一种利用菠萝茎提取菠萝蛋白酶的方法
【专利摘要】本发明公开了一种利用菠萝茎提取菠萝蛋白酶的方法，属于菠萝蛋白酶提取技术领域。本发明利用菠萝茎为原料制作菠萝蛋白酶，制作工艺简单可靠，通过此工艺可提高酶的活性和延长活性保存时间,酶活性从70万U/g提高到160万U/g，常温下保质期6个月提高到20个月，制作的菠萝蛋白酶最适pH值为7.0，分子量为33000，毒性较低，菠萝蛋白酶在生物体中具有溶解纤维蛋白及血凝块的作用，临床上用于治疗一些炎症，能迅速溶痂，对正常组织无害，不影响植皮，性质稳定，使用方便，适用于中小面积深度烧伤的治疗。由菠萝蛋白酶制成的制剂对急慢性支气管炎、哮喘、多痰顽咳、百日咳、等病症疗效明显。
【专利说明】
一种利用菠萝茎提取菠萝蛋白酶的方法
技术领域
[0001]本发明涉及菠萝蛋白酶提取技术领域，具体涉及一种利用菠萝茎提取菠萝蛋白酶的方法。
【背景技术】
[0002]菠萝蛋白酶是一种天然的无毒、无副作用的蛋白质，作为一种疏基水生成肽或氨基酸形成具有独特风味的蛋白质水解液，主要应用于食品和医药中。在食品中的应用有:可水解动物蛋白，水解羊胎素及大豆等，使食品的蛋白质水解成小分子肽或氨基酸大分子蛋白质，水解为易吸收的小分子氨基酸和蛋白质肉制品的精加工，可制成相应饼干松化剂、嫩肉粉等，更广泛的应用于肉类嫩化、饼干松脆、酒类澄清、面粉改良、大豆分解、高级口服液、保健广品等，可增加食品中氣基酸含量，改良食品风味，降低成本，且能大大提尚食品营养价值，幷作为非生物稳定剂制成的啤酒饮料澄清剂、酒类发酵剂等应用于酒类I酿造工业、酱油酿造工业、饮料生产工业等。
[0003]在医药中的应用有:1)抑制肿瘤细胞的生长。2)对心血管疾病的防治是有益的，能抑制血小板聚集引起的心脏病发作和中风，缓解心绞痛症状，缓和动脉收缩，加速纤维蛋白原的分解。3)抑制毒素分泌；实验证明菠萝酶能降低毒素结合活性并能抑制热不稳定毒素(LI)、霍乱毒素(CT)及热稳定毒素(ST)的分泌效应。4)用于烧伤脱痂；菠萝酶能选择性地除去死皮，使新皮移植得以尽早进行。动物实验证明，菠萝酶对邻近的正常皮肤无不良影响。局部使用抗生素不影响菠萝酶的效果。5)消炎作用；菠萝酶在各种组织中能有效地治疗炎症和水肿(包括血栓静脉炎、骨骼肌损伤、血肿、口腔炎、糖尿病人溃疡及运动损伤)；菠萝酶具有激活炎症反应的潜力。据统计资料推测，含有菠萝酶的混合物(含菠萝酶、胰蛋白酶、芸香苷)在疗效和安全性方面，更优于类固醇的消炎药，将菠萝酶与低剂量的抗菌素及其它酶混用的方法治疗风湿性关节炎有望取得好的疗效；菠萝酶还可治疗腹泻。6)增进药物吸收；将菠萝酶与各种抗生素(如四环素，阿莫西林等)联用，能提高其疗效。相关研究表明，它能促进抗生素在感染部位的传输，从而减少抗生素的用药量。据推断，对于抗癌药物，也有类似的作用。此外，菠萝酶能促进营养物质的吸收。
[0004]申请号为2012102064456公布了菠萝蛋白酶提取工艺，此方法过程繁琐，造价高，不适合工业化生产。
【发明内容】
[0005]本发明针对现有菠萝蛋白酶制作工艺技术过程繁琐，各环节不宜控制的问题，目的是提供一种提取率高、工艺流程简单、易操控的菠萝蛋白酶提取方法。
[0006]为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案予以实现:
[0007]—种利用菠萝茎提取菠萝蛋白酶的方法，具体步骤:
[0008]I)取菠萝去皮，收集菠萝茎，切成小块用压榨机压出汁液；
[0009]2)将汁液移入搪瓷缸中，边搅拌边加入汁液重10%的固体氯化钠，然后置10°C条件下放13h，过滤分出滤液；
