【技术领域】
本发明属于中药加工技术领域，具体涉及一种三七真空冷冻干燥的方法及其应用。
背景技术：
三七是传统的贵重中药之一，常见的商品有三七个、三七片、三七粉，近年来由于科学技术的发展，市场上逐渐出现冻干三七、冻干三七粉。三七个、三七片大部分采用的是热风干燥，干燥时间长，泥土较多，不易清洁，且质地较硬，粉碎损耗较大，有效成分不易溶出；三七粉粒度较细，极易沾壁，服用量大，且服用剂量不好把控，食用不便；冻干三七、冻干三七粉水分较低，吸湿性较大，不易保存，且生产周期较长，生产效率低，成本较高。
中药颗粒剂产品质量较稳定，既可以直接吞服，也可以冲入水中饮入，剂量准确，应用和携带比较方便，溶出和吸收速度较快，可以明显改善粉剂的不足。
cn106074644a公开了一种三七冷冻干燥的保鲜方法，具体参数为：-30～-40℃，预冻结20～25h；抽真空至30-50pa，在冷阱温度-50～-60℃，冷冻干燥10-15h。但消耗的时间较长，特别是预冷冻时间达25h，造成加工的成本较高；此外，三七干燥不彻底，水份不能除尽，产出的三七成品绵软，不酥脆，难以保证三七产品如中药颗粒剂的质量，影响三七制品中药颗粒剂的应用推广。
因此，有必要研究一种新的三七冷冻干燥的制备方法，在提升品质的同时改善三七的加工性能，并应用于三七炮制品的制备，以提升中药颗粒剂的性能，推进三七制品中药颗粒剂的广泛应用。
技术实现要素：
本发明的目的在于解决上述现有技术存在的缺陷，提供一种三七真空冷冻干燥的方法及其应用。
本发明的提供了一种三七真空冷冻干燥的方法，包括将三七匀浆通过预冷冻、真空干燥处理步骤；其中，所述预冷冻步骤在-20～-75℃分阶段进行；所述真空干燥处理在-20～30℃分阶段进行。
进一步地，所述预冷冻步骤为：第一阶段-20～-40℃，2～3h；第二阶段-40～-60℃，2～4h；第三阶段-65～-75℃，1～2h；所述真空干燥步骤为：第一阶段-20～-10℃，1pa，3～5h；第二阶段-5～5℃，1pa，2～4h；第三阶段10～30℃，1pa，3～6h。
进一步地，所述预冷冻步骤以5～10℃/min的降温速率降温。
进一步地，所述三七匀浆的制备方法为：将鲜三七与水按质量体积比为1:3～7混合、破碎，过1号筛；粗渣再与水按质量体积比为1:2～4混合、破碎，过7号筛，两次筛过物混合得到三七匀浆。
本发明的另一个目的在于，提供上述三七真空冷冻干燥方法在制备三七产品中的应用。
本发明还一个目的在于，提供一种三七炮制品的制备方法，步骤包括：净制、清洗、破碎过筛、真空冷冻干燥、粉碎、制软材、制粒、包衣、灭菌、包装；其中，所述真空冷冻干燥本发明以上所述的三七真空冷冻干燥的方法。
进一步地，所述清洗步骤后，采用沥干机风吹沥干除水；所述沥干机抖动速率20～30次/min、风吹速率800-1200rpm。
进一步地，所述粉碎粉末过9号筛，取筛过物。
进一步地，所述制软材用辅料包括微晶纤维素、甘露醇或可溶性淀粉中的一种或多种。
进一步地，所述包衣方法为流化床底喷包衣，包衣增重15％，包衣材料为hpmc、欧巴代或peg。
进一步地，所述灭菌为臭氧灭菌处理2～4h，臭氧浓度平均为10～13ppm。
本发明的有益效果为：
