一种基于反射光强的多孔硅微腔生物传感器检测生物分子的方法
【专利摘要】本发明提供一种基于反射光强的多孔硅微腔生物传感器检测生物分子的方法，其特征在于：主要的实验仪器为氦氖激光器和光功率检测计；激光器以一定的角度入射到以多孔硅微腔为基底的材料上，用功率接收计接收反射光，找到微腔结构对应的最小光强功率的角度，然后添加生物改变多孔硅层折射率，再检测反射光的最小光强功率对应的角度，通过前后角度的改变，来检测添加生物浓度。
【专利说明】一种基于反射光强的多孔硅微腔生物传感器检测生物分子的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种生物分子的检测方法，具体而言涉及一种基于反射光强的多孔硅微腔生物传感器检测生物分子的方法。
【背景技术】
[0002]多孔硅生物传感器具有高灵敏度、响应速度快、实时性好、免标记、可遥控控制、结构紧凑、无电磁干扰和安全性高的特点，现在被广泛地应用于研究生物分子之间的相互作用，基因表达、新药开发、环境检测和食品安全和核辐射监测的重要研究手段。
[0003]生物光学传感方法有两种:一种是利用生物分子折射率的变化原理，其主要特点是生物分子不用标记，而且样品制备简单；另一种利用于生物分子荧光标记的变化原理，主要特点检测简单而且灵敏度高。在各种生物传感器材料中，多孔硅是一种很好的生物传感器材料，具备以下优点:
[0004]1.多孔硅生物传感器具有非常高的内表面积，方便了驻扎在多孔硅中识别感应分子(生物活性探针)与被测分子的结合，因而相比于平面器件的生物传感器，多孔硅的单位面积的信号容量显著增强；
[0005]2.多孔硅的蜂窝状孔隙结构对生物分子进行了自然包裹，很好地防止了生物成分的浸出，所以生物传感器的稳定性较强；
[0006]3.多孔硅的孔的大小，可用电流腐蚀时控制，所以对不同大小的生物分子，可以对应制备相应的多孔硅传感器，提高了该传感器的抗干扰能力；
[0007]4.多孔硅生物传感器无毒无害，且具有非常好的生物兼容性和吸附性；
[0008]5.多孔硅能保持生物活性，已有在多孔硅上生长神经元细胞、鼠肝上皮实质细胞和人类胚胎肾细胞等细胞。这些生长在多孔硅的生物细胞，可以进行正常的新陈代谢，明显好于生长在玻璃上的生物；
[0009]6.多孔硅能与其它器件集成，而且多孔硅的制备方法也相当成熟稳定，可以快速，方便使用。多孔硅材料可大量用于制备光学生物传感器，同时可以对许多生物分子进行相应的改性。多孔硅生物光学传感器也可以MEMS器件的研发，并处于研究开发实用的阶段。
[0010]目前，在国际国内外的学术刊物发表的生物传感器的数量很多，越来越多的研究更加从理论走向实际的应用。比如:在玻璃为基底制备的二维光子晶体生物传感器和一维多层带隙结构的多孔硅生物传感器等的研究来看，将纳米多孔硅的生物特性与光波导或者光子晶体的带隙结构传感器结合起来的趋势，将大大提高目前的生物传感器的性能。
[0011]多孔硅作为基底材料用于生物检测已经被广泛的作为实验研究和应用。多孔硅通过电化学腐蚀的时候交替使用不同电流，可以制备出各种多孔硅多层结构，电化学腐蚀技术配合光刻等技术还可以制备出多孔硅波导、多孔硅光栅等各种结构。无论哪种类型的多孔硅生物传感器归根到底原理都是生物分子进入了多孔硅层的多孔结构后增大了多孔硅层的折射率，折射率增大的多少和进入生物分子的多少有关，因此利用多孔硅层的折射率的改变，就可以通过计算机模拟加入生物的实验。
[0012]目前报道的基于多孔硅微腔的生物传感器很多，检测方法包括:反射光谱的检测和拉曼、荧光光谱的检测。
[0013]CN101710118A公开了一种基于多孔娃三兀结构微腔的光学免疫检测方法，该方法采用基于计算机精确控制的电化学腐蚀方法制备多孔硅微腔，其中多孔硅微腔内上、下的Bragg结构由三种电流密度交替进行电化学腐蚀而形成，其特征在于对于不同条件制备的多孔硅微腔进行编码可以实现多元检测，如果是一元检测则不需要编码，使抗体或抗原在多孔硅三元结构微腔的孔洞里结合，多元检测中抗原或抗体的种类利用多孔硅微腔的编码进行标识，而通过生物反应前后的光谱峰位变化进行检测样品中相应的抗原或抗体浓度，所述检测方法包括以下步骤:
