技术特征：
1.一种用于肿瘤相关成纤维细胞提取和培养的装置，其特征在于，所述的装置包括培养皿和设置在培养皿中的样品架，以及上覆盖和下覆盖；样品架上设有若干垂直向下的样品孔，每个样品孔内的底部分别设有一个样品柱。2.根据权利要求1所述的用于肿瘤相关成纤维细胞提取和培养的装置，其特征在于，所述的装置中，样品架的上部在样品孔外设有搁置条，通过将样品架周围的搁置条卡置在培养皿的侧壁外沿上，使样品孔悬浮在培养皿中，而不沉入培养皿底部。3.根据权利要求2所述的用于肿瘤相关成纤维细胞提取和培养的装置，其特征在于，所述的装置中，样品柱为梯形圆台状，位于样品孔的底端；样品柱通过若干纤维丝与所在的样品孔连接，将样品柱粘合固定在样品孔内的底部中央位置，样品柱的底部与样品孔的内侧孔壁之间留有空隙；样品柱的梯形圆台上表面和侧壁上均匀地喷涂了减少细胞黏附的涂层。4.根据权利要求3所述的用于肿瘤相关成纤维细胞提取和培养的装置，其特征在于，所述的装置中，在样品孔的底部周围设有环形的样品孔磁条。5.根据权利要求4所述的用于肿瘤相关成纤维细胞提取和培养的装置，其特征在于，所述的装置中，上覆盖扣置在培养皿的顶部，将培养皿和样品孔覆盖；下覆盖设置在培养皿的底部，下覆盖内镶嵌有环形的下覆盖磁条，与样品孔磁条的尺寸对应且磁力相斥。6.一种根据权利要求1～5中任意一项所述的装置用于肿瘤相关成纤维细胞提取和培养的方法，其特征在于，该方法包含：步骤1，取肿瘤组织块，冰上分离筋膜、血管和腐败组织，用手术刀将组织切片，放入离心管内，加入含抗生素且预冷的洗涤液，通过水平脱色摇床进行洗涤；步骤2，使用移液器吸取组织块，转入新的离心管内，加入含抗生素且预冷的洗涤液，通过水平脱色摇床进行洗涤；步骤3，再使用移液器吸取组织块，转入新的离心管内，加入红细胞裂解液，通过水平脱色摇床洗涤，去除组织内造成污染的红细胞；步骤4，使用移液器吸取组织块，转入新的离心管内，加入含抗生素且预冷的洗涤液，通过水平脱色摇床洗涤，共洗涤3次；步骤5，将洗涤完成的组织块以最大表面积向下的方式，放入样品架的样品孔内的样品柱上，并贴合样品柱的平台表面，再将样品架放入培养箱内无血清培养20分钟；步骤6，在培养皿内加入含有抗生素的完全培养基，再将步骤5中的装有组织块并进行无血清培养后的、设有样品孔的样品架置入培养皿内，通过增加或减少培养基，以保证完全培养基浸没样品柱上的组织；步骤7，将插入样品孔的培养皿，放置在下覆盖上并旋转调整角度，以保证样品孔因磁力相斥而悬浮在培养皿内，然后进行培养。7.根据权利要求6所述的用于肿瘤相关成纤维细胞提取和培养的方法，其特征在于，所述的方法中，洗涤液的用量为25mg组织块加入500μl洗涤液；红细胞裂解液的用量与洗涤液的用量相同。8.根据权利要求6所述的用于肿瘤相关成纤维细胞提取和培养的方法，其特征在于，所述的步骤1中，组织切片的大小为2mm
×
2mm
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1mm的薄片。9.根据权利要求6所述的用于肿瘤相关成纤维细胞提取和培养的方法，其特征在于，所
述的步骤1和2中的洗涤，都采用水平脱色摇床，以90rpm洗涤10分钟；步骤3中是采用水平脱色摇床，以90rpm洗涤15分钟；步骤4中则是采用水平脱色摇床，每次以90rpm洗涤5分钟，共洗涤3次。10.根据权利要求6所述的用于肿瘤相关成纤维细胞提取和培养的方法，其特征在于，所述的步骤6中，完全培养基是采用dmem培养基，并按质量百分比计加入10％的胎牛血清。
技术总结
本发明公开了一种用于肿瘤相关成纤维细胞提取和培养的装置与方法，该装置包括培养皿和设置在培养皿中的样品架，以及上覆盖和下覆盖；样品架上设有若干垂直向下的样品孔，每个样品孔的底部分别设有一个样品柱。样品柱为梯形圆台状，通过纤维丝与所在的样品孔连接，将样品柱粘合固定在样品孔内的底部中央位置；样品柱的梯形圆台上喷涂了减少细胞黏附的涂层。样品孔底部和下覆盖内分别镶嵌有磁力相斥的磁条。本发明还提供了将该装置用于肿瘤相关成纤维细胞提取和培养的方法。本发明建立了更加高效、便捷、省时、减少污染的肿瘤相关成纤维细胞培养与维持等关键技术环节的改进方法，同时通过结构设计改变，提高了肿瘤相关成纤维细胞的提取效率。的提取效率。的提取效率。
技术研发人员：王佳谊 曾冰洁 马丽芳 杨义然 王先照 秦越洋 曹雷群
受保护的技术使用者：上海市胸科医院
技术研发日：2022.10.14
技术公布日：2022/12/19