本发明涉及医药领域，具体涉及含1,3-二甲基-5-芳氧基吡唑的β-咔啉衍生物及其制备方法和用途。
背景技术：
：近年来，恶性肿瘤严重威胁着人类健康。这就需要广大药物化学科研工作者寻找与发现高效的抗肿瘤药物。吡唑类衍生物是重要的氮杂环，近年来，许多吡唑类化合物对一些肿瘤细胞表现出优良的抑制作用。β-咔啉类化合物亦为一类重要的氮杂环化合物，某些β-咔啉衍生物具有较好的抗肿瘤效果。为了进一步从β-咔啉衍生物中探寻出具有优良抗肿瘤作用的药物，有机地将吡唑结构与β-咔啉单元连接起来。本发明公开了一类具有药用价值的含1,3-二甲基-5-芳氧基吡唑的β-咔啉衍生物。技术实现要素：本发明的目的是提供对hepg2肿瘤细胞显示出优良抑制活性的一种含1,3-二甲基-5-芳氧基吡唑的β-咔啉衍生物。本发明的另一目的是提供上述化合物的制备方法。本发明的又一个目的是提供上述化合物在制备抗肿瘤细胞药物方面的用途。为解决上述技术问题，本发明提供含1,3-二甲基-5-芳氧基吡唑的β-咔啉衍生物，有如下的结构：本发明提供上述含1,3-二甲基-5-芳氧基吡唑的β-咔啉衍生物的制备方法，其特征在于包括以下的步骤：其中，中间体β-咔啉酰肼参照文献(chin.j.org.chem.2016,36,1431)的方法合成得到，中间体1,3-二甲基-5-芳氧基吡唑醛参照文献(molecules2017,22,2000)的方法合成得到。本发明公开的含1,3-二甲基-5-芳氧基吡唑的β-咔啉衍生物对hepg2等肿瘤细胞有良好的抑制活性。因此，可用来制备抗肿瘤细胞药物。具体实施方式为了便于对本发明的进一步了解，下面提供的实施例对其做了更详细的说明。这些实施例仅供叙述而并非用来限定本发明的范围或实施原则。实施例1：将8mmol中间体ⅱa溶于50ml丙酮，室温下加入中间体ⅲa9mmol，加好后，室温搅拌19小时。除去溶剂所得粗品通过硅胶柱层析纯化得目标物ia；1hnmr(400mhz,cdcl3):δ11.88(s,1h,nh),11.60(s,1h,nh),8.88(s,1h,ar-h),8.45(d,1h,j＝7.6hz,ar-h),8.39(s,1h,n＝ch),7.67-7.71(m,3h,ar-h),7.53-7.62(m,2h,ar-h),7.33(d,1h,j＝7.6hz,ar-h),7.24-7.26(m,2h,ar-h),7.07-7.14(m,3h,ar-h),3.89(s,3h,och3),3.57(s,3h,n-ch3),2.45(s,3h,ch3).实施例2：将5mmol中间体ⅱa溶于30ml二甲基亚砜(dmso)，室温下加入中间体ⅲb6mmol，加好后，加热至85℃反应13小时。除去溶剂所得粗品通过硅胶柱层析纯化得目标物ib；1hnmr(400mhz,cdcl3):δ11.88(s,1h,nh),11.57(s,1h,nh),8.88(s,1h,ar-h),8.45(d,1h,j＝8.0hz,ar-h),8.37(s,1h,n＝ch),7.67-7.71(m,3h,ar-h),7.52-7.62(m,3h,ar-h),7.33(t,1h,j＝7.2hz,ar-h),7.14(d,1h,j＝7.2hz,ar-h),7.02-7.05(m,2h,ar-h),3.90(s,3h,och3),3.62(s,3h,n-ch3),2.42(s,3h,ch3).实施例3：将8mmol中间体ⅱb溶于35ml正丙醇，室温下向其中加入中间体ⅲa8mmol，加好后，室温搅拌16小时。除去溶剂所得粗品通过硅胶柱层析纯化得目标物ic；1hnmr(400mhz,cdcl3):δ11.84(s,1h,nh),11.56(s,1h,nh),8.82(s,1h,ar-h),8.40(s,2h,ar-handn＝ch),8.13(s,2h,ar-h),7.60-7.70(m,2h,ar-h),7.09-7.31(m,7h,ar-h),3.89(s,3h,och3),3.56(s,3h,n-ch3),2.45(s,3h,ch3).实施例4：将6mmol中间体ⅱb溶于30ml四氢呋喃，室温下向其中加入中间体ⅲc5mmol，加好后，室温搅拌26小时。除去溶剂所得粗品通过硅胶柱层析纯化得目标物id；1hnmr(400mhz,cdcl3):δ11.85(s,1h,nh),11.59(s,1h,nh),8.83(s,1h,ar-h),8.41(s,2h,ar-handn＝ch),8.13(s,2h,ar-h),7.58-7.70(m,4h,ar-h),7.19-7.32(m,3h,ar-h),7.01(s,2h,ar-h),3.89(s,3h,och3),3.56(s,3h,n-ch3),2.46(s,3h,ch3).