[0014]I)抗原或抗体固定在多孔硅微腔的孔洞里，如果是需要编码的多元检测，那么一种编码的多孔硅微腔对应固定一种待测生物分子的特异性抗原或抗体，冲洗未结合的分子并封闭多孔硅微腔里的未结合生物分子的空白键位，记录测定固定有抗原或抗体的多孔硅微腔光谱；
[0015]2)不同多孔硅微腔与不同浓度待测溶液发生反应，使抗原-抗体在多孔硅微腔的孔洞里特异性结合，反应后进行冲洗，记录多孔硅微腔光谱及编码确定种类和浓度。
[0016]这种光学免疫检测方法不仅兼具多孔硅和光子带隙结构传感器的诸多优异性能，而且结构稳定性很好，通过编码检测技术更是可以实现多元检测。此外，由于采用的制备方法较为简单，价格相对低廉，有一定的商业应用前景。
[0017]CN1922486A公开了一种用于分析生物样品中内含物的方法，包括:a)在合适的结合条件下，使所述生物样品与纳米多孔半导体传感器接触，所述纳米多孔半导体传感器包括纳米多孔半导体结构和连接到所述多孔半导体结构上的一个或多个第一探针，所述纳米多孔半导体结构包括置于上层和下层之间的中心层，所述上层和下层都包括5至20层交替多孔性层；所述一个或多个第一探针特异性结合所述样品中的至少一个分析物，形成一个或多个结合复合物山)在适合促进它们的特异性结合的条件下，使所述一个或多个结合复合物与拉曼活性探针接触；c)照射所述传感器，以便从所述传感器引发荧光发射，所述发射产生来自所述结合复合物的拉曼光谱；和d)检测由所述结合复合物产生的拉曼信号；其中，与所述结合分析物有关的拉曼信号表明所述样品中所述分析物的存在以及类型。
[0018]该方法提供用级联拉曼传感用于分析生物样品例如血清中内含物的方法。使具有特异性结合已知分析物的探针的、产生荧光的纳米多孔生物传感器与生物样品接触，形成连接于多孔半导体结构的一个或多个结合复合物。将结合复合物与拉曼活性探针接触，该拉曼活性探针特异性结合该结合复合物，照射生物传感器，从生物传感器产生荧光发射。检测结合复合物产生的拉曼信号，与结合的含蛋白质分析物有关的拉曼信号表明样品中含蛋白质化合物的存在。
[0019]上述反射光谱和拉曼光谱、荧光光谱的检测，缺点都是需要昂贵精密的相应光谱分析仪。因此，需要研究开发一种可以用简单的实验仪器来检测生物的检测技术。
【发明内容】
[0020]本发明的目的是提供一种基于反射光强检测的多孔硅微腔生物传感器，及其用于生物检测的方法。
[0021]本发明与以往的检测技术最大的区别在于用简单的实验仪器来检测生物。主要的实验仪器为氦氖激光器和光功率检测计(均为普通、便宜的常规光学配置)。激光器以一定的角度入射到以多孔硅微腔为基底的材料上，用功率接收计接收反射光，找到微腔结构对应的最小光强功率的角度，然后添加生物改变多孔硅层折射率，再检测反射光的最小光强功率对应的角度，通过前后角度的改变，来检测添加生物浓度。
[0022]如图1所示的，这种多孔硅微腔的反射光谱是一种有缺陷峰的光谱，在固定633nm波长的激光入射时，在30°出现反射光强的最小值，图1所示的这种多孔硅微腔的结构是一种多层多孔硅结构:(HL) 6C (LH) 6，H是高折射率层(折射率1.52、物理厚度104nm)，L是低折射率层(折射率1.21、物理厚度13lnm)，C是缺陷层(折射率1.21、物理厚度13Inm)，因为通过调制电流，就可以制备出各种折射率(1.2-2.0之间)和厚度的多层多孔硅，这里选用的结构参数分布对应相应的电流腐蚀参数。
[0023]图1所示的反射谱在加入生物分子，也就是增大多孔硅微腔每一层的折射率后，光谱会整体向右移动，也就是说，反射光强的最小值不再是30°而会增大，如图2所示，A线为折射率均匀增加0.02后、反射光强的最小值接近33°，B线为折射率均匀增加0.04、反射光强的最小值是36°。
