确定血液凝固特性的制作方法

确定血液凝固特性的制作方法
【专利摘要】本发明涉及确定血液凝固特性。在一些示例中，设备在血样上施加电压差。设备在一定持续时间内测量经过血样的电信号，以获得表示时间的测量函数的多个测量结果。可以确定测量函数的累计特性，使得累计特性与血液凝固特性相关。
【专利说明】确定血液凝固特性
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求于2012年7月16日提交的美国临时专利申请N0.61/671，810的优先权，该美国临时专利申请的全文以引用的方式并入于此。
【技术领域】
[0003]本发明涉及用于检验多种血液凝固特定的医学设备和方法，例如凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原含量(FIB)和凝血酶时间(TT，ThrombinTime)。
【背景技术】
[0004]可以使用医疗设备和医疗检验来诊断、识别、监测或确定健康相关信息。作为一个示例，血液凝固筛查检验，例如凝血酶原时间(PT, Prothrombin Time)、活化部分凝血活酶时间(APTT, Activated Partial Thromboplastin Time)、活化凝血时间(ACT, ActivatedClotting Time)、纤维蛋白原含量(FIB, fibrinogen content)和凝血酶时间(TT, ThrombinTime)，可以由临床实验室、健康从业者等等执行。这些检验中的每一个涉及特定条件下的血液凝固特性的类型。
[0005]临床医生可以将这些检验用于各种目的，例如，监测抗凝剂疗法、筛查单因子缺陷、筛查多因子缺陷和/或筛查特异性或非特异性抑制剂。作为一个示例，普通肝素疗法广泛地用作对血栓栓塞(阻塞性血块)失调的治疗。在一些情况下，基于APTT或ACT检验的结果来确定肝素疗法或者所施以的肝素的量。然而，存在许多预分析和分析变量可以影响PT、APTT, ACT、FIB或TT测量，通常从一个检验设备或实验室到另一个给出极为不同的测量。这可能使得对患者施以的药物(例如，肝素)或其他疗法的量产生变动，并可能导致无法得到最优治疗结果。

【发明内容】

[0006]本公开包括用于确定指示血样的血液凝固特性的血样特性的技术和布置。在一些示例中，血样被引入到包括多个电极的样本接收器(sample receiver)中，使得至少部分血样以及多个电极在电路中连接。例如，样本接收器和电路可以在设备中实现。该设备可以在多个电极和至少部分血样上施加电压差。该设备可以测量经过血样的电信号，例如通过在电路的输出端子处进行测量。该测量可以在测量持续时间内进行，以获得表示时间的测量函数的多个测量结果。测量函数的累计特性可以被确定，使得累计特性与血液凝固特性相关。血液凝固特性是可以至少部分地基于对测量函数施加的累计特性来确定的。在一些情况下，累计特性可以至少部分地基于与随时间绘制的电信号的曲线的分段相关联的面积。在其他情况下，累计特性可以至少部分地基于随时间绘制的电信号的曲线的部分的幅度的改变。
[0007]这里的一些示例可以考虑随时间获得的测量结果的曲线的至少一部分，并可以基于测量曲线来计算表示血液凝固特性的量。相比之下，用于测量血液凝固的传统技术包括:检测血样的终点或最终状态(例如，检测颜色改变、阻抗曲线的平坦点、粘性或者其他物理属性)。因此，传统技术可以仅聚焦于确定样本的特定最终状态。
[0008]这里的一些实施方式至少部分地基于以下前提:在凝固期间，存在针对电导率而逐步增强的内摩擦力，从而导致累计导电能量损耗。相应地，在这里的一些示例中使用该累计特性来表征血样的凝固特性。如这里所公开，相对于曲线的单个点处的属性(例如，凝固的最终状态的粘性或阻抗)，累计特性可以是所获取的测量函数的累计特性，并可以与随时间段变化的测量函数中的至少两个数据点(测量结果)相关。
[0009]此外，这里的一些实施方式至少部分地基于以下直觉:与传统使用的单个最终状态特性测量结果相比，测量函数的累计特性更加准确且完整地体现了凝固过程。在此理论和解释可以被假设以对观察进行合理化。然而，基于此的所公开的方法和设备的效用，以及更重要地，在本申请中提供的权利要求的范围，并不依赖于也不限于任何假设的理论、前提或解释的正确性和稳固性。此外，本公开不要求所公开的方法、设备或技术有优越的性能。
【专利附图】

【附图说明】
[0010]【具体实施方式】参照附图来被阐述。在附图中，参考标记的最左部数字标识了该参考标记首次出现的附图。在不同附图中使用相同参考标记来指示相似或相同的项目或特征。
[0011]图1示意了根据一些实施方式的用于确定血液凝固信息的示例框架。
[0012]图2示意了根据一些实施方式的示例样本受体(sample receptor)。
[0013]图3示意了根据一些实施方式的包括用于检验血液凝固特性(blood coagulationcharac t er i s t i c )的设备的示例系统的选择组件。
[0014]图4示意了根据一些实施方式的时间的示例测量函数(measurement function)。
[0015]图5示意了根据一些实施方式的测量函数的示例累计特性(accumulativeproperty)。
[0016]图6示意了根据一些实施方式的测量函数的示例累计特性。
[0017]图7示意了根据一些实施方式的RACE结果与PT检验的参考实验室系统结果之间的相关性的示例。
[0018]图8示意了根据一些实施方式的测量函数的示例累计特性。
[0019]图9示意了根据一些实施方式的测量函数的示例累计特性。
[0020]图10示意了根据一些实施方式的RACE结果与APTT检验的参考实验室系统结果之间的相关性的示例。
[0021]图11示意了根据一些实施方式的RACE结果与TT检验的参考实验室系统结果之间的相关性的示例。
[0022]图12示意了根据一些实施方式的测量函数的示例累计特性。
[0023]图13示意了根据一些实施方式的RACE结果与FIB检验的参考实验室系统结果之间的相关性的示例。
[0024]图14是示意了根据一些实施方式的用于检验血液凝固特性的示例过程的流程图。[0025]图15是示意了根据一些实施方式的用于检验血液凝固特性的示例过程的流程图。
