本发明具体涉及一种有机活性因子异味分解剂的制备工艺及分解剂。
背景技术
近年来异味污染对人体产生不容忽视的危害,世界各国对异味造成的环境污染都高度关注,对异味处理技术的研究也日益活跃。虽然有机活性因子异味分解技术的研究历史尚短、部分工作还停留在实验阶段,但由于其具有传统方法所不能比拟的优势性和安全性,发展潜力巨大、应用前景极为广阔。
技术实现要素:
为解决上述技术问题,本发明的目的是提供一种处理效率高,无二次污染,所需设备简单、易操作、费用低、便于维护、管理,发展潜力巨大,应用前景广阔的有机活性因子异味分解剂的制备工艺及及分解剂。
本发明有机活性因子异味分解剂的制备工艺,包括:
s1将液体态的光合菌类、醋酸杆菌类、放线菌类、乳酸菌类、酵母菌类及假单胞菌类六类菌群进行种子发酵;
s2混合菌株的扩大化培养:将各菌株的种子发酵液按1∶1∶2∶3∶1∶2∶1的比例接入混合菌生长的合成培养基中,按照大罐液体发酵法工业发酵流程进行发酵,发酵过程中同时进行监测发酵液中的活菌数;所述混合菌生长的合成培养基包括以下重量份的组分:(nh4)2so410,kh2po450,na2hpo450,mgso4·7h2o50,cacl225,酵母膏2,蛋白胨1,自来水100,碳源5;
s3在s2中得到混合发酵液中加入自来水,发酵液和自来水的重量份比例为1∶10,得到有机活性因子活性分解剂成品。
进一步地,s2中所述的种子发酵具体包括:
在将放线菌、酵母菌、醋酸杆菌接种至三角瓶,摇床培养,摇床转速180r/min,温度控制在28℃;
光合细菌的培养:将光合细菌接种至3l半密闭细口玻璃瓶,室温,1000lux光照培养,间隙摇动;
乳酸菌的培养:将乳酸菌接种至密闭细口玻璃瓶中,28℃下静止培养。
假单胞菌的种子培养方法采用目前比较常用的任一种子培养方法即可。
进一步地,混合菌群生长的ph和温度范围,ph为
进一步地,混合菌群生长的ph和温度范围,
进一步地,碳源为红糖,氮为有机氮或无机氮。
本发明有机活性因子异味分解剂,采用上述所述的有机活性因子异味分解剂的制备工艺制备而成。
借由上述方案,本发明有机活性因子异味分解剂的制备工艺及分解剂至少具有以下优点:
1、绿色环保:使用的活性因子均来自纯天然有益菌群,培养基为有机营养液,不含任何化工成分和转基因成分;有机活性因子在吸附分解异味分子后会自行分解、消亡,无残留,不会造成二次污染。
2、广谱高效:有机活性因子异味分争剂使用范围广,在工业、农业、畜牧业、建筑业、医药业等数十个方面都能使用。除异味效果是在有异味场地直接使用本产品5分钟见其效。
3、除味费低:有机活性因子异味分解剂用量少、功效高、无残留、无污染、无后续费用,使用普通设备就能进行标准化作业。
4、化害为益:有机活性因子异味分解剂能彻底分解发浓烈异味的腐败有机物质,使之全部转化为可被植物直接吸收的有机养料。可用于农业堆肥和生活垃圾处理,化害为益。
上述说明仅是本发明技术方案的概述,为了能够更清楚了解本发明的技术手段,并可依照说明书的内容予以实施,以下以本发明的较佳实施例详细说明如后。
具体实施方式
下面实施例,对本发明的具体实施方式作进一步详细描述。以下实施例用于说明本发明,但不用来限制本发明的范围。
实施例1
本实施例有机活性因子异味分解剂的制备工艺,包括:
s1将液体态的光合菌类、醋酸杆菌类、放线菌类、乳酸菌类、酵母菌类及假单胞菌类六类菌群进行种子发酵;
s2混合菌株的扩大化培养:将各菌株的种子发酵液按1∶1∶2∶3∶1∶2∶1的比例接入混合菌生长的合成培养基中,按照大罐液体发酵法工业发酵流程进行发酵,发酵过程中同时进行监测发酵液中的活菌数;所述混合菌生长的合成培养基包括以下重量份的组分:(nh4)2so410,kh2po450,na2hpo450,mgso4·7h2o50,cacl225,酵母膏2,蛋白胨1,自来水100,碳源5;