[0024]多孔硅的制备:
[0025]多孔硅的形成原理解释很多，电化学腐蚀制备多孔硅为例，就是把单晶硅作为阳极在HF酸溶液中通以恒定直流电流进行阳极氧化。单晶硅在HF酸溶液中由于所加电压大小不同或者所给恒定电流大小不同，会出现两种情况:当电流大于某个临界值时，单晶硅将会被剥离掉。当电流低于这个此临界值时，单晶硅表面将出现蜂窝状的多孔硅。
[0026]P型单晶硅的电化学阳极腐蚀制备多孔硅。
[0027]步骤1.采用P型〈100〉单面抛光单晶硅片，其电阻率为4-8Ω-πι，厚度为100±10μπι。实验前分别用丙酮、无水乙醇、去离子水对硅片进行超声洗15分钟。对经过清洗后的单晶硅片进行电化学腐蚀。腐蚀液是由49%的氢氟酸和95%的乙醇按照体积比HF = CH3CH2OH =1:1-3比例混合而成。腐蚀过程分别由电流密度为200-300mA/cm2和600-800mA/cm2的恒流源引导。首先用电流密度为200-300mA/cm2，腐蚀时间为10_30s，暂停5-lOs，再用电流密度为600-800mA/cm2，腐蚀时间为10_30s，再暂停5_10s，以此交替腐蚀2-4个周期。中间微腔用600-800mA/cm2腐蚀30_60s中间暂停10_20s，最后用电流密度为600-800mA/cm2，腐蚀时间为15_25s，暂停5_10s，再用电流密度为200-300mA/cm2，腐蚀时间为15-25s，以此交替腐蚀2-4个周期。实验过程中，需要低温，把腐蚀槽放入冰水混合溶液中的超声波槽中。
[0028]步骤2.将得到的多孔硅进行烷氧基硅烷修饰。
[0029]步骤3.将得到的烷氧基硅烷修饰的多孔硅与4_( 二乙氨基)水杨醛反应，得到带有芳叔胺基团的多孔硅。
[0030]步骤4.将得到的带有芳叔胺基团的多孔硅浸泡在离子交换水中，去除残存的有机物。
[0031 ] 优选地，所述步骤2中多孔硅以质量比为1:20-1:40分散于有机溶剂中，超声处理l-2h，滴加烷氧基硅烷，90-100°C反应2-4h ;反应结束后过滤除去溶剂，用无水乙醇洗涤数次，真空干燥，即得烷氧基硅烷修饰的多孔硅。
[0032]进一步优选地，所述有机溶剂为甲苯或二甲苯或THF或DMF，溶剂的选择对于最终得到的多孔硅的灵敏度影响不大；烷氧基硅烷优选为Y-氨丙基三甲氧基硅烷或Y-氨丙基三乙氧基硅烷，其中，烷氧基硅烷与多孔硅的质量比为1:0.1-1:0.5。
[0033]对于步骤3，将步骤2得到的烷氧基硅烷修饰的多孔硅分散到无水乙醇中，超声处理10-20min，加入4_( 二乙氨基)水杨醛(CAS: 17754-90-4)，搅拌回流6_8h后倾出上层悬浮液，过滤除去溶剂后用无水乙醇洗涤数次，真空干燥，得到带有芳叔胺基团的多孔硅。烷氧基硅烷修饰的多孔硅与4-( 二乙氨基)水杨醛的质量比为1:5-1:10。
[0034]本发明中通过对交替电流制备的多孔硅进行修饰，得到了制备工艺简单，价格低廉的修饰多孔硅，有的产品的检测灵敏度可以高达8800±50nm/折射率单位以上。
【专利附图】
【附图说明】
[0035]图1.固定入射波长633nm的多孔硅微腔的模拟反射光谱
[0036]图2.固定入射波长633nm的多孔硅微腔的模拟反射光谱(A线为折射率均匀增加
0.02，B线为折射率均匀增加0.04)
【具体实施方式】
[0037]实施例1:
