一种假单胞菌及由其发酵制得的微生物絮凝剂的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于微生物絮凝剂领域。具体而言，本发明涉及一种能够发酵生产微生物 絮凝剂的新型假单胞菌，以及由其发酵制得的微生物絮凝剂。
【背景技术】
[0002] 喷漆室是专供喷涂液态涂料的涂装室，是工业涂装车间的关键设备之一。随着现 代涂装工艺的发展，喷涂用量日益增加，由此在喷涂过程中也出现喷漆不能涂覆到工件上 而成为"过喷"漆雾的问题。
[0003] "过喷"漆雾含有大量不利于人体健康的挥发性有机溶剂，严重污染周围环境和空 气。涂料粘在地上难以清理，还会进入循环水中造成环境污染，并且涂料资源被浪费，对设 备、管道也造成腐蚀堵塞等危害。
[0004] 对于喷漆室内循环水处理的方式主要包括机械刮除法、吸附絮凝分离法等。絮凝 剂是一类可以使液体中的胶体和悬浮颗粒絮凝成较大的絮凝体沉淀或者上浮的物质。絮凝 剂主要分为三大类：无机絮凝剂、有机絮凝剂和微生物絮凝剂。无机絮凝剂主要包括铝盐和 铁盐。但铝盐产生的污泥广泛应用于农业，导致土壤中铝含量升高，植物出现铝害，从而影 响植物正常生长，甚至死亡；同时伴随这些农作物进入食物链影响到人体的健康。铁盐对金 属有腐蚀作用，也可造成处理水中带有颜色，且高浓度的铁对人体健康和生态环境均有不 利影响。并且有机絮凝剂中得到最广泛应用的是聚丙烯酰胺，其单体更是具有强烈的神经 毒性与致癌性。
[0005] 微生物絮凝剂是一类由微生物产生的有絮凝活性的高分子代谢产物，成分有糖蛋 白、多糖、蛋白质、纤维素和DNA等。它是利用微生物技术，通过细菌、真菌等微生物发酵、提 取、精制而得到的，具有生物分解性和安全性的新型、高效、无毒、无二次污染的水处理剂。 微生物絮凝剂是目前国内外研宄的热点。
【发明内容】
[0006] 针对上述问题，本发明的目的是提供一种新型假单胞菌，该假单胞菌具有生长速 度快、稳定性强的特点，并且可以发酵制得能够高效絮凝漆雾废水的新的微生物絮凝剂，因 此本发明的假单胞菌具有良好的应用前景。
[0007] 本发明的上述目的是通过以下技术方案实现的：
[0008] -方面，本发明提供一种假单胞菌（Pseudomonassp. )FL_1，所述假单胞菌种的保 藏编号为CGMCCNo. 9379。
[0009] 本发明所提供的菌株为门多萨假单胞菌FL-1，是从江苏韩一模塑有限公司的废水 中分离得到的，已于2014年6月25日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物 中心（简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研宄所）， 保藏号为CGMCCNo. 9379。其具有以下生物学特性：在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基上，37°C下 培养24h，菌落产生，呈现为圆形，乳白色，边缘规整，光滑，有粘性。
[0010] 该囷株的16SrDNA基因序列测定结果如下序列所不：
[0011] SEQIDNO:l
【主权项】
1. 一种假单胞菌（Pseudomonas sp.)FL-l，其特征在于，所述假单胞菌的保藏编号为 CGMCC No. 9379〇
2. 权利要求1所述的假单胞菌在制备用于絮凝和/或降解漆雾废水的微生物絮凝剂中 的用途。
3. -种用于絮凝和/或降解漆雾废水的微生物絮凝剂，其特征在于，所述微生物絮凝 剂由权利要求1所述的假单胞菌发酵制得。
4. 根据权利要求3所述的微生物絮凝剂，其特征在于，所述微生物絮凝剂是权利要求 1所述的假单胞菌的发酵液，或者是所述发酵液的离心上清液，或者是从所述离心上清液中 提取的物质； 优选地，所述微生物絮凝剂由包括以下步骤的方法进行制备： 在大量发酵培养基中，在25-35°C下，以120-200r/min的转速，培养权利要求1所述的 假单胞菌60-80h，得到发酵液。
5. 根据权利要求3或4所述的微生物絮凝剂，其特征在于，所述微生物絮凝剂由包括以 下步骤的方法进行制备： (1) 采用牛肉膏蛋白胨琼脂培养基，制备所述假单胞菌的斜面； (2) 从步骤（1)制备的斜面挑取菌落接种到牛肉膏蛋白胨液体培养基，37°C下恒温培 养24h得到种子液，其中所述种子液中的菌浓度为2. 3X 106个/mL ; (3) 将步骤（2)制备的种子液按照种子液与大量发酵培养基的体积比为3%的量接种 至大量发酵培养基，在30°C、160r/min的条件下培养72h ; 任选地，所述方法还包括： (4) 将步骤（3)制备的发酵液在4°C下以8000r/min离心20min得到上清液； (5) 任选地，向步骤（4)制备的上清液中加入两倍体积的4°C下预冷的无水乙醇，4°C下 静置过夜，然后在与步骤（4)相同的条件下离心，倾去上清液，将沉淀于透析袋中透析48h， 然后冷冻干燥。
6. 根据权利要求3至5中任一项所述的微生物絮凝剂，其特征在于，所述步骤（1)中 牛肉膏蛋白胨琼脂培养基的配方为牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl 5g，琼脂15-20g，蒸馏水 lOOOmL ;所述步骤（2)中牛肉膏蛋白胨液体培养基的配方为牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl 5g，蒸馏水lOOOmL ;所述步骤（3)中大量发酵培养基配方的配方为葡萄糖20g，KH2P042g， K 2HP045g，（NH4)2S040. 2g，NaCl 0? lg，MgS04,7H20 0? 5g，尿素 0? 2g，酵母膏 0? 5g，蒸馏水 lOOOmL。
7. -种用于絮凝和/或降解漆雾废水的微生物絮凝组合物，其特征在于，所述微生物 絮凝组合物包含根据权利要求3至6中任一项所述的微生物絮凝剂。
8. 根据权利要求7所述的微生物絮凝组合物，其特征在于，所述微生物絮凝组合物还 包含阳离子，所述阳离子选自Na+、K +、Mg2+、Ca2+、CU2+、F e3+、Al3+中的一种或多种； 优选地，所述阳离子选自Na+、Ca2+、Fe 3+、Al3+中的一种或多种；更优选地，所述阳离子为 Fe3+〇
9. 一种絮凝和/或降解漆雾废水的方法，其特征在于，所述方法包括将权利要求1所述 的假单胞菌接种至漆雾废水中培养，或者将权利要求3至7中任一项所述的微生物絮凝剂 与漆雾废水混合，或者将权利要求7或8所述的微生物絮凝组合物与漆雾废水混合。
【专利摘要】本发明提供一种假单胞菌及其应用。本发明提供的假单胞菌的保藏编号为CGMCC No.9379，具有生长速度快、稳定性强、絮凝剂产量高、高效等特点，可以用于发酵生产微生物絮凝剂，特别是发酵生产用于絮凝漆雾废水的微生物絮凝剂。CGMCC No. 937920140625
【IPC分类】C12P1-04, C02F1-52, C02F3-34, C12N1-20, C12R1-38
【公开号】CN104531583
【申请号】CN201410844663
【发明人】董锐, 周冰倩
【申请人】盐城工学院
【公开日】2015年4月22日
【申请日】2014年12月30日