[0010]3)残渣加入等量水后，用柠檬酸调节pH值至4.5 (先加10 %固体氯化钠)，搅拌均匀，浸泡40min，过滤分离出滤液(合并两次滤液)；
[0011]4)将澄清液移入搪瓷桶中，在搅拌条件下，按澄清液体积加入0.05% EDTA-2Na、
0.06%的二氧化硫、0.02%的维生素C (做稳定剂)及0.6%的鞣酸，在4°C条件下静置，在离心机上分出沉淀物，弃去上清液；
[0012]5)将沉淀物放入搪瓷桶中，加入2?3倍量pH值4.5的抗坏血酸溶液，搅拌洗脱40min，然后过滤，收集滤液，常温减压干燥，即得本发明产品。
[0013]所述步骤5)中加入的抗坏血酸最优倍量为2.4倍。
[0014]有益效果:本发明利用菠萝茎为原料制作菠萝蛋白酶，制作工艺简单可靠，通过此工艺可提高酶的活性和延长活性保存时间，酶活性从70万U/g提高到160万U/g，常温下保质期6个月提高到20个月，制作的菠萝蛋白酶最适pH值为7.0，分子量为33000，毒性较低，菠萝蛋白酶在生物体中具有溶解纤维蛋白及血凝块的作用，临床上用于治疗一些炎症，能迅速溶痂，对正常组织无害，不影响植皮，性质稳定，使用方便，适用于中小面积深度烧伤的治疗。由菠萝蛋白酶制成的制剂对急慢性支气管炎、哮喘、多痰顽咳、百日咳、等病症疗效明显。
【具体实施方式】
[0015]结合实施例对本发明进一步阐述，不构成对本发明的范围限制。
[0016]本【具体实施方式】采用以下技术方案:它的工艺流程:
[0017]I)取菠萝去皮，收集菠萝茎，切成小块用压榨机压出汁液；
[0018]2)将汁液移入搪瓷缸中，边搅拌边加入汁液重10%的固体氯化钠，然后置10°C条件下放13h，过滤分出滤液；
[0019]3)残渣加入等量水后，用柠檬酸调节pH值至4.5 (先加10 %固体氯化钠)，搅拌均匀，浸泡40min，过滤分离出滤液(合并两次滤液)；
[0020]4)将澄清液移入搪瓷桶中，在搅拌条件下，按澄清液体积加入0.05 % EDTA_2Na、
0.06%的二氧化硫、0.02%的维生素C (做稳定剂)及0.6%的鞣酸，在4°C条件下静置，在离心机上分出沉淀物，弃去上清液；
[0021]5)将沉淀物放入搪瓷桶中，加入2.4倍量pH值4.5的抗坏血酸溶液，搅拌洗脱40min，然后过滤，收集滤液，常温减压干燥，即得本发明产品。
【主权项】
1.一种利用菠萝茎提取菠萝蛋白酶的方法，其特征在于，工艺流程为: 1)取菠萝去皮，收集菠萝茎，切成小块用压榨机压出汁液； 2)将汁液移入搪瓷缸中，边搅拌边加入汁液重10%的固体氯化钠，然后置10°C条件下放13h，过滤分出滤液； 3)残渣加入等量水后，先加10%固体氯化钠，用柠檬酸调节pH值至4.5，搅拌均匀，浸泡40min，过滤分离出滤液，合并两次滤液；4)将澄清液移入搪瓷桶中，在搅拌条件下，按澄清液体积加入0.05 % EDTA-2Na、0.06%的二氧化硫、0.02%的维生素C及0.6%的鞣酸，在4°C条件下静置，在离心机上分出沉淀物，弃去上清液； 5)将沉淀物放入搪瓷桶中，加入2?3倍量pH值4.5的抗坏血酸溶液，搅拌洗脱40min，然后过滤，收集滤液，常温减压干燥，即得本发明产品。2.根据权利要求1所述的一种利用菠萝茎提取菠萝蛋白酶的方法，其特征在于，所述步骤4)中0.02%的维生素C做稳定剂。3.根据权利要求1所述的一种利用菠萝茎提取菠萝蛋白酶的方法，其特征在于，所述步骤5)中加入的抗坏血酸最优倍量为2.4倍。
【文档编号】C12N9/50GK106032530SQ201510113318
【公开日】2016年10月19日
【申请日】2015年3月16日
【发明人】谭凌晖
【申请人】谭凌晖