裂褶菌菌丝球的制造方法及利用其的β-葡聚糖生产方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及裂褶菌菌丝球的制造方法及利用该方法的β-葡聚糖生产方法，更详细地讲，涉及如下的制造裂褶菌菌丝球的方法及能够通过这种方法高产地生产源于裂褶菌菌丝体的β-葡聚糖的方法:在培养裂褶菌菌丝体时，添加粘土矿物而增加了紧实度。
【背景技术】
[0002]裂裙菌(Schizophyllum commume)在分类学上属于担子菌类的伞菌目糙皮侧耳科裂褶菌属，在阔叶林的古木或树桩上以集群产生，随着发现裂褶菌的抗氧化、抗炎等的功效，对其关注度日益增加。
[0003]在培养蘑菇的菌丝体时，如果形成适当的颗粒大小，则氧气传递率提高，从而能够增加菌丝体的成长及二次代谢产物的生成量。另外，在坚硬颗粒的情况下，能够作为反复的培养接种源来再使用。这种紧实度高、适当大小的颗粒，顺利进行物质传递、氧气传递等，能够减少在通气和搅拌中使用的能量的消耗。相对于此，在菌丝体以块的形态(loosemycelia clump)聚集生长或者颗粒大小非常大的情况下,营养成分不能很好地传递到颗粒内部的菌丝体，因此相比于菌丝体量，酶的分泌、二次代谢产物形成量减少，在菌丝体中生成的细胞外分泌酶的生成量和分泌量出错，从而对特定物质的生物降解能力产生很大的影响。另外，在颗粒非常小的情况下，对菌丝体培养液的后处理工序、即菌丝体的过滤等产生很大的坏影响。
[0004]另一方面，裂褶菌存在如下问题:在菌丝体液体培养时，不能形成紧实度优异的颗粒(pellet)。因此，要求开发出紧实度优异的裂褶菌菌丝球的形成方法。
[0005]另一方面，葡聚糖(β-glucan)是在体内不会被消化、吸收的膳食纤维的一种，从酵母、蘑菇、谷类等以各种形态进行生产。这种β_葡聚糖具有抗癌效果、防止血栓形成效果、免疫力增加、糖尿病及成人疾病预防效果等，从而作为药品和食品添加剂来进行了利用。另外，具有皮肤保护、皮肤水分增加、弹力性提高等美容效果，从而还使用为化妆品原料。
[0006]最近，在与裂褶菌有关的各种研究中，发现裂褶菌生产的被称为葡聚糖的多糖体具有各种功效，作了很多努力，以从裂褶菌生产β -葡聚糖。
[0007]但是，目前实情是，还不能以满意的提取率生产葡聚糖，因此能够从裂褶菌高产地回收β_葡聚糖的方法的开发仍是迫切的。
[0008]在韩国授权专利第10-0909857号中，记载有“以高浓度生产β _1，6_支链-β -1, 3-葡聚糖的裂褶菌新菌株QG143-1和使用该菌株的β -1, 6-支链-β -1, 3-葡聚糖的制造方法”。
[0009]另外，在韩国授权专利第10-0892355号中记载有“基于裂褶菌菌丝体的半连续式液体培养的β -1, 3-葡聚糖批量生产方法”。
【发明内容】
[0010]本发明想要开发并提供能够制造紧实度优异的裂褶菌菌丝球的方法。
[0011]另外，本发明想要开发并提供能够高产地获得源于裂褶菌菌丝体的β-葡聚糖的方法。
[0012]本发明的第一方式，提供一种裂褶菌菌丝球(pellet)的制造方法，其特征在于，在培养裂褶菌的菌丝体时，添加粘土矿物。
[0013]属于担子菌类的白腐菌、裂褶菌，在液体培养菌丝体时不能形成紧实度优异的颗粒(pellet)。但是,通过本发明确认到,在将粘土矿物(clay mineral)添加到裂裙菌菌丝体的液体培养过程中时，能够制造出菌丝体紧实度优异的裂褶菌菌丝球。