1.本发明提供的三七真空冷冻干燥方法在共晶点的温度区间让样品快速冷冻，然后再程序降温保证产品冷冻完全，这种阶段式冷冻方法可使样品快速冷冻，使微细冰晶均匀的分布于物料中，保证物料在冷冻过程中结构不被破坏，保持活性，同时缩短了冷冻时间，提高冷冻效率；冷冻完全后，先在低于共晶点的温度区间让物料中的冰晶升华成水蒸气逸出，然后程序升温，让物料内剩余的10％左右的水分从分子吸附中解吸出来。这种阶段式干燥方法，可以防止物料发生局部融化崩解，影响干燥后的产品质量，还可以缩短干燥时间，提高干燥效率，克服了干燥时间较长的缺点。
2.通过本发明的真空冷冻干燥方法得到的三七，可以直接粉碎，粉碎率高，克服了产品极硬的缺点，最大程度地保持了三七的有效成分，提高产品有效性。
3.三七炮制品制备采用清洗机清洗新鲜三七，利用气泡、翻滚、提升、喷淋等方式达到模拟手工清洗，让中药材达到清洗的要求，减少清洗过程中药材的损伤，提高产品洁净度；冲洗后经过过滤，水可循环使用；采用喷淋等方式清洗，减少药材与水分接触，减少皂苷类有效成分损失。
4.本发明三七炮制品制备将鲜三七破碎过滤后再冷冻干燥，得到的三七粉口感更细腻，有效成分溶出度更高，营养价值更高，还可减少冷冻干燥时间，提高生产效率，节省生产成本。
5.本发明三七炮制品制备做成颗粒的形式，减少了三七粉末的粘附性，提高产品利用率；冻干三七颗粒可直接吞服或泡水服用，服用量更为精确，携带、储藏、运输方便，产品标准化更强。
6.本发明三七炮制品制备过程采用臭氧灭菌，既环保又能保证产品服用的安全性。
【具体实施方式】
为了使本发明的目的、技术方案和有益技术效果更加清晰明白，以下结合具体实施方式，对本发明进行进一步详细说明。应当理解的是，本说明书中描述的具体实施方式仅仅是为了解释本发明，并不是为了限定本发明。
本发明涉及的一种三七真空冷冻干燥方法，采用了分段的方法，在-20～-75℃分阶段预冷冻；在-20～30℃分阶段真空干燥。
具体为：
预冷冻步骤：第一阶段-20～-40℃，2～3h；第二阶段-40～-60℃，2～4h；第三阶段-65～-75℃，1～2h；
真空干燥步骤：第一阶段-20～-10℃，1pa，3～5h；第二阶段-5～5℃，1pa，2～4h；第三阶段10～30℃，1pa，3～6h。
具体原理如下：
预冻是一个重要的环节，直接影响到物料干燥后的品质。三七的共晶点温度为-22.95℃，从节约能源、提高冻干效率的角度出发，为保证物料完全冻结，一般样品的预冻温度低于共晶点温度5～15℃为宜，因此第一阶段的预冻温度在-20℃～-40℃之间。
若物料内水分未完全冻结，在真空度较小的情况下，溶解在水中的气体急剧溢出，造成局部沸腾、起泡，使物料结构发生变化，而且未冻结的水分在真空条件下发生汽化，使产品内部产生很多大的空隙，影响产品的品质。另外，因物料未冻结完全，溶解在此部分水中的物质在干制过程中会不断析出，并不断向表面迁移，易造成冻干产品的表面发生硬化。因此第二阶段的预冻温度在-40℃～-60℃之间。
预冻温度越低预冻时间越短，为了减少冷冻时间，提高生产效率，第三阶段的预冻温度在-60℃～-75℃之间。
三七的共融点温度为-2.74℃，升华干燥阶段物料的温度应低于共融点温度。低得太多，升华时间加长，这时升华速率低。高于共融点温度，则产品融化，出现干缩现象。因此第一阶段干燥温度为-20℃～-10℃。
