一种霍乱弧菌鉴别的选择性培养基的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及微生物鉴别、检测技术领域，具体涉及一种霍乱弧菌鉴别的选择性培 养基。
【背景技术】
[0002] 霍乱作为一种古老且流行广泛的烈性传染病曾在世界上引起多次大流行，主要表 现为剧烈的呕吐，腹泻，失水，死亡率甚高，属于国际检疫传染病。霍乱弧菌是人类霍乱的病 原体，属于革兰氏阴性菌，菌体弯曲呈弧状或逗点状，菌体一端有单根鞭毛和菌毛，无荚膜 与芽胞，经人工培养后，易失去弧形而呈杆状。由于霍乱传染性强、死亡率高，因此霍乱弧菌 的检测技术对公共卫生安全至关重要。
[0003] 该菌株对营养要求不高，在pH8. 8~9. 0的碱性蛋白胨中生长良好，现有技术中 通常利用该碱性环境用于执行霍乱弧菌与其他微生物的鉴别、检测。尽管该方法成本较低、 易于实现，却可能因其他嗜碱菌的生长而影响检测结果。另一方面，通过基因测序的方式结 果最为可靠，因此科研领域通常采用该方法，但由于该方法需要提取DNA、PCR扩增、测序等 复杂操作，因此检测流程较长，鉴于其强烈的传染性，因此该方法存在较大的安全风险。针 对上述情况，临床上用于霍乱弧菌的检测主要从选择性培养基的开发着手，但现有技术的 选择性培养基仍存在着灵敏性不高、霍乱弧菌生长速度较慢的技术问题。
【发明内容】
[0004] 本发明旨在针对现有技术的技术缺陷，提供一种霍乱弧菌鉴别的选择性培养基， 以解决现有技术的霍乱弧菌检测方法灵敏性较低。
[0005] 本发明要解决的另一技术问题是现有技术的霍乱弧菌检测方法检测时间较长。
[0006] 为实现以上技术目的，本发明采用以下技术方案：
[0007] -种霍乱弧菌鉴别的选择性培养基，该培养基包括以下重量份的成分：蛋白胨 8~10份，蚕蛹粉4~6份，茯苓粉2~3份，苜蓿草粉1~2份，核桃粉1~2份，黑大豆 皮1~2份，乳糖1~2份，合欢米1~2份，桦菌芝1~2份，对二甲氨基苯甲醛1~2份。
[0008] 优选地，还包括1~2重量份的琼脂。
[0009] 优选地，还包括1~2重量份的明胶。
[0010] 优选地，还包括1~2重量份的戊醇。
[0011] 优选地，还包括1~2重量份的碳酸钠。
[0012] 优选地，所述选择性培养基由以下重量份的成分组成：蛋白胨9份，蚕蛹粉5份，茯 苓粉2. 5份，苜蓿草粉1. 5份，核桃粉1. 5份，黑大豆皮1. 5份，乳糖1. 5份，合欢米1. 5份， 桦菌芝1. 5份，对二甲氨基苯甲醛1. 5份。
[0013] 优选地，所述选择性培养基由以下重量份的成分组成：蛋白胨8. 5份，蚕蛹粉5. 5 份，茯苓粉2. 1份，苜蓿草粉1. 3份，核桃粉1. 7份，黑大豆皮1. 6份，乳糖1. 2份，合欢米 1. 1份，桦菌芝1. 4份，对二甲氨基苯甲醛1. 5份，琼脂1. 4份，明胶1. 1份，戊醇1. 5份，碳 酸钠1. 8份。
[0014] 在以上技术方案中，发明人基于霍乱弧菌的营养代谢特点，优选了适宜其生长的 营养成分，实验发现在该营养条件下大多数革兰氏阳性细菌生长受到明显抑制，从而缩小 了对检测结果可能产生影响的微生物范围。在此基础上，本发明利用了霍乱弧菌可分解蛋 白胨中色氨酸生成吲哚的特性，添加了适量的对二甲氨基苯甲醛作为选择性指示剂，该指 示剂可与吲哚反应生成红色的玫瑰吲哚，从而作为霍乱弧菌阳性指标。
