一种检测血浆游离DNA中EGFR基因T790M突变的引物对及试剂盒的制作方法

文档序号:24240896发布日期:2021-03-12 13:15阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种检测血浆游离dna中egfr基因t790m突变的引物对,由上游引物与下游引物组成,其特征在于,上游引物由引物1与引物2组成;引物1由模板完全匹配区序列、spacer、模板不匹配区序列、模板匹配区序列、突变碱基适配区序列依次连接组成;引物2由所述模板不匹配区序列、模板匹配区序列、突变碱基适配区序列依次连接组成。

2.根据权利要求1所述检测血浆游离dna中egfr基因t790m突变的引物对,其特征在于,模板完全匹配区序列的长度为20~30bp,spacer为spacerc3、spacerc6、spacerc9或者spacerc18;模板匹配区序列的长度为8~12bp。

3.根据权利要求1所述检测血浆游离dna中egfr基因t790m突变的引物对,其特征在于,模板完全匹配区序列为seqidno.1;模板不匹配区序列、模板匹配区序列、突变碱基适配区序列依次连接组成的序列为seqidno.2。

4.一种检测血浆游离dna中egfr基因t790m突变的引物体系,包括检测引物、内控引物;其特征在于,所述检测引物由权利要求1所述上游引物与下游引物组成。

5.根据权利要求4所述检测血浆游离dna中egfr基因t790m突变的引物体系,其特征在于,下游引物的序列为seqidno.3;内控引物为seqidno.4、seqidno.5。

6.一种检测血浆游离dna中egfr基因t790m突变的试剂盒,其特征在于,包括权利要求4所述检测血浆游离dna中egfr基因t790m突变的引物体系。

7.根据权利要求6所述检测血浆游离dna中egfr基因t790m突变的试剂盒,其特征在于,还包括taqman探针、内控探针。

8.权利要求1所述检测血浆游离dna中egfr基因t790m突变的引物对、权利要求4所述检测血浆游离dna中egfr基因t790m突变的引物体系或者权利要求6所述检测血浆游离dna中egfr基因t790m突变的试剂盒在检测血浆游离dna中egfr基因t790m突变中的应用;或者权利要求1所述检测血浆游离dna中egfr基因t790m突变的引物对、权利要求4所述检测血浆游离dna中egfr基因t790m突变的引物体系或者权利要求6所述检测血浆游离dna中egfr基因t790m突变的试剂盒在制备检测血浆游离dna中egfr基因t790m突变试剂盒中的应用。

9.血浆游离dna中egfr基因t790m突变的扩增方法,其特征在于,采用权利要求1所述检测血浆游离dna中egfr基因t790m突变的引物对为扩增引物。

10.检测血浆游离dna中egfr基因t790m突变的方法,其特征在于,采用权利要求1所述检测血浆游离dna中egfr基因t790m突变的引物对为检测引物。


技术总结
本发明公开了一种检测血浆游离DNA中EGFR基因T790M突变的引物对及试剂盒,由上游引物与下游引物组成,上游引物由引物1与引物2组成;引物1由模板完全匹配区序列、Spacer、模板不匹配区序列、模板匹配区序列、突变碱基适配区序列依次连接组成;引物2由所述模板不匹配区序列、模板匹配区序列、突变碱基适配区序列依次连接组成。创造性的设计引物2没有长片段的辅助,无法在起始阶段扩增,只能对第一步PCR反应的产物进行扩增,确保特异性,相对于常规引物,本发明提高了ARMS灵敏度。

技术研发人员:孙石磊;姬云
受保护的技术使用者:苏州科诺医学检验实验室有限公司
技术研发日:2020.12.29
技术公布日:2021.03.12
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