实施例5：将10mmol中间体ⅱb溶于35ml乙醇，室温搅拌下向其中加入中间体ⅲd13mmol，加好后，加热回流反应8小时。除去溶剂所得粗品通过硅胶柱层析纯化得目标物ie；1hnmr(400mhz,cdcl3):δ11.84(s,1h,nh),11.56(s,1h,nh),8.82(s,1h,ar-h),8.43(d,1h,j＝7.6hz,ar-h),8.39(s,1h,n＝ch),8.15(d,2h,j＝8.4hz,ar-h),7.71(d,1h,j＝8.0hz,ar-h),7.60(t,1h,j＝7.6hz,ar-h),7.32(t,1h,j＝7.6hz,ar-h),7.20(d,2h,j＝8.4hz,ar-h),6.94-7.00(m,4h,ar-h),3.89(s,3h,och3),3.71(s,3h,och3),3.54(s,3h,n-ch3),2.45(s,3h,ch3).实施例6：将4mmol中间体ⅱb溶于35ml苯，室温下加入中间体ⅲb5mmol，加好后，加热回流反应10小时。除去溶剂所得粗品通过硅胶柱层析纯化得目标物if；1hnmr(400mhz,cdcl3):δ11.85(s,1h,nh),11.53(s,1h,nh),8.83(s,1h,ar-h),8.43(d,1h,j＝7.6hz,ar-h),8.38(s,1h,n＝ch),8.14(d,2h,j＝7.6hz,ar-h),7.71(d,2h,j＝7.6hz,ar-h),7.60(t,1h,j＝7.6hz,ar-h),7.32(t,1h,j＝6.8hz,ar-h),7.21(d,2h,j＝7.2hz,ar-h),7.04(d,2h,j＝6.0hz,ar-h),3.89(s,3h,och3),3.61(s,3h,n-ch3),2.42(s,3h,ch3).实施例7：将9mmol中间体ⅱb溶于30ml1，4-二氧六环，室温下向其中加入中间体ⅲe8mmol，加好后，室温搅拌15小时。除去溶剂所得粗品通过硅胶柱层析纯化得目标物ig；1hnmr(400mhz,cdcl3):δ11.85(s,1h,nh),11.57(s,1h,nh),8.83(s,1h,ar-h),8.41(s,2h,ar-handn＝ch),8.14(d,2h,j＝7.6hz,ar-h),7.71(d,1h,j＝7.6hz,ar-h),7.60(s,1h,ar-h),7.07-7.32(m,4h,ar-h),6.86(d,2h,j＝5.6hz,ar-h),3.89(s,3h,och3),3.60(s,3h,n-ch3),2.44(s,3h,ch3).实施例8：样品对肿瘤细胞的活性筛选采用四甲基氮唑蓝比色法(mtt)测定了化合物的体外抗肿瘤活性。测试对象为人肝癌细胞hepg2。选择5-氟尿嘧啶(5-fu)作为阳性对照药。取处于指数生长期的人肝癌细胞hepg2制成4×103个细胞/ml的细胞悬液，接种于96孔板中，在co2培养箱中培养36小时。将待测化合物的供试液(10μl)加入测试孔中，每个浓度设平行孔，并使用等量的dmso作空白对照，在co2培养箱中培养24小时，然后弃上清液，每孔加入10μl5％的mtt，培养4小时，吸弃上清液，每孔加入100μldmso，在振动器振荡20分钟，用酶标仪在570nm波长测定od值，计算细胞抑制率。细胞抑制率＝(阴性对照组od值-受试物组od值)/阴性对照组od值×100％，通过机率单位加权回归法计算出化合物的ic50值。表1.ia-ig的细胞毒性数据(ic50,μm)化合物hepg2ia2.07ib0.82ic1.06id1.44ie0.14if0.90ig1.145-fu37.80由实验结果(表1)可发现，化合物ia-ig对人肝癌细胞株hepg2均显示出较好的抑制活性，都好于阳性对照药5-氟尿嘧啶(5-fu)的药效。以上结果说明有机地将吡唑结构与β-咔啉单元连接在一起，得到的化合物对人肝癌细胞株hepg2表现出较好的抗肿瘤作用。以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实例的限制，上述实例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等同物界定。当前第1页12