[0015] 在优选技术方案中，添加琼脂或明胶可赋予培养基固体形态，从而以菌落周围的 显色圆圈作为判断依据，更加便于视觉判断；添加戊醇则有助于进一步提升霍乱弧菌的生 长速度；而添加适量的碳酸钠则是为了赋予培养基8. 5~9. 5的pH范围，利用该碱性环境 进一步降低其他微生物对检测结果的潜在影响。本发明以创新性的技术改进实现了突出的 技术效果，同时成本较低、易于实现，因此具有突出的推广前景。
【具体实施方式】
[0016] 以下将对本发明的【具体实施方式】进行详细描述。为了避免过多不必要的细节，在 以下实施例中对属于公知的结构或功能将不进行详细描述。除有定义外，以下实施例中所 用的技术和科学术语具有与本发明所属领域技术人员普遍理解的相同含义。
[0017] 实施例1
[0018] -种霍乱弧菌鉴别的选择性培养基，由以下重量份的成分组成：蛋白胨8份，蚕蛹 粉4份，茯苓粉2份，苜蓿草粉1份，核桃粉1份，黑大豆皮1份，乳糖1份，合欢米1份，桦 菌芝1份，对二甲氨基苯甲醛1份。
[0019] 实施例2
[0020] -种霍乱弧菌鉴别的选择性培养基，由以下重量份的成分组成：蛋白胨10份，蚕 蛹粉6份，茯苓粉3份，苜蓿草粉2份，核桃粉2份，黑大豆皮2份，乳糖2份，合欢米2份， 桦菌芝2份，对二甲氨基苯甲醛2份。
[0021] 实施例3
[0022] -种霍乱弧菌鉴别的选择性培养基，由以下重量份的成分组成：蛋白胨9份，蚕蛹 粉5份，茯苓粉2. 3份，苜蓿草粉1. 8份，核桃粉1. 5份，黑大豆皮1. 6份，乳糖1. 7份，合欢 米1. 8份，桦菌芝1. 2份，对二甲氨基苯甲醛1. 8份。
[0023] 实施例4
[0024] -种霍乱弧菌鉴别的选择性培养基，由以下重量份的成分组成：蛋白胨8. 8份，蚕 蛹粉5. 4份，茯苓粉2. 7份，苜蓿草粉1. 2份，核桃粉1. 2份，黑大豆皮1. 2份，乳糖1. 5份， 合欢米1. 6份，桦菌芝1. 4份，对二甲氨基苯甲醛1. 7份，琼脂1份，碳酸钠1. 1份。
[0025] 实施例5
[0026] -种霍乱弧菌鉴别的选择性培养基，由以下重量份的成分组成：蛋白胨9. 4份，蚕 蛹粉4. 2份，茯苓粉2. 1份，苜蓿草粉1. 3份，核桃粉1. 1份，黑大豆皮1份，乳糖2份，合欢 米1. 9份，桦菌芝1. 2份，对二甲氨基苯甲醛1. 9份，明胶1. 3份，戊醇1. 2份，碳酸钠1. 6 份。
[0027] 实施例6
[0028] -种霍乱弧菌鉴别的选择性培养基，由以下重量份的成分组成：蛋白胨8. 8份，蚕 蛹粉5. 4份，茯苓粉2. 7份，苜蓿草粉1. 2份，核桃粉1. 2份，黑大豆皮1. 2份，乳糖1. 5份， 合欢米1. 6份，桦菌芝1. 4份，对二甲氨基苯甲醛1. 7份，琼脂1. 5份。
[0029] 实施例7
[0030] -种霍乱弧菌鉴别的选择性培养基，由以下重量份的成分组成：蛋白胨9. 2份，蚕 蛹粉5. 7份，茯苓粉2. 4份，苜蓿草粉1. 5份，核桃粉1. 5份，黑大豆皮1. 7份，乳糖1. 7份， 合欢米1. 2份，桦菌芝1. 9份，对二甲氨基苯甲醛