[0038]⑴通过电化学刻蚀方法制备多孔硅:采用P型〈100〉单面抛光单晶硅片，其电阻率为4Ω-ηι,厚度为100 μ m。实验前分别用丙酮、无水乙醇、去离子水对娃片进行超声洗15分钟。对经过清洗后的单晶硅片进行电化学腐蚀。腐蚀液是由49%的氢氟酸和95%的乙醇按照体积比HF = CH3CH2OH = 1:1比例混合而成。腐蚀过程分别由电流密度为200mA/cm2和800mA/cm2的恒流源引导。首先用电流密度为200mA/cm2，腐蚀时间为10s，暂停5s，再用电流密度为800mA/cm2，腐蚀时间为10s，再暂停5s，以此交替腐蚀2个周期。中间微腔用800mA/cm2腐蚀30s中间暂停10s，最后用电流密度为800mA/cm2，腐蚀时间为15s，暂停5s，再用电流密度为200mA/cm2，腐蚀时间为15s，以此交替腐蚀2个周期。实验过程中，需要低温，把腐蚀槽放入冰水混合溶液中的超声波槽中；
[0039]⑵将步骤⑴得到的多孔硅进行烷氧基硅烷修饰:多孔硅以质量比为1:20分散于甲苯中，超声处理lh，滴加Y-氨丙基三甲氧基硅烷，100°C反应2h ;反应结束后过滤除去溶齐U，用无水乙醇洗涤数次，真空干燥，即得烷氧基硅烷修饰的多孔硅；Y -氨丙基三甲氧基硅烷与多孔硅的质量比为1:0.1 ;
[0040]⑶将步骤⑵得到的烷氧基硅烷修饰的多孔硅与4_( 二乙氨基)水杨醛反应，得到带有芳叔胺基团的多孔硅:将步骤⑵得到的烷氧基硅烷修饰的多孔硅分散到无水乙醇中，超声处理lOmin，加入4-( 二乙氨基)水杨醛(CAS: 17754-90-4)，搅拌回流6h后倾出上层悬浮液，过滤除去溶剂后用无水乙醇洗涤数次，真空干燥，得到带有芳叔胺基团的多孔硅；烷氧基硅烷修饰的多孔硅与4-( 二乙氨基)水杨醛的质量比为1:5 ;
[0041]⑷将步骤⑶得到的带有芳叔胺基团的多孔硅浸泡在离子交换水中，去除残存的有机物。
[0042]制备的经修饰的多孔硅的稳定性检测:修饰的多孔硅片试样放入聚甲基丙烯酸甲酯制成的流式槽中，不同的PH值的磷酸盐缓冲液依次通过微流泵送入流式槽中，每次送入缓冲液前用PH7.4，0.0lM磷酸盐缓冲液洗涤流式槽5分钟。光学反射干涉光谱通过Y型光纤拾取光学信号，实时监控薄膜光学厚度变化。结果发现经修饰的多孔硅的光学厚度在PH2-12范围变化的磷酸盐缓冲液中，变化很稳定。
[0043]灵敏度检测:将1uL不同折射率的有机化合物滴在硅片的表面，检测光学厚度的变化，以折射率为横轴，光学厚度为纵轴绘制线性关系图，以折射率改变I个单位的光学厚度变化量为试样的灵敏度。本发明实施例1中多孔硅的灵敏度为8850±50nm/折射率单位。
[0044]测试生物分子；
[0045]主要的实验仪器为氦氖激光器和光功率检测计(均为普通、便宜的常规光学配置)。激光器以一定的角度入射到以多孔硅微腔为基底的材料上，用功率接收计接收反射光，找到微腔结构对应的最小光强功率的角度，然后添加生物改变多孔硅层折射率，再检测反射光的最小光强功率对应的角度，通过前后角度的改变，来检测添加生物浓度。
[0046]事先，对确定浓度的生物分子制定浓度-角度位移的标准曲线。以便通过测试结果的角度位移值获得目标分子的浓度。
[0047]首先，测试没有加入生物小分子时的多孔硅微腔的反射光谱，记录光强最小值时的角度；
[0048]其次，测试加入生物小分子后的反射光谱，记录光强最小值时的角度；
[0049]然后，分别对比其中光强最小值对应角度的红移，计算得出移动的角度差值。将该角度位移值与标准曲线相对应，读取生物小分子的浓度值。
[0050]实施例2:
[0051 ] 腐蚀过程分别由电流密度为300mA/cm2和600mA/cm2的恒流源引导。其他同实施例1，多孔硅的灵敏度为8800±50nm/折射率单位。
[0052]实施例3:
[0053]步骤⑵中的有机溶剂选用THF，其它同实施例1.所得的多孔硅的灵敏度达到8850 土 50nm/折射率单位。
[0054]实施例4:
[0055]步骤⑵中的有机溶剂选用DMF，其它同实施例1.所得的多孔硅的灵敏度达到8850±50nm/折射率单位。
[0056]实施例5:
[0057]步骤⑵中的有机溶剂选用二甲苯，其它同实施例1.所得的多孔硅的灵敏度达到8850±50nm/折射率单位。
[0058]实施例6:
[0059]步骤⑵中的Y-氨丙基三甲氧基硅烷与多孔硅的质量比为1:0.5，其它同实施例1.所得的多孔硅的灵敏度达到8900±50nm/折射率单位。
[0060]实施例7:
[0061]步骤⑵中的Y-氨丙基三甲氧基硅烷与多孔硅的质量比为1:1，其它同实施例1.所得的多孔硅的灵敏度达到8830±50nm/折射率单位。
[0062]实施例8:
[0063]步骤⑵中的Y-氨丙基三甲氧基硅烷与多孔硅的质量比为1:2，其它同实施例1.所得的多孔硅的灵敏度达到8810±50nm/折射率单位。
[0064]实施例9:
[0065]步骤⑶中烷氧基硅烷修饰的多孔硅与4-( 二乙氨基)水杨醛的质量比为1:10，其它同实施例1.所得的多孔硅的灵敏度达到8870±50nm/折射率单位。
[0066]实施例10:
[0067]步骤⑶中烷氧基硅烷修饰的多孔硅与4_( 二乙氨基)水杨醛的质量比为1:2，其它同实施例1.所得的多孔硅的灵敏度达到8330±50nm/折射率单位。
[0068]实施例11:
[0069]步骤⑶中烷氧基硅烷修饰的多孔硅与4-( 二乙氨基)水杨醛的质量比为1:15，其它同实施例1.所得的多孔硅的灵敏度达到8410±50nm/折射率单位。
[0070]实施例12:
[0071]腐蚀过程分别由电流密度为20mA/cm2和80mA/cm2的恒流源引导。其他同实施例1，多孔硅的灵敏度为8300±50nm/折射率单位。
[0072]实施例13:
[0073]腐蚀过程分别由电流密度为30mA/cm2和60mA/cm2的恒流源引导。其他同实施例1，多孔硅的灵敏度为8200±50nm/折射率单位。
[0074]对比例1:
[0075]步骤⑴为通过电化学刻蚀方法制备多孔硅，刻蚀液为氢氟酸:无水乙醇体积比为3:1 ;电流密度为600mA/cm2，蚀刻时间为20秒；其他同实施例1。本发明对比例I中多孔硅的灵敏度为8600 ± 10nm/折射率单位。
[0076]对比例2:
[0077]电流密度为200mA/cm2，蚀刻时间为20秒；其他同对比例I。本发明对比例2中多孔硅的灵敏度为8100±100nm/折射率单位。
[0078]对比例3:
[0079]未进行步骤⑶处理，其它同实施例1.结果发现多孔硅的稳定性较差，光学厚度在PH2-12范围变化的磷酸盐缓冲液中，变化较大。灵敏度不足8000±100nm/折射率单位。
[0080]对比例4:
[0081]未进行步骤⑵处理，其它同实施例1.结果发现多孔硅的稳定性较差，光学厚度在PH2-12范围变化的磷酸盐缓冲液中，变化很大。
[0082]对比例5:
[0083]采用N型〈100〉单晶娃，其它同实施例1.多孔硅的灵敏度为8500± 10nm/折射
率单位。
[0084]通过实施例1，对比例3-4的比较可见，本发明的步骤⑵和⑶处理均对最终多孔硅的稳定性和灵敏度有重要影响。
[0085]通过实施例1，对比例1-2的比较可见，步骤⑴中采用交替电流腐蚀比单一电流强度腐蚀所得到的多孔硅的灵敏度要好。
[0086]实施例1与对比例5的比较可见，单晶硅的选择对最终的多孔硅灵敏度有影响。P型单晶硅更适合本发明。
[0087]实施例1与2的比较可见，交替电流分别选择200-300mA/cm2和600-800mA/cm2，对最终多孔硅的灵敏度有一定影响。但是比选择交替电流分别为20-30mA/cm2和60-80mA/cm2的所得产品灵敏度高。
[0088]实施例1与3-5的比较可见，步骤⑵中溶剂的选择对最终多孔硅的灵敏度没有影响。
[0089]通过实施例1，6_8的比较可见，步骤⑵中Y-氨丙基三甲氧基硅烷与多孔硅的质量比对最终多孔硅的灵敏度有重要影响。
[0090]通过实施例1，9-11的比较可见，步骤⑶中烷氧基硅烷修饰的多孔硅与4_( 二乙氨基)水杨醛的质量比对最终多孔硅的灵敏度有重要影响。
【权利要求】
