35]图4为Cu2+-EDTA-Fe3O4磁粒选择性去除稀释牛血样品中的牛血红蛋白以及对照实验图，其中(a)为稀释100倍的牛血，(b)为被Cu2+-EDTA-Fe3O4磁粒吸附后的上清，(c)为被EDTA-Fe3O4磁粒吸附后的上清。
【具体实施方式】
[0036]下面结合实施例和附图对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。
[0037]下列实施例中的试剂均可购买得到。
[0038]实施例1 =Cu2+-EDTA-Fe3O4磁粒的制备
[0039](I)水热法制备 EDTA-Fe3O4磁粒，准确称取 0.5g FeCl 3.6H20(1.85mmol)，加入15mL乙二醇和15mL 二甘醇超声辅助溶解，然后边搅拌边加入1.8g尿素(30mmol)和0.35g乙二胺四乙酸二钠(1.(Mmmol)，在70°C搅拌30min形成均一溶液，将该溶液倾入50mL特氟龙高压反应釜中，放入烘箱中，然后升温至200°C，反应10h。反应结束后，冷却至室温，将产物在外加磁场下分离并用乙醇、去离子水依次充分洗涤3次，最后烘干得到产物EDTA-Fe3O4磁粒。
[0040](2)将EDTA-Fe3O4磁粒加入到0.2mmol/L的硫酸铜溶液中，室温条件下超声5min，将产物在外加磁场下分离并用去离水充分洗涤，烘干得到铜离子修饰的Cu2+-EDTA-Fe3O4磁粒。
[0041 ] (3)对步骤⑵制备得到的Cu2+-EDTA-Fe3O4磁粒进行SEM、TEM扫描观察，结果见图1。
[0042](4)对步骤⑴、⑵制备得到的EDTA-Fe3O4Xu2+-EDTA-Fe3O4磁粒进行磁滞回线测定，结果见图2。
[0043](5)对步骤(2)制备得到的Cu2+-EDTA-Fe3OJIt粒进行Zeta电势测定，结果见图3。
[0044]实施例2 =Cu2+-EDTA-Fe3O4磁粒的制备
[0045](I)水热法制备 EDTA-Fe3O4磁粒，准确称取 0.39g FeCl 3.6H20 (1.44mmol)，加入13.4mL乙二醇和16.6mL 二甘醇超声辅助溶解，然后边搅拌边加入1.44g尿素(24mmol)和0.28g乙二胺四乙酸二钠(0.83mmol)，在50°C搅拌30min形成均一溶液，将该溶液倾入50mL特氟龙高压反应釜中，放入烘箱中，然后升温至190°C，反应12h。反应结束后，冷却至室温，将产物在外加磁场下分离并用乙醇、去离子水依次充分洗涤3次，最后烘干得到产物EDTA-Fe3O4 磁粒。
[0046](2)将EDTA-Fe3O4磁粒加入到0.lmmol/L的氯化铜溶液中，室温条件下超声3min，将产物在外加磁场下分离并用去离水充分洗涤，烘干得到铜离子修饰的Cu2+-EDTA-Fe3O4磁粒。
[0047]实施例3 =Cu2+-EDTA-Fe3O4磁粒的制备
[0048](I)水热法制备 EDTA-Fe3O4磁粒，准确称取 0.61g FeCl 3.6H20(2.26mmol)，加入16.4mL乙二醇和13.6mL 二甘醇超声辅助溶解，然后边搅拌边加入2.16g尿素(36mmol)和0.42g乙二胺四乙酸二钠(1.24mmol)，在60°C搅拌30min形成均一溶液，将该溶液倾入50mL特氟龙高压反应釜中，放入烘箱中，然后升温至210°C，反应8h。反应结束后，冷却至室温，将产物在外加磁场下分离并用乙醇、去离子水依次充分洗涤3次，最后烘干得到产物EDTA-Fe3O4 磁粒。
[0049](2)将EDTA-Fe3O4磁粒加入到0.3mmol/L的硝酸铜溶液中，室温条件下超声lOmin，将产物在外加磁场下分离并用去离水充分洗涤，烘干得到铜离子修饰的Cu2+-EDTA-Fe3O4 磁粒。
