一种检测盐酸决奈达隆的方法
【专利摘要】本发明提供了一种检测N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐的方法，对N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐进行高效液相色谱检测，在本发明提供的高效液相色谱条件下，N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐能够较好地与共存的杂质分离，而且各杂质间也能够较好地分离，本发明提供的方法还具有较高的灵敏度，因此，本发明提供的方法实现了对N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐较准确地测定。
【专利说明】一种检测盐酸决奈达隆的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及药品监测【技术领域】，尤其涉及一种检测N-(2- 丁基-3-(4-(3- 二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐的方法。
【背景技术】
[0002]盐酸决奈达隆(Dronedaronehydrochloride),其为N_(2_丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐的通用名，为抗心律失常药物。该药与胺碘酮具有类似的电生理作用，但它不含碘，故不会引起与碘相关的不良反应，为胺碘酮的替代更新药物。本品适用于心房颤动和心房扑动患者的心率控制、维持窦性心律和减慢室性心律，临床主要用于治疗心率失常。
[0003]心房纤颤是一种有着潜在生命威胁的疾病，由于人口老龄化,全球心房纤颤发病率不断走高，并成为新的公共卫生难题。美国的心房纤颤患者人数达250万人，欧盟的患者人数达450万人。Multaq (决奈达隆)是赛诺菲-安万特用了 20年时间研发成功的。研究表明，作为一种抗心律失常药物，它适用于患有阵发性或持续性房颤或房扑或者；有房颤或房扑病史并合并心血管危险因素的患者，无论当前为窦性心律或即将实施心脏复律，均能有效降低因心血管事件住院的风险。相关研究结果发表在2008年和2009年的《新英格兰医学杂志》上。
[0004]由于盐酸决奈达隆具有较好的治疗心房颤动和/或心房扑动的疗效，现有技术致力于其合成方法的研究，关于盐酸决奈达隆的合成报道较多，如李素义等(李素义，钟启星，陈国华，李楠.盐酸决奈达隆的合成，中国医学工业杂志，2011，42(3):16广164.)以硝基苯酚为原料，经多聚甲醛/盐酸进行氯甲基化得到2-羟基-5-硝基氯苄，2-羟基-5-硝基氣节与二苯勝反应得到2_轻基-5-硝基节基二苯基氣化鱗，2-轻基-5-硝基苄基三苯基氯化鱗与正戊酰氯发生酯化反应、Wittig反应得到2-正丁基-5-硝基苯并呋喃，2-正丁基-5-硝基苯并呋喃经三氯化铝脱甲基得到2-正丁基-5硝基-3-(4-羟基苯甲酰基)苯并呋喃，2-正丁基-5硝基-3-(4-羟基苯甲酰基)苯并呋喃与N-(3-氯丙基)二正丁胺反应得到2-正丁基-3-[4-(3- 二正丁胺基丙氧基)苯甲酰基]-5-硝基苯并呋喃，2-正丁基-3-[4-(3- 二正丁胺基丙氧基)苯甲酰基]-5-硝基苯并呋喃经催化氢化得到5-氨基-2-正丁基-3-[4-( 二正丁胺基丙氧基)苯甲酰基]苯并呋喃，5-氨基-2-正丁基-3-[4-( 二正丁胺基丙氧基)苯甲酰基]苯并呋喃经甲磺酰化得到决奈达隆，在成盐酸盐得到盐酸决奈达隆。何晓清等(何晓清，吴泰志，张福利，谢美华.盐酸决奈达隆合成路线图解.中国医药工业杂志，2010，41 (2):148?152.)综述了盐酸决奈达隆及其重要中间体4- (3- 二正丁基氨基丙氧基)苯甲酰氯盐酸盐、2-正丁基-5硝基苯并呋喃的合成路线。
[0005]在这些合成方法中，原料中会带入去丙基杂质，随着后续反应的进行会产生杂质2-甲基-3-[4-(3-二正丁基氨基丙氧基)苯甲酰基]-5-甲磺酰胺基苯并呋喃盐酸盐；原料中带入去甲基杂质，随着后续反应的进行会产生杂质2-正丙基-3-[4-(3-二正丁基氨基丙氧基)苯甲酰基]-5-甲磺酰胺基苯并呋喃盐酸盐；合成过程中的甲磺酰化反应会产生副反应产物2-正丁基-3- [4- (3- 二正丁基氨基丙氧基)苯甲酰基]-5- 二甲磺酰胺基苯并呋喃盐酸盐；在合成的过程中，还会产生中间体5-氨基-3-[4-(3- 二正丁基氨基丙氧基)苯甲酰基]-2-正丁基苯并呋喃二草酸盐，另外还会产生降解产物和未知杂质，这些物质的存在会对盐酸决奈达隆的品质产生影响，现有技术中对于盐酸决奈达隆的检测，得到的结果准确度不高，不利于生产和疾病的治疗。
【发明内容】
[0006]本发明的目的在于提供一种N-(2- 丁基-3-(4-(3- 二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐的检测方法，本发明提供的方法能够将N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐与其他杂质分离，能够较好的反映出盐酸决奈达隆的品质。