1.一种基于反射光强的多孔娃微腔生物传感器检测生物分子的方法，其特征在于:使用的主要设备为氦氖激光器和光功率检测计；激光器以一定的角度入射到以多孔硅微腔为基底的材料上，用功率接收计接收反射光，找到微腔结构对应的最小光强功率的角度，然后添加生物分子改变多孔硅层折射率，再检测反射光的最小光强功率对应的角度，通过前后角度的改变，来检测添加生物浓度。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于:多孔硅的制备方法为⑴通过电化学刻蚀方法制备多孔硅，优选采用P型单晶硅；⑵将步骤⑴得到的多孔硅进行烷氧基硅烷修饰；(3)将步骤⑵得到的烷氧基硅烷修饰的多孔硅与4- (二乙氨基)水杨醛反应，得到带有芳叔胺基团的多孔硅；⑷将步骤⑶得到的带有芳叔胺基团的多孔硅浸泡在离子交换水中，去除残存的有机物。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于:步骤⑴采用P型〈100〉单面抛光单晶硅片，其电阻率为4-8 Ω-m，厚度为10ilOym;制备前分别用丙酮、无水乙醇、去离子水对硅片进行超声洗15分钟；对经过清洗后的单晶硅片进行电化学腐蚀；腐蚀液是由49%的氢氟酸和95%的乙醇按照体积比HF = CH3CH2OH=1: 1-3比例混合而成；腐蚀过程分别由电流密度为200-300mA/cm2和600-800mA/cm2的恒流源引导；首先用电流密度为200-300mA/cm2，腐蚀时间为10-30s，暂停5-lOs，再用电流密度为600-800 mA/cm2，腐蚀时间为10-30 S，再暂停5-10 S，以此交替腐蚀2-4个周期；中间微腔用600-800mA/cm2腐蚀30_60s中间暂停10-20s，最后用电流密度为600-800mA/cm2，腐蚀时间为15_25s，暂停5_10s，再用电流密度为200-300mA/cm2，腐蚀时间为15_25s，以此交替腐蚀2_4个周期；制备过程中，需要低温，把腐蚀槽放入冰水混合溶液中的超声波槽中。
4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于:所述步骤⑵中多孔硅以质量比为1:20-1:40分散于有机溶剂中，超声处理l_2h，滴加烷氧基硅烷，90-100°C反应2_4h ;反应结束后过滤除去溶剂，用无水乙醇洗涤数次，真空干燥，即得烷氧基硅烷修饰的多孔硅。
5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于:所述有机溶剂为THF或DMF。
6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于:烷氧基硅烷与多孔硅的质量比为1:0.1-1:0.5。
7.根据权利要求2所述的方法，其特征在于:烷氧基硅烷优选为Y-氨丙基三甲氧基娃烧或Y-氛丙基二乙氧基娃烧。
8.根据权利要求2所述的方法，其特征在于:对于步骤⑶，将步骤⑵得到的烷氧基娃烧修饰的多孔娃分散到无水乙醇中，超声处理10-20min,加入4- (二乙氨基)水杨醒(CAS: 17754-90-4)，搅拌回流6-8h后倾出上层悬浮液，过滤除去溶剂后用无水乙醇洗涤数次，真空干燥，得到带有芳叔胺基团的多孔硅。
9.根据权利要求2所述的方法，其特征在于:烷氧基硅烷修饰的多孔硅与4-(二乙氨基)水杨醛的质量比优选为1:5-1:10。
10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于:所述的多孔硅作为生物传感器用于光学非标记生物检测，其中待测样品优选是血清、组织液、毒品或兴奋剂。
【文档编号】G01N21/41GK104034693SQ201410194334
【公开日】2014年9月10日 申请日期:2014年5月8日 优先权日:2014年5月8日
【发明者】贾振红, 李鹏, 吕小毅 申请人:新疆大学