一种从白灵菇菇渣中提取纤维素粗酶的方法
【专利说明】一种从白灵菇菇渣中提取纤维素粗酶的方法
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技术领域
[0002]本专利属于农业中的食用菌废弃物深加工领域。
【背景技术】
[0003]本专利是一种针对农业领域中自白灵菇菇渣提取纤维素粗酶的方法。
[0004]白灵菇菇渣是指栽培白灵菇后的废弃培养基，目前，多用来作为燃料或肥料，既浪费了资源，又对环境造成了污染。菇渣中含有丰富的粗脂肪、粗蛋白以及粗纤维，但因其粗纤维含量过高，同时存在抗营养因子，因此严重制约了动物对白灵菇菇渣的消化率以及适口性，影响营养物质的有效利用，因此很少或通常不作为畜禽饲料。
[0005]纤维素酶是一种重要的酶产品，是一种复合酶，主要由外切葡聚糖酶、内切葡聚糖酶和葡萄糖苷酶等组成，还有很高活力的木聚糖酶活力。由于纤维素酶在饲料、酒精、纺织和食品等领域具有巨大的市场潜力，已被国内外业内人士看好，将是继糖化酶、淀粉酶和蛋白酶之后的第四大工业酶种，甚至在中国完全有可能成为第一大酶种，因此纤维素酶是酶制剂工业中的一个新的增长点。
[0006]在白灵菇菇渣中存在丰富的纤维素酶，如通过优化筛选的工艺，将纤维素酶从白灵菇菇渣中提取出来，不仅能够大幅度降低纤维素酶的提取成本而且能够实现白灵菇菇渣的循环利用，变废为宝，减少污染，实现经济效益与环境效益的统一。
[0007]
【发明内容】
[0008]本技术主要包括以下内容
1.对白灵菇菇渣进行预处理
2.采用浸提法将获得含有纤维素粗酶的上清液
3.将上清液加入一定比例的溶液进行盐析
4.将盐析后溶液进行离心沉淀。
[0009]5.将离心后沉淀进行透析。
[0010]6.二次离心
7.干燥，获得成品。
[0011]举例:采用本技术对白灵菇菇渣进行处理，每公斤干燥白灵菇菇渣可获得粗酶13.12克，其酶活为纤维素标准品的34%。
【具体实施方式】
[0012]本技术具体实施操作步骤如下:
1.预处理将白灵菇菇渣烘干至恒重，过60目筛。
[0013]2.浸提
以料水比1:15加入磷酸二氢钠缓冲液，震荡提取30分钟，经玻璃纤维以一次过滤，经双层纱布二次过滤，得到上清液。
[0014]3.盐析
按上清液与80%硫酸氨溶液1:2比例混合，在4°C下静置24小时。
[0015]4.离心沉淀
将盐析溶液进行冷冻离心，其工艺条件为离心温度4°C，离心速度为5000转/分钟，离心30分钟。
[0016]5.透析
取离心沉淀于半透膜中透析24小时。
[0017]6.二次离心
将透析后溶液进行二次冷冻离心，其工艺条件为:离心温度2°C，离心速度为5000转/分钟，离心20分钟.7.干燥
将离心后沉淀物于干燥箱中烘干至恒重后，既得粗酶成品。
【主权项】
1.自白灵菇菇渣中提取纤维素粗酶的优化工艺流程，其特征在于:优化后工艺流程为菇渣预处理一浸提一盐析一离心一透析一二次离心一干燥。
2.自白灵菇菇渣中提取纤维素粗酶中的浸提工艺，其特征在于:以料水比1:15加入磷酸二氢钠缓冲液，震荡提取30分钟。
3.白灵菇菇渣中提取纤维素粗酶中的盐析工艺，其特征在于:按上清液与80%硫酸氨溶液1:2比例混合，在4°C下静置24小时。
4.白灵菇菇渣中提取纤维素粗酶中的冷冻离心条件，其特征在于:其工艺条件为离心温度4°C，离心速度为5000转/分钟，离心30分钟。
【专利摘要】本发明属于农业中的食用菌废弃物深加工领域，是一种针对农业领域中自白灵菇菇渣提取纤维素粗酶的方法。由于白灵菇菇渣中存在丰富的纤维素酶，本技术经过优化提取工艺，经筛选得到以下工艺流程：菇渣预处理→浸提→盐析→离心→透析→二次离心→干燥，采用本技术对白灵菇菇渣进行处理，每公斤干燥白灵菇菇渣可获得粗酶13.克，其酶活为纤维素标准品的34%，具有极高的社会效益以及经济效益。
【IPC分类】C12N9-42
【公开号】CN104560916
【申请号】CN201310491009
【发明人】詹文蔚
【申请人】詹文蔚
【公开日】2015年4月29日
【申请日】2013年10月20日