通用麦氏浊度值(例如,0.5mcf、1mcf、2mcf、3mcf、4mcf)与菌悬液的浓度(例如,0.5mcf对应1.5×108个/ml、1mcf对应3×108个/ml、2mcf对应6×108个/ml、3mcf对应9×108个/ml、4mcf对应12×108个/ml)的关系表可以得到待测的菌悬液浓度。需要注意的是,以上对于制备所述培养基组合物流程的描述,仅为了示例和说明,而不限定本申请的适用范围。对于本领域的技术人员来说,在了解本申请的原理后,可能在不背离这一原理的情况下,可以对该流程进行任意修正和改变。然而这些修正和改变仍在本申请的范围之内。{{细菌计数方法或设备中培养基组合物的应用}}在一些实施例中,所述培养基组合物可以用于细菌计数的细菌培养。例如,快速培养细菌,满足例如电阻计数所需要的降低本底即减少颗粒性物质的要求。第一步,选取合适器皿进行细菌培养。在一些实施例中,所述细菌如上文所述,在此不再赘述。第二步,将所述培养基组合物加入到所述细菌中,对细菌进行培养,培养时间小于等于4小时。第三步,用细菌计数方法或设备测取组合物(含有细菌及其培养基的组合物)中的细菌数量,得到组合物中细菌数量的测取值。在一些实施例中,所述细菌计数方法可以包括电子计数、镜检、活细胞计数、细胞重量法等中的一种或其任意组合。所述细菌计数设备可以是采用如上所述的细菌计数方法实现细菌计数的设备。所述细菌浓度的测取值可以是利用所述细菌计数方法在现有步骤下或利用所述细菌计数设备在现有状态下对所述组合物中的细菌进行计数得到的数值。实现所述细菌计数的所有步骤或运行所述细菌计数设备即可得到所述测取值。优选的,所述细菌计数方法为电阻计数法。本申请实施例可能带来的有益效果包括但不限于:本申请所披露的组合物可以用于细菌计数设备或方法中的细菌的加速培养,其准确性高、稳定性好、速度快。需要说明的是,不同实施例可能产生的有益效果不同,在不同的实施例里,可能产生的有益效果可以是以上任意一种或几种的组合,也可以是其他任何可能获得的有益效果。具体实施方式下面将参考若干示例性实施方式来描述本发明的原理和精神。应当理解,给出这些实施方式仅仅是为了使本领域技术人员能够更好地理解进而实现本发明,而并非以任何方式限制本发明的范围。相反,提供这些实施方式是为了使本申请公开更加透彻和完整,并且能够将本申请公开的范围完整地传达给本领域的技术人员。下面通过具体实施例对本申请做进一步阐述。实施例1-培养基组合物的制备制备过程如下:第一步,将容器放入超声波清洗仪中进行清洗,清洗完成后用纯水冲洗三遍。第二步,将mh肉汤、脑心浸液按配方称量,用水溶解。第三步,对溶解物进行过滤,首先通过0.4μm滤膜进行初次过滤,然后通过0.22μm滤膜进行一次、二次或三次过滤降低颗粒性物质的存在,即按照表中标识的不同配比的过滤条件进行过滤。第四步,对过滤后的培养基组合物进行高压湿热灭菌。第五步,灭菌后的培养基组合物在35℃下培养48h,对灭菌培养后的培养基组合物进行无菌性检查,并接种临床常见细菌检验培养基的培养能力。35℃下培养48h只是一个示例,温度可在30℃至40℃之间培养36小时至72小时。培养基组合物的配方组成见表1。表1.主要成分mh脑心浸液纯水a培养基组方21g/l12g/l1lb培养基组方5g/l40g/l1lc培养基组方27g/l5g/l1ld培养基组方0.5g/l60g/l2le培养基组方40g/l0.5g/l2lf培养基组方4g/l10g/l2lg培养基组方20g/l30g/l2lh培养基组方10g/l50g/l1li培养基组方18g/l15g/l1lj培养基组方25g/l20g/l1l实施例2-培养基组合物的制备制备过程如下:第一步,将容器放入超声波清洗仪中进行清洗,清洗完成后用纯水冲洗三遍。