技术总结
本发明公开一种利用多重定量PCR技术检测样品中多种病毒的方法，包括以下步骤：(1)通过待检测病毒DNA和/或RNA序列进行Blast比对，设计并优化针对多种待检测病毒的特异性引物及探针；(2)利用步骤(1)的特异性引物和探针来优化多重qPCR的反应条件，获得了优选的反应条件；(3)通过稀释病毒原液和经典的细胞斑块实验，确定目标病毒基因标准品的制备方法，进而通过ABI 7500 PCR仪器检测梯度稀释的标准品，产生标准曲线；(4)采用一步法TaqMan检测试剂盒，按照所述步骤(2)得到的优选的反应条件进行检测；根据步骤(3)的标准曲线计算检测结果。本发明的方法具有高特异性和灵敏性，使用该标准品生成的标准曲线，线性关系和相关系数好，孔间差异小，重复性高。
技术研发人员：陈源源;管春爱;汪景长;童涌
受保护的技术使用者：苏州药明检测检验有限责任公司
技术研发日：2019.12.25
技术公布日：2020.03.27