[0007]本发明提供了一种检测N-(2_ 丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐的方法，包括以下步骤:
[0008]对待测样品进行高效液相色谱检测，得到待测样品的高效液相色谱图；
[0009]根据所述高效液相色谱图和预先获得的标准曲线，得到待测样品中N-(2_ 丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐的含量；
[0010]所述高效液相色谱检测中的填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶；
[0011]所述高效液相色谱检测中的流动相为甲醇、乙腈和磷酸盐缓冲液的混合物；
[0012]所述高效液相色谱检测中的柱温不高于40°C ；
[0013]所述高效液相色谱检测中待测溶液的流速为1.3mL/mirTl.7mL/min ；
[0014]所述高效液相色谱检测中磷酸盐缓冲液的pH值为7.0-8.0 ；
[0015]所述高效液相色谱检测的检测波长为210mnT230nm。
[0016]优选的，所述流动相中磷酸盐缓冲溶液为磷酸二氢钾和碱性化合物的混合溶液。
[0017]优选的，所述磷酸盐缓冲溶液中磷酸二氢钾的摩尔浓度为(0.0005、.005)mol/L。
[0018]优选的，所述流动相中甲醇的体积分数不大于32%。
[0019]优选的，所述流动相中乙腈的体积分数不大于50%。
[0020]优选的，所述柱温为35°C~40°C。
[0021]优选的，所述pH值为7.5。
[0022]优选的，所述进行高效液相色谱检测前还包括以下步骤:
[0023]将待测样品用流动相溶解，得到待测溶液。
[0024]优选的，所述标准曲线按照以下方法获得:
[0025]将N- (2- 丁基-3- (4- (3_ 二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃_5_基)甲磺酰胺盐酸盐标准品配制成系列浓度标准溶液；
[0026]将所述系列浓度的标准溶液进行高效液相色谱检测，分别得到系列浓度标准溶液的高效液相色谱图；
[0027]根据得到的高效液相色谱图得到标准品峰的峰面积；
[0028]根据所述峰面积和标准溶液的浓度，得到标准曲线。
[0029]优选的，所述将待测样品进行高效液相色谱检测前还包括以下步骤:
[0030]将待测样品进行显氯化物鉴别和紫外光谱鉴别，得到待测样品中含有盐酸决奈达隆的鉴别结果。
[0031]本发明提供了一种检测N-(2_ 丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐的方法，包括以下步骤:对待测样品进行高效液相色谱检测，得到待测样品的高效液相色谱图；根据所述高效液相色谱图和预先获得的标准曲线，得到待测样品中N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐的含量；所述高效液相色谱检测中的填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶；所述高效液相色谱检测中的流动相为甲醇、乙腈和磷酸盐缓冲液的混合物；所述高效液相色谱检测中的柱温不高于40°C;所述高效液相色谱检测中待测溶液的流速为1.3mL/mirTl.7mL/min ;所述高效液相色谱检测中磷酸盐缓冲液的pH值为7.0-8.0，在上述检测条件下，得到N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐的检测结果。本发明提供的方法能够将N-(2- 丁基-3-(4-(3- 二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐与其他杂质分离，并且也能够较好的区分各杂质，在本发明提供的检测条件下，N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐与各杂质以及各杂质之间的分离均较好，出峰时间较为合适，而且本发明提供的方法具有较高的灵敏度，因此本发明提供的方法能够较好地实现对N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐品质的测定，而且有利于指导生产过程中对杂质的控制，得到高品质的N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐。【专利附图】
【附图说明】)
[0032]图1为本发明实施例5得到的盐酸决奈达隆片的紫外光谱图；
[0033]图2为本发明实施例6得到的盐酸决奈达隆片的紫外光谱图；
[0034]图3为本发明实施例7得到的盐酸决奈达隆片的紫外光谱图；
[0035]图4为本发明实施例8得到的盐酸决奈达隆片的紫外光谱图；
[0036]图5为本发明实施例9得到的空白辅料的紫外光谱图；
[0037]图6为本发明实施例10中流动相的液相色谱图；
[0038]图7为本发明实施例11中空白溶液的液相色谱图；
[0039]图8为本发明实施例12中待测溶液的液相色谱图；