第二步,将mh肉汤21g/l(克每升)、脑心浸液12g/l称量,用1l水溶解。第三步,对溶解物进行过滤,首先通过0.4μm(微米)滤膜进行初次过滤,然后通过0.22μm滤膜进行三次过滤降低颗粒性物质的存在。第四步,对过滤后的培养基组合物进行高压湿热灭菌。第五步,灭菌后的培养基组合物在35℃下培养48h,对灭菌培养后的培养基组合物进行无菌性检查,并接种临床常见细菌检验培养基的培养能力,备用,得到a培养基组方组合物。实施例3-培养基组合物的制备制备过程如下:第一步,将容器放入超声波清洗仪中进行清洗,清洗完成后用纯水冲洗两遍。第二步,将mh肉汤5g/l(克每升)、脑心浸液40g/l称量,用1l水溶解。第三步,对溶解物进行过滤,首先通过0.4μm(微米)滤膜进行初次过滤,然后通过0.22μm滤膜进行一次过滤降低颗粒性物质的存在。第四步,对过滤后的培养基组合物进行高压湿热灭菌。第五步,灭菌后的培养基组合物在35℃下培养48h,对灭菌培养后的培养基组合物进行无菌性检查,并接种临床常见细菌检验培养基的培养能力,备用,得到b培养基组方组合物。实施例4-培养基组合物的制备制备过程如下:第一步,将容器放入超声波清洗仪中进行清洗,清洗完成后用纯水冲洗两遍。第二步,将mh肉汤27g/l(克每升)、脑心浸液5g/l称量,用1l水溶解。第三步,对溶解物进行过滤,首先通过0.4μm(微米)滤膜进行初次过滤,然后通过0.22μm滤膜进行二次过滤降低颗粒性物质的存在。第四步,对过滤后的培养基组合物进行高压湿热灭菌.第五步,灭菌后的培养基组合物在35℃下培养48h,对灭菌培养后的培养基组合物进行无菌性检查,并接种临床常见细菌检验培养基的培养能力,备用,得到c培养基组方组合物。实施例5-培养基组合物的制备制备过程与实施例2至实施例4类似,按照实施例1中的培养基组合物的配方组成制备d培养基组方组合物、e培养基组方组合物、f培养基组方组合物、g培养基组方组合物、h培养基组方组合物、i培养基组方组合物、j培养基组方组合物。实施例6-最优培养基组合物配方筛选目的:通过制备培养基组合物,筛选出能够保证临床常见的细菌快速生长,能够在尽量短的时间(1-4)小时达到细菌计数的目的,即满足快速电阻计数细菌数量的目的。实验步骤:将容器放入超声波清洗仪中进行清洗,清洗完成后用纯水冲洗三遍;按照配方的要求进行称量、溶解;对溶解好的试剂进行初次过滤(0.4μm滤膜),过滤完成后分别用0.22μm滤膜过滤三次,进行电阻计数并进行结果记录,也可直接采用实施例2-实施例4的培养基组合物进行试验。分别记录在培养基中接种50cfu/ml的大肠埃希菌(atcc25922)、铜绿假单胞菌(atcc27853)、金黄色葡萄球菌(atcc25923)、粪肠球菌(atcc29212)、肺炎链球菌(atcc49619)在达到200左右计数的值所需要的时间,试验结果见表2所示。表2时间/h为时间/小时实验结果分析:根据试验结果中五株标准菌株,在上述配方范围内均能满足4个小时细菌生长达到电阻计数值为200左右,其中mh与脑心浸液不同的配比会导致各种细菌电阻计数达到200时的生长时长不一致,其中a培养基组方为最优的配比,五种标准菌株生长所需时间最短,即为最优值。实施例7-培养基组合物制备工艺的筛选目的:通过制备培养基组合物,筛选最优的过滤方式除去颗粒性物质保证培养基能够满足细菌培养电阻计数的要求。实验步骤:1.将容器放入超声波清洗仪中进行清洗,清洗完成后用纯水冲洗三遍;2.按照a培养基组方的要求进行称量、溶解;3.