硝苯双酰基苄胺类ampk激活剂、其制备方法及用图
【技术领域】
[0001] 本发明涉及2型糖尿病治疗的药物领域。更具体地讲，本发明涉及对2型糖尿病 具有治疗作用的一类含硝苯双酰基苄胺类AMPK激活剂、其制备方法及其用途。
【背景技术】
[0002] 糖尿病是由多病因引起的疾病过程，影响到全球6 %的人口。预计到2025年，患病 人数会再增加一倍达到3亿。糖尿病的最重要的临床病理特征是血浆葡萄糖（血糖）浓度 增高。血糖浓度增高是导致糖尿病的各种临床症状的主要原因。未控制的高血糖导致诸多 糖尿病并发症，如增加微血管和大血管疾病风险，包括肾病，神经病，视网膜病，高血压，脑 缺血和冠心病等。因此，降低血糖是治疗和预防糖尿病及其并发症的关键。
[0003]AMP(腺苷一磷酸）活化的蛋白激酶（AMPK)作为一种重要的蛋白激酶参与多种代 谢过程。AMPK在调节肌体能量代谢的平衡方面起总开关作用。在肌肉和肝脏中，AMPK的活 化增强了葡萄糖的摄取、脂肪酸氧化作用和胰岛素敏感性，并且减少了葡萄糖、胆固醇和甘 油三酯的产生。因此，AMPK及其信号通路是2型糖尿病有效药物作用靶点。事实上，目前在 临床上广泛应用的双胍类降糖药，如二甲双胍、苯乙双胍和丁福明治就是AMPK激活剂。其 中二甲双胍是目前临床上应用最广泛的一线抗糖尿病药物，不仅是首选的糖尿病治疗药物 而且对正常血糖无影响。这表明AMPK是II型糖尿病药物治疗的关键作用靶点。但是，目 前这些在临床上广泛使用的双胍类AMPK激活剂的一个严重的副作用是会导致乳酸性酸中 毒。乳酸性酸中毒是一类严重的代谢类疾病，一旦发生将危及生命。正是由于可导致乳酸 性酸中毒，苯乙双胍等双胍类AMPK激活剂在欧美等国已被终止临床应用。虽然二甲双胍导 致乳酸性酸中毒的几率较苯乙双胍低，但在口服降糖药中，其导致严重毒副反应及导致死 亡的临床报告数最多，因此，研发新型、非双胍类AMPK激活剂作为糖尿病的治疗药物具有 及其重要的临床意义。
[0004] 本发明公开了一类含硝苯双酰基苄胺类AMPK激活剂，这些化合物可用于制备治 疗2型糖尿病的药物。
【发明内容】
[0005] 本发明的一个目的是提供一种具有通式I的良好活性的AMPK激动剂。本发明的 另一个目的是提供制备具有通式I的化合物的方法。现结合本发明的目的对本
【发明内容】
进 行具体描述。
[0006] 本发明具有通式I的化合物具有下述结构式：
[0007]
[0012] 化合物II与丙烯酰胺在加热的条件下发生反应，得到III;化合物III在碱存在 下与CH3COCl发生反应，得到化合物IV;化合物V和化合物VI发生缩合反应，得到化合物 VII;化合物VII在光照下用N-溴代丁二酰亚胺（NBS)处理，得到化合物VIII;化合物IV 与化合物VIII在碱存在下发生取代反应，得到化合物I。
[0013] 本发明所述通式I化合物具有AMPK激活作用，可作为有效成分用于制备2型糖尿 病治疗药物。本发明所述通式I化合物的活性是通过受体结合试验来验证的。
[0014] 本发明的通式I化合物在相当宽的剂量范围内是有效的。例如每天服用的剂量约 在Img-1000 mg/人范围内，分为一次或数次给药。实际服用本发明通式I化合物的剂量可 由医生根据有关的情况来决定。
【具体实施方式】
[0015] 下面结合实施例对本发明作进一步的说明。需要说明的是，下述实施例仅是用于 说明，而并非用于限制本发明。本领域技术人员根据本发明的教导所做出的各种变化均应 在本申请权利要求所要求的保护范围之内。
[0016] 实施例1化合物I-I的合成
[0017]
[0018] A.化合物III的合成
[0019] 化合物11(0. 87g，IOmmol)和丙烯酰胺（0. 71g，IOmmol)溶于IOmL二甲苯中，而后 升温回流过夜，TLC显示反应完成。反应混合物直接减压蒸去溶剂，得到的残余物使用柱层 析纯化，得到化合物III，白色固体。ESI-MS，m/z= 159([M+H]+)。
[0020] B.化合物IV-I的合成
[0021] 二异丙胺（I.Olg，IOmmol)溶于IOmL干燥的THF中，在氮气气氛下冷却到-78°C， 搅拌，慢慢用注射器向体系中加入I. 6M的n-BuLi的正己烷溶液（6. 25mL，lOmmol)，滴加完 毕后，反应混合物在该温度下继续搅拌10分钟，而后将由化合物III(I.llg，7_〇1)和3mL 干燥的THF配成的溶液慢慢滴加到反应体系中，滴加完毕后，反应混合物在该温度下继续 搅拌10分钟。用注射器将由乙酰氯（〇. 78g，lOmmol)和ImL干燥的THF配制的溶液慢慢滴 加到反应体系中，滴加完毕后反应混合物在该温度下继续搅拌30分钟，而后再在室温下搅 拌过夜。反应混合物倾倒入200mL冰水中，搅拌，用CH2Cl2(60mLX3)萃取，合并萃取相，用 盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。抽滤除去干燥剂，滤液在旋转蒸发仪上蒸干，得到的残余物使 用柱层析纯化，得到化合物IV-1，白色固体。ESI-MS，m/z= 201([M+H]+)。