当温度在共融点温度-2.74℃时三七开始融化吸收能量，为了防止干燥过程冻三七温度升高过快导致内部结构塌陷，第二阶段温度为-5℃～5℃。
第三阶段干燥为解析干燥过程，温度10℃-30℃，可除去物料内部结合水，使产品彻底干燥，延长产品保质期，在此温度条件下，产品皂苷含量最高。
基于上述原理，可使三七样品快速冷冻，使微细冰晶均匀的分布于物料中，保证物料在冷冻过程中结构不被破坏，保持活性，同时缩短了冷冻时间，提高冷冻效率；冷冻完全后，先在低于共晶点的温度区间让物料中的冰晶升华成水蒸气逸出，然后程序升温，让物料内剩余的10％左右的水分从分子吸附中解吸出来。这种阶段式干燥方法，可以防止物料发生局部融化崩解，影响干燥后的产品质量，还可以缩短干燥时间，提高干燥效率，克服了干燥时间较长的缺点。
基于本发明提供的三七真空冷冻干燥方法获得的三七，可以直接粉碎，粉碎率高，克服了产品极硬的缺点，最大程度地保持了三七的有效成分，提高产品有效性，可以用于制备三七中药颗粒剂等，做成颗粒的形式，避免了三七粉末的粘附性，提高产品利用率；冻干三七颗粒可直接吞服或泡水服用，服用量更为精确，携带、储藏、运输方便，产品标准化更强，从而推进了三七制品中药颗粒剂的广泛应用。
本发明以下实施例或对比例选择相同品质的三七作为原材料。
实施例1
(1)净制：将采挖的新鲜三七除去剪口、须根、绒根等部位，留下三七主根；
(2)清洗：将新鲜三七放入清洗机中深度清洗，然后采用沥干机风吹沥干除水(沥干机抖动速率20～30次/min、风吹速率800-1200rpm)；
(3)破碎过筛：将清洗干净的新鲜三七与适量水一起放入破壁机中，三七与水的比例为1:3(g/ml)，搅打至匀浆，过1号筛，粗渣再与适量水混合破碎，三七与水的比例为1:2(g/ml)，过7号筛；
(4)真空冷冻干燥：将三七匀浆放入真空冷冻干燥机中预冷冻，然后在干燥仓内进行真空干燥处理；第一阶段冷冻温度为-20℃，冷冻时间2h；第二阶段冷冻温度为-40℃，冷冻时间3h；第三阶段冷冻温度为-60℃，冷冻时间2h；以5～10℃/min的降温速率降温；干燥温度第一阶段为-20℃，真空度为1pa，干燥时长为4h；第二阶段为5℃，真空度为1pa，干燥时长为2h；第三阶段为30℃，真空度为1pa，干燥时长为5h；
(5)粉碎：将冻干三七进行超微粉碎，过9号筛；
(6)制软材：将冻干三七粉与辅料(微晶纤维素、甘露醇)按比例充分混合，加40％乙醇制成软材；
(7)制粒：将软材投入喷雾制粒机中制粒；
(8)包衣：流化床喷雾包衣；特别地，(6)-(8)步骤中，冻干三七粉与其他辅料的重量比例为7:3；
(9)灭菌：将处理好的三七颗粒放入臭氧灭菌箱中，臭氧灭菌处理2h，臭氧浓度平均为12ppm；
(10)包装：将冻干三七颗粒用铝箔袋包装。
实施例2
(1)净制：将采挖的新鲜三七除去剪口、须根、绒根等部位，留下三七主根；
(2)清洗：将新鲜三七放入清洗机中深度清洗，然后采用沥干机风吹沥干除水(沥干机抖动速率20～30次/min、风吹速率800-1200rpm)；
(3)破碎过筛：将清洗干净的新鲜三七与适量水一起放入破壁机中，三七与水的比例为1:5(g/ml)，搅打至匀浆，过1号筛，粗渣再与适量水混合破碎，三七与水的比例为1:2(g/ml)，过7号筛；
