三七愈伤组织培养及其毛状根诱导方法

技术特征：

1.三七愈伤组织培养及其毛状根诱导方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的三七愈伤组织培养及其毛状根诱导方法，其特征在于，步骤（1）中，将外植体清洗的具体方法为：

3.根据权利要求1所述的三七愈伤组织培养及其毛状根诱导方法，其特征在于，步骤（1）中，外植体切成1.0-1.5cm小段。

4.根据权利要求1所述的三七愈伤组织培养及其毛状根诱导方法，其特征在于，步骤（2）中，暗培养时间为30天；光照培养时，光照强度为1400-1600lx，光照培养时间为50-60天。

5.根据权利要求1所述的三七愈伤组织培养及其毛状根诱导方法，其特征在于，步骤（3）中，摇床速度为200r/min；培养时间为8-12h；离心速度为4000 r/min，离心的时间为12min。

6.根据权利要求1所述的三七愈伤组织培养及其毛状根诱导方法，其特征在于，步骤（3）中，取上清液再次离心的具体参数为：以4000 r/min转速、4℃下离心12min。

7.根据权利要求1所述的三七愈伤组织培养及其毛状根诱导方法，其特征在于，步骤（4）中，将愈伤组织切成0.5cm×0.5cm的小块；共培养的培养时间为3-4天。

技术总结
本发明涉及一种三七愈伤组织培养及其毛状根诱导方法，属于植物组培技术领域。该方法包括外植体的处理、愈伤组织诱导培养、菌液制备和共培养几大步骤。以ArA4载体的农杆菌作为毛状根诱导的菌株，以选择三七茎杆诱导产生且培养得到的绿色胚性愈伤组织为研究对象，通过遗传转化试验，经50‑60d时间的试验，诱导出的三七根状植物组织，PCR验证确定本试验诱导出的三七根状植物组织，即为以ArA4菌株通过遗传转化诱导出的三七毛状根。本发明所获得的结果为三七基因功能验证，即三七皂苷合成通路探究提供试验基础和理论依据。

技术研发人员：张广辉,冯垒,杨生超,赵艳,马春花,刘祥宇,吴博霖,付瀚钰,段美玉,谭凤灵,贺雪颖,张双艳,寸竹,韩堂珍,徐文娟,朱金玉,李霞
受保护的技术使用者：云南农业大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15