专利名称：氨基嘧啶含量的测定方法
技术领域：
本发明涉及维生素生产技术领域，尤其涉及一种氨基嘧啶含量的测定方法。
背景技术：
国内外维生素Bl的合成，其变化主要体现在中间体2-甲基-4-氨基-5-(氨基甲 基)嘧啶的合成，目前较为成熟的路线主要有丙烯腈乙酰嘧啶路线、丙烯腈甲酰嘧啶路线和丙二腈路线。丙烯腈甲酰嘧啶路线合成维生素Bl的路线主要包括氨基丙腈、钠代、烯胺、嘧啶、 氯酯、盐酸乙醚、硫代硫胺、硝酸硫胺和盐酸硫胺等工序。硫代硫胺氧化工序是维生素Bl合成过程的CCP (关键控制点)，硫代硫胺经双氧水 氧化后的溶液原工艺没有建立质量指标来控制氧化液的质量，只是判断外观后直接向下流 转，给产品质量和过程控制带来风险。
发明内容
本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种氨基嘧啶含量的测定方法，减 少开发过程中的代码量，降低适配工作门槛，使分工更加合理，项目易于维护，同时节约人 力成本。本发明提供一种氨基嘧啶含量的测定方法，其包括 量取嘧啶精制品含量，称取氨基嘧啶质量和嘧啶精制品质量； 计算得出样品中氨基嘧啶峰面积和嘧啶精制品主峰面积；将嘧啶精制品含量、样品中氨基嘧啶峰面积、嘧啶精制品质量和氨基嘧啶分子量四者 相乘，得到第一乘积；将嘧啶分子、氨基嘧啶质量和嘧啶精制品主峰面积三者相乘，得到第二乘积； 将第一乘积除以第二乘积，将得到氨基嘧啶含量。进一步地，还包括嘧啶精制品的制取步骤，具体为将嘧啶样品置于圆底烧瓶中，加入纯甲醇，回流装置连接完好，开启搅拌器，缓缓加热， 经回流后，趁热过滤，过滤液加入活性炭缓缓加热，再回流半小时，脱色后，再过滤液冷却结 晶过滤，滤出物放入烘箱干燥至恒重。进一步地，所述嘧啶样品质量为20g，所述圆底烧瓶的容积为500mL，所述纯甲醇 为 200mL。进一步地，所述缓缓加热，经回流后的步骤进一步包括 缓缓加热至60°C，经回流后1小时。进一步地，所述活性炭的质量为lg。进一步地，所述脱色的次数为3次。进一步地，所述量取嘧啶精制品含量的步骤，进一步包括精密称取嘧啶精制品至 容量瓶中，加入流动相溶解并稀释至刻度，进样，平行多次进样并记录色谱图，按面积归一法计算结果，取平均值。进一步地，所述嘧啶精制品的质量为20mg，所述容量瓶的容积为100 mL，平行四次 进样并记录色谱图。本发明提供了一种氨基嘧啶含量的测定方法，为实现过程监控和质量把关提高了 保证，提高产品质量。
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现 有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本 发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可 以根据这些附图获得其它附图。图1是本发明实施例提供的氨基嘧啶含量的测定方法的流程示意图。
具体实施例方式为使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，下面参照附图对本发明进一 步详细说明。本发明提供一种氨基嘧啶含量的测定方法，如图1所示，具体步骤包括 步骤Si、量取嘧啶精制品含量，称取氨基嘧啶质量和嘧啶精制品质量； 步骤S2、计算得出样品中氨基嘧啶峰面积和嘧啶精制品主峰面积；步骤S3、将嘧啶精制品含量、样品中氨基嘧啶峰面积、嘧啶精制品质量和氨基嘧啶分子 量四者相乘，得到第一乘积；步骤S4、将嘧啶分子、氨基嘧啶质量和嘧啶精制品主峰面积三者相乘，得到第二乘积； 步骤S5、将第一乘积除以第二乘积，将得到氨基嘧啶含量。为详细起见，进一步描述上述步骤的一个较佳实施例子 首先，嘧啶精制品的制取称20g左右嘧啶样品于500mL圆底烧瓶中，加入200mL分析纯甲醇，回流装置连接完 好，开启搅拌器，缓缓加热60°C左右，回流1小时，趁热过滤，过滤液加入Ig左右活性炭缓缓 加热60°C左右，回流半小时，脱色3次。过滤液冷却结晶过滤，滤出物放入烘箱105°C干燥至恒重。其实，提供液相色谱仪实验条件 流动相缓冲液甲醇乙腈=75 :10:15 检测波长274 nm流 速1. OmL/min 柱温室温 进样量20yL 色谱柱AQ-C18 检测器紫外检测器 再者，量取精制品定纯度精密称取试样20mg至100 mL容量瓶中，加入流动相溶解并稀释至刻度，进样10 1，平行四次进样并记录色谱图。按面积归一法计算结果，取平均值。