[0040]图9为本发明实施例13中待测溶液的液相色谱图；
[0041]图10为本发明实施例14中待测溶液的液相色谱图；
[0042]图11为本发明实施例15中待测溶液的液相色谱图；
[0043]图12为本发明实施例16中待测溶液的液相色谱图；
[0044]图13为本发明实施例17中待测溶液的液相色谱图；
[0045]图14为本发明实施例18中待测溶液的液相色谱图
[0046]图15为本发明实施例19中待测溶液的液相色谱图；
[0047]图16为本发明实施例20中待测溶液的液相色谱图；
[0048]图17为本发明实施例21中待测溶液的液相色谱图；
[0049]图18为本发明实施例22中待测溶液的液相色谱图；
[0050]图19为本发明实施例23得到的杂质D的液相色谱图；[0051]图20为本发明实施例23得到的杂质C的液相色谱图；
[0052]图21为本发明实施例23得到的杂质A和杂质B的液相色谱图；
[0053]图22为本发明实施例23得到的盐酸决奈达隆的液相色谱图；
[0054]图23为本发明实施例24中柱温为35°C时待测溶液的液相色谱图；
[0055]图24为本发明实施例24中柱温为45°C时待测溶液的液相色谱图；
[0056]图25为本发明实施例25中流速为1.3mL/min时待测溶液的液相色谱图；
[0057]图26为本发明实施例25中流速为1.7mL/min时待测溶液的液相色谱图；
[0058]图27为本发明实施例26中流动相为体积比为32:52:16的甲醇-乙腈-缓冲盐溶液时待测溶液的液相色谱图；
[0059]图28为本发明实施例26中流动相为体积比为32:48:20的甲醇-乙腈-缓冲盐溶液时待测溶液的液相色谱图；
[0060]图29为本发明实施例27中流动相为体积比为30:50:20的甲醇-乙腈-缓冲盐溶液时待测溶液的液相色谱图；
[0061]图30为本发明实施例27中流动相为体积比为34:50:16的甲醇-乙腈-缓冲盐溶液时待测溶液的液相色谱图；
[0062]图31为本发明实施例28中流动相中缓冲溶液的pH为7.0时待测溶液的液相色谱图；
[0063]图32为本发明实施例28中流动相中缓冲溶液的pH为8.0时待测溶液的液相色谱图；
[0064]图33为本发明实施例24~28得到的流动相为体积比为32:50:18的甲醇-乙腈-pH值7.5磷酸盐缓冲盐溶液、柱温为40°C、流速为1.5mL/min时待测溶液的液相色谱图；
[0065]图34为本发明实施例29得到的酸破坏的待测溶液的液相色谱图；
[0066]图35为本发明实施例30得到的碱破坏的待测溶液的液相色谱图；
[0067]图36为本发明实施例31得到的氧化破坏的待测溶液的液相色谱图；
[0068]图37为本发明实施例32得到的高温破坏的待测溶液的液相色谱图；
[0069]图38为本发明实施例33得到的强光破坏的待测溶液的液相色谱图；
[0070]图39为本发明实施例34得到的未破坏的待测溶液的液相色谱图；
[0071]图40为本发明实施例35辅料被酸破坏的待测溶液的液相色谱图；
[0072] 图41为本发明实施例36辅料被碱破坏的待测溶液的液相色谱图；
[0073]图42为本发明实施例37辅料被氧化破坏的待测溶液的液相色谱图；
[0074]图43为本发明实施例38辅料被高温破坏的待测溶液的液相色谱图；
[0075]图44为本发明实施例39辅料被强光破坏的待测溶液的液相色谱图；
[0076]图45为本发明实施例40辅料未破坏的待测溶液的液相色谱图；
[0077]图46为本发明实施例41得到的静置时间为Oh的对照溶液的液相色谱图；
[0078]图47为本发明实施例41得到的静置时间为Ih的对照溶液的液相色谱图；
[0079]图48为本发明实施例41得到的静置时间为2h的对照溶液的液相色谱图；
[0080]图49为本发明实施例41得到的静置时间为4h的对照溶液的液相色谱图；
[0081]图50为本发明实施例41得到的静置时间为6h的对照溶液的液相色谱图；
[0082]图51为本发明实施例41得到的静置时间为8h的对照溶液的液相色谱图；[0083]图52为本发明实施例41得到的静置时间为Oh的待测溶液的液相色谱图；
[0084]图53为本发明实施例41得到的静置时间为Ih的待测溶液的液相色谱图；
[0085]图54为本发明实施例41得到的静置时间为2h的待测溶液的液相色谱图；
[0086]图55为本发明实施例41得到的静置时间为4h的待测溶液的液相色谱图；
[0087]图56为本发明实施例41得到的静置时间为6h的待测溶液的液相色谱图；
[0088]图57为本发明实施例41得到的静置时间为8h的待测溶液的液相色谱图；
[0089]图58为本发明实施例42得到的第一份对照溶液的液相色谱图；
[0090]图59为本发明实施例42得到的第二份对照溶液的液相色谱图；
[0091]图60为本发明实施例42得到的第三份对照溶液的液相色谱图；
[0092]图61为本发明实施例42得到的第四份对照溶液的液相色谱图；
[0093]图62为本发明实施例42得到的第五份对照溶液的液相色谱图；
[0094]图63为本发明实施例42得到的第六份对照溶液的液相色谱图；
[0095]图64为本发明实施例42得到的第一份待测溶液的液相色谱图；