【具体实施方式】
[0026]出于讨论的目的,一些不例实施方式在用于检验血液凝固属性的检验设备和系统的环境中被描述。然而，对于按照本公开的领域的技术人员来说显而易见，这里的实施方式不限于所提供的特定示例，而是可以扩展至其他类型的设备、装置和系统以及其他类型的检验。
[0027]示例框架
[0028]图1示意了根据一些实施方式的用于检验血液凝固特性的示例框架100。在一些示例中，不检测血样的最终状态，而是应用分析技术来确定在凝固过程期间随时间进行的多个测量结果的累计特性。框架100的至少一部分可以在设备102上执行。在其他示例中，多个设备可以执行框架100，例如，在第一设备上执行测量函数并在从第一设备接收测量信息的第二设备上执行计算函数。至少部分地根据设备102的类型，设备102的用户可以是以下任一项:医疗或临床专业人员、患者、患者的家庭成员、患者的护理者、或者使用设备102的任何其他人。
[0029]在框架100中，血样104可以由血样接收器106接收。作为多个示例，可以将小血样104应用于试剂片、盒、匣、样本受体等，它们可以是设备102的一部分，或者可以被引入到设备102中、被插入到设备102中、连接至设备102等等。相应地，这里的实施方式不限于用于将血样104提供给设备102的血样接收器106的任何特定设备或技术。
[0030]可以对由血样接收器106接收到的血样104施加电压差108。如110处所指示，可以在一定时间段内测量经过血样的电信号，以产生多个测量结果112。例如，测量结果112可以指示由于对血样104施加电压差108而引起的在一定时间段内电压的改变或电流的改变中的至少一个。作为另一示例，测量结果112可以是随时间测量的电信号的导数值。
[0031]基于测量结果112和该时间段，可以确定时间的测量函数114。在一些示例中，可以将时间的测量函数114表达为图示，例如，表示随该时间段测量的电信号的曲线。然而，在其他示例中，不需要产生图示来应用或使用时间的测量函数114。基于时间的测量函数114，可以确定至少一个累计特性116。例如，累计特性116可以与时间的测量函数的部分相对应，并可以与血液凝固特性118相关。在一些示例中，可以将测量函数的曲线(例如，信号曲线)划分为四个过程，其中每一个可以与不同的血液凝固条件相关。可以将与血液凝固特性118相关的信息提供给各个目标中的任一个，例如显示器、存储介质和/或计算设备。
[0032]示例样本受体
[0033]图2示意了根据一些实施方式的示例样本受体200。在该示例中，样本受体200被示意为检验片或检验盒202。如虚线206所示的反应区204可以包括一个或多个试剂208或者针对一种或多种类型的检验而选择的其他物质。通常，不同检验(例如，PT、APTT、ACT、FIB或TT)具有其自身的试剂208或者适用于检测特定特性的其他物质。作为一个示例，可以在反应区204处预先应用(例如，印制、放置等)和固定试剂208。
[0034]检验盒202还包括可将反应区204与加样口(sample well)或接收器212相连接的输送通道210。例如，可以将一定量的样本血液104输送至接收器212。血液样本可以流经输送通道210至反应区204。例如，在毛细管作用下可以将血样104从样本接收器212提取至反应区204。
[0035]检验盒202还可以包括多个电极214，以形成电化学电池。例如，第一电极216可以连接至反应区204的第一部分218，第二电极220可以连接至反应区204的第二部分222。第三电极224也连接至反应区204。在该示例中，反应区204处的电化学电池由三个电极，例如工作电极、反电极(counter electrode)和参考电极,构成。在其他示例中，可以将反电极和参考电极进行组合以提供两电极配置(two-electrode configuration)。
[0036]相应地,可以看出，当来自加样口的血液进入反应区204时,血样104位于多个电极，例如第一电极216和第二电极220，之间。此外，在血样的检验期间使用试剂或其他物质的示例中，血样104可以在反应区204中与试剂208或其他物质相互作用。此外，尽管在该示例中示出了单个电化学电池，但是在其他示例中，可以包括多个电化学电池，以提供多个反应区204。例如，不同反应区204可以包括不同类型的试剂208或者适用于不同类型的检验的物质。这些反应区可以通过通道连接至单个样本接收器212。
[0037]可应用检验盒202的一个应用是肝素监测。例如，肝素中和剂可以是位于与电极相邻的反应区204中的试剂208。在样本接收器212处引入血样104，并通过输送通道210将血样104输送至反应区204。在反应区204内，血样与试剂208发生反应，这可以触发一系列导致凝固的生化反应。在反应区204中，血样104与多个电极214相接触。如下另外讨论，当检验盒202被插入到设备中时，位于反应区204中的电极214和血样104变为用于检验血样104的完整电路的电化部分。例如，该设备可以在电极214上施加电压差，以在一定时间段(即，测量持续时间)内检测电路的输出端子处的电信号，以便获得表示时间的函数(即，时间的测量函数)的多个测量。
[0038]示例系统
[0039]图3示意了根据一些实施方式的用于获得可以用于确定血液凝固特性的测量结果的系统300的示例架构。系统300包括可以作为检验设备的设备302或者能够至少对血样104施加电压差的其他设备，如上所讨论。在一些示例中，设备302可以与以上讨论的设备102相对应，和/或可以执行以上参照图1讨论的框架100的至少一部分。
[0040]设备302包括血样接收器106，在该示例中，血样接收器106包括盒接收器304和加热器306。例如，加热器306可以确保在检验时间将血样104维持在一致的温度，以确保检验在多个样本上的一致。此外，在其他示例中，根据实际用于将血样输送至设备302的技术，血样接收器106可以具有不同的配置。
[0041]设备302还可以包括用于将检验盒202的电极与设备302的电路310相连接的多个电连接308。例如，电极214可以连接至电源312和模拟/数字转换器314。电源312可以在检验血样104期间在检验盒202的反应区214中提供血样104上的电压差。A/D转换器314可以测量结果电信号，例如在输出端子处。在一些情况下，输出端子可以与电极214中的一个或多个相对应。
