1.一种用于骨干载体的rnai表达框的表达框,其特征在于,所述用于骨干载体的rnai表达框包含启动子、mlh1基因互补序列、nos终止子序列,其中,所述启动子序列如序列表中seq id no.1的第59-2048位所示,所述mlh1基因互补序列如序列表中seq id no.1序列表1的2058-2788位所示,所述nos终止子序列如序列表中seq id no.1的2902-3154位所示。
2.一种用于切除权利要求1所述表达框的重组酶表达框,其特征在于,所述重组酶表达框包含干旱诱导的rab17启动子、cre重组酶和3at终止子序列,干旱诱导的所述rab17启动子如序列表中seq id no.1的第3160-4137位所示,cre重组酶如序列表中seq id no.1的第4140-5365位所示,3at终止子如序列表中seq id no.1的第5380-5849位所示。
3.根据权利要求2所述的重组酶表达框,其特征在于,所述重组酶表达框的特异识别位点包含方向一致的重组酶特异识别位点loxp,二者分别位于序列表1的1-34位和5879-5912位。
4.一种植物骨干载体,其特征在于,所述植物骨干载体包括权利要求1所述的用于骨干载体的rnai表达框和权利要求2所述的重组酶表达框。
5.根据权利要求4所述的植物骨干载体,其特征在于,所述植物骨干载体包含识别并引入突变的pegrna表达框和用于cas9蛋白表达和反转录酶表达的pe蛋白复合体。
6.根据权利要求5所述的植物骨干载体,其特征在于,所述pegrna表达框包含35s-cmyl-u6复合型启动子,spr抗性基因,hdv-polyt核酶+终止子,所述pegrna表达框位于序列表骨干载体序列的第6133-8771位,所述壮观霉素抗性基因spr用于替换为靶向目的dna片段的sgrna、sgrna骨架序列、逆转录模板rt和引物结合位点pbs、8 bp linker序列。
7.根据权利要求5所述的骨干载体,其特征在于,所述融合蛋白表达框包括zmubi启动子、经改造后的cas9切刻酶或其变体编码序列、逆转录酶m-mlv rt编码序列和35s终止子,所述表达框位于序列表seq id no.1的第8778-17149位。
8.利用权利要求5所述的骨干载体构建靶向载体的方法,其特征在于,所述方法包括:
9.一种权利要求1或2所述的表达框、权利要求3所述载体的应用,其特征在于,所述应用包括将所述表达框或所述重组载体转入植物细胞,使细胞同时含有针对靶标基因的pegrna和融合蛋白;并对生物体的基因组进行编辑,获得生物突变体,所述基因组序列的编辑为基因组序列的碱基替换、缺失和插入。
10.一种提高植物引导编辑效率的系统,其特征在于,所述植物引导编辑系统包含权利要求1或2所述的所有表达框或者权利要求3所述的骨干载体。