(4)真空冷冻干燥：将新鲜三七匀浆放入真空冷冻干燥机中预冷冻，然后在干燥仓内进行真空干燥处理；第一阶段冷冻温度为-40℃，冷冻时间3h；第二阶段冷冻温度为-50℃，冷冻时间4h；第三阶段冷冻温度为-75℃，冷冻时间1h；以5～10℃/min的降温速率降温；干燥温度第一阶段为-20℃，真空度为1pa，干燥时长为5h；第二阶段为-5℃，真空度为1pa，干燥时长为4h；第三阶段为30℃，真空度为1pa，干燥时长为6h；
(5)粉碎：将冻干三七进行超微粉碎，过9号筛；
(6)制软材：将冻干三七粉与微晶纤维素、甘露醇、可溶性淀粉充分混合，加适量40％乙醇制成软材；
(7)制粒：将软材投入喷雾制粒机中制粒；
(8)包衣：流化床喷雾包衣；特别地，(6)-(8)步骤中，冻干三七粉与其他辅料的重量比例为7:3；
(9)灭菌：将处理好的三七颗粒放入臭氧灭菌箱中，臭氧灭菌处理3h，臭氧浓度平均为10ppm；
(10)包装：将冻干三七颗粒用铝箔袋包装；
实施例3
(1)净制：将采挖的新鲜三七除去剪口、须根、绒根等部位，留下三七主根；
(2)清洗：清洗：将新鲜三七放入清洗机中深度清洗，然后采用沥干机风吹沥干除水(沥干机抖动速率20～30次/min、风吹速率800-1200rpm)；
(3)破碎过筛：将清洗干净的新鲜三七与适量水一起放入破壁机中，三七与水的比例为1:7(g/ml)，搅打至匀浆，过1号筛，粗渣再与适量水混合破碎，三七与水的比例为1:3(g/ml)，过7号筛；
(4)真空冷冻干燥：将新鲜三七放入真空冷冻干燥机中预冷冻，然后在干燥仓内进行真空干燥处理；第一阶段冷冻温度为-30℃，冷冻时间3h；第二阶段冷冻温度为-40℃，冷冻时间3h；第三阶段冷冻温度为-65℃，冷冻时间4h；以5～10℃/min的降温速率降温；干燥温度第一阶段为-10℃，真空度为1pa，干燥时长为5h；第二阶段为5℃，真空度为1pa，干燥时长为4h；第三阶段为10℃，真空度为1pa，干燥时长为6h；
(5)粉碎：将冻干三七片进行超微粉碎，过9号筛；
(6)制软材：将冻干三七粉与微晶纤维素、甘露醇充分混合，加适量50％乙醇制成软材；
(7)制粒：将软材投入喷雾制粒机中制粒；
(8)包衣：流化床喷雾包衣；特别地，(6)-(8)步骤中，冻干三七粉与其他辅料的重量比例为7:3。
(9)灭菌：将处理好的三七颗粒放入臭氧灭菌箱中，臭氧灭菌处理3h，臭氧浓度平均为12ppm；
(10)包装：将冻干三七颗粒用铝箔袋包装；
实施例4
(1)净制：将采挖的新鲜三七除去剪口、须根、绒根等部位，留下三七主根；
(2)清洗：将新鲜三七放入清洗机中深度清洗，然后采用沥干机风吹沥干除水(沥干机抖动速率20～30次/min、风吹速率800-1200rpm)；
(3)破碎过筛：将清洗干净的新鲜三七与适量水一起放入破壁机中，三七与水的比例为1:3(g/ml)，搅打至匀浆，过1号筛，粗渣再与适量水混合破碎，三七与水的比例为1:2(g/ml)，过7号筛；
(4)真空冷冻干燥：将新鲜三七片放入真空冷冻干燥机中预冷冻，然后在干燥仓内进行真空干燥处理；第一阶段冷冻温度为-30℃，冷冻时间2h；第二阶段冷冻温度为-45℃，冷冻时间3h；第三阶段冷冻温度为-60℃，冷冻时间1h；以5～10℃/min的降温速率降温；干燥温度第一阶段为-15℃，真空度为1pa，干燥时长为4h；第二阶段为5℃，真空度为1pa，干燥时长为2h；第三阶段为40℃，真空度为1pa，干燥时长为4h；