s3在s2中得到混合发酵液中加入自来水,发酵液和自来水的重量份比例为1∶10,得到有机活性因子活性分解剂成品。
碳源为红糖,氮为有机氮或无机氮。
s2中所述的种子发酵具体包括:
在将放线菌、酵母菌、醋酸杆菌接种至三角瓶,摇床培养,摇床转速180r/min,温度控制在28℃;
光合细菌的培养:将光合细菌接种至3l半密闭细口玻璃瓶,室温,1000lux光照培养,间隙摇动;
乳酸菌的培养:将乳酸菌接种至密闭细口玻璃瓶中,28℃下静止培养。
该混合菌群生长的ph和温度范围较广,ph为
实施例2
本实施例有机活性因子异味分解剂,采用上述实施例1所述的有机活性因子异味分解剂的制备工艺制备而成。
1、光合菌群
光合细菌(photosyntheticbacteria简称:psb)属细菌中的一类,有紫硫菌、绿硫菌、紫色非硫细菌和绿色非硫细菌。本实验室分离到的兼性厌氧菌主要是紫色非硫细菌,属原核生物界,光能异养型原核生物门,红色光合细菌纲,红蜾菌目(rhodospirillales),红螺菌科(rhodospirillaceae),红假单胞菌属(rhoropseudoaonas)和红螺菌属(rhodospiri1lum)。
光合菌群(好气性和嫌气性),如光合细菌和蓝澡类。光合菌群由自养微生物分离而来,具有化害为利的特殊功能,即可将有害物质转变成为无害物质,并以植物的分泌物、有机物、有害气体(硫化氢等)及二氧化碳、氨等为基质,合成糖类、氨基酸类、维生素类、氨素化合物和生理活性物质等,是肥沃土壤和促进动植物生长的主要组成部分。光合菌群的代谢物质可以被植物直接吸收,也可以成为其它有益微生物的营养物质。因此,随着光合菌群的增殖,其它有益微生物也相应增殖。
2、乳酸菌群
乳酸菌(lacticacidbacteria简称:lab)是一类能从可发酵碳水化合物(主要指葡萄糖)产生大量乳酸的细菌的统称,目前已发现的这一类菌在细菌分类学上至少包括18个属,主要有:乳酸杆菌属(lactobacillus),双歧杆菌属(bifidobacterium),链球菌属(streptococcus)等,本发明主要筛选的主要是乳酸杆菌属(lactobacillus),链球菌属(streptococcus)的若干个种。
乳酸菌群(嫌气性)它以摄取光合细菌、酵母菌产生的糖类等物质为基础,制作乳酸。乳酸具有很强的杀菌能力,能有效抑制有害微生物的活动,以及有机物的急剧腐败分解。乳酸菌能够使常态下不易分解的木质素和纤维素等变得容易分解,并且消除未分解有机物产生的种种弊端,在有机物发酵分解上发挥突击队的重要作用,它将未腐熟的有机物质转化成对动植物有效的养份。乳酸菌的另一个重要作用,就是能够抑制连作障碍产生的致病菌增殖。一般情况下,致病菌如果增加,植物就会衰弱,有害线虫也会急剧增加。乳酸菌抑制了致病菌的活动,有害线虫也逐渐消失。
3、假单细胞菌类
本发明从土壤中分离到具有很强活性分解能力的一株荧光假单胞杆菌变种。荧光假单胞杆菌广泛存在于土壤中,是定殖于植物根际的优势细菌种群。由于此类细菌大量存在于植物根围,又称根际细菌(rhizobacteria)。此类细菌以其分布广泛、适应能力强、繁殖速度快、易于人工培养、对许多病原菌具有很强的拮抗作用,成为近年来报道最多、最具生防潜力和应用价值的生防菌。
4、酵母菌群
酵母菌群(好气性)它利用氨基酸、糖类及其它有机物质产生发酵力,产生出促进细胞分裂的活性化物质。酵母菌菌群中对于促进其它的有效微生物(如乳酸菌、放线蔺)增殖所需要的基质(食物)的生产提供重要的给养保障。此外,酵母菌生产的单细胞蛋白是动物不可缺少的有效养份。