[0014]另一方面，在本发明裂褶菌菌丝球的制造方法中，上述粘土矿物作为一例可以是蛭石(vermiculite)或伊利石(illite)。
[0015]另一方面，在本发明裂褶菌菌丝球的制造方法中，关于上述粘土矿物，优选以培养基的0.1%?5% (w/v)进行添加。这是因为，在以这种比率添加时，相比于其他添加比率，能够顺利地执行菌丝体培养，也能够顺利地形成颗粒。
[0016]另一方面，本发明的第二方式提供一种从裂褶菌菌丝体生产β_葡聚糖的方法，其特征在于，包括如下步骤:在培养裂褶菌的菌丝体时，添加粘土矿物而进行培养；以及在上述培养之后，从培养液回收β_葡聚糖。
[0017]根据本发明能够确认到，在培养裂褶菌的菌丝体时，添加粘土矿物而进行培养的情况，与没有添加粘土矿物的情况相比，β-葡聚糖(β-glucan)的生产量增加了 30%左右。
[0018]另一方面，在本发明的从裂褶菌菌丝体生产葡聚糖的方法中，关于上述葡聚糖的回收，作为一例能够通过乙醇沉淀而执行。在利用公知为容易回收有用物质的方法的乙醇沉淀法来执行乙醇沉淀时，能够从培养液容易地获得β_葡聚糖。但是，根据需要，在乙醇沉淀之前，还能够追加培养液的过滤过程。
[0019]根据本发明，在培养裂褶菌菌丝体时添加粘土矿物而进行培养，从而能够制造出紧实度增加的裂褶菌颗粒菌丝体。
[0020]另外，在培养裂褶菌菌丝体时添加粘土矿物而进行培养，从而能够高产地生产源于裂褶菌的葡聚糖。
【附图说明】
[0021]图1是用肉眼观察了通过培养制造的裂褶菌菌丝球的结果。
[0022]图2是利用解剖显微镜观察了通过培养制造的裂褶菌菌丝球的截面的结果。
[0023]图3是测量添加粘土矿物(蛭石或伊利石)而进行培养的裂褶菌菌丝体培养液的过滤效率的结果。
[0024]图4是测量添加粘土矿物(蛭石或伊利石)而进行培养的裂褶菌菌丝体培养液的β葡聚糖生产量的结果。
【具体实施方式】
[0025]以下，通过下述实施例进一步详细说明本发明的内容。但是，本发明的权利范围不仅仅限定于下述实施例，包含与此等价的技术思想的变形。
[0026]实施例1:裂褶菌菌丝球的制造
[0027]对于一般YMG液体培养基(0.4% (w/v)酵母提取物、1% (w/v)麦精、0.4% (w/v)葡萄糖)和在上述一般YMG液体培养基中添加了 0.5% (w/v)蛭石(vermic ulite)或伊利石(illite)而制造的培养基各自接种裂褶菌种菌并执行了菌丝体液体培养。
[0028]关于液体培养，在将上述制造的10ml的液体培养基分别投入到250ml锥形瓶之后，进行灭菌而使用，在24°C下以150rpm振荡培养了五天。之后，用肉眼观察了所生成的颗粒，并且利用解剖显微镜对截面进行了观察。
[0029]实验结果，能够确认到相比于在一般培养基中培养的裂褶菌颗粒菌丝体，在添加了粘土矿物(蛭石或伊利石)的培养基中培养的裂褶菌颗粒菌丝体的紧实度更优异(图1、图
2)。图1是用肉眼观察了通过培养而制造的裂褶菌菌丝球的结果。图2是利用解剖显微镜观察了通过培养而制造的裂褶菌菌丝球的截面的结果。
[0030]实验例1:裂褶菌菌丝球的过滤效率测量
[0031]在本实验例中，想要确认在添加了本发明的粘土矿物(蛭石或伊利石)的培养基中培养而制造的裂褶菌菌丝球的过滤效率。
