咪唑并吡啶-6-甲酰-Met-Ser-OBzl，其合成，活性和应用
【专利说明】咪唑并吡啶-6-甲酿-Met-Ser-OBzl,其合成，活性和应用 发明领域
[0001] 本发明涉及3H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-甲酰-Met-Ser-OBzl，涉及它们的制备 方法，进一步涉及它们对SD大鼠的抗血栓活性，因而本发明涉及它们作为抗血栓药物的应 用。本发明属于生物医药领域。
【背景技术】
[0002] 血栓性疾病是一种严重威胁人类健康的心脑血管疾病，每年均会有3%。的人发生 不同程度的血栓性疾病，其发病率及致死率均较高。
[0003]目前临床上治疗血栓性疾病的药物主要分为抗血小板药物、溶栓药物及抗凝血药 物三类。从防治角度来看，抗栓药物更能针对疾病本身，减轻临床治疗压力，从而得到广泛 应用。但由于传统的抗血栓药物的安全性及依从性都有待优化，研究疗效更高且毒副作用 更低的新型药物已成为抗栓药物研究的热点。从天然产物中发现咪唑并吡啶类衍生物具有 广泛的生物学活性，以此作为先导结构对其进行结构优化，以期得到疗效更好安全性更高 的抗栓药物。
[0004] 发明人曾经公开下式代表的3H-咪唑并[4, 5-c]吡啶-6-甲酰-AA-〇Bzl(其中AA 代表甘氨基酸或其它L-氨基酸残基）在1μmol/kg剂量下显示良好的抗肿瘤活性。通过进 一步研究发明人认识到，将Met-Ser-OBzl代替3H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-甲酰-AA-〇Bzl 中的AA-OBzl，可以使抗肿瘤活性化合物转变为抗血栓活性化合物。根据这些认识，发明人 提出了本发明。
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【发明内容】
[0006] 本发明的第一个内容是提供3H-咪唑并[4, 5-c]吡啶-6-甲酰-Met-Ser-OBzl。
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[0008] 本发明的第二个内容是提供3H-咪唑并[4, 5-c]吡啶-6-甲酰-Met-Ser-OBzl的 合成方法，该方法包括：
[0009] (1)L-组氨酸在稀硫酸催化下与甲酸进行Pictet-Spengler缩合生成6S-4,5,6, 7-四氢-3H-咪唑并[4, 5-c]吡啶-6-羧酸；
[0010] (2)63-4,5,6,7-四氢-3!1-咪唑并[4,5-(3]吡啶-6-羧酸转化为63-4,5,6,7-四 氢-3H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-甲酸甲酯；
[0011] (3)63-4,5,6,7-四氢-3!1-咪唑并[4,5-(3]吡啶-6-甲酯用高锰酸钾氧化为3!1-咪 唑并[4, 5-c]吡啶-6-甲酸甲酯；
[0012] (4) 3H-咪唑并[4, 5-c]吡啶-6-甲酸甲酯在NaOH溶液（2N)中皂化成3H-咪唑并 [4,5-c]吡啶-6-甲酸；
[0013] (5)Boc-Met-OH与丝氨酸节酯偶联得到Boc-Met-Ser-OBzl;
[0014] (6)Boc-Met-Ser-OBzl在4N氯化氢的乙酸乙酯溶液中得到H-Met-Ser-OBzl;
[0015] (7) 3H-咪唑并[4, 5-c]吡啶-6-甲酸与L-Met-Ser-OBzl偶联得到3H-咪唑并[4， 5-c]吡啶-6-甲酰-Met-Ser-OBzl。
[0016] 本发明的第三个内容是评价3H-咪唑并[4, 5-c]吡啶-6-甲酰-Met-Ser-OBzl对 SD大鼠的抗血栓作用。
[0017] 本发明的第四个内容是评价3H-咪唑并[4, 5-c]吡啶-6-甲酰-Met-Ser-OBzl在 制备抗血栓药物中的应用。
【附图说明】
