一种表达果胶酸内切水解酶的工程菌及其应用的制作方法

文档序号:20916388发布日期:2020-05-29 13:34阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种果胶酸内切水解酶,其特征在于,所述果胶酸内切水解酶氨基酸序列如seqidno.2所示。

2.编码权利要求1所述果胶酸内切水解酶的基因。

3.一种表达载体,其特征在于,所述表达载体表达权利要求1所述果胶酸内切水解酶或含有权利要求2所述基因。

4.根据权利要求3所述的表达载体,其特征在于,所述表达载体的核苷酸序列如seqidno.3所示。

5.一种工程菌或细胞系,其特征在于,所述工程菌或细胞系能够表达权利要求1所述果胶水解酶,或表达权利要求2所述基因,或含有权利要求3~5任一所述表达载体。

6.根据权利要求5所述的工程菌或细胞系,其特征在于,所述工程菌或细胞系是以枯草芽孢杆菌b.subtilis800为宿主。

7.一种制备权利要求1所述果胶水解酶的方法,其特征在于,所述方法是以权利要求5或6所述工程菌或细胞系为发酵菌株进行发酵产酶。

8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,所述方法是将权利要求5或6所述工程菌或细胞系进行活化培养得到菌液,将菌液进行诱导培养后得到发酵液,将发酵液进行纯化即得到权利要求1所述果胶水解酶。

9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,所述诱导培养是在菌液中加入终浓度为0.3~0.6mmiptg进行诱导,15~25℃培养22~26h。

10.权利要求1所述果胶水解酶,或权利要求2所述基因,或权利要求3~4任一所述表达载体,或权利要求5~6任一所述工程菌或细胞系在食品工业、生物能源工业和植物活性物质药物成分提取过程中破碎细胞壁的应用。


技术总结
本发明涉及一种表达果胶酸内切水解酶的工程菌及其应用,属于食品工程领域、生物工程和微生物工程领域。本发明使用食品安全级的枯草杆菌B.subtilis800为宿主,在果胶酸内切水解酶基因(npg)的上下游分别融合编码特定多肽(SSSSHHHHHHHHSSS和SSHHHHSS)的核苷酸序列,并整合至枯草芽孢杆菌表达载体pBSCWZ,构建高效表达果胶酸内切水解酶的表达质粒(npg/pBSCWZ)和工程菌(npg/pBSCWZ/B.subtilis 800),工程菌(npg/pBSCWZ/B.subtilis 800)表达食品级果胶酸内切水解酶的活性可达350U/mL。

技术研发人员:赵庆新;赵子润;朱华琛;康贻军;沈敏;刘忠权
受保护的技术使用者:盐城师范学院
技术研发日:2020.02.28
技术公布日:2020.05.29
当前第2页1 2 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1