胶质细胞生长在同一细胞外液的不同平面上，星形胶质细胞和神经元分泌的各种细胞因子和营养物质可以相互交换，纯化的星形胶质细胞向培养基中释放大量的神经营养因子以供神经元生长所需，又不会阻碍神经元的正常生长；(2)本实用新型改良了传统的插入式培养皿，将更易于贴壁的星形胶质细胞爬片反扣于玻璃珠表面，有益于共培养体系的建立；(3)本实用新型应用过程中，长有胶质细胞的爬片可以从培养皿中自由取出，用于免疫细胞化学，细胞原位杂交以及膜片钳等方面的实验，同时由于支撑柱与孔板焊接机械力适中，孔板上的神经元细胞也可通过夹镊去除支撑柱后进行上述实验操作；(4)本实用新型相对于Transwell小室大大降低实验成本，提高共培养成功率，同时通过反扣爬片，可以使神经元与星形胶质细胞直接对话，相对于以往通过滤膜进行分子生物交换，更直接、更接近于生理情况。
【附图说明】
[0024]图1是本实用新型孔板的局部结构示意图；
[0025]图2是实施例1爬片与支撑座的底面示意图；
[0026]图3是实施例2爬片与支撑座的底面示意图。
【具体实施方式】
[0027]下面结合附图对本实用新型作更进一步的说明。
[0028]实施例1
[0029]如图1、图2所示，一种神经元星形胶质细胞共培养板，包括12孔板1、玻璃珠2、方形爬片3，玻璃珠2有4个，通过下端熔融状态下焊接在12孔板I内底面，在爬片3下表面设有4个圆形浅槽4，爬片3搭在玻璃珠2上，玻璃珠2上端对应到浅槽4内形成限位关系O
[0030]玻璃珠直径为3~5 mm，相邻玻璃珠之间距离为15~25 mm，熔融部分的高度为0.5?L O mmD
[0031]利用本实用新型的培养板建立神经元和星形胶质细胞培养体系的处理步骤包括:
[0032](I)酸处理后进行高压灭菌，然后焊接到孔板内底面；
[0033](2)冷却后将焊接有玻璃珠的孔板紫外消毒，多聚赖氨酸包被，37°C过夜；
[0034](3)将神经元种植于孔板内底面，48 h后大半量换液，以后每2?3 d换液一次；
[0035](4)神经元种植第5 d，玻璃爬片酸处理后高压灭菌，多聚赖氨酸包被，37°C过夜；
[0036](5)离体培养10?14 d星形胶质细胞种植于爬片，24 h后全量换液，以后每2?3 d换液一次；
[0037](6)神经元种植第7 d，条件培养基预孵星形胶质细胞24 h，收集条件培养基；次日，条件培养基半量更换神经元培养基，37°C孵育24 h ;
[0038](7)神经元种植第9?10 d，更换新鲜神经元培养基7，将星形胶质细胞爬片小心反扣于玻璃珠表面，建立体系。
[0039]实施例2
[0040]参考图1，结合图3所示，一种神经元星形胶质细胞共培养板，包括12孔板1、玻璃柱5、圆形爬片3，玻璃柱5有4个，通过下端熔融状态下焊接在6孔板I内底面，在爬片3下表面设有一个环形浅槽6，环形浅槽6宽度略大于玻璃珠直径，爬片3搭在玻璃柱5上，玻璃柱5上端对应到环形浅槽6内形成限位关系。
[0041]玻璃柱底面直径为3~5 mm，高度为3~5 mm，相邻玻璃柱之间距离为15~25 mm，熔融部分的高度为0.5-1.0 mm。
[0042]以上所述仅是本实用新型的优选实施方式，应当指出:对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本实用新型原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本实用新型的保护范围。
【主权项】
1.神经元星形胶质细胞共培养板，其特征在于:包括孔板、设于孔板内底面的若干个支撑座、以及搭在若干支撑座上的爬片。2.根据权利要求1所述的神经元星形胶质细胞共培养板，其特征在于:所述爬片下表面设有与支撑座上端形成限位关系的浅槽。3.根据权利要求2所述的神经元星形胶质细胞共培养板，其特征在于:所述支撑座为球形支撑座或柱形支撑座。4.根据权利要求3所述的神经元星形胶质细胞共培养板，其特征在于:所述支撑座为圆柱形支撑座。5.根据权利要求3所述的神经元星形胶质细胞共培养板，其特征在于:所述支撑座为局部熔融状态下焊接在孔板内底面的玻璃珠或玻璃柱。6.根据权利要求5所述的神经元星形胶质细胞共培养板，其特征在于:所述玻璃珠直径为3~5mm，相邻玻璃珠之间距离为15~25 mm，熔融部分的高度为0.5-1.0 mm ; 所述玻璃柱底面直径为3~5 mm，高度为3~5 mm，相邻玻璃柱之间距离为15~25 mm，熔融部分的高度为0.5-1.0 mm。7.根据权利要求1所述的神经元星形胶质细胞共培养板，其特征在于:所述孔板为6孔、12孔、24孔细胞培养板或细胞培养皿的任意一种。8.根据权利要求1~7任意一项所述的神经元星形胶质细胞共培养板，其特征在于:所述支撑座设有为3~6个。9.根据权利要求8所述的神经元星形胶质细胞共培养板，其特征在于:所述支撑座设有为4个。10.根据权利要求8所述的神经元星形胶质细胞共培养板，其特征在于:所述爬片形状为四边形。
【专利摘要】本实用新型公开了一种神经元星形胶质细胞共培养板，属于生物实验器材领域。该培养板包括孔板、设于孔板内底面的若干个支撑座、以及搭在若干支撑座上的爬片，爬片下表面设有与支撑座上端形成限位关系的浅槽，支撑座为局部熔融状态下焊接在孔板内底面的玻璃珠或玻璃柱。本实用新型克服了传统的Banker培养方法星形胶质细胞生长不易控制的问题，将爬片反扣于玻璃珠或玻璃柱表面，有益于共培养体系的建立；实验过程中爬片可以从培养皿中自由取出；该培养板相对于传统transwell小室大大降低实验成本，提高共培养成功率。
【IPC分类】C12M3/00
【公开号】CN204752743
【申请号】CN201520386203
【发明人】曾晓宁, 孔辉, 解卫平, 马元, 叶伶云, 戴望舒, 陈光宗
【申请人】曾晓宁, 孔辉, 解卫平
【公开日】2015年11月11日
【申请日】2015年6月8日