(5)粉碎：将冻干三七进行超微粉碎，过9号筛；
(6)制软材：将冻干三七粉与微晶纤维素、甘露醇充分混合，加适量60％乙醇制成软材；
(7)制粒：将软材投入喷雾制粒机中制粒；
(8)包衣：流化床喷雾包衣；特别地，(6)-(8)步骤中，冻干三七粉与其他辅料的重量比例为7:3。
(9)灭菌：将处理好的三七颗粒放入臭氧灭菌箱中，臭氧灭菌处理2h，臭氧浓度平均为13ppm；
(10)包装：将冻干三七颗粒用铝箔袋包装；
对比例1
该过程同实施例1，不同区别在于冷冻干燥前未粉碎。
对比例2
该过程同实施例1，不同区别在于冷冻干燥后粉碎粒度不一样，粉末过5号筛。
对比例3
该过程同实施例1，不同区别在于预冷冻条件不一样：将新鲜三七匀浆放入真空冷冻干燥机中预冷冻，预冻温度为-30℃，冷冻时间10h。
对比例4
该过程同实施例1，不同区别在于干燥条件不一样：干燥温度第一阶段为-20℃，真空度为1pa，干燥时长为5h；第二阶段为20℃，真空度为1pa，干燥时长为10h。
对比例5
该过程同实施例1，不同区别在于制粒后不包衣。
对比例6
(1)三七分拣；
(2)去除大根和须根；
(3)高压水枪冲洗或者毛刷清洗设备清洗；
(4)漂洗3次；
(5)冷藏；冷藏温度为-8～4℃。
(6)速冻；每分钟10-15℃的降温速度进行速冻温度到－25℃～－50℃保持1～5小时。
(7)升华干燥；升华干燥温度为－28℃～－38℃，绝对压强为3～9pa，干燥时间为：18～36小时。
(8)解析干燥；解析干燥的温度为：－40℃～－50℃，绝对压强为8～13pa，干燥时间：2～5小时。
(9)同实施例1制软材、制粒、包衣、灭菌、包装成品。
对比例7
(1)前处理：采挖后的新鲜三七，经分选挑拣，将鲜三七所附的剪口、须根、绒根分离剔除后，得到三七主根，清洗除去表面附着物，沥干表面水分，用切片机切制成0.5～2mm的片状物；
(2)预冷冻：将三七片放入温度设定在-15℃～-20℃的预冻室内，预冷冻5～6小时；
(3)升华干燥：将预冷冻好的三七片，铺平放置于由导热材料制成的台盘上，铺料厚度控制在5cm以下，移至真空干燥室内；密闭后，开始抽真空，保持真空压力30～70帕，并将台面温度设定为40℃，给台盘持续供热，真空升华干燥7～10小时，直至台盘温度升至40℃；
(4)解析：保持台盘温度为40℃，持续6～10小时，直至物料温度上升至40℃，物料水分控制在3％～5％；
(5)同实施例1制软材、制粒、包衣、灭菌、包装成品。
对比例8
(1)剪切新鲜三七，将三七的须根﹑剪口﹑焉七、坏七部分剪去；
(2)洗涤新鲜三七，清洗至无泥点；
(3)将洗涤好的三七均匀铺盘，放置于轨道上的托盘小车中，放置完毕后，将托盘小车沿着轨道转运至速冻库中，关闭好速冻库，冷冻温度为-35℃，冷冻至透心；
(4)将冻好的三七转移至干燥仓中，打开真空机组和制冷机组进行真空干燥，干燥包括第一干燥阶段、第二干燥阶段和第三干燥阶段：
第一干燥阶段的工艺参数包括：加热温度为5℃，加热时间为20h，真空度为25-30pa；
第二干燥阶段的工艺参数包括：加热温度为20℃，加热时间为12h，真空度为15-20pa；