[0018] 图 1. 3H-咪唑并[4, 5-c]吡啶-6-甲酰-Met-Ser-OBzl的合成路线.i)HCH0，H20， H2S04,65°C;ii)Me0H，S0C12,0°C;iii)DMF，三乙胺，KMn04 ;iv)Na0H，H20,0°C;v)二环己基碳 二亚胺（DCC)，1-羟基苯并三唑（HOBt)，N-甲基吗啉（NMM)，四氢呋喃（THF) ;vi)4N氯化氢 的乙酸乙酯溶液，0°C;vii)二环己基碳二亚胺（DCC)，1-羟基苯并三唑（HOBt)，N-甲基吗 啉（NMM)，DMF〇
【具体实施方式】
[0019] 为了进一步阐述本发明，下面给出一系列实施例。这些实施例完全是例证性的，它 们仅用来对本发明进行具体描述，不应当理解为对本发明的限制。
[0020] 实施例1化合物6S-4,5,6,7-四氢-3H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-羧酸（1)的制 备
[0021] 10. 00g(64. 5mmol)L-组氨酸，30mL水混合于100mL爺瓶中，冰浴下，用恒压漏斗 逐滴加入2mL浓硫酸，随浓硫酸的加入，原料逐渐洛解，待其完全洛解后，向反应液中加入 40 %的甲醛溶液10mL，在微波加速反应仪65°C下反应5小时。反应完毕后，冰浴下缓慢滴加 浓氨水调溶液pH= 6-7,有大量白色沉淀析出，减压过滤，得到无色固体10. 76g(99. 2% )。 ESI-MS(m/z) :168[M+H]+。
[0022] 实施例2化合物6S-4, 5,6, 7-四氢-3H-咪唑并[4, 5-c]吡啶-6-甲酸甲酯（2) 的制备
[0023] 冰浴下在100mL茄瓶里加15. 6mL甲醇，冰浴下，用恒压漏斗缓慢滴加1. 56mL二 氯亚砜，30min后加入1.00g(6mmol)6S-4,5,6,7-四氢-3H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-羧酸 (2)，室温反应3天后，TLC监测反应完全，反应混合物减压浓缩，残留物加甲醇溶解并减压 浓缩。该操作重复3次得白色泡状固体，再加乙醚抽干重复3次得无色粉末，最后用甲醇/ 乙醚重结晶得〇. 58g(53% )标题化合物，为无色固体。ESI-MS(m/z) 181[M+H] +。
[0024] 实施例3化合物3H-咪唑并[4, 5-c]吡啶-6-甲酸甲酯（3)的制备
[0025]冰浴下在lOOmL茄瓶里加 1.lg(6.lmmol)6S-4,5,6,7-四氢-3H-咪唑并[4,5-c] 吡啶-6-甲酸甲酯（3)，加DMF使溶解。向该溶液中滴加lmL三乙胺调pH到8,分三次加 入1.2g(7. 6_〇1)高锰酸钾。反应6小时后，TLC监测反应完毕。反应物吹干，得到的黑 色固体用INHC1溶液溶解，冰浴下滴加2NNaOH溶液调pH到7,析出大量无色固体。该固 体以二氯甲烷/甲醇为洗脱剂用硅胶柱纯化，得〇. 68g(63. 2% )标题化合物，为无色固体。 ESI-MS(m/z)177[M+H]+〇
[0026] 实施例4化合物3H-咪唑并[4, 5-c]吡啶-6-羧酸（4)的制备
[0027]冰浴下在lOOmL茄瓶里力卩40mLNa0H溶液（2N)，lOmin后力卩入 5. 30g(29. 9mmol)3H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-甲酸甲酯（4)，反应1小时后TLC显示反应 完毕，冰浴下向反应液中滴加2NHC1溶液调pH到7,析出大量无色固体。该固体以二氯甲 烷/甲醇为洗脱剂用硅胶柱纯化，得1.50g(30% )标题化合物，为无色固体。ESI-MS(m/ z)162[M-H]。
[0028] 实施例5化合物Boc-Met-Ser-OBzl的制备
[0029]称取 3. 49g(14.Ommol)Boc-Met-OH于 250mL茄形瓶中，加 入 50mLTHF。在冰 浴和搅拌下依次加入 2. 39g(17. 7mmol)H0Bt及 3. 44g(16