[0096]图65为本发明实施例42得到的第二份待测溶液的液相色谱图；
[0097]图66为本发明实施例42得到的第三份待测溶液的液相色谱图；
[0098]图67为本发明实施例42得到的第四份待测溶液的液相色谱图；
[0099]图68为本发明实施例42得到的第五份待测溶液的液相色谱图；
[0100]图69为本发明实施例42得到的第六份待测溶液的液相色谱图；
[0101]图70为本发明实施例43得到的对照溶液的液相色谱图；
[0102]图71为本发明实施例44得到的对照溶液的液相色谱图；
[0103]图72为本发明实施例45得到的对照溶液的液相色谱图；
[0104]图73为本发明实施例46得到的对照溶液的液相色谱图；
[0105]图74为本发明实施例43得到的待测溶液的液相色谱图；
[0106]图75为本发明实施例44得到的待测溶液的液相色谱图；
[0107]图76为本发明实施例45得到的待测溶液的液相色谱图；
[0108]图77为本发明实施例46得到的待测溶液的液相色谱图；
[0109]图78为本发明实施例61中空白辅料的液相色谱图；
[0110]图79为本发明实施例61中待测溶液的液相色谱图；
[0111]图80为本发明实施例63得到的不同溶出时间的待测溶液溶出度图；
[0112]图81为本发明实施例63?67得到的待测溶液溶出度图；
[0113]图82为本发明实施例68得到的盐酸决奈达隆的标准曲线。
【具体实施方式】
[0114]本发明提供了一种检测N-(2_ 丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐的方法，包括以下步骤:
[0115]对待测样品进行高效液相色谱检测，得到待测样品的高效液相色谱图；
[0116]根据所述高效液相色谱图和预先获得的标准曲线，得到待测样品中N-(2_ 丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐的含量；
[0117]所述高效液相色谱检测中的填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶；[0118]所述高效液相色谱检测中的流动相为甲醇、乙腈和磷酸盐缓冲液的混合物；
[0119]所述高效液相色谱检测中的柱温不高于40°C ；
[0120]所述高效液相色谱检测中待测溶液的流速为1.3mL/mirTl.7mL/min ；
[0121]所述高效液相色谱检测中磷酸盐缓冲液的pH值为7.0-8.0 ；
[0122]所述高效液相色谱检测的检测波长为210mnT230nm。
[0123]本发明提供了一种检测N-(2_ 丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐的方法，本发明提供的方法对N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐进行高效液相色谱检测，在本发明提供的高效液相色谱检测的条件下，N- (2- 丁基-3- (4- (3- 二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐能够较好地与共存的杂质分离，而且各杂质之间也能够较好地分离，本发明提供的方法还具有较好的灵敏度，因此，本发明提供的方法能够实现对N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐准确地测定，有利于鉴定N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐商品的质量，也有利于指导生产，生产出高品质的N-(2- 丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐。
[0124]N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃_5_基)甲磺酰胺盐酸盐的通用名为盐酸决奈达隆，在以下描述中，N- (2- 丁基-3- (4- (3- 二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐均采用盐酸决奈达隆代替。 [0125]本发明对待测样品进行高效液相色谱检测，优选在进行高效液相色谱检测前先对待测样品进行定性测定，判定待测样品中含有盐酸决奈达隆。在本发明中，所述定性测定包括显氯化物的鉴别反应和紫外-可见分光光度法测定，本发明对所述显氯化物的鉴别反应和紫外-可见分光光度法没有特殊的限制，采用本领域技术人员熟知的显氯化物的鉴别反应和紫外-可见分光光度法即可，本发明优选采用中国药典2010年版二部附录III所述的显氯化物的鉴别反应的方法对待测样品进行鉴别，采用中国药典2010年板二部附录IV A所述的紫外-可见分光光度法对待测样品进行测定，具体为:
