专利名称：：小麦粉中过氧化苯甲酰的高效液相色谱检测法的制作方法
技术领域：
：本发明属于一种检测方法，特别涉及一种小麦粉中过氧化苯甲酰的高效液相色谱检测法。
背景技术：
：过氧化苯甲酰是一种面粉改良剂，可增加面粉的白度，提高面粉的质量等级。我国国标GB2760-1996规定其最大使用量为0.06g/kg。但目前市场上不法厂商为了片面追求面粉白度，过量加入过氧化苯甲酰，不仅影响面制品的口感，还使人大量摄入其分解物，危害人体健康。目前过氧化苯甲酰的检测方法有气相色谱法、比色法等，气相色谱法样品前处理复杂费时，很难保证样品前处理时过氧化苯甲酰的全部还原，容易造成测量误差，而比色法测定周期长、操作繁琐。
发明内容本发明的目的就在于克服上述现有技术中存在的不足，而提供一种小麦粉中过氧化苯甲酰的高效液相色谱检测法，该方法简单、且检测的精度高。本发明的技术方案是一种小麦粉中过氧化苯甲酰的高效液相色谱检测法，其特征在于依照下列步骤进行①样品前处理在样品中加入无水乙醇，浸透润湿后，在混合器上混匀、静置，再加入碘化钾溶液于混合器上混匀、静置，最后加入硫代硫酸钠溶液，加水定容，在混合器上混匀，静置分层，吸取上清液经滤膜过滤后得到样品滤液;②将样品滤液、苯甲酸标准溶液注入高效液相色普仪中，按照色普条件条件进行测定样品中苯甲酸的浓度；③按照公式计算样品中过氧化苯甲酰的含量；X=AXVX0.992/(mX1000)式中X—样品中过氧化苯甲酰含量(g/kg)A—进样液中苯甲酸含量(ug/mL)m—样品质量(g)V—样品制备液体积(mL)0.992—苯甲酸与过氧化苯甲酰的换算系数。上述色普条件为采用Irregular-HC18，(4.6mmX250mm，10um)色普柱，以甲醇乙酸铵溶液(0.02mol/L)(5:95)为流动相，流速为1.0mL/min，检测波长是230nm，0.16AUFS。上述苯甲酸标准溶液是将苯甲酸标准储备液体加水定容后所得。上述苯甲酸标准储备液是将苯甲酸加人碳酸氢钠溶液后，加热溶解后，再加水定容后所得。本发明具有如下的优点和积极效果1、方法先进。样品前处理简单，操作方便，所用试剂无毒无害，且不易丢失被测组分。2、检测的精度高。样品前处理保留了被测组分，在测定过氧化苯甲酰中被引用使结果获得较高的回收率，回收率试验为96-102%，结果准确可靠，方法的检出限为15ng，平行试验相对误差在多次试验中均未超过2%，而GB/T18415-2001中要求《15%。3、方法简单、易行。本发明测定过程仅在样品的前处理加入碘化钾将过氧化苯甲酰还原为苯甲酸，反应为简单的化学反应，反应完全彻底，所以可以得到准确的测定结果。具体实施例方式利用高效液相色谱检测法对小麦粉中过氧化苯甲酰的浓度进行1、选用的试剂甲醇(色谱纯)无水乙醇(分析纯)乙酸铵溶液(0.02mol/L):称取1.54g乙酸铵，加水至1000mL溶解，经0.45um滤膜过滤。碘化钾溶液(150g/L):称取15.00g碘化钾，加水至100mL溶解。硫代硫酸钠溶液(100g/L):称取10.00g硫代硫酸钠，加水至100mL溶解。碳酸氢钠溶液(20g/L):称取2.00g碳酸氢钠，加水至100mL溶解。苯甲酸标准储备液准确称取0.1000g苯甲酸，加碳酸氢钠溶液(20g/L)5mL，加热溶解，移入100mL容量瓶中，加水定容至100mL。苯甲酸的浓度为lmg/mL。苯甲酸标准溶液吸取苯甲酸标准储备液(lmg/mL)0、1、3、5、7、9mL分别置于100mL容量瓶中，加水定容至100mL。苯甲酸的浓度为分别为0、10、30、50、70、90ug/mL。2、仪器岛津LC-4A高效液相色谱仪(带紫外检测器)H-l微型混合器3.