5、放线菌群
放线菌(好气性)是细胞和霉菌的中间形态。它从光合细菌中获取氨基酸、氨素等作为基质,产生出各种抗生物质,可以直接抑制病原菌。它提前获取有害霉菌和细菌增殖所需要的基质,从而抑制它们的增殖,并创造出其它有益微生物增殖的生存环境。放线菌和光合细菌组成的混合菌群,其抑菌作用比单一放线菌成倍增加。另外,被放线菌分解的物质容易被动植物吸收,从而增强动植物对各种病害的抵抗性和免疫性。
本研宄获得了一株新的链霉菌变种,即委内瑞拉链霉菌秦岭变种,该变种具有很强的抑菌活性。
6、醋酸菌群
醋酸杆菌(好气性)它是氨素合成中具有代表性的微生物。它从光合细菌中摄取糖类固态氮,然后一部分供给植物,另一部分再还给光合细菌,形成好气性和嫌气性细菌结构的共生态
本发明有机活性因子异味分解剂的应用试验
1、对生活污水除异味试验
取家庭厨房洗米、洗菜、洗鱼等混合污水,将其放置几天发出强烈异味后,取混合菌液不同浓度的投放量对嗅阈值不同的污水进行除异味处理,测定不同浓度菌系菌液的投放量对污水除异味效果的影响。实验表明:当液体菌系的投放量为污水的0.2%时,除异味效果最好;并且用对不同嗅阈值生活污水除异味处理,结果是当污水的嗅阐值越高时,除异味的效果越显著。这被认为是该污水中含有较多的营养物质,使所加菌种的活性较高,进而除异味效果较好。
2、池塘自然水体除异味试验
采用在桥巩(本研制室养殖基地)的鱼塘的污水中投入有机活性因子分解剂菌液的方法,系统评价了该有机活性因子分解剂菌液对污水中三类常见污染物去除率的影响。结果表明:①好氧条件下,有机活性因子分解剂菌液显著提高污水codcr去除率,适宜加入量(v菌液/v污水)为5/10000~1/1000,增幅达10%;②有机活性因子分解剂菌系在好氧条件下能显著或极显著提高污水
3、室内垃圾除异味试验
于一间密封的房间内放一堆已高度腐烂的产生浓烈异味的垃圾(主要是生活垃圾),在垃圾周围设置不同的采集地点进行采样和喷药,各测定喷药前及喷药后15min异味中的nh3、h2s浓度,实验结果表明有机活性因子异味分解剂菌系对生活垃圾具有明显的除异味效果,nh3最高去除率可达88.98%,h2s的最高去除率可达82.33%。
4、禽畜笼舍空气除异味试验
运用喷洒法将有机活性因子活性分解剂菌系液体按每m3空间往地面上均匀喷洒,测定氨和硫化氢的浓度。栏舍内5点采样,取平均值,重复实验5次。结果表明,本分解剂菌系可使鸡舍内的氨和硫化氢分别平均降解72.5%和81.8%,舍内空气氨和硫化氢浓度分别平均降到16.8mg/m3和3.9mg/m3明显降低鸡舍内的异味。研究表明有机活性因子活性分解剂菌系是目前净化禽畜笼舍空气最好的净化剂。
5、养殖场鸡舍主要致病性微生物的监测及抗菌实验
在对良塘、桥巩、小平阳、太阳村等地8家养鸡场鸡舍空气主要致病性微生物的污染情况进行调查的基础上,应用该异味分解剂进行消毒,比较处理前后的主要致病性微生物的变化。结果表明:处理后鸡舍空气中所含致病微生物显著降低。总细菌杀灭率达86%~94%,大肠杆菌杀灭率达
6、家用电冰箱抗菌除异味试验
为了解家用冰箱的细菌与真菌污染情况对十多台使用中的冰箱采样112份进行检测,观察冰箱细菌和真菌是否超标。将有机活性因子异味分解剂菌系的菌液稀释成不同浓度,按一定的投放量对家用冰箱进行喷洒除异味处理,测定分解剂菌液对冰箱异味的去除能力及不同浓度菌液对冰箱除异味效果的影响。实验表明该分解剂菌系对冰箱中的异味有很好的清除效果。
7、运动鞋抑菌除异味试验
