一种双水相耦合破壁技术从雨生红球藻中提取分离虾青素的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及化学提取技术领域，尤其涉及一种双水相耦合破壁技术从雨生红球藻 中提取分离虾青素的方法。
【背景技术】
[0002] 虾青素是唯一能通过血脑屏障的类胡萝卜素，研究表明，虾青素的抗氧化性比 ￠2胡萝卜素高了 10倍以上，同时它还比维生素E的抑制脂质过氧化反应特性高100倍以 上，被誉为"超级抗氧化剂"，已被广泛应用于保健食品、医药、化妆品及水产养殖业中，具 有极高的经济价值和保健作用。雨生红球藻是公认自然界中生产天然虾青素的最好生物来 源，雨生红球藻的虾青素含量最高可达3%以上，远高于其它原料，利用雨生红球藻提取虾 青素，极具大规模工业化生产潜力，具有广阔的发展前景，目前国内已开展雨生红球藻的 规模化养殖。
[0003] 雨生红球藻的厚壁孢子具有坚韧的细胞壁，其中的虾青素直接提取率较低。通常 需在提取前需将红球藻进行破壁处理，且虾青素属于热敏性较高的物质，提取过程中易于 分解。目前藻类常用的破壁方法主要有：珠磨法、高压均质法，冷冻法、匀浆法、超声波法、 冻融法、机械研磨法、液氮冷冻法、酶法和化学法等。提取则用氯仿、乙酸乙酯、乙醇等溶剂， 分离则先用过滤法使藻浆与溶液分离，得到粗提取物，再用大孔树脂纯化。
[0004]目前文献报道的提取方法如表1所示：
[0005]表1文献报道的方法
[0006]
【主权项】
1. 一种双水相耦合破壁技术从雨生红球藻中提取分离虾青素的方法，其特征在于：所 述方法的具体步骤如下： (1) 往雨生红球藻粉中加入硫酸铵溶液，两者固液比为1:1?5g/ml，然后浸泡0.5? 3h，再置于速冻机中迅速冷却至-15?-25°C，冷冻10?15h ; (2) 冷冻结束后，取出，常温解冻，然后按每克干藻粉加入3?9ml丙醇，置于180? 200r/min摇床振荡20?40min，静置5?15min ; (3) 待分相完全后，分去异丙醇上相，盐水相和藻粉重新置于速冻机中，按步骤（1)和 (2)的方法重复冷冻、丙醇萃取、分相三次，收集得到的全部丙醇相通过旋转蒸发仪真空蒸 馏蒸去异丙醇至糊状，加入l_4ml乙醇将固体物洗出，将所得到固体20-35°C真空干燥至 干，即得虾青素提取物。
2. 如权利要求1所述的双水相耦合破壁技术从雨生红球藻中提取分离虾青素的方法， 其特征在于：步骤（1)中，所述的硫酸铵溶液的质量浓度为25%，pH = 7. 0。
3. 如权利要求1所述的双水相耦合破壁技术从雨生红球藻中提取分离虾青素的方法， 其特征在于：步骤（1)中，雨生红球藻粉和硫酸铵溶液，两者固液比为l:3g/ml。
4. 如权利要求1所述的双水相耦合破壁技术从雨生红球藻中提取分离虾青素的方法， 其特征在于：步骤（1)中，浸泡lh。
5. 如权利要求1所述的双水相耦合破壁技术从雨生红球藻中提取分离虾青素的方法， 其特征在于：步骤（1)中，置于速冻机中迅速冷却至-20°C，冷冻12h。
6. 如权利要求1所述的双水相耦合破壁技术从雨生红球藻中提取分离虾青素的方法， 其特征在于：步骤（2)中，按每克干藻粉加入6ml丙醇。
7. 如权利要求1所述的双水相耦合破壁技术从雨生红球藻中提取分离虾青素的方法， 其特征在于：步骤（2)中，置于190r/min摇床振荡30min。
8. 如权利要求1所述的双水相耦合破壁技术从雨生红球藻中提取分离虾青素的方法， 其特征在于：步骤（2)中，静置lOmin。
9. 如权利要求1所述的双水相耦合破壁技术从雨生红球藻中提取分离虾青素的方法， 其特征在于：步骤（3)中，加入2ml乙醇，真空干燥温度25°C。
【专利摘要】本发明公开了一种双水相耦合破壁技术从雨生红球藻中提取分离虾青素的方法。本发明通过实验将双水相分离体系与冻融破壁技术耦合，通过双水相体系的引入，将破壁-提取-分离等过程耦合，可在破壁提取同时，通过简单的分液方法实现虾青素与藻渣、多种杂质成分的有效分离，明显提高了虾青素纯度和提取率。本发明减少了提取分离过程，同时冻融剂、提取剂与双水相体系成相物质一致，减少试剂种类和用量，所用试剂绿色环保，易于回收。
【IPC分类】C07C403-24
【公开号】CN104557651
【申请号】CN201410850677
【发明人】高云涛, 熊华斌, 刘晓海, 彭金辉, 李晓芬, 刘晓芳, 马肖艳, 杨洪巧, 张宏教
【申请人】云南民族大学
【公开日】2015年4月29日
【申请日】2014年12月31日