1.一种将外源核酸序列多重插入表达cas9酶的细胞中的dna内的方法,所述酶同与靶dna互补的向导rna形成共定位复合物并以位点特异性方式切割所述靶dna,所述方法包括:
2.根据权利要求1所述的方法,其中,所述细胞是真核细胞。
3.根据权利要求1所述的方法,其中,所述细胞是酵母细胞、植物细胞或者动物细胞。
4.根据权利要求1所述的方法,其中,所述向导rna是约10个至约500个之间的核苷酸。
5.根据权利要求1所述的方法,其中,所述向导rna是约20个至约100个之间的核苷酸。
6.根据权利要求1所述的方法,其中,所述向导rna是tracrrna-crrna融合体。
7.根据权利要求1所述的方法,其中,所述dna是基因组dna、线粒体dna、病毒dna、或外源dna。
8.根据权利要求1所述的方法,其中,通过重组插入所述供体核酸序列。
9.根据权利要求1所述的方法,其中,通过同源重组插入所述供体核酸序列。
10.根据权利要求1所述的方法,其中,所述向导rna存在于质粒上。
11.根据权利要求1所述的方法,其中,所述供体核酸包括侧接所述剪切位点的臂或同源序列。
12.根据权利要求1所述的方法,其中,所述供体核酸包括用于除去所述切割位点的序列。