[0126]向待测样品中加入乙醇、水和氨试液，得到混合溶液，将所述混合溶液过滤后得到滤液，将得到的滤液按照中国药典2010年版二部附录III记载的方法进行操作，若结果均呈正反应，阴性无干扰，则说明待测样品为盐酸决奈达隆。在本发明中，所述氨试液按照中国药典2010年版二部附录中记载的氨试液的方法进行配制，所述待测样品与乙醇和水的质量比优选为(0.005~0.015): (10~15): 15，更优选为(0.008~0.012): (11 ~13):15,?本发明中，按照中国药典2010年版二部附录中记载的氨试液的方法配制得到氨试剂后，待测样品的质量与所述氨试剂的体积比优选为(0.005、.015)g: ( 1-10) mL,更优选为(0.008~0.012) g: (3~8)mL。
[0127]本发明还将待测样品进行紫外-可见分光光度法的测定，具体为:
[0128]将待测样品采用无水乙醇溶解，得到待测样品的乙醇溶液；
[0129]向所述待测样品的乙醇溶液中加入盐酸溶液，得到待测溶液；
[0130]将所述待测溶液进行紫外-可见分光光度法检测，得到检测结果。
[0131]本发明将待测样品用无水乙醇溶解，优选将得到的溶液进行过滤，然后向得到的滤液中加入盐酸溶液，得到待测溶液。在本发明中，所述待测样品的乙醇溶液的质量浓度优选为(0.ri)mg/mL,更优选为(0.3^0.8) mg/mL ;所述盐酸溶液的摩尔浓度优选为(0.05、.5) mol/L,更优选为(0.08、.2) mol/L ;所述待测溶液中盐酸决奈达隆的质量浓度优选为(5~15) 118/!^，更优选为(8~12) yg/mL。得到待测溶液后，本发明按照中国药典2010年版二部附录IV A记载的方法对所述待测样品进行紫外-可见分光光度法的检测。若得到的紫外-可见光谱图中在214nm和290nm左右的波长处有最大吸收峰，则说明待测样品为盐Ife决奈达隆。
[0132]完成对所述待测样品的定性鉴别后，本发明对待测样品进行高效液相色谱检测，得到待测样品中盐酸决奈达隆的含量。在本发明中，将所述待测样品进行高效液相色谱检测前，优选将所述待测样品溶解，得到待测溶液，在本发明中，所述溶解待测样品的溶剂优选为高效液相色谱检测中的流动相，在本发明中，所述流动相为甲醇、乙腈和磷酸盐缓冲溶液的混合溶液，在所述流动相中，所述甲醇的体积分数优选不大于32%，更优选为30%~32% ；所述乙腈的体积分数优选不大于50%，更优选为48%~50% ;所述磷酸盐缓冲溶液的pH值为7.0-8.0，所述磷酸盐缓冲溶液优选为磷酸二氢钾和碱性化合物的混合溶液，所述碱性化合物优选为氢氧化钠或氢氧化钾，更优选为氢氧化钠，在本发明中，所述磷酸盐缓冲溶液优选按照以下方法配制:
[0133]将磷酸二氢钾溶解，得到磷酸二氢钾的水溶液；
[0134]向所述磷酸二氢钾的水溶液中加入碱性化合物调节其pH值为7.0-8.0，得到磷酸盐缓冲溶液。
[0135]本发明将磷酸二氢钾溶于水中，得到磷酸二氢钾的水溶液，然后优选向得到的磷酸二氢钾水溶液中加入碱性化合物溶液，将其PH值调至7.0-8.0,优选为7.5，得到磷酸盐缓冲溶液。在本发明中，所述磷酸二氢钾水溶液的摩尔浓度优选为(0.001、.01)mol/L，更优选为(0.003、.008) mol/L ;本发明对所述碱性化合物溶液的浓度没有特殊的限制，采用本领域技术人员熟知的碱性化合物溶液即可；本发明将所述磷酸二氢钾水溶液的PH值调至7.0-8.0后，优选将得到的溶液进行稀释，使其中磷酸二氢钾的摩尔浓度为(0.0005、.005)mol/L，更优选为(0.0008、.002) mol/L，得到磷酸盐缓冲溶液。
[0136]得到待测溶液后，本发明将所述待测溶液注入高效液相色谱仪中进行检测，得到待测溶液的高效液相色谱图。本发明对所述高效液相色谱仪没有特殊的限制，采用本领域技术人员熟知的高效液相色谱仪即可。在本发明中，所述高效液相色谱检测中的填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶；所述高效液相色谱检测中的流动相为上述技术方案所述的流动相；所述高效液相色谱检测中的柱温不高于40°C，优选为35°C~40°C;所述高效液相色谱检测中待测溶液的流速为1.3mL/mirTl.7mL/min,更优选为1.5mL/min ;所述高效液相色谱检测中磷酸盐缓冲液的PH值为7.0-8.0，更优选为7.5 ;所述高效液相色谱检测的检测器为紫外-可见分光检测器，检测波长为210nnT230nm,优选为215nnT225nm,最优选为220nm。
[0137]得到待测溶液的高效液相色谱图后，本发明根据所述高效液相色谱图和预先获得的标准曲线，得到待测样品中盐酸决奈达隆的含量。在本发明中，所述标准曲线优选按照以下方法获得:
[0138]将盐酸决奈达隆标准品配制成系列浓度标准溶液；
[0139]将所述系列浓度的标准溶液进行高效液相色谱检测，分别得到系列浓度标准溶液的高效液相色谱图；[0140]根据所述高效液相色谱图和标准溶液的浓度，得到标准曲线。
[0141]本发明将盐酸决奈达隆标准品配制成系列浓度的标准溶液，本发明对所述标准溶液的配制方法没有特殊的限制，采用本领域技术人员熟知的溶液的配制方法即可。本发明优选先配制较高质量浓度的盐酸决奈达隆标准品母液，再将所述母液稀释成系列浓度的标准溶液，在本发明中所述母液的质量浓度优选为(80-120) 118/1^，更优选为(90~110) μ g/mL。在本发明中，配制所述标准溶液的溶剂为上述技术方案所述的流动相，所述标准溶液的质量浓度优选为(0.1~15) μ g/mL,更优选为(0.5~10) yg/mL,最优选为0.5 μ g/mL、I μ g/mL、2 μ g/mL、4 μ g/mL、6 μ g/mL、8 μ g/mL 和 10 μ g/mL。