第三干燥阶段的工艺参数包括：加热温度为60℃，加热时间为15h，真空度为2-15pa；
(5)预粉碎冻干三七，其中粉碎的工艺参数：预粉碎后粒度为40目；
(6)超微粉碎，其中超微粉碎的工艺参数：物料温度为2℃，粉碎时间为15min，超微粉碎后粒度为550目；
(7)同实施例1制软材、制粒、包衣、灭菌、包装成品；
对比例9
(1)预热阶段：将鲜三七放入烤房内，逐渐加温，使烤房温度达40℃，烤房车间内湿度不能低于80％，时间为7小时；
(2)干燥阶段：将烤房内温度上调到50℃，湿度设置为60％，干燥7小时；
(3)脱水阶段：温度保持50℃，将烤房内的湿度由60％逐步递减至20％，时间为23小时；
(4)降温阶段：温度降到35℃，湿度仍然为20％，时间为7小时。
(5)同实施例1制软材、制粒、包衣、灭菌、包装成品。
对比例10
(1)将采挖的新鲜三七除去剪口、须根、绒根等部位，留下三七主根；
(2)清洗消毒：清洗掉三七中的泥沙、去除异物以及枯黄叶，无可见泥土及明显异物，清洗后的三七用300ppm浓度的过氧乙酸溶液浸泡30min，用于杀菌消毒，消毒后的三七用洁净的水冲洗5min；
(3)切片：将三七切片，三七切片的厚度为至3mm，然后用流动水冲洗一遍；(4)沥干：静置于自然环境中沥水10min；
(5)铺盘：沥干后的三七片均匀的平铺在网状托盘上，平铺高度2cm，托盘网孔直径为0.4mm；
(6)热风烘干：将托盘放入热风干箱中，风速0.25m/s，热风干箱的温度在40℃，烘干1h；
(7)真空冷却：风干后的三七片在真空环境下，三七片冷却到6℃；
(8)速冻：将冷却后的三七片放入冷冻室中在温度为-60℃，速冻3h；
(9)真空冻干：a.升华干燥：将速冻后的三七片放入真空冷冻干燥设备中，抽真空至80pa，冻干温度在-85℃，时间为3h；b.解吸干燥：然后将真空冷冻干燥设备抽真空至50pa，冻干温度在-60℃，时间为4h；
(10)同实施例1制软材、制粒、包衣、灭菌、包装成品。
对比例11
(1)剔除鲜三七根的须根和绒根，得到三七主根，清洗三七主根并去除表面附着物，然后沥干水分；
(2)将沥干水分后的三七主根依次在第一环境中静置45h、第二环境中静置65h和第三环境中静置28h；其中，第一环境中：温度为22℃，相对湿度为12％，气体的浓度为0.55μl/l；氧气、二氧化碳、氮气和1-甲基环丙烯的摩尔比为1:0.45:2.7:0.35；第二环境中：温度为10℃，相对湿度为7％，气体的浓度为0.37μl/l；氧气、二氧化碳和氮气的摩尔比为1:0.6:1.7；第三环境中：温度为3℃，相对湿度为4％，气体的浓度为0.15μl/l；氧气、二氧化碳和臭氧的摩尔比为1:0.4:0.15；
(3)将静置后的三七主根置于冷冻箱，降温至-11℃，保温9h，然后以1.5℃/min的降温速率降温至-28℃，保温12h，使三七主根冻结；
(4)将冻结后的三七主根放入真空冷冻干燥机中，抽真空，使真空度为0.06mbar，冷阱温度为-49℃，冷冻38h，然后从真空冷冻干燥机中取出，得到含水质量低于5％的冻干三七；
(5)采用真空密闭型pvc复合膜袋，将冻干三七用真空包装机器按重量进行密闭封存。
对比例12
采用专利公开文件cn106074644a中的方法，具体参数为：-30℃，预冻结25h；抽真空至30pa，在冷阱温度-50℃，冷冻干燥10h。其他步骤同实施例1。