为了测试有机活性因子异味分解剂对运动鞋的抑菌除异味效果,在实验室及现场对该样品进行了抑菌试验和皮肤刺激试验。喷雾法检测微生物抗菌除异味菌系对运动鞋的抑菌效果试验;试验结果表明该微生物抗菌除异味菌系原药对金黄色葡萄球菌和白色念珠菌抑菌率分别为93%和95%,将原药稀释1∶50倍,对金黄色球菌抑菌率为90.95%:对白色念珠菌抑率90.90%。现场试验结果表明,用有机活性因子活性分解剂进行喷雾,对鞋内自然污染菌平均抑菌率为97.06%。皮肤刺激试验表明该样品对皮肤无刺激,适用于对鞋袜的抑菌除异味。
8、病房抑菌除异味实验
采用有机活性因子异味分解剂菌系对病房浓烈异味进行喷雾处理,经喷雾
9、房屋、汽车甲醛、霉味除臭实验
采用有机活性因子除臭菌系对新装修房屋及新车的甲醛、霉味、油漆味进行喷雾处理,经喷雾2-5分钟恶臭味基本消失,空气质量明显得到提高。本品适-应于泛用于房屋、车子的甲醛、霉味油漆味的消毒除臭。
本发明有机活性因子异味分解剂的特点表述如下:
纯绿色环保。由于有机活性因子异味分解技术是利用能够转化或降解异味物质的特殊活性因子的高吸附、吸收和分解作用,对异味源进行分解转化。不含任何化工成分,也不含转基因成分,不会造成二次污染,代表着生物环保产业发展的未来方向。
处理功效高。采用有机活性因子异味分解技术能大大增强其处理异味污染的功效,与化工方法和生物方法相比,有机活性因子异味分解技术对有机物的分解、转化速度是以上方法的100倍。异味源在投放有机活性因子异味分解剂后,能快速祛除异味,净化水质,降低cod、bod5、氨、氮等在空气中含量,达到处理异味污染的目的。
适应性更广。有机活性因子异味分解技术特别对混生菌微生物的分解降低了自身生存条件,增强适应性,减少过滤,适应多种湿度、温度和ph值范围,在低氧环境中也能有效发挥作用,在无氧环境中能长期存活。
更有针对性。有机活性因子异味分解技术具有标本兼治的特性,可广泛应用于不同领域、不同用途、不同环境的异味污染;并可根据治理对象的具体情况,专门研发出针对性更强、更高效力的产品。
治理成本低。有机活性因子异味分解剂生产过程简单,环境要求低,不用大规模征地建厂或购买庞大设备,按市场需求确定产能,根据实力动态投资,综合成本低,而治理异味污染效果却非常显著。
化害为益优。有机活性因子异味分解技术能把不能回收利用的腐败的有机物、污水厂的污泥、制糖厂的尾液、淀粉厂的残浆、城市的生活垃圾等经过有机活性因子异味分解剂处理后,都能变成农作物最好的有机肥。
无污染残留。有机活性因子异味分解剂与传统化工产品相比,化工产品都是针对性较强的产品,当遇到复杂的混合基质时,便会失效;使用化工产品之后,在空气、地表及水体中总有化学残留物,带来副作用、或新的污染;使用化工产品虽能掩盖异味,却不能停止异味的生成或阻止异味的散发。有机活性因子异味分解剂利用分解和转化作用来改变异味源的结构,从而达到彻底处理异味的目的,不存在上述问题。
无混菌异味。有机活性因子异味分解剂与传统微生物净化剂相比,传统微生物转化和降解异味源时,虽然能祛除异味,但又形成另一个混合细菌群,产生新的异味。有机活性因子异味分解剂快速分解。
有机活性因子是从微生物这个庞大家族中筛选出来的、具有超强活动能力、分解能力和生存能力的全新有益微生物种群。
自然界中微生物资源极其丰富,土壤、水、大气、动植物及其腐败残骸都是微生物的主要栖居和生长繁殖场所,在这些场所可以寻找到有益微生物菌群。随着微生物学研究工作的不断深入,新的微生物菌种资源开发和利用的前景十分广阔。分离筛选微生物新种群的具体过程大体可分为采样、样品处理、富集培养、分离培养、纯化、性能测定和菌种鉴定等步骤。
——有机活性因子的分离和采集
本研究采样于多株微生物。