[0142]得到标准溶液后，本发明将系列浓度的标准溶液分别注入高效液相色谱仪中进行检测，分别得到系列浓度的标准溶液的高效液相色谱图。本发明按照上述技术方案所述的待测样品的高效液相色谱检测技术方案对所述标准溶液进行高效液相色谱检测。[0143]得到高效液相色谱图后，本发明根据所述标准溶液的高效液相色谱图和其对应的标准溶液的质量浓度，得到标准曲线。本发明优选计算得到所述标准溶液的高效液相色谱图中盐酸决奈达隆色谱峰的峰面积，以所述峰面积为纵坐标，以其对应的标准溶液的质量浓度为横坐标，得到标准曲线。
[0144]本发明实验结果表明，本发明提供的方法得到标准曲线的相关系数R为0.9999，这说明本发明提供的方法中，盐酸决奈达隆的峰面积与其质量浓度间存在良好的线性关系，从而使得到的盐酸决奈达隆含量的检测结果具有较高的准确度。
[0145]得到标准曲线后，本发明根据上述技术方案得到的待测溶液的高效液相色谱图和所述标准曲线，得到待测样品中盐酸决奈达隆的含量。本发明优选根据上述技术方案得到的待测溶液的高效液相色谱图计算得到待测样品中盐酸决奈达隆对应的色谱峰的峰面积，从而根据所述峰面积的值和所述标准曲线，得到待测溶液的质量浓度，然后根据所述待测溶液的质量浓度和待测溶液的进样体积，得到待测溶液中盐酸决奈达隆的质量，从而根据待测样品的质量和盐酸决奈达隆的质量得到待测样品中盐酸决奈达隆的含量。
[0146]由于在将待测样品溶解时得到的待测溶液中盐酸决奈达隆的含量会受到其溶出度的影响，因此，为了得到更加准确地的盐酸决奈达隆在活性物质中的含量，更加准确的判断待测样品的品质，本发明在计算待测样品中盐酸决奈达隆含量前测定待测样品的溶出度。溶出度是指活性药物从片剂、胶囊剂或颗粒剂等制剂在规定条件下溶出的速率和程度。在本发明中，所述待测样品的溶出度是指盐酸决奈达隆从盐酸决奈达隆片中溶出的速率和程度。本发明对所述溶出度的检测方法没有特殊的限制，采用本领域技术人员熟知的溶出度检测的技术方案即可。本发明优选采用2010版药典二部附录X C中的第二法进行检测，得到待测样品的溶出度，具体为:
[0147]将待测样品与溶出介质混合，在不小于75转/min的转速下进行溶出，根据2010版药典二部附录X C中的第二法所述的技术方案得到待测样品的溶出度。在本发明中，所述溶出介质优选为水或醋酸-醋酸钠缓冲溶液，更优选为PH值为4.5的醋酸-醋酸钠缓冲溶液；所述转速优选为75转/mirTlOO转/min,更优选为75转/min ;所述溶出的时间优选不小于30分钟，更优选不小于45分钟。
[0148]得到待测样品的溶出度后，本发明计算得到待测样品中活性物质溶出的质量，从而根据所述活性物质溶出的质量和上述技术方案得到的盐酸决奈达隆的质量，计算得到待测样品中盐酸决奈达隆的含量。
[0149]本发明考察了本发明提供的检测方法的抗干扰性能，本发明考察了酸、碱、氧化、高温、强光和辅料对该方法的干扰，具体过程为:
[0150]本发明向上述技术方案得到的标准溶液中加入酸性物质，将得到的混合溶液按照上述技术方案所述的高效液相色谱检测方法进行测定，本发明对所述酸性物质没有特殊的限制，采用本领域技术人员熟知的酸性物质即可，在本发明中，所述酸性物质优选为摩尔浓度为(0.5^5)mol/L的盐酸溶液，更优选为0-2) mol/L ;得到混合溶液后，本发明优选将所述混合溶液在90°C ^lOO0C的水浴条件下加热后再将其pH值调至中性，再进行检测，更优选为95°C~98°C，所述加热的时间优选为0.5小时~I小时，更优选为0.8小时~1.5小时。结果表明，本发明提供的方法具有较强的抗酸干扰性能；
[0151]本发明向上述技术方案得到的标准溶液中加入碱性物质，将得到的混合溶液
[0152]本发明向上述技术方案得到的标准溶液中加入氧化剂，将得到的混合溶液按照上述技术方案所述的高效液相色谱检测方法进行测定，本发明对所述氧化剂没有特殊的限制，采用本领域技术人员熟知的氧化剂即可，在本发明中，所述氧化剂优选为过氧化氢，更优选为质量分数为5%~15%的过氧化氢溶液，更优选为8%~12% ;得到混合溶液后，本发明优选将所述混合溶液在90°C ~100°C的水浴条件下加热后再进行检测，更优选为95°C~98°C，所述加热的时间优选为20分钟~50分钟，更优选为25分钟~40分钟。结果表明，本发明提供的方法具有较强的抗氧化干扰性能；
[0153]本发明将上述技术方案得到的标准溶液在100°C ~120°C下进行加热，将得到的溶液冷却后按照上述技术方案所述的高效液相色谱检测方法进行测定，更优选为1050C ^llO0C，所述加热的时间优选为10小时~15小时，更优选为11小时~13小时，结果表明，本发明提供的方法具有良好的抗高温干扰性能；
[0154]本发明将上述技术方案得到的标准溶液在光照度为(400(T5000) Ix下进行照射，然后将得到的溶液按照上述技术方案所述的高效液相色谱方法进行检测，所述光照度更优选为(4300-4700) lx，所述照射的时间优选为3天~10天，更优选为5天I天，结果表明，本发明提供的方法具有良好的抗强光干扰性能；