[0032]菌丝体培养是按照在上述实施例1中记载的方法而执行的，过滤效率是以100L的培养液为基准来测量了过滤速度、过滤器更换次数。过滤速度是以裂褶菌一般菌丝体培养液为基准测量每升获得的量的时间而换算为百分率的。关于过滤器更换次数，对在过滤100L时0.45 μ m过滤器(filter)的更换次数进行了测量。
[0033]实验结果，能够确认到:在添加了蛭石(Vermiculite)的培养基中培养而制造的裂裙菌菌丝体培养液相比于在一般培养基中培养而制造的菌丝体培养液，过滤速度增加，过滤过滤器更换次数也减少，大大增加了作业效率(图3)。图3是对添加粘土矿物(蛭石或伊利石)而培养的裂褶菌菌丝体培养液的过滤效率进行测量的结果。观察图3可确认到，在培养液过滤时到约5L的过滤速度三种都表现出相似的模样，但是随着过滤液的量增加，一般裂褶菌菌丝体培养液的过滤速度显著降低，甚至减少到初始过滤速度的约50%。另外，能够确认到:添加粘土矿物而培养的裂褶菌菌丝体培养液，到100L的整个过滤期间都表现出初始速度的80%以上。
[0034]如上所述的实验的结果，表示:在添加了本发明的粘土矿物的培养基中培养而制造的裂褶菌菌丝球比在一般培养基中培养而制造的裂褶菌菌丝球更坚硬、即紧实度增大。
[0035]实施例2:从裂褶菌菌丝体回收β -葡聚糖
[0036]在本实施例中，想要确认从在添加了粘土矿物(蛭石或伊利石)的培养基中培养的裂裙菌菌丝体生成的β -葡聚糖(β -glucan)的量。
[0037]菌丝体培养是按照在上述实施例1中记载的方法而执行的，而关于β -葡聚糖，在通过灭菌而杀灭微生物之后，利用0.45 μ m过滤器(filter)将菌丝体与培养液进行了分离。之后，添加与所过滤的培养液同量的95%乙醇，一边以约400rpm进行搅拌一边使β-葡聚糖沉淀而获得，将所获得β_葡聚糖在65°C下干燥48小时后测量了重量。
[0038]实验结果，如图4所示，能够确认到:以100L培养液为基准，与在一般培养基中培养的培养液相比，伊利石(illite)约增加了 18%、蛭石(vermiculite)约增加了 30%。图4是测量添加粘土矿物(蛭石或伊利石)而进行培养的裂褶菌菌丝体培养液的β葡聚糖生产量的结果。
【主权项】
1.一种裂褶菌菌丝球的制造方法，其特征在于， 在培养裂褶菌的菌丝体时，添加粘土矿物。
2.根据权利要求1所述的裂褶菌菌丝球的制造方法，其特征在于， 上述粘土矿物为蛭石或伊利石。
3.根据权利要求1所述的裂褶菌菌丝球的制造方法，其特征在于， 关于上述粘土矿物，以培养基的0.1%?5% (w/v)进行添加。
4.一种从裂褶菌菌丝体生产葡聚糖的方法，其特征在于包括如下步骤: 在培养裂褶菌的菌丝体时，添加粘土矿物而进行培养；以及 在上述培养之后，从培养液回收葡聚糖。
5.根据权利要求4所述的从裂褶菌菌丝体生产β-葡聚糖的方法，其特征在于，上述β-葡聚糖的回收是通过乙醇沉淀而执行的。
【专利摘要】本发明涉及裂褶菌菌丝球的制造方法及利用其的β-葡聚糖生产方法。在培养裂褶菌菌丝体时，添加粘土矿物而增加了紧实度。
【IPC分类】C12P19-08, C12N1-14, C12R1-645
【公开号】CN104673674
【申请号】CN201310616930
【发明人】崔信旭, 黄淳锡, 石地琄
【申请人】瑞帝安有限公司
【公开日】2015年6月3日
【申请日】2013年11月27日