[0042]设备302还可以包括一个或多个处理器316、一个或多个计算机可读介质318、显示器320、电源适配器端口 322以及一个或多个通信接口 324，例如外部数据端口或其他合适的通信接口，如以下所讨论。例如，处理器316可以是控制逻辑电路、中央处理单元、微处理器或其他合适类型的处理器中的任一个。在一些示例中，每个处理器316自身可以包括一个或多个处理器或处理核心。或者，在其他示例中，设备302可以是薄组件，该薄组件具有仅足以在使用设备302期间执行检验功能或检验模块326的最小处理资源，同时，可以在能够通过通信接口 324与设备302进行通信的计算设备328或其他设备上远程执行附加处理。
[0043]根据设备302的配置，计算机可读介质318可以是有形非瞬态计算机存储介质的示例，并可以包括以用于存储信息的任何类型的技术，例如计算机可读指令、数据结构、程序模块或其他数据，实现的易失性和非易失性存储器和/或可移除和不可移除介质。这种计算机可读介质318可以包括但不限于RAM、ROM、EEPR0M、闪存、或者其他计算机可读介质技术、计算机存储技术或可以用于存储信息且可以由处理器316直接或通过另一计算设备接入的任何其他介质。相应地，计算机可读介质318可以包括能够存储和维持处理器316可执行的指令、模块或组件的计算机存储介质。
[0044]计算机可读介质318可以用于存储处理器316可执行的任何数目的功能组件。在一些实施方式中，这些功能组件包括处理器316可执行且在被执行时实现用于执行归于设备302的动作的运算逻辑的指令、代码或程序。在计算机可读介质318中维持的设备302的功能组件可以包括检验模块326，其可由处理器316执行以执行对血样的检验，例如在血样上施加电压差以及获得对电信号的测量结果。功能组件还可以包括分析模块330，其可以由处理器316执行，用以执行这里描述的一些功能，例如确定时间的测量函数114、一个或多个对应的累计特性116和/或血液凝固特性118。例如，分析模块330还可以至少部分地基于累计特性116和/或测量结果112或时间的测量函数114来确定血液凝固特性。此夕卜，计算机可读介质318可以存储诸如测量结果112、时间的测量函数114、累计特性116、血液凝固特性118或与此相关的信息等数据。此外，根据设备302的类型，计算机可读介质318还可以可选地包括其他功能组件和数据，例如用户接口模块、通信模块、医疗历史、过去的血液凝固检验结果或其他模块、应用、程序、驱动器、数据等。
[0045]由设备302针对血样104获得的测量结果112可以存储在计算机可读介质318中，并被分析，例如通过由处理器316执行分析模块330而被分析。分析模块330可以确定测量函数114的累计特性116的量值。在获得测量结果112之前，或者在一些情况下，在制造设备302之前，可以凭经验导出或选择累计特性116。例如，选择合适累计特性116的标准通常是:获得与血液凝固特性118的良好相关性，以使累计特性116能够用于确定血液凝固特性118。
[0046]在一些示例中，用于确定时间的测量函数114、累计特性116和/或血液凝固特性118的处理可以通过由处理器316在设备302上执行分析模块330来执行。在其他示例中，一些或所有处理可以由外部计算设备328执行。例如，设备302可以将测量结果112提供给计算设备328，并且计算设备328可以在计算设备328的处理器上执行分析模块330，以确定时间的测量函数114，应用累计特性116和/或确定血液凝固特性118。在这种情形下，检验模块326或者设备302上的其他合适的应用或通信模块可以通过连接332来与计算设备328进行通信，以将测量结果112提供给计算设备328。在其他示例中，计算设备328可以暴露设备302可以使用来提供测量结果112的编程接口或API (应用编程接口)。在其他示例中，不提供测量结果112，而是设备302可以将血液凝固特性118或者与血液凝固特性相关的信息提供给计算设备328。[0047]检验设备102可以包括一个或多个通信接口 324，该一个或多个通信接口 324可以用于与计算设备328进行通信，以接入计算设备328上的一个或多个模块并与该一个或多个模块进行交互。在一些示例中，通信接口 324可以支持有线和/或无线连接332通往各个网络，例如蜂窝网络、无线电通信、W1-Fi网络、短距离或近场网络(例如BI uetooth?)、红外信号、局域网、广域网、互联网、直接线缆连接等等。作为一个示例，通信接口 324可以包括USB (通用串行总线)端口、IEEE802.3端口或其他有线连接。在其他示例中，通信接口324可以允许设备302接入无线通信网络或设备。
[0048]图3还示意了显示器320，显示器320可以是无源、发射型或者任何其他形式的显示器。在一些示例中，显示器320可以包括任何合适类型，例如液晶显示器、等离子体显示器、发光二极管显示器、有机发光二极管显示器等等。此外，在一些示例中，显示器320可以具有与其相关联的触摸传感器，以实现来自用户的触摸输入。此外，在其他示例中，检验设备302可以不包括显示器。
[0049]检验设备302还可以配备有各种其他输入/输出(I/O)组件(图3未示出)。这种I/o组件可以包括各种用户控制器(例如，按钮、操纵杆、键区等)、扬声器、麦克风等等。例如，设备302可以包括被配置为接受来自键区或其他用户控制器的输入的合适驱动器以及作为I/O组件而被包含的设备。此外，根据类型，设备302可以包括该示例中未示出的各种其他组件。
[0050]示例测量函数
