一种提高雨生红球藻生物量和虾青素产量的方法

文档序号:31678000发布日期:2022-09-28 03:48阅读:来源:国知局

技术特征:
1.一种提高雨生红球藻的生物量和虾青素的方法,其特征在于,所述提高雨生红球藻的生物量和虾青素的方法包括:将配制的l-苹果酸母液添加到诱导种子液中,进行培养,诱导雨生红球藻生物量和虾青素的积累;利用有机溶剂提取虾青素,并测定虾青素浓度以及雨生红球藻生物量。2.如权利要求1所述提高雨生红球藻的生物量和虾青素的方法,其特征在于,所述提高雨生红球藻的生物量和虾青素的方法具体包括:步骤一,配制bg-11培养基并灭菌,将培养至对数生长期的雨生红球藻种子液接种到培养基中进行培养;步骤二,配制缺氮bg-11培养基并灭菌,用缺氮bg-11培养基将步骤一中的种子液稀释作为诱导种子液;步骤三,配制l-苹果酸母液,将配制好的母液添加到步骤二已稀释好的诱导种子液中;对该种子液持续通入无菌空气,培养,诱导雨生红球藻生物量和虾青素的积累;步骤四,利用有机溶剂提取虾青素,使用分光光度法测定虾青素浓度;使用干重法测定雨生红球藻生物量。3.如权利要求2所述提高雨生红球藻的生物量和虾青素的方法,其特征在于,在步骤一中培养温度为24~26℃,光照强度为1900~2100lux,使藻细胞浓度达到1.0
×
106cells ml-1
。4.如权利要求2所述提高雨生红球藻的生物量和虾青素的方法,其特征在于,在步骤二中种子液稀释至3.0
×
105cells ml-1
作为诱导种子液。5.如权利要求2所述提高雨生红球藻的生物量和虾青素的方法,其特征在于,在步骤三中用超纯水配制浓度为350mmol l-1
的l-苹果酸母液,诱导种子液中l-苹果酸终浓度达到0.5~2mmol l-1
;所述种子液持在温度为27~29℃,光照强度为18000~20000lux条件下培养15天诱导雨生红球藻生物量和虾青素的积累。6.如权利要求2所述提高雨生红球藻的生物量和虾青素的方法,其特征在于,在步骤四中利用有机溶剂提取虾青素包括:在反应器补液后,取5ml藻液,3500rpm离心5分钟,弃上清,得到藻细胞沉淀;向藻细胞沉淀中加入2ml含有30%(v/v)甲醇和5%(w/w)氢氧化钾的水溶液,65℃水浴15分钟,3500rpm离心5分钟;弃上清,加入纯水洗涤2次,去除碱液残留,加入5ml二甲基亚砜,于45℃水浴超声至藻体泛白。7.如权利要求2所述提高雨生红球藻的生物量和虾青素的方法,其特征在于,在步骤四中离心收集上清,利用分光光度计测定od
490nm
;按如下公式计算:虾青素浓度c(mg l-1
)=4.5
×
od
490nm
×v二甲基亚砜
/v
藻液
。8.如权利要求2所述提高雨生红球藻的生物量和虾青素的方法,其特征在于,在步骤四中生物量浓度的具体测定方法为:每隔一天用无菌水向鼓泡塔式光生物反应器进行补液,取10ml藻细胞培养液,3500rpm离心5分钟,弃上清,用超纯水洗2次,转移至提前称重的1.5ml离心管中,12000rpm离心2分钟,弃上清,冷冻干燥至恒重,称取藻细胞干重;按如下公式计算:生物量(g l-1
)=干重(g)/藻液体积(l)。9.一种具有抗氧化、抗炎、抗凋亡、保护神经的膳食补充剂,其特征在于,所述膳食补充剂包含权利要求1~8任意一项所述提高雨生红球藻的生物量和虾青素的方法制备的虾青素。10.一种具有保护皮肤、保护肝肾的膳食补充剂,其特征在于,所述膳食补充剂包含权
利要求1~8任意一项所述提高雨生红球藻的生物量和虾青素的方法制备的虾青素。

技术总结
本发明属于生物工程技术领域,公开了一种提高雨生红球藻生物量和虾青素产量的方法,配制BG-11培养基并灭菌,将培养至对数生长期的雨生红球藻种子液接种到培养基中进行培养;配制缺氮BG-11培养基并灭菌,用缺氮BG-11培养基将步骤一中的种子液稀释作为诱导种子液;配制L-苹果酸母液,将配制好的母液添加到步骤二已稀释好的诱导种子液中;对该种子液持续通入无菌空气,培养,诱导雨生红球藻生物量和虾青素的积累;利用有机溶剂提取虾青素,使用分光光度法测定虾青素浓度;使用干重法测定雨生红球藻生物量。本发明的虾青素具有抗氧化、抗炎、抗凋亡、保护神经、保护皮肤、保护肝肾等作用,可作为一种膳食补充剂进行应用。作为一种膳食补充剂进行应用。作为一种膳食补充剂进行应用。


技术研发人员:余旭亚 刘颖艺 肖云云
受保护的技术使用者:昆明理工大学
技术研发日:2022.06.10
技术公布日:2022/9/27
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