另外，提供样品制备的方法1)缓冲液A液称取15. 2189g K2HP04 3H20溶解并定容至IOOOml ；B液称取 9. 078g KH2P04溶解并定容至1000ml。临用前将A液、B液按1 1比例混合即得。2)对照品溶液配制称取嘧啶精制品0.02g，水定容至100 ml，精密移取20 ml，流动相定容至50 ml。3)样品溶液配制称取氨基嘧啶0. 20-0. 30g，水定容至100 ml，精密移取20 ml，流动相定容至50 ml。最后，计算得出氨基嘧啶含量，请参考以下计算公式 氨基嘧啶含量氨基嘧啶96=0^5^1^^152 + 166+ + 嘧啶含量嘧啶％=CKX S2 XMe^Ms^Se其中，Ce表示嘧啶精制品含量，% ； S1表示样品中氨基嘧啶峰面积； S2表示样品中嘧啶峰面积； Se表示嘧啶精制品主峰面积； Ms表示称取氨基嘧啶质量，g ； Me表示称取嘧啶精制品质量，g ； 152表示氨基嘧啶分子量； 166表示嘧啶分子量。综上所述，本发明提供了一种氨基嘧啶含量的测定方法，为实现过程监控和质量 把关提高了保证，提高产品质量。本发明主要特点是氨基嘧啶的检测方法与原有的甲酰嘧啶高效液相色谱法相比，有如下特点 a 甲酰嘧啶与氨基嘧啶在分子结构上很接近，一般的理化分析很难将二者分离并测 定。故采用高效液相色谱法进行分离测定；b 之前的甲酰嘧啶高效液相色谱法的实验条件无法达到分离效果，现有实验条件能够 达到分离并分析。c 采用自制甲酰嘧啶精制品。考虑到以下几点1)氨基嘧啶的不稳定性，不易精 制；2)氨基嘧啶和甲酰嘧啶基本结构一致，甲酰嘧啶相比氨基嘧啶稳定性好，且易得；3)基 嘧啶和甲酰嘧啶在274nm出均有最大吸收峰；d 采用外标法。以上对本发明所提供的一种氨基嘧啶含量的测定方法进行了详细介绍，本文中对 本发明的原理及实施方式进行了详细阐述。以上说明只用于帮助理解本发明的方案，对于 本领域的一般技术人员，依据本发明的思想，在具体实施方式
及应用范围上均会有所改变， 因此本说明书内容不应理解为对本发明的限制。权利要求
1.一种氨基嘧啶含量的测定方法，其特征在于，包括量取嘧啶精制品含量，称取氨基嘧啶质量和嘧啶精制品质量； 计算得出样品中氨基嘧啶峰面积和嘧啶精制品主峰面积；将嘧啶精制品含量、样品中氨基嘧啶峰面积、嘧啶精制品质量和氨基嘧啶分子量四者 相乘，得到第一乘积；将嘧啶分子、氨基嘧啶质量和嘧啶精制品主峰面积三者相乘，得到第二乘积； 将第一乘积除以第二乘积，将得到氨基嘧啶含量。
2.根据权利要求1所述的氨基嘧啶含量的测定方法，其特征在于，还包括嘧啶精制品 的制取步骤，具体为将嘧啶样品置于圆底烧瓶中，加入纯甲醇，回流装置连接完好，开启搅拌器，缓缓加热， 经回流后，趁热过滤，过滤液加入活性炭缓缓加热，再回流半小时，脱色后，再过滤液冷却结 晶过滤，滤出物放入烘箱干燥至恒重。
3.根据权利要求2所述的氨基嘧啶含量的测定方法，其特征在于，所述嘧啶样品质量 为20g，所述圆底烧瓶的容积为500mL，所述纯甲醇为200mL。
4.根据权利要求3所述的氨基嘧啶含量的测定方法，其特征在于，所述缓缓加热，经回 流后的步骤进一步包括缓缓加热至60°C，经回流后1小时。
5.根据权利要求4所述的氨基嘧啶含量的测定方法，其特征在于，所述活性炭的质量 为lg°
6.根据权利要求5所述的氨基嘧啶含量的测定方法，其特征在于，所述脱色的次数为3次。
7.根据权利要求5所述的氨基嘧啶含量的测定方法，其特征在于，所述量取嘧啶精制 品含量的步骤，进一步包括精密称取嘧啶精制品至容量瓶中，加入流动相溶解并稀释至刻 度，进样，平行多次进样并记录色谱图，按面积归一法计算结果，取平均值。
8.根据权利要求7所述的氨基嘧啶含量的测定方法，其特征在于，所述嘧啶精制品的 质量为20mg，所述容量瓶的容积为100 mL，平行四次进样并记录色谱图。
全文摘要
本发明公开一种氨基嘧啶含量的测定方法，其包括量取嘧啶精制品含量，称取氨基嘧啶质量和嘧啶精制品质量；计算得出样品中氨基嘧啶峰面积和嘧啶精制品主峰面积；将嘧啶精制品含量、样品中氨基嘧啶峰面积、嘧啶精制品质量和氨基嘧啶分子量四者相乘，得到第一乘积；将嘧啶分子、氨基嘧啶质量和嘧啶精制品主峰面积三者相乘，得到第二乘积；将第一乘积除以第二乘积，将得到氨基嘧啶含量。采用本发明，为实现过程监控和质量把关提高了保证，提高产品质量。
文档编号G01N30/02GK102053131SQ20101060532
公开日2011年5月11日 申请日期2010年12月24日 优先权日2010年12月24日
发明者李健平, 李来成, 陈英明 申请人:江苏兄弟维生素有限公司