[0051]凝血可以包括三个阶段。在第一阶段期间，血管壁损伤或创伤触发血小板的附着和活化。在第二阶段中，活化的血小板提供用于凝固因子和复合物的聚集和活化的面。在第三阶段中，凝固因子互相作用以产生凝血酶，这将纤维蛋白原(fibrinogen)转换为纤维蛋白(fibrin)。纤维蛋白链绑定聚合的血小板，以便有助于加固血小板-纤维蛋白止血栓。血液凝固的第二和第三阶段可以被称为用于凝固因子中的每一个之间的相互作用的凝血瀑布反应(coagulation cascade)。由于在这些阶段中形成凝血酶,这些是凝血的主要阶段。凝血酶是凝血效应酶，具有生物学上重要的功能，例如，血小板的活化、纤维蛋白原至纤维蛋白网络的转换以及凝固的反馈放大。凝血瀑布反应可以被概括为三个途径:内源性路径、外源性路径和共同路径。内源性路径可以由表面接触触发，而外源性路径可以由组织/细胞缺陷触发。这两个均可以导致凝血酶的形成。在共同路径中，凝血酶将纤维蛋白原转换为纤维蛋白，然后，纤维蛋白可以形成交联的纤维蛋白网状物。
[0052]图4示意了根据一些实施方式的电信号的相对于时间绘制的测量函数的示例性曲线400。图4的曲线400仅被示意为示例。由设备302检测到的电信号可以是电压差(电压)或电流。其时间函数用于凝固分析的测量结果可以与实际检测到的电信号相同，或者可以基于从检测到的电信号导出的另一属性，例如电阻或阻抗。在一些情况下，测量函数可以由设备102的处理器316在数学上或在计算上分析，而无需在确定曲线400的累计特性时实际生成或绘制电信号的可视曲线400。
[0053]当血样104被放置于样本接收器(sample receptacle)212中时,血液通过毛细管作用被向前运载，以到达反应区204，如上所讨论。在以上讨论的示例中，反应区204包含多个电极，这些电极可以在反应区204中的血样104上施加电压差。在一些示例中，电压差可以是由设备302对电极214施加的恒定电压。在其他示例中，电压或电流可以变化，电流可以是交流电，等等。
[0054]在一些实施方式中，在输出端子，例如第一电极216或第二电极220，处检测到的电信号是经过反应区204中的血样的电流，或者与经过血样的电流相关的电流。图4的曲线400示意了由于血样中的凝固反应而引起的电流响应(即，电信号)的行为的示例,该凝固反应还可能已经与一个或多个试剂208起反应。
[0055]在图4的示例中，曲线400示出的电流起初快速增大，在时刻h处达到第一峰值402。该结果可以归因于血样在相邻的电极，例如第一电极216和第二电极220，之间形成电连接。时间点h可以是电极通过血样进行完整电连接的时刻。在该示例中，从初始时刻至时刻h处第一峰值402的时间跨度期间的过程被称为过程一 404。
[0056]在时刻h之后，电流开始下降。该结果可以归因于将纤维蛋白原转换为纤维蛋白以形成不溶性产物的过程。该过程还可以伴随有凝血瀑布反应的启动，导致凝血酶产生。曲线400示出了在该活化发生直到在时刻tm处达到曲线400的第一底部406为止经过血样的电流的下降。在该示例中，从时刻tQ处的第一峰值402至曲线400的时刻^处的第一底部406的过程被称为过程二 408。
[0057]然后，从曲线400的第一底部400处的时刻tm起，电流开始逐渐再次增大，在时刻t’处达到第二峰值410，这可以为纤维蛋白原在凝血酶的催化下改变为纤维蛋白以及进一步开始形成小颗粒的过程的结果。在该示例中，从时刻1处的第一底部406至时刻t’处的第二峰值410的过程被称为过程三412。
[0058]在时刻t’处的第二峰值410之后，电流开始再次稍微下降(或者在一些情况下，可以保持稳定)。该过程可以由于纤维蛋白的网状形成，伴随有纤维蛋白的沉降。在该示例中，第二峰值410处的时刻t’之后的过程被称为过程四414。
[0059]示例累计特性
[0060]凝血酶原时间确定(例如，PT监测)的传统示例可以基于使用斜率计算的最终状态确定。然而，该技术不适于其他 类型的抗凝监测，例如肝素剂量监测。
[0061]这里公开了一种用于凝固监测的新技术，可以被称为残余累计导电能量(RACE，Residual Accumulative Conductive Energy)方法。根据这里公开的RACE方法,可以根据如以上参照图4讨论的四个过程404、408、412和414来划分或分割测量函数(例如，所测量出的电信号)的曲线400。该方法将RACE用作电信号的测量的时间函数的经验累计特性。RACE的计算值可以用于估计凝固特性，而不是最终状态确定的传统技术，例如基于斜率计笪
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[0062]图5和6示意了根据一些实施方式的将RACE用于凝固监测的示例。在这些示例中，将RACE应用为从时刻h至时刻t’，即从第一峰值402至第二峰值410，的信号曲线400之下的面积的函数。基于对测量函数(例如，电信号随时间变化的函数)的分析，这里的实施方式可以基于在过程二 408和过程三412期间累计的数据来确定凝血时间。RACEelrtting是旨在与凝固特性，例如PT、ACT和/或APTT，相关的测量函数的示例性累计特性。
[0063]图5示意了根据一些实施方式的可基于从时刻tQ至时刻t’的曲线400的分段确定的第一面积Ai502的示例500。例如，可以将第一面积Ai502确定为从时刻h至时刻t’，即从第一峰值402至第二峰值410，的曲线400之下的面积的积分。
[0064]图6示意了根据一些实施方式的可基于从时刻tQ至时刻t’的曲线400的分段确定的第二面积A2602的示例600。例如，可以通过在特征时间段内对可变值与电流的曲线400的第一底部406处的固定最小值(在时刻tm处)之差进行积分，将第二面积A2602确定为从时刻h至时刻t’的曲线400之下的面积的积分。
[0065]RACEclotting是可以根据以下等式凭经验确定的:
[0066]RACEclotting= (t，-t0)nX (A1)V(A2)5 等式 I
[0067]RACEelrtting表示凝固过程的累计改变。时刻t’是血样开始沉降纤维蛋白的时刻，时刻h是反应区204中的血样将电极连接的时刻。面积A1是通过从时刻h至时刻t’对电流的可变值进行积分而计算出的第一积分面积502，从时刻h至时刻t’是测量持续时间内的特征时间段。相应地，面积A1表示在过程二 408和过程三412期间累计的总残余导电能量。面积A2是通过在特征时间段内对可变值与电流的固定最小值(在时刻tm处)之差进行积分而计算出的第二积分面积，在这种情况下，特征时间段是从时刻h至时刻t’的时间。