分析步骤①样品处理称取1.00g样品，置于10mL比色管中，加入2mL无水乙醇，浸透润湿后，在混合器上混匀lmin，静置5min，加入碘化钾溶液(150g/L)lmL，于混合器上混匀2min，静置15min，加入硫代硫酸钠溶液(100g/L)lmL，加水定容至刻度，在混合器上混匀lmin，静置分层，吸取上清液经0.45um滤膜过滤后得到样品滤液；②将样品滤液、苯甲酸标准溶液注入高效液相色普仪中，按照色普条件条件进行测定样品中苯甲酸的浓度；③按照公式计算样品中过氧化苯甲酰的含量；X=AXVX0.992/(mX1000)式中X—样品中过氧化苯甲酰含量(g/kg)B—进样液中苯甲酸含量(ug/mL)m—样品质量(g)V—样品制备液体积(mL)0.992—苯甲酸与过氧化苯甲酰的换算系数上述的色谱条件为采用Irregular-HC18，(4.6mmX250mm，10um)色普柱，以甲醇乙酸铵溶液(0.02mol/L)(5:95)为流动相，流速为1.0mL/min，检测波长是230nm，0.16AUFS。表1高效液相色谱法的回收率测定<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>表2气相色谱法的回收率测定<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>表3高效液相色谱法与气相色谱法的对比<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>结论经过比较，高效液相色谱法的样品前处理比GB/T18415-2001气相色谱法简单、方便，回收率为96~102%，高效液相色谱法与气相色谱法之间的误差满足GB/T18415-2001的要求。权利要求1.一种小麦粉中过氧化苯甲酰的高效液相色谱检测法，其特征在于依照下列步骤进行①样品前处理在样品中加入无水乙醇，浸透润湿后，在混合器上混匀、静置，再加入碘化钾溶液于混合器上混匀、静置，最后加入硫代硫酸钠溶液，加水定容，在混合器上混匀，静置分层，吸取上清液经滤膜过滤后得到样品滤液；②将样品滤液、苯甲酸标准溶液注入高效液相色普仪中，按照色普条件条件进行测定样品中苯甲酸的浓度；③按照公式计算样品中过氧化苯甲酰的含量；X＝A×V×0.992/(m×1000)式中X-样品中过氧化苯甲酰含量(g/kg)C-进样液中苯甲酸含量(ug/mL)m-样品质量(g)V-样品制备液体积(mL)0.992-苯甲酸与过氧化苯甲酰的换算系数。2、根据权利要求1所述的小麦粉中过氧化苯甲酰的高效液相色谱检测法，其特征在于上述色普条件为采用Irregular-HC18，(4.6mmX250mm，10um)色普柱，以甲醇乙酸铵溶液(0.02mol/L)(5:95)为流动相，流速为1.0mL/min，检测波长是230nm，0.16AUFS。3、根据权利要求1所述的小麦粉中过氧化苯甲酰的高效液相色谱检测法，其特征在于上述苯甲酸标准溶液是将苯甲酸标准储备液体加水定容后所得。4、根据权利要求1所述的小麦粉中过氧化苯甲酰的高效液相色谱检测法，其特征在于上述苯甲酸标准储备液是将苯甲酸加人碳酸氢钠溶液后，加热溶解后，再加水定容后所得。全文摘要一种小麦粉中过氧化苯甲酰的高效液相色谱检测法，依照下列步骤进行①样品前处理在样品中加入无水乙醇，浸透润湿后，在混合器上混匀、静置，再加入碘化钾溶液于混合器上混匀、静置，最后加入硫代硫酸钠溶液，加水定容，在混合器上混匀，静置分层，吸取上清液经滤膜过滤后得到样品滤液；②将样品滤液、苯甲酸标准溶液注入高效液相色普仪中，按照色普条件条件进行测定样品中苯甲酸的浓度；③按照公式计算样品中过氧化苯甲酰的含量；X＝A×V×0.992/(m×1000)。本发明的优点是1.方法先进。2.检测的精度高。3.方法简单、易行。文档编号G01N30/02GK101210907SQ20061013064公开日2008年7月2日申请日期2006年12月28日优先权日2006年12月28日发明者翔兰,孙晶晶,张颖璐,莹李,安王,悦王,杨程,郭小莉,欣随申请人:天津市食品研究所有限公司