[0155]本发明按照现有技术公开的盐酸决奈达隆片的配方，向上述技术方案得到的标准溶液中加入辅料，将得到的混合溶液按照上述技术方案所述的高效液相色谱方法进行检测，结果表明，本发明提供的方法能够抗辅料的干扰。
[0156]本发明考察了本发明提供的检测方法的适用性、重复性和稳定性，具体过程为:
[0157]本发明配制含有杂质的盐酸决奈达隆溶液，得到混合溶液；将所述混合溶液在设置有不同色谱柱的高效液相色谱仪上进行检测，所述检测的技术方案为上述技术方案所述的待测溶液的高效液相色谱检测方法，结果表明，本发明提供的方法不会受色谱柱的限制，能够较好地实现盐酸决奈达隆和杂质，以及杂质间的分离，实现对盐酸决奈达隆的测定，这说明，本发明提供的方法具有较好的适用性；
[0158]本发明将上述技术方案得到的含有杂质的混合溶液按照上述技术方案所述的检测技术方案进行平行测定，考察本发明提供方法的重复性，结果表明，平行测定的相对标准偏差符合规定，本发明提供的方法具有较好的重复性；
[0159]本发明将上述技术方案得到的含有杂质的混合溶液放置一定时间后再按照上述技术方案所述的检测方法进行测定，考察本发明提供方法的稳定性，结果表明，在放置8小时后对混合溶液进行检测，结果依然较准确，本发明提供的方法具有较好的稳定性。
[0160]本发明提供了一种检测盐酸决奈达隆的方法，包括以下步骤:对待测样品进行高效液相色谱检测，得到待测样品的高效液相色谱图；根据所述高效液相色谱图和预先获得的标准曲线，得到待测样品中盐酸决奈达隆的含量；所述高效液相色谱检测中的填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶；所述高效液相色谱检测中的流动相为甲醇、乙腈和磷酸盐缓冲液的混合物；所述高效液相色谱检测中的柱温不高于40°C ;所述高效液相色谱检测中待测溶液的流速为1.3mL/mirTl.7mL/min ;所述高效液相色谱检测中磷酸盐缓冲液的pH值为
7.0-8.0，在上述检测条件下，得到盐酸决奈达隆的检测结果。本发明提供的方法能够将盐酸决奈达隆与其他杂质分离，并且也能够较好的区分各杂质，在本发明提供的检测条件下，盐酸决奈达隆与各杂质以及各杂质之间的分离均较好，出峰时间较为合适，而且本发明提供的方法具有较高的灵敏度，因此本发明提供的方法能够较好地实现对盐酸决奈达隆品质的测定，而且有利于指导生产过程中对杂质的控制，得到高品质的盐酸决奈达隆。[0161]为了进一步说明本发明，下面结合实施例对本发明提供的一种检测盐酸决奈达隆的方法进行详细地说明，但不能将它们理解为对本发明保护范围的限定。
[0162]在以下实施例中，药物溶出仪为天大天发生产的型号为D-SOOls与天大天发生产的型号为RCZ-8M，高效液相色谱仪为Agilent生产的型号为1100与Agilent生产的型号为1200，天平为Sartorius生产的型号为BP211D。
[0163]盐酸决奈达隆对照品来自于江苏康缘药业股份有限公司、批号为101201-1、纯度为99.7% ;盐酸决奈达隆片来自于江苏康缘药业股份有限公司、规格为400mg、批号分别为110401,110402和110403 ;市售盐酸决奈达隆片购自赛诺菲-安万特(Sanof1-Aventis)、批号为58。空白辅料中的乳糖购自常州市朗生生物工程有限公司、批号为20110211，淀粉来自于曲阜市天利药用辅料有限公司、批号为101226 ;泊洛沙姆188购自南京威尔化工有限公司、批号为20101201 ;羟丙甲纤维素购自安徽山河药用辅料股份有限公司、批号为100508 ;交联聚维酮购自安徽山河药用辅料股份有限公司、批号:20101103 ;硬脂酸镁购自湖南尔康制药有限公司、批号:20101101 ;薄膜包衣粉(白)购自天津爱勒易医药材料有限公司、批号为101101A1060。杂质对照品购自上海医药工业研究院，其中2-甲基_3-[4-(3_二正丁基氨基丙氧基)苯甲酰基]-5-甲磺酰胺基苯并呋喃盐酸盐的批号为110101，在本发明中，将2-甲基-3- [4- (3- 二正丁基氨基丙氧基)苯甲酰基]-5-甲磺酰胺基苯并呋喃盐酸盐命名为杂质A ;2_正丙基-3- [4- (3- 二正丁基氨基丙氧基)苯甲酰基]-5-甲磺酰胺基苯并呋喃盐酸盐的批号为110101，在本发明中，将2-正丙基-3-[4-(3- 二正丁基氨基丙氧基)苯甲酰基]-5-甲磺酰胺基苯并呋喃盐酸盐命名为杂质B ；2-正丁基-3-[4- (3- 二正丁基氨基丙氧基)苯甲酰基]-5-二甲磺酰胺基苯并呋喃盐酸盐的批号为101001，在本发明中，将
2-正丁基-3-[4- (3- 二正丁基氨基丙氧基)苯甲酰基]-5- 二甲磺酰胺基苯并呋喃盐酸盐命名为杂质C ;5_氨基-3-[4- (3- 二正丁基氨基丙氧基)苯甲酸基]~2~正丁基苯并呋喃二草酸盐的批号为100901，在本发明中，将5-氨基-3-[4-(3-二正丁基氨基丙氧基)苯甲酰基]-2-正丁基苯并呋喃二草酸盐命名为杂质D。乙腈和甲醇购自美国天地，为色谱纯；磷酸二氢钾、氢氧化钠、冰醋酸和醋酸钠均购自国药集团化学试剂有限公司；水为超纯水。