对比例13
采用专利公开文件cn106074644a中的方法，具体参数为：-40℃，预冻结20h；抽真空至50pa，在冷阱温度-60℃，冷冻干燥15h。其他步骤同实施例1。
实验例
选取从同一个亩田地中种植的成熟三七，称取三七15.0kg，将其平均为分17等份，取其中4等份分别按照实施例1-4的工艺来干燥三七，剩余13等份分别按照对比例1-13的工艺来干燥三七。
实验例1
取实施例1-4和对照例1-5的三七颗粒各15份，记录此时的质量，根据合格颗粒的规定用一号筛与五号筛叠加筛粒，称量两种筛之间颗粒的质量并记录，采用计算公式如下：合格颗粒收率＝合格颗粒重量(g)/总颗粒重量(g)×100％。合格颗粒收率测定结果见表1。
实验例2
采用固定漏斗法测定休止角，将3只漏斗串联并固定于水平放置的坐标纸上3cm高度处，分别将实施例1-4和对照例1-5的三七颗粒沿漏斗侧壁倒入最上面的漏斗中，直至坐标纸上形成的药粉圆锥体尖端接触到漏斗口为止，测出圆锥体的堆高(h)和底部直径(2r)，按照公式tga＝h/r，各种颗粒平行测定3次，计算休止角的平均值。流动性(休止角)测定结果见表1。
实验例3
取实施例1-4和对照例1-5的三七颗粒适量，参照2015年版《中国药典》水分测定法(通则0832)测定含水量，结果见表1。
实验例4
取底部盛有过饱和氯化钠溶液的玻璃干燥器皿放入25℃恒温培养箱内恒温24h，使得玻璃器皿中相对湿度保持为75％。在已恒重的称量瓶底部放入厚度约2mm的实施例1-4和对照例1-5三七颗粒2g，打开称量瓶盖，置于过饱和氯化钠溶液的玻璃干燥器内，96h后取出准确称重，按下式计算吸湿率。吸湿率＝(吸湿后颗粒重量－吸湿前颗粒重量)/吸湿前颗粒重量×100％。吸湿率测定结果见表1。
表1实验结果
由表1可知，实施例1-4制备工艺得到的三七颗粒合格收率均在97％以上，含水量均在1％～3％之间，吸湿量均为0％，其中实施例1的合格收率最高，含水量最低，说明实施例1的方法最佳，样品得率最高；实施例1与对比例1-5进行比较，颗粒收率有差异，其中对比例2的收率最低，说明制软材前的粉末粒度对颗粒收率影响最大；实施例1-4与对比例1-5制备工艺得到的休止角均在24％～28％之间，差异不明显，说明工艺对休止角的影响不大；对比例1、对比例3-4的含水量明显较高，说明样品真空冷冻干燥前是否破碎、冷冻温度与干燥条件均可影响样品含水量；实施例1与对比例1-5进行比较，实施例1的吸湿量最低，对比例5的吸湿量最高，说明颗粒是否包衣对吸湿性影响很大，包衣可降低颗粒吸湿性，延长样品储存时间。
实验例5
参照2015年版《中国药典(一部)》，将三七皂苷r1、人参皂苷rg1、人参皂苷rb1的总含量作为本次实验的测定有效成分皂苷含量考察指标，分别对上述实施例1和对比例1-9及对比例12-13制备得到的三七产品进行皂苷含量测定。结果见表2。
表2：人参皂苷含量测定结果