共采用3种方法进行分离:(1)划线分离法,即用接种针挑取微生物样品在固体培养基表面划线,适当条件下培养,获得单菌落;(2)涂布分离法,涂布棒蘸取培养液,或先将少量培养液滴在固体培养基表面,再用涂布棒再固体培养基表面涂布均匀;(3)稀释分离法,获得纯种的几率较大,该法是将降至60℃左右的固体培养基与一定量的菌悬液混匀后,再浇注成平板以获得单菌落。
在采集的样品中,待分离的具有除臭能力的菌株在数量上并占优势,为提高分离效率,研究人员以投其所好和取其所抗的原则采用在培养基中投放和添加特殊的养分或抗菌物质对所需菌种进行增殖培养或富集培养,使所需菌种的数量相对增加,使天然样品中的劣势菌转变为人工环境中的优势菌,如:将样品按30%的接种量加入新鲜猪粪中,反复富集至猪粪无臭化。以无臭猪粪为起始菌种添加到模拟有机垃圾中进行驯化培养。
通过以上方法,本发明从采集的样品中分离到很多株微生物,进而进行活性菌的筛选。
——活性菌的筛选
所有的微生物胄种工作都离不开菌种筛选,筛选是最为艰难的也是最为重要的步骤。为了提高筛选效率,本实验将筛选工作分为初筛和复筛两步进行。对于初筛,要力求快速、简便;对于复筛,应该做到精确,测得的数据要能够反映将来的生产水平。
根据所需菌株的特性,本实验自制了简单的初筛培养基:残菜400g,鱼头、内脏、肉渣100g,水800ml,煮沸30min,过滤,调滤液ph7.0,琼脂2%。按10%接种量接入所试菌株,分别在5d、10d、15d后用感官法初步判定微生物的活性效果。初筛工作连续进行几轮。初筛出具有活性分解能力的中温和耐高温微生物种群,其活性分解效果结果表如表1所示:
表1中温和耐高温微生物活性分解效果
从表1中可见,分离的微生物中除臭能力各异,有效百分比最低的是放线菌,为13.40%,最高的为41.66%,而且,耐高温或嗜热的细菌、真菌、放线菌,无论从有效菌株还是从有效百分比都表现出活性分解能力低于其各类的中温微生物,这初步说明在常温条件下,中温微生物的活性分解剂能力高于耐高温微生物,或者表明活性微生物的优势菌群可能属于中温微生物。进而对初筛实验中有活性分解效果的微生物进行分类编号和复筛实验。
活性微生物复筛过程采用官能检测法和异味组分测定法两种方法相结合。官能检测法是通过嗅辨人员利用其嗅觉对被检测物质进行嗅味辨别,然后通过计算得出检测结果,它包括现场官能检测法和室内液体稀释法;液体稀释法现场取鸡粪便样,在试验重内经过定量、水溶、过滤、稀释、嗅辨、数据处理等步骤,得出试验组和对照组鸡粪便异味强烈程度,最后分析以确认除异味效果。异味组分测定法主要是测定异味中主要成分一氨气和硫化氢的量:用硼酸吸收凯氏法测定氨气的量,用锌铵络盐吸收比色法测定硫化氢的量。
通过上述两种复筛试验方法,我们共筛选出73株具超强活性分解能力的菌株,其中细菌、丝状真菌、放线菌、酵母菌分别为32、13、8、20株。
——体外抗菌菌株的筛选
根据微生态学原理,用普通培养基和选择性培养基相结合的方法,自分离的固有菌群中进行致病微生物抑制试验,以筛选拮抗菌。
试验采用平板稀释法和杯碟法,自分离出很多菌株中初筛拮抗菌株,得出38株对普通大肠杆菌和金黄色葡萄球菌有抑制作用;复筛得出10株对猪源弱病毒型大肠杆菌(e.coli,c83917)o9:k103,987p:nm有抑制作用。
—一微生物活性因子菌群的初步鉴定
经初步鉴定本试验分离到的活性因子微生物主要种属类别如下:
表2活性因子微生物的种类
以上所述仅是本发明的优选实施方式,并不用于限制本发明,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明技术原理的前提下,还可以做出若干改进和变型,这些改进和变型也应视为本发明的保护范围。