[0164]实施例1~4[0165]根据中国药典2010年版二部附录111的记载进行显氯化物的鉴别。精密称取IOmg批号为110401、110402和110403的购自江苏康缘药业股份有限公司盐酸决奈达隆样品和购自赛诺菲-安万特(Sanof1-Aventis)的盐酸决奈达隆片，分别加入乙醇和水各15mL和氨试液5mL，进行振摇、静置、过滤，将得到的滤液按照药典中的方法进行操作进行显氯化物的鉴别。
[0166]结果表明，实施例1~4中样品的检查结果均呈正反应，阴性无干扰。
[0167]实施例5~9
[0168]精密称定25mg批号为110401、110402和110403的购自江苏康缘药业股份有限公司盐酸决奈达隆样品、和购自赛诺菲-安万特(Sanof1-Aventis)的盐酸决奈达隆片和空白辅料，将其分别置于50mL的量瓶中，向其中加无水乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，静置，过滤；精密量取续滤液lmL，将其置于50mL的量瓶中，向其中加入摩尔浓度为0.lmol/L盐酸溶液溶解并稀释成每ImL含盐酸决奈达隆10 μ g的溶液，按照中国药典2010年版二部附录IV A记载的紫外-可见分光光度法对其进行测定。
[0169]结果如图1飞所示，图f 4分别为本发明实施例51得到的盐酸决奈达隆片的紫外光谱图，图5为本发明实施例9得到的空白辅料的紫外光谱图，根据得到的图f 5得到盐酸决奈达隆片的最大吸收波长，结果如表1所示，表1为本发明实施例51中盐酸决奈达隆的紫外最大吸收波长。
[0170]表1本发明实施例5~8中盐酸决奈达隆的紫外最大吸收波长
[0171]
【权利要求】
1.一种检测N- (2- 丁基-3- (4- (3- 二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐的方法，包括以下步骤: 对待测样品进行高效液相色谱检测，得到待测样品的高效液相色谱图； 根据所述高效液相色谱图和预先获得的标准曲线，得到待测样品中N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐的含量；所述高效液相色谱检测中的填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶； 所述高效液相色谱检测中的流动相为甲醇、乙腈和磷酸盐缓冲液的混合物； 所述高效液相色谱检测中的柱温不高于40°C ； 所述高效液相色谱检测中待测溶液的流速为1.3mL/mirTl.7mL/min ； 所述高效液相色谱检测中磷酸盐缓冲液的PH值为7.0-8.0 ； 所述高效液相色谱检测的检测波长为210mnT230nm。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述流动相中磷酸盐缓冲溶液为磷酸二氢钾和碱性化合物的混合溶液。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述磷酸盐缓冲溶液中磷酸二氢钾的摩尔浓度为(0.0005~0.005) mol/L。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述流动相中甲醇的体积分数不大于32%。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述流动相中乙腈的体积分数不大于50%。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述柱温为35°C~40°C。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述PH值为7.5。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述进行高效液相色谱检测前还包括以下步骤: 将待测样品用流动相溶解，得到待测溶液。
9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述标准曲线按照以下方法获得: 将N-(2-丁基-3-(4-(3-二丁基氨基丙氧基)苯甲酰基)苯并呋喃-5-基)甲磺酰胺盐酸盐标准品配制成系列浓度标准溶液； 将所述系列浓度的标准溶液进行高效液相色谱检测，分别得到系列浓度标准溶液的高效液相色谱图； 根据得到的高效液相色谱图得到标准品峰的峰面积； 根据所述峰面积和标准溶液的浓度，得到标准曲线。
10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，还包括以下步骤: 将待测样品进行显氯化物鉴别和紫外光谱鉴别，得到待测样品中含有盐酸决奈达隆的鉴别结果。
【文档编号】G01N30/02GK103901117SQ201210574390
【公开日】2014年7月2日 申请日期:2012年12月27日 优先权日:2012年12月27日
【发明者】萧伟, 仲艳, 潘红娟, 傅小勤, 李家春, 王振中, 毕宇安, 章晨峰, 徐丰果, 于丹 申请人:江苏康缘药业股份有限公司