由表2可知，实施例1-4中的皂苷总量均比较高，说明采用本发明真空冷冻干燥方法获得的皂苷总量更高，相比现有技术有较大的改进。另外，实施例1与对比例1进行比较，实施例1的皂苷含量高，说明冷冻干燥前对鲜样品进行破碎处理可以提高有效成分溶解度。实施例1与对比例2进行比较，皂苷含量差异不大，说明冷冻干燥后粉末粒度对皂苷含量影响不大；实施例1与对比例3-4进行比较，皂苷含量差异较大，说明真空冷冻干燥条件可影响皂苷含量，其中干燥条件影响最大；实施例1与对比例6-9进行比较，实施例1皂苷含量最高，对比例9的皂苷含量最低，说明本发明方法得到的产品剂型相较于传统剂型更有利于有效成分溶出；另外，实施例1-4与对比例12-13进行比较，皂苷含量较高，说明采用本发明分阶段真空冷冻干燥方法，可以提升三七的品质。
实验例6：活血作用比较
取实施例1和对照例6-9的三七样品，加水煎煮5分钟，过滤，浓缩为10ml的水溶液，吸取定量灌胃给药，应用于角叉菜胶造成的血栓模型，比较血栓重量、血栓指数、血栓长度及血栓形成率。阳性药物组给予阿斯匹林肠溶片cmc-na混悬液灌胃。
血栓模型制备：用生理盐水配制0.5％的角叉菜胶溶液，于给药第2d皮下注射角叉菜胶40mg/kg诱发血栓形成。
检测：于末次给药后1h，以20％乌拉坦腹腔注射麻醉，分离一侧颈总动脉和另一侧颈外静脉行旁路血栓实验。准备6cm长的丝线，实验前精确称重，插管成功开始记时，15min后取出丝线称重，计算血栓重量以及血栓指数；于末次给药1h后直尺测定小鼠尾部血栓长度及计算血栓形成率。实验结果见表3。
表3对大鼠动静脉旁路血栓形成的影响
由表3可知，各组均显示出抗血栓形成作用，说明三七在该模型中具有确切的抗血栓作用。实施例1和对比例8的抗血栓效果与阳性对照组相当，提示冻干超细粉和冻干颗粒2种剂型疗效较好。
表4对小鼠尾部血栓形成的影响
由表4可知，实施例1和对比例8显示出很强的抗血栓作用，其中实施例1的抗血栓作用最强，说明颗粒剂的生物利用度较高；对比例9的抗血栓作用明显减弱，提示传统三七的抗血栓的合适剂量高于其他组。
实验例7
取实施例1和对照例6-9的三七样品，用茶袋包好，将其置于60℃水中，每隔半分钟取出沥干，测定其质量，直至质量不再增加为止，记录所需时间，此时间即为复水时间；
复水比测定：取干燥后的三七切片，用茶袋包好，称量记为ma，然后将其置于60℃水中，10min后沥干水，称量并记为mb，复水比＝mb/ma；
实验结果见表5。
表5复水时间及复水比结果
由表5可知，实施例1的复水比最小，复水时间最短，复水效果较好；对比例9的复水比最大，复水时间最长，复水效果最差；对比例8样品由于是超微粉末，沾水后易结块，复水效果不好。
实验例8
将实施例1和对比例6-11制备得到的冻干三七分别进行细菌总数的测定，测定的具体结果如下表6所示。
表6：细菌总数测定结果
由表6可知，实施例1与对比例10-11的细菌总数几乎未检出，说明该3个灭菌工艺可行。对比例10中采用300ppm浓度的过氧乙酸溶液浸泡30min杀菌，该方法采用的是强氧化剂杀菌，具有强烈刺激性气味，极易不稳定，易爆炸，生产不安全，服用也会影响人体健康。对比例11中采用多种气体抑制微生物生长能够达到灭菌目的，但是成本较高。
本发明并不仅仅限于说明书和实施方式中所描述，因此对于熟悉领域的人员而言可容易地实现另外的优点和修改，故在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念的精神和范围的情况下，本发明并不限于特定的细节、代表性的方案和这里示出的实验示例。