[0050]实施例4 =Cu2+-EDTA-Fe3O4磁粒去除血红蛋白的探讨
[0051]向I?1mL稀释100倍的牛血样品中加入I?1mg的Cu2+-EDTA-Fe3O4M粒，震荡30?60min，利用磁粒上的铜离子与牛血红蛋白表面的组氨酸残基之间强烈的配位作用，选择性吸附牛血红蛋白，然后磁分离，用毛细管电泳检测上清溶液中残留的牛血红蛋白的量，结果表明所制备磁粒对牛血样品的去除效率大于90%，对样品中的其他蛋白无明显吸附，表现出超强的选择性，结果见图4。
[0052]上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1.一种Cu2+-EDTA-Fe3O4磁粒，其特征在于由包含以下步骤方法制备得到:水热法制备EDTA-Fe3O4磁粒，加入到水溶性铜盐溶液中，通过螯合作用，得到Cu 2+-EDTA_Fe304磁粒。2.根据权利要求1所述的Cu2+-EDTA-Fe304磁粒，其特征在于由具体包括以下步骤的方法制备得到: 将氯化铁溶于溶剂中，加入尿素、乙二胺四乙酸二钠，混合均匀，加热反应，分离，得到EDTA-Fe3O4磁粒；将EDTA-Fe 304磁粒加入水溶性铜盐溶液中，超声反应，分离，得到Cu2+-EDTA-Fe3O4 磁粒。3.根据权利要求1所述的Cu2+-EDTA-Fe304磁粒，其特征在于:所用氯化铁、尿素和乙二胺四乙酸二钠的摩尔比为(7?11): (120?180): (4?6)。4.根据权利要求1所述的Cu2+-EDTA-Fe3O4磁粒，其特征在于:所述加热反应的条件为在190?210°C反应8?12h。5.根据权利要求1所述的Cu2+-EDTA-Fe3O4磁粒，其特征在于:所述将氯化铁溶于溶剂中得到的溶液体系中，铁离子浓度为0.01?0.lmol/Lo6.根据权利要求1所述的Cu2+-EDTA-Fe304磁粒，其特征在于:所述的混合均勾指在50?70°C下搅拌10?30min ;所述超声反应的时间为3?lOmin。7.根据权利要求1所述的Cu2+-EDTA-Fe3O4磁粒，其特征在于:所述的水溶性铜盐为硫酸铜、硝酸铜和氯化铜中的一种。8.根据权利要求1所述的Cu2+-EDTA-Fe3O4磁粒，其特征在于:所述水溶性铜盐溶液中铜离子的浓度为0.1?0.3mmol/Lo9.根据权利要求1?8任一项所述的Cu2+-EDTA-Fe304磁粒在生物医学领域中的应用。10.根据权利要求1?8任一项所述的Cu2+-EDTA-Fe304磁粒在分离组氨酸蛋白中的应用。
【专利摘要】本发明属于超顺磁性功能材料技术领域，公开了一种表面带有大量铜离子修饰的Cu2+-EDTA-Fe3O4磁粒及其制备方法与在生物医学领域中的应用，特别适用于分离组氨酸蛋白。该磁粒由包含以下步骤方法制备得到：水热法制备EDTA-Fe3O4磁粒，加入到水溶性铜盐溶液中，通过螯合作用，得到Cu2+-EDTA-Fe3O4磁粒。本发明磁粒呈球形，分散性好，粒径约150nm，磁饱和度为69emu/g。其表面修饰的Cu2+与血红蛋白表面的组氨酸残基强烈的配位作用，对血红蛋白表现出超高的吸附能力，吸附容量可达1250mg/g，且对血清白蛋白没有明显的吸附作用，表现出优异的选择性，去除效率大于90％。
【IPC分类】B01J13/02, H01F41/02, C07K1/14, H01F1/00
【公开号】CN105032310
【申请号】CN201510444431
【发明人】贾丽, 丁纯
【申请人】华南师范大学
【公开日】2015年11月11日
【申请日】2015年7月24日