[0022] C.化合物VII-I的合成
[0023]对甲基苯乙酮V(l. 34g,lOmmol)和VI-I(I. 38g,lOmmol)溶于IOmL乙醇中，加入 冰醋酸lmL，而后反应混合物在氮气下回流过夜，TLC检测反应完成。反应混合物倾倒入 200mL冰水中，搅拌，用CH2Cl2 (60mLX3)萃取，合并萃取相，依次用饱和NaHCO3溶液和盐水 洗涤，无水硫酸钠干燥。抽滤除去干燥剂，滤液在旋转蒸发仪上蒸干，得到的残余物使用柱 层析纯化，得到化合物VII-1，白色固体。ESI-MS，m/z= 255([M+H]+)。
[0024] D.化合物VIII-I的合成
[0025] 化合物￥11-1(2.038,8臟〇1)和咄5(1.788，10臟〇1)溶于151^0：1 4中，在500评白 炽灯照射下回流3小时，TLC检查发现反应完成。反应混合物倾倒入200mL冰水中，搅拌， 用CH2Cl2 (60mLX3)萃取，合并萃取相，依次用饱和NaHCCV^液和盐水洗涤，无水硫酸钠干 燥。抽滤除去干燥剂，滤液在旋转蒸发仪上蒸干，得到的残余物使用柱层析纯化，得到化合 物VIII-1，白色固体。ESI-MS，m/z= 334([M+H]+)。
[0026]E.化合物I-I的合成
[0027]二异丙胺（0. 61g, 6mmol)溶于6mL干燥的THF中，在氮气气氛下冷却到-78°C，搅 拌，慢慢用注射器向体系中加入I. 6M的n-BuLi的正己烷溶液（3. 75mL，6mmol)，滴加完毕 后，反应混合物在该温度下继续搅拌10分钟，而后将由化合物IV-I(I. 〇〇g，5_〇1)和3mL 干燥的THF配成的溶液慢慢滴加到反应体系中，滴加完毕后，反应混合物在该温度下继续 搅拌10分钟。用注射器将由VIII-I(2. 00g，6mmol)和5mL干燥的THF配制的溶液慢慢滴 加到反应体系中，滴加完毕后反应混合物在该温度下继续搅拌30分钟，而后再在室温下搅 拌过夜。反应混合物倾倒入200mL冰水中，搅拌，用CH2Cl2(60mLX3)萃取，合并萃取相，用 盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。抽滤除去干燥剂，滤液在旋转蒸发仪上蒸干，得到的残余物使 用柱层析纯化，得到化合物1-1，白色固体。ESI-MS，m/z= 453([M+H]+)。
[0028] 实施例2-3
[0029] 参照实施例1的方法，合成了下表所列化合物。
[0030]
[0031] 实施例4化合物体外对AMPK的激活作用
[0032] 在大肠杆菌中表达人重组AMPK酶并在酶活性测定之前在体外用LKBl重新活化。 使用两种基于荧光的技术检测AMPK酶活性（a-筛选和Delfia)并在微孔板（分别包含 25mMTris/HCl缓冲液、pH7. 5、含有 100yMATP/50mM的H印es缓冲液，25mMTris/HCl缓 冲液、pH7. 4、含有125yMATP)上在合成的肤底物（AMARAASAAALARRR，即〃AMARAA〃肤）和 连续稀释的激活剂存在下进行。通过加入AMPK(50-100ng)引发反应。混合后，将板子在室 温下孵育30分钟。通过使用抗磷酸化丝氨酸的抗体以测定掺入AMARAA中的磷酸量来检测 酶活性。活性以对照（基础活性表示为100)的百分率（％)表示。
[0033] 测试结果见下表。
[0034]
[0035] 从上表结果可以看出，本发明的化合物对AMPK具有很强的激活作用，可以作为制 备治疗2型糖尿病的的药物。
【主权项】
1. 具有通式I结构的化合物，2. 权利要求1所定义的通式I化合物，选自：3. 合成权利要求1-2任一所定义的属于通式I的化合物的方法：化合物II与丙締酷胺在加热的条件下发生反应，得到III;化合物III在碱存在下与C&COCl发生反应，得到化合物IV;化合物V和化合物VI发生缩合反应，得到化合物VII;化 合物VII在光照下用N-漠代了二酷亚胺处理，得到化合物VIII;化合物IV与化合物VIII 在碱存在下发生取代反应，得到化合物I。4. 权利要求1-2之一所定义的通式I化合物在制备治疗2型糖尿病药物方面的应用。
【专利摘要】本发明涉及与2型糖尿病相关的药物领域。具体而言，本发明涉及一类含硝苯双酰基苄胺类的黄原酸类AMPK激活剂、其制备方法、以及在制备2型糖尿病药物中的应用。
【IPC分类】C07D295/15, A61P3/10
【公开号】CN104926755
【申请号】CN201510353013
【发明人】江河
【申请人】佛山市赛维斯医药科技有限公司
【公开日】2015年9月23日
【申请日】2015年6月24日