[0068]幂指数n、m和P是经验参数。实验已示出:将经验参数n、m和p分别设置为实质上接近于1、1和1/2可以使得RACEdrtting与一个或多个常用的凝固特性(例如，PT、ACT或APTT)之间的相关性相对较好。
[0069]此外，本公开不限于以上参照等式I描述的特定公式，本公开也不限于经验参数n、m和P的特定值，这对特定应用来说可以是优选的。
[0070]作为一个示例应用，凝血瀑布反应的四个组分取决于维生素K含量。这四个组分是组织凝血活酶(tissue thromboplastin)(因子I1、TF)、因子IX、因子X和凝血酶原。华法令(warfarin)是口服抗凝药物,广泛用于防止血栓栓塞事件,包括深静脉血栓形成、肺栓塞、心肌梗塞和中风。华法令是维生素K相似物，因此，华法令疗法以凝血瀑布反应的这些因子为目标，这对外源性途径具有最大影响。华法令不具有直接抗凝剂属性，但通过抑制维生素K途径相关凝血因子I1、VI1、IX、X以及抗血栓形成蛋白C和S来施加其影响。
[0071]凝血酶原时间(PT)检测可以用于评估外源性和共同路径凝血系统以及监测长期抗凝疗法。相应地，这里的实施方式可以使用如上所讨论的RACEelrtting来确定华法令监测的凝血酶原时间(PT)检测结果，其中，RACEelrtting是通过等式I来计算的。例如，采用适当的的试剂208可以通过对经过试剂引入的血样的电信号进行多个测量来测定PT时间。可以使用以上讨论的RACEdrtting技术来确定累计特性，并可以基于RACEdrtting结果来确定PT检验结果。
[0072]图7示出了基于上述等式I的RACEcdrtting结果与通过使用参考实验室系统，即Siemens AG, Erlangen, Germany 销售的Sysmex? CA-7000System,而获得的 PT 之间的相关性的示例700。图7中的数据是使用被修改以满足如本发明中所述的RACE技术的需要的qLabs? ElectroMeters (型号Q-1)和qLabs? PT-1NR检测卡(均来自中国深圳的Micropoint Biotechnologies, Inc.)在医院中收集的数据的示例。所示的示例是233个口服华法林患者检测的数据。对于每个患者，RACE技术使用了少量血样，约IOyL的指尖末梢血，在30分钟内收集相同患者的柠檬酸钠抗凝的静脉血，经常规离心过的血浆在Sysmex?中央实验室凝血检测仪上进行检测。
[0073]如图7所示，线702表示在9.7-92.9秒的范围内针对PT、利用多个菱形704表示的实验结果的最佳拟合线。在该示例中，线702可以被表达为y=11691x+30983以及相关系数R=0.92。结果示出了在RACEeltrtting结果与Sysmex? PT结果的结果之间存在很好的相关性，证明RACEdrtting结果可以用于获得PT检验结果。
[0074]这里公开的RACEdtrtting技术还可以用于肝素监测。肝素是与心脏搭桥手术、心脏插管、肾透析相联系且在急救护理情形下用于急性心肌梗塞的常用药物。利用肝素的治疗导致凝血酶失活。肝素通过绑定至被称为抗凝血酶III的血浆辅因子并与该血浆辅因子形成复合物来施加抗凝影响。
[0075]相应地，可以采用以上讨论的RACEdrtting技术来监测血液中的肝素，例如通过包括作为盒202上的试剂208的试剂凝血酶。在这里的一些示例中，RACEelrtting技术甚至可以实现比传统方法更宽的信号检测范围以及对比lU/ml低的肝素浓度的检测。因此，以上参照图5和6讨论的累计特性可以提供与血样中的肝素浓度的紧密相关性，并可以作为APTT或ACT检验结果而相关和/或由此使用。传统地，低于1.5U/ml的肝素浓度通常由APTT监测，而高于1.5U/ml的肝素浓度通常由ACT监测。
[0076]图8-9不意了根据一些实施方式的将RACE用于凝固监测和检验的另一不例。在图8-9的示例中，将RACE应用为与从时刻h至时刻t’，即从第一峰值402至第二峰值410，的信号曲线400的分段相对应的一个或多个面积的函数。基于对测量函数(例如，电信号随时间变化的函数)的分析，这里的实施方式可以基于在过程二 408和过程三412期间累计的数据来确定血液凝固特性。在该示例中，RACE技术是旨在与凝固特性，例如TT和/或APTT，进行相关的测量函数的示例性累计特性。
[0077]图8示意了根据一些实施方式的可关于从时刻h至时刻tm的曲线400而确定的第一面积QW02的示例800。例如，第一面积Q0O2可以被确定为从时刻h至时刻tm的曲线400的积分，即，曲线400的从第一峰值402至第一底部406的曲线分段，并且其中，面积Q0O2以第一峰值402和时刻tm为界。
[0078]图9示意了根据一些实施方式的可关于从时刻tm至时刻t’的曲线400的分段而确定的第二面积02902的示例900。例如，第二面积Q2902可以被确定为从时刻tm至时刻t’的曲线400的积分，S卩，曲线400的从第一底部406至第二峰值410的曲线分段，并且其中，面积Q2902以时间tm和第二峰值410为界。
[0079]面积Q0O2和Q2902可以用于与诸如TT或APTT之类的检验进行相关。例如，第一合适试剂208,例如促凝血酶原激酶(thromboplastin)可以用于通过对经过对第一试剂引入的血样的电信号进行多个测量来与APTT检验进行相关。不同的第二合适试剂208，例如凝血酶(thrombin)可以用于通过对经过对第二试剂引入的血样的电信号进行多个测量来与TT检验进行相关。以下等式可以用于与APTT和TT检验中的任一个或这两者进行相关。
[0080]RACEaptt或RACEtt是可以根据以下等式凭经验确定的:
[0081 ] RACEaptt 或 RACETT=kQ，其中 Q=QfQ2 等式 2
[0082]RACEaptt或RACEtt表示凝固过程的累计改变。面积Q1是通过从时刻tQ至时刻tm对电流的可变值进行积分而计算出的第一积分面积802，从时刻h至时刻tm是测量持续时间内的特征时间段。相应地，面积Q1表示在过程二 408期间累计的总残余导电能量。面积Q2是通过从时刻tm至时刻t’对电流的可变值进行积分而计算出的第二积分面积902，从时刻tm至时刻t’是测量持续时间内的另一特征时间段。相应地，面积Q2表示在过程三412期间累计的总残余导电能量。[0083]常量k可以是经验参数。实验已示出:将经验参数k设置为实质上接近于I可以使得RACEaptt和/或RACEtt与一个或多个常用的凝固特性，例如APTT或TT，之间分别实质相关。此外，本公开不限于以上参照等式2描述的特定公式，本公开也不限于经验参数k的特定值，这对特定应用来说可以是优选的。
[0084]图?ο示意了基于等式2的race结果与5个样本的Sysmex? APTT结果之间的相关性的示例1000。与以上参照图7讨论的示例700类似，使用修改后的qLabs?ElectroMeter 和qLabs? PT-1NR检测卡，检验了五个样本并应用了等式2，以利用RACE技术获得APTT检验结果。例如，在没有抗凝剂的情况下提取了五个静脉血样，其中每一个是利用不同浓度的肝素刺穿并利用这里描述的RACE技术和参考实验室系统(即，SiemensAG, Erlangen Germany 销售的Sysmex? CA-500)检验的。在所示的示例中，在 34.6-112.3秒的范围内针对APTT而表达为y=194.06x+7275.1的线1002是如利用菱形1004表示的实验数据点的最佳拟合线。在该示例中，相关系数是R=0.91，这示出了提供APTT检验结果的RACE结果的足够相关性。
[0085]TT测量纤维蛋白原至纤维蛋白的转换。作为一个示例，可以通过将纯化凝血酶(purified thrombin)添加至患者血衆来执行该检验。所得的凝血时间是纤维蛋白原浓度和活性的函数。TT可以用作对血浆样本中存在肝素的筛查检验。被延长的TT的其他原因包括纤维蛋白原的数量缺乏、纤维蛋白原的质量异常(异常纤维蛋白原)、纤维蛋白降解产物(FDP)的升高水平、特定副蛋白的存在以及纤维蛋白原的显著提高水平。图11示意了基于等式2的RACE结果与将Sysmex? CA-500用作参考实验室系统的八个样本的Sysmex?ττ结果之间的相关性的示例1100。这八个样本中的每一个是利用不同浓度的肝素来刺穿并使用等式2的RACE技术和 Sysmex? CA-500参考实验室系统来检验的。在所示的示例中，线1102指示了如利用菱形1104表示的实验数据点的最佳拟合线。线1102可以在19-152秒的范围内针对TT而表示为y=51.503x+5629.5。相关系数R=0.92，足以相关RACEtt结果以提供TT检验结果。
[0086]除了使用上述等式I和等式2的RACE技术来表征血样中的凝固改变外，这里的附加RACE技术可以用于确定血液凝固特性，例如纤维蛋白原含量(FIB)。为了确定FIB特性，可以凭经验导出测量函数的不同累计特性，这里表示为RACEfib,以便令人满意地与FIB测
量相关。
[0087]凝血酶作用于纤维蛋白原，以产生纤维蛋白单体，纤维蛋白单体聚合以形成纤维蛋白链并最终形成纤维蛋白凝块。不是所有纤维蛋白原分子都能够参与凝块形成，并且出于止血筛查的目的，仅有可凝血纤维蛋白原是所关注的。在当前自动化凝固分析器上可用的纤维蛋白原测定包括Clauss和PT推导方法。在一些情况下，PT、APTT和血小板测定足以筛查出血的患者。然而，在纤维蛋白原水平可以陡峭下降(例如，产科患者体内的弥散性血管内凝固)的情况下，纤维蛋白原测定可以用作筛查检验，这是由于PT和APTT检验对低水平的纤维蛋白原相对不敏感。
[0088]图12示意了根据一些实施方式的使用RACE来确定血样中的FIB的示例1200。在该示例中，第一幅度ADtl是时刻h处的第一峰值402处的曲线400的幅度，第二幅度AW是时刻tm处的第一底部406处的曲线400的幅度。RACEfib可以由以下等式表达:[0089]RACEfib= (AD0-ADl) r 等式 3
[0090]因此，RACEfib是过程二 408的累计值，过程二 408使用幅度ADtl (时刻tQ处的第一峰值402处的电信号幅度)和AD1j (时刻tm处的第一底部406处的电信号幅度)的差并表不纤维蛋白原转换为纤维蛋白的过程。等式2中的幂指数r是经验参数，可以是I或接近于
I。可以将RACEfib等式的结果与血样中的纤维蛋白原含量进行相关。例如，可以准备血样以测量纤维蛋白原含量，可以随时间测量电信号，并可以将累计特性RACEfib与血样的纤维蛋白原含量进行相关。
[0091]图13示意了根据一些实施方式的这里的RACEfib技术与FIB检验之间的相关性的示例1300。样本是从60个患者获得并使用RACEfib技术和参考实验室系统(B卩，DiagnosticaStago, Inc.，Parsippany, New Jersey销售的Stago分析器)来检验的。在图13的示例中，在1.03至4.69g/L的范围内针对FIB而表达为y=_29.22x+277.3的线1302是如利用菱形1304表示的实验数据点的最佳拟合线。相关系数R=0.76指示足以基于RACEfib技术获得FIB检验结果的相关性。
[0092]示例性实施方式被采用来示意本公开中的本发明的概念和实施方式。示例性实施方式仅用于更好地理解本发明的方法和核心概念。基于本公开中的概念，本领域技术人员可以进行一些修改。这些修改也应当处于本发明的范围内。
[0093]示例过程
[0094]图14-15示意了根据一些实施方式的示例过程。这些过程以及这里描述的其他过程被示意为逻辑流程图中的一系列框，逻辑流程图表示操作的顺序，其中一些或所有操作可以以硬件、软件或其组合实现。在软件的上下文中，框可以表示存储在一个或多个计算机可读介质上的计算机可执行指令，该一个或多个计算机可读介质在被一个或多个处理器执行时执行所记载的操作。一般地，计算机可执行指令包括执行特定功能或实现特定抽象数据类型的例程(routines)、程序、对象、组件、数据结构等。对操作进行描述的顺序不应解释为限制。可以按任何顺序和/或并行地将任何数目的所述框进行组合以实现过程或交替过程，并且不是所有框都需要被执行。出于讨论的目的，参照这里的示例中描述的架构、环境和框架来描述过程，尽管这些过程可以在许多种其他架构、环境或框架中实现。
[0095]图14是示意了根据一些实施方式的可以由设备执行的用于检验血液凝固特性的示例过程1400的流程图。