对溶解好的试剂进行初次过滤(0.4μm滤膜),过滤完成后分别用0.22μm滤膜过滤一次、两次、三次,进行电阻计数,记录颗粒性物质的数量,结果见表3所示;表3实验结果分析:根据试验结果分析滤膜过滤一次除去了43%的颗粒性物质,过滤两次除去了92.6%的颗粒性物质,过滤三次除去了98.6%的颗粒性物质,完全达到了降低细菌计数的本底的要求,可见对溶解好的试剂进行0.4μm滤膜初次过滤,过滤完成后分别用0.22μm滤膜过滤三次后的培养基组合物的除去颗粒性物质的效果最佳,能满足电阻细菌计数对颗粒性物质极少的要求,产生了意想不到的效果。上文已对基本概念做了描述,显然,对于本领域技术人员来说,上述详细披露仅仅作为示例,而并不构成对本申请的限定。虽然此处并没有明确说明,本领域技术人员可能会对本申请进行各种修改、改进和修正。该类修改、改进和修正在本申请中被建议,所以该类修改、改进、修正仍属于本申请示范实施例的精神和范围。同时,本申请使用了特定词语来描述本申请的实施例。如“一个实施例”、“一实施例”、和/或“一些实施例”意指与本申请至少一个实施例相关的某一特征、结构或特点。因此,应强调并注意的是,本说明书中在不同位置两次或多次提及的“一实施例”或“一个实施例”或“一个替代性实施例”并不一定是指同一实施例。此外,本申请的一个或多个实施例中的某些特征、结构或特点可以进行适当的组合。此外,本领域技术人员可以理解,本申请的各方面可以通过若干具有可专利性的种类或情况进行说明和描述,包括任何新的和有用的工序、机器、产品或物质的组合,或对他们的任何新的和有用的改进。此外,除非权利要求中明确说明,本申请所述处理元素和序列的顺序、数字字母的使用、或其他名称的使用,并非用于限定本申请流程和方法的顺序。尽管上述披露中通过各种示例讨论了一些目前认为有用的发明实施例,但应当理解的是,该类细节仅起到说明的目的,附加的权利要求并不仅限于披露的实施例,相反,权利要求旨在覆盖所有符合本申请实施例实质和范围的修正和等价组合。同理,应当注意的是,为了简化本申请披露的表述,从而帮助对一个或多个发明实施例的理解,前文对本申请实施例的描述中,有时会将多种特征归并至一个实施例或对其的描述中。但是,这种披露方法并不意味着本申请对象所需要的特征比权利要求中提及的特征多。实际上,实施例的特征要少于上述披露的单个实施例的全部特征。一些实施例中使用了描述成分、属性数量的数字,应当理解的是,此类用于实施例描述的数字,在一些示例中使用了修饰词“大约”、“近似”或“大体上”来修饰。除非另外说明,“大约”、“近似”或“大体上”表明所述数字允许有±20%的变化。相应地,在一些实施例中,说明书和权利要求中使用的数值参数均为近似值,该近似值根据个别实施例所需特点可以发生改变。在一些实施例中,数值参数应考虑规定的有效数位并采用一般位数保留的方法。尽管本申请一些实施例中用于确认其范围广度的数值域和参数为近似值,在具体实施例中,此类数值的设定在可行范围内尽可能精确。针对本申请引用的每个专利、专利申请、专利申请公开物和其他材料,如文章、书籍、说明书、出版物、文档等,特此将其全部内容并入本申请作为参考。与本申请内容不一致或产生冲突的申请历史文件除外,对本申请权利要求最广范围有限制的文件(当前或之后附加于本申请中的)也除外。需要说明的是,如果本申请附属材料中的描述、定义、和/或术语的使用与本申请所述内容有不一致或冲突的地方,以本申请的描述、定义和/或术语的使用为准。最后,应当理解的是,本申请中所述实施例仅用以说明本申请实施例的原则。其他的变形也可能属于本申请的范围。因此,作为示例而非限制,本申请实施例的替代配置可视为与本申请的教导一致。相应地,本申请的实施例不仅限于本申请明确介绍和描述的实施例。当前第1页1 2 3 
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