[0096]在1402处，设备在包括多个电极的电化学电池中接收血样，使得血样和多个电极在电路中连接。例如，可以将血样存放至盒或试剂片中，并且可以将盒或试剂片插入到能够测量血样的一个或多个特性的设备中。
[0097]在1404处，设备在多个电极和血样上施加电压差。例如，设备可以使电流经过血样。
[0098]在1406处，设备在一定持续时间内测量经过电路中的血样的电信号，以获得表示时间的测量函数的多个测量结果。例如，设备可以在一定时间段内测量经过血样的电流，以检测电流的改变，例如电流的幅度随时间的改变。
[0099]在1408处，设备将测量函数的累计特性作为基于随时间绘制的测量函数的曲线而计算出的积分面积或测量函数在特定时刻处的幅度中的至少一个的函数来确定，使得累计特性与血液凝固特性相关。例如，设备可以应用与血液凝固特性相关的累计特性。在一些情况下，累计特性可以至少部分地被基于来确定与随时间绘制的电信号测量的曲线的分段相对应的面积。在其他情况下，累计特性可以至少部分地被基于来确定随时间绘制的电信号测量的曲线的分段的幅度的差异。
[0100]在1410处，设备至少部分地基于累计特性来提供血液凝固特性。例如，设备可以确定与累计特性相关的血液凝固特性，并可以提供与该血液凝固特性相关的信息，例如通过将该信息显示在显示器上、将该信息存储至计算机可读介质、和/或将该信息发送至计算设备。
[0101]图15是示意了根据一些实施方式的可以执行的用于检验血液凝固特性的示例过程1500的流程图。
[0102]在1502处，设备在血样上施加电压差。例如，设备可以在血样上施加电压差，以使电流经过血样。
[0103]在1504处，检验设备随时间获得经过血样的电信号的多个测量结果。例如，设备可以在一定时间段内测量经过血样的电流的改变。
[0104]在1506处，检验设备至少部分地基于在电信号的第一峰值与电信号的第二峰值之间随时间获得的多个测量结果来确定血液凝固特性。例如，检验设备可以将基于电信号的曲线的分段而计算出的面积与血液凝固特性进行相关。例如，该曲线分段可以从第一峰值扩展至曲线的第二峰值。可替换地，检验设备可以将电信号的曲线分段的幅度的改变与不同的血液凝固特性进行相关。例如，该曲线分段可以从第一峰值扩展至曲线的第一底部。
[0105]这里描述的示例过程仅为出于讨论目的而提供的过程的示例。按照这里的公开，许多其他变型对本领域技术人员来说将显而易见。此外，尽管这里的公开阐述了用于执行这些过程的合适框架、架构和环境的多个示例，但是这里的实施方式不限于所示出和讨论的特定示例。
[0106]本公开提供了各种示例实施方式，如附图中描述和示意。然而，如本领域技术人员公知或将变为公知的那样，本公开不限于这里描述和示意的实施方式，而是可以扩展至其他实施方式。说明书中对“一个实施方式”、“该实施方式”、“这些实施方式”或“一些实施方式”的引用意味着所描述的特定特征、结构或特性包括在至少一个实施方式中，并且说明书中各处出现这些短语不必然均指代相同实施方式。
[0107]结论
[0108]尽管以对结构特征和/或方法动作来说特有的语言描述了主题，但是应当理解，所附权利要求中限定的主题不必然限于所描述的具体特征或动作。更确切地，这些具体特征和动作作为实现权利要求的示例形式而公开。
【权利要求】
1.一种方法，包括: 在血样上施加电压差； 在测量持续时间内检测经过所述血样的电信号，以获得表示时间的测量函数的多个测量结果；以及 确定所述测量函数的累计特性，其中，所述累计特性与血液凝固特性相关。
2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述累计特性是基于所述测量函数的随时间绘制的曲线的积分面积的函数，所述积分面积覆盖所述测量持续时间内的特征时间段。
3.根据权利要求2所述的方法，其中，所述特征时间段从所述测量函数的第一峰值跨越至所述测量函数的第二峰值。
4.根据权利要求1所述的方法，其中: 所述累计特性是与所述测量函数的随时间绘制的曲线相对应的第一积分面积和第二积分面积的函数； 所述第一积分面积是通过在所述测量持续时间内的特征时间段上对所述测量函数的可变值进行积分来计算的；以及 所述第二积分面积是通过在所述特征时间段上对所述可变值与所述测量函数的固定最小值之差进行积分来计算的。
5.根据权利要求1所述的方法，还包括:作为所述累计特性的函数，用公式表达标准化量，以表示相关的血液凝固特性。
6.根据权利要求1所述的方法，其中，所述血样是采用适于凝血酶原(PT)测量的试剂来被准备,且所述累计特性与凝血酶原时间(PT)相关。
7.根据权利要求6所述的方法，还包括:将凝血酶原时间(PT)作为所述累计特性的函数进行计算。
8.根据权利要求1所述的方法，其中，所述血样是采用适于活化凝血时间(ACT)或活化部分凝血活酶时间(APTT)测量的试剂来被准备，且所述累计特性与活化凝血时间(ACT)或活化部分凝血活酶时间(APTT)相关。
9.根据权利要求8所述的方法，还包括:将活化凝血时间(ACT)或活化部分凝血活酶时间(APTT)作为所述累计特性的函数进行计算。
10.根据权利要求1所述的方法，其中，确定所述测量函数的累计特性包括: 使用等式RACEdtrtting= ( Λ t)nX (A1)V (A2)p来计算所述累计特性， 其中，RACEelrtting是所述累计特性的值或与所述累计特性的值成线性比例，At是所述测量函数的第一峰值和第二峰值之间的时间跨度，A1是通过在所述时间跨度上对所述测量函数的可变值进行积分而计算出的第一面积，A2是通过在所述时间跨度上对所述可变值与所述测量函数的固定最小值之差进行积分而计算出的第二面积，n、m和P是经验参数。
11.根据权利要求10所述的方法，其中，经验参数n、m和p实质上分别接近于1、1和1/2。
12.根据权利要求10所述的方法，还包括:将活化凝血时间(ACT)或活化部分凝血活酶时间(APTT)中的至少一个与所计算出的累计特性相关。
13.根据权利要求10所述的方法，还包括:将凝血酶原时间(PT)与所计算出的累计特性相关。
14.根据权利要求1所述的方法，其中，所述累计特性是所述电信号在特定时刻处的幅度的函数。
15.根据权利要求1所述的方法，其中，所述累计特性是所述测量函数的第一峰值和第一底部之间的幅度差的函数。
16.根据权利要求1所述的方法，其中，所述血样被准备来用以测量纤维蛋白原含量(FIB)，且所述累计特性与纤维蛋白原含量(FIB)相关。
17.根据权利要求16所述的方法，其中，所述累积函数是所述测量函数的第一峰值和第一底部之间的幅度差的函数。
18.根据权利要求16所述的方法，还包括:将纤维蛋白原含量(FIB)作为所述累计特性的函数进行计算。
19.根据权 利要求1所述的方法，其中，所述血样被准备来用以测量凝血酶时间(TT)，且所述累计特性与凝血酶时间(TT)相关。
20.根据权利要求19所述的方法，其中，所述累计特性是所述测量函数的第一峰值和第一底部之间的幅度差的函数。
21.根据权利要求19所述的方法，还包括:将凝血酶时间(TT)作为所述累计特性的函数进行计算。
22.根据权利要求1所述的方法，其中，所述电信号包括电流。
23.根据权利要求1所述的方法，其中，所述电信号包括电压。
24.根据权利要求1所述的方法，其中，所述测量结果是所检测到的电信号的值。
25.根据权利要求1所述的方法，其中，所述测量结果是作为所检测到的电信号的函数的微分特性的值。
26.根据权利要求1所述的方法，还包括:至少部分地基于所述累计特性来提供与血液凝固特性相关的信息，其中，所述提供包括以下至少一项: 将与所述血液凝固特性相关的信息呈现在显示器上； 将与所述血液凝固特性相关的信息存储在计算机可读介质上；或者 将与所述血液凝固特性相关的信息发送至计算设备。
27.根据权利要求1所述的方法，其中: 所述累计特性是与所述测量函数的随时间绘制的曲线相对应的第一积分面积和第二积分面积的函数； 所述第一积分面积是通过在所述测量函数的从第一峰值至第一底部的第一特征时间段内对所述测量函数的可变值进行积分来计算的；以及 所述第二积分面积是通过在所述测量函数的从所述第一底部至第二峰值的第二特征时间段内对所述测量函数的可变值进行积分来计算的。
28.根据权利要求1所述的方法，其中，确定所述测量函数的累计特性，包括: 使用等式RACEaptt或RACETT=kQ来计算所述累计特性，其中Q=QjQ2,并且其中 Q1是通过在所述测量函数的从第一峰值至第一底部的第一时间段内对所述测量函数的可变值进行积分而计算出的第一面积，Q2是通过在所述测量函数的从所述第一底部至第二峰值的第二特征时间段内对所述测量函数的可变值进行积分而计算出的第二面积，k是常量。
29.—种方法,包括: 在包括多个电极的电化学电池中接收血样，使得所述血样和所述多个电极在电路中连接; 在所述多个电极和所述血样上施加电压差； 在持续时间内测量经过所述电路中的血样的电信号，以获得表示时间的测量函数的多个测量结果； 将所述测量函数的累计特性作为与所述测量函数的随时间绘制的曲线相关联的积分面积或所述测量函数在特定时刻处的幅度中的至少一个的函数进行确定，其中，所述累计特性与血液凝固特性相关；以及 至少部分地基于所述累计特性来提供与所述血样凝固特性相关的信息。
30.根据权利要求29所述的方法，其中: 所述累计特性是与所述测量函数的随时间绘制的曲线相关联的第一积分面积和第二积分面积的函数； 所述第一积分面积是通过在所述测量持续时间内的特征时间段上对所述测量函数的可变值进行积分来计算的；以及 所述第二积分面 积是通过在所述特征时间段上对所述可变值与所述测量函数的固定最小值之差进行积分来计算的。
31.根据权利要求29所述的方法，其中，所述血样是采用适于凝血酶原(PT)测量的试剂来被准备，且所述累计特性与凝血酶原时间(PT)相关。
32.根据权利要求29所述的方法，其中: 所述血样是采用适于活化凝血时间(ACT)或活化部分凝血活酶时间(APTT)测量中的至少一者的试剂来被准备；以及 所述累计特性与活化凝血时间(ACT)或活化部分凝血活酶时间(APTT)相关。
33.根据权利要求29所述的方法，其中所述累计特性是电信号的最大幅度与所述电信号的最小幅度之差的函数。
34.根据权利要求29所述的方法，其中，所述血样被准备来用以测量纤维蛋白原含量(FIB)，且所述累计特性与纤维蛋白原含量(FIB)相关。
35.根据权利要求29所述的方法，其中，所述血样被准备来用以测量凝血酶时间(TT)，且所述累计特性与凝血酶时间(TT)相关。
36.根据权利要求29所述的方法，其中，提供与所述血液凝固特性相关的信息包括以下至少一项: 将与所述血液凝固特性相关的信息呈现在显示器上； 将与所述血液凝固特性相关的信息存储在计算机可读介质上；或者 将与所述血液凝固特性相关的信息发送至计算设备。
37.一种或多种计算机可读介质，维持一个或多个处理器能够执行以执行以下操作的指令，所述操作包括: 在血样上施加电压差； 随时间获得对经过所述血样的电信号的多个测量结果；以及 至少部分地基于在所述电信号的第一峰值与所述电信号的第二峰值之间随时间获得的所述多个测量结果来确定血液凝固特性。
38.根据权利要求37所述的一种或多种计算机可读介质，其中 所述多个测量结果表示所述电信号随时间变化的曲线；以及 所述确定血液凝固特性至少部分地基于根据所述第一峰值与所述第二峰值之间的曲线而计算出的面积。
39.根据权利要求37所述的一种或多种计算机可读介质，其中，所述血液凝固特性是以下至少一项: 凝血酶原时间(PT);或者 活化部分凝血活酶时间(APTT)。
40.根据权利要求37所述的一种或多种计算机可读介质，其中，确定血液凝固特性还包括:至少部分地基于所述电信号的第一峰值与所述电信号的第一底部之间的所述电信号的幅度差来确定血液凝固特性。
41.根据权利要求40所述的一种或多种计算机可读介质，其中，所述血液凝固特性是以下至少一项: 纤维蛋白原含量(FIB);或者 凝血酶时间(TT)。
42.根据权利要求37所述的一种或多种计算机可读介质，其中，所述操作还包括:确定以下血液凝固特性中的至少三项:凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原含量(FIB)和凝血酶时间(TT)。
【文档编号】G01N33/86GK103543278SQ201310301617
【公开日】2014年1月29日 申请日期:2013年7月15日 优先权日:2012年7月16日
【发明者】严萍宜, 黄海涛, 王神宇, 